廣州市兒童TORCH指標(biāo)篩查結(jié)果及常見感染模式分析

姚亞男,張莉滟,張 娟,陳敏靜,唐 曉,廖亞龍*

[1.南方醫(yī)科大學(xué)附屬廣東省人民醫(yī)院(廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)檢驗科,廣東 廣州510080;2.羅城人民醫(yī)院 檢驗科,廣西 河池546400]

TORCH是一組病原微生物的英文名稱縮寫,其中T(Toxoplasma gondii)是弓形體,O(Others)是其他病原微生物,如梅毒螺旋體、帶狀皰疹病毒、細小病毒B19、柯薩奇病毒等,R(Rubella Virus)是風(fēng)疹病毒,C(Cytomegalo Virus)是巨細胞病毒,H(Herpes Virus)即是單純皰疹Ⅰ/Ⅱ型病毒。TORCH感染主要導(dǎo)致患兒先天畸形、器官損害、免疫功能下降以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常等危害[1-2]。臨床上多通過血清學(xué)方法對TORCH病原體IgM和IgG進行檢測并判斷是否為急性感染或復(fù)發(fā)感染。IgM主要見于感染早期,但該抗體在體內(nèi)維持的時間較短;IgG出現(xiàn)于感染中后期,其在機體內(nèi)維持的時間較長,IgG的存在表示機體處于感染中后期或者有既往感染史。本研究回顧性分析自2019年1月1日至2021年8月11日共3 390例0～18歲未成年人TORCH的感染情況并探討其流行病學(xué)特點。

1 資料與方法

1.1 一般資料

3 390例0～18歲未成年人按性別分為男性1 976例,女性1 414例;按發(fā)病季節(jié)分為春季(3～5月)918例,夏季(6～8月)815例,秋季(9～11月)760例,冬季(12月、1月和2月)897例;按年度分為2019年1 961例,2020年1 028例,2021年401例;按年齡分為0～3歲嬰幼兒2 567例,3～12歲兒童556例,12～18歲青少年267例。

1.2 標(biāo)本采集

所有研究對象空腹采血,用干燥管采血2 ml,離心機3 000 r/min離心10 min。若當(dāng)天不能及時檢測標(biāo)本,將標(biāo)本置于4℃冰箱內(nèi)進行保存,并于24 h內(nèi)進行檢測。

1.3 標(biāo)本要求

通過靜脈穿刺取血后,若標(biāo)本出現(xiàn)嚴重溶血、脂血,黃疸以及標(biāo)本被污染的情況下,應(yīng)進行重新采血,或標(biāo)本不納入檢驗。

1.4 檢驗方法

整個實驗使用的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。將測試血清、校準(zhǔn)品以及質(zhì)控品用樣本稀釋液按照1∶81(即10 μL+800 μL)的比例稀釋。充分搖勻后在每個微孔加入相應(yīng)的100 μL稀釋的校準(zhǔn)品,質(zhì)控品和稀釋后的血清樣本。在空白孔中加入100 μL樣本稀釋液。37℃水浴孵育30 min后洗板并拍干所有液體,重復(fù)該步驟5次。在每孔中加入100 μL酶結(jié)合物,37℃水浴孵育30 min,洗板并拍干所有液體,重復(fù)該步驟5次。每孔中加入100 μL染液(TMB),37℃水浴孵育15 min。每孔加入100 μL終止液終止反應(yīng)。用設(shè)備有450 nm濾光片的酶標(biāo)儀讀取產(chǎn)生的顏色,儀器需要空氣調(diào)零。試劑空白孔在450 nm處吸光度必須<0.150,如果試劑空白≥0.150,則該批實驗必須重做。將讀數(shù)減去試劑空白后繼續(xù)讀取整板數(shù)值。

1.5 實驗結(jié)果判定

所有結(jié)果<0.90為陰性,0.90～1.10為可疑,>1.10為陽性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS26.0軟件進行統(tǒng)計分析,計數(shù)資料用率表示,采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 未成年人TORCH總體陽性率比較

