c-Jun氨基末端激酶與首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能及預(yù)后的相關(guān)性研究

劉 威, 耿郡笛, 賈會(huì)珍, 王 曉

(1. 河北省衡水市人民醫(yī)院 精神心理科, 河北 衡水, 053000;2. 河北醫(yī)科大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院, 河北 石家莊, 050017)

精神分裂癥是一種嚴(yán)重的心理疾病,主要臨床表現(xiàn)為陽(yáng)性癥狀(妄想、幻覺)、陰性癥狀(語(yǔ)言減少、社交減退)和認(rèn)知功能障礙[1]。認(rèn)知功能對(duì)機(jī)體病情發(fā)展和功能恢復(fù)具有重要的預(yù)測(cè)作用,還可以反映患者的預(yù)后與生活質(zhì)量[2]。目前,精神分裂癥患者認(rèn)知功能障礙的發(fā)病機(jī)制尚不明確。c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號(hào)通路是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的重要分支,在細(xì)胞周期、增殖、凋亡和細(xì)胞應(yīng)激等多種生理病理過程中起重要作用[3]。研究[4]發(fā)現(xiàn), JNK信號(hào)通路參與調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)疾病。動(dòng)物研究[5]發(fā)現(xiàn), JNK3可能參與大鼠認(rèn)知功能損害的病理進(jìn)程。由此提示, JNK可能與精神分裂患者認(rèn)知功能障礙存在一定關(guān)聯(lián)。目前,首發(fā)精神分裂癥患者血清JNK表達(dá)情況與認(rèn)知功能、出院預(yù)后的關(guān)系尚未闡明。本研究對(duì)首發(fā)精神分裂癥患者進(jìn)行調(diào)查,探討其血清JNK水平與認(rèn)知功能及出院1年預(yù)后的相關(guān)性,旨在為精神分裂癥的治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年4月—2020年4月河北省衡水市人民醫(yī)院精神心理科收治的168例未用藥首發(fā)精神分裂癥患者為試驗(yàn)組。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 年齡≥18歲者; ② 符合《國(guó)際疾病分類精神與行為障礙分類》[6]中精神分裂癥診斷標(biāo)準(zhǔn),陽(yáng)性和陰性癥狀量表(PANSS)總分≥60分者; ③ 住院治療,病歷資料完整者; ④ 本人及其監(jiān)護(hù)人簽訂知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 伴有嚴(yán)重心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肝腎功能障礙、惡性腫瘤或其他嚴(yán)重內(nèi)科疾病者; ② 先天性智力障礙或首發(fā)精神疾病前大腦損傷已伴有認(rèn)知功能障礙者; ③器質(zhì)性精神障礙,或精神活性物質(zhì)及非成癮物質(zhì)誘發(fā)精神障礙者。另選取同期150名健康志愿者為對(duì)照組,納入標(biāo)準(zhǔn): ① 年齡≥18歲者; ②無精神病史和精神病家族史者; ③無酒精依賴或精神抑制類藥物服用史者; ④ 簽訂知情同意書,自愿參與本研究者。2組性別、年齡、婚姻狀況等一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

表1 試驗(yàn)組與對(duì)照組一般資料比較

圖2 不同因素預(yù)測(cè)首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的ROC曲線

1.2 臨床資料調(diào)查

自行設(shè)計(jì)情況調(diào)查表,調(diào)查首發(fā)精神分裂癥患者性別、年齡、合并其他慢性病、婚姻狀況、子女?dāng)?shù)量、文化程度、家庭人均月收入、睡眠障礙、是否焦慮、是否抑郁、事件相關(guān)電位P300和血清白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)、同型半胱氨酸(Hcy)水平等臨床資料。

1.3 肌電誘發(fā)電位系統(tǒng)檢測(cè)事件相關(guān)電位P300

使用Nicolet EDX肌電誘發(fā)電位系統(tǒng)檢測(cè)患者事件相關(guān)電位P300, 于患者腦枕區(qū)放置記錄電極,雙乳突處放置參考電極,前額FZ點(diǎn)和PZ點(diǎn)分別接地,電極阻抗<5 000 Ω, 分析時(shí)間為1 000 ms, 患者雙耳短音刺激強(qiáng)度為85 dB, 高頻純音按照2 000 Hz與低頻純音按照1 000 Hz進(jìn)行靶向刺激,強(qiáng)度比例為2∶8, 刺激次數(shù)為500次,刺激時(shí)間為140 ms, 患者受到靶刺激后進(jìn)行按鍵反應(yīng),測(cè)定3次潛伏期及波幅后取平均值。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清相關(guān)因子水平

抽取患者靜脈血10 mL, 4 ℃條件下以3 000轉(zhuǎn)/min離心10 min, 通過ELISA法測(cè)定血清IL-6、TNF-α、IL-1β、BDNF、Hcy表達(dá)水平,試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D system公司。

1.5 蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)測(cè)定血清JNK表達(dá)水平

抽取患者靜脈血10 mL, 4 ℃條件下以3 000轉(zhuǎn)/min離