在3 390位受檢者中,TOX IgM的可疑率為0.2%(6/2 824),陽性率為0.4%(10/2 824);RUV IgM的可疑率為0.2%(6/2 848),陽性率為0.8%(22/2 848);CMV IgM的可疑率為1.1%(31/2 944),陽性率為2.9%(86/2 944);HSV-1 IgM的可疑率為4.2%(22/530),陽性率為10.9%(58/530);HSV-2 IgM的可疑率為0.9%(28/3 029),陽性率為1.7%(50/3 029)。HSV-1 IgM陽性率最高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),結(jié)果見表1。

表1 未成年人TORCH總體陽性率比較[n(%)]

2.2 不同年齡段的未成年人 TORCH陽性率比較

兒童與嬰幼兒的TOX IgM、HSV-2 IgM陽性率有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),青少年與嬰幼兒的TOX IgM、HSV-2 IgM、CMV IgM陽性率有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。而不同年齡段間RUV IgM、HSV-1 IgM陽性率無差異,結(jié)果見表2。

表2 不同年齡段的未成年人TORCH陽性率比較[n(%)]

2.3 不同年度、性別、季節(jié)的未成年人 TORCH陽性率比較

不同年度、性別、季節(jié)的未成年人TOX IgM、RUV IgM、CMV IgM、HSV-1 IgM、HSV-2 IgM的陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異,結(jié)果見表3～5。

表3 不同年度的未成年人TORCH陽性率比較[n(%)]

表4 不同性別的未成年人TORCH陽性率比較[n(%)]

表5 不同季節(jié)的未成年人TORCH陽性率比較[n(%)]

2.4 0～18歲未成年人TORCH感染模式分析

在3 390例患者中共有75例患者同時進行了上述5種病原體的篩查,陽性率為18.67%(14/75)。單一病原體感染以單純皰疹病毒Ⅰ型感染為主,占6.67%(5/75);兩種病原體及以上感染以單純皰疹病毒Ⅰ型+單純皰疹病毒Ⅱ型感染為主,占4.0%(3/75),結(jié)果見圖1。

圖1 0～18歲未成年人TORCH感染模式分析

3 討論

TORCH原發(fā)性感染是指機體首次被感染,IgM是機體被感染后最先出現(xiàn)的抗體,IgM陽性可以作為機體感染的早期指標(biāo),具有特異性。而IgG抗體產(chǎn)生的時間較晚,且IgG陽性不能直接判斷機體為原發(fā)性感染還是既往感染或是接種疫苗所導(dǎo)致的。

本研究中TOX IgM陽性率較低,這與邵婧等人研究結(jié)果一致[3]。HSV-1 IgM陽性率最高,為10.9%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,這與鄭輝等[4]、Bordea等[5]、莫秋菊等[6]的研究結(jié)果存在差異。鄭輝等學(xué)者的研究得出的結(jié)果均是以CMV感染為主。上述分析中,嬰幼兒與兒童、青少年TORCH陽性率均有差異。具體表現(xiàn)在兒童HSV-2 IgM、TOX IgM抗體陽性率高于嬰幼兒;青少年HSV-2 IgM、CMV IgM、TOX IgM抗體陽性率高于嬰幼兒。TORCH感染可以抑制或破壞細胞的分裂和增殖,造成流產(chǎn)、早產(chǎn)以及胎兒先天性畸形等不良后果[7]。

本研究中TORCH感染不具有季節(jié)差異,可能與廣州的四季溫差變化較小、空氣濕度較大有關(guān)系。在同時進行了5種病原體篩查的患者中以HSV-1和HSV-2混合感染模式多見,這可能是因為TORCH病原體間存在著共同抗原而導(dǎo)致的交叉感染,但還需要進一步研究[8]。另外,由于ELISA方法學(xué)受影響因素較多,例如抗原抗體比例的不協(xié)調(diào)、孵育時間、顯色時間和溫度等均會影響到實驗的準(zhǔn)確性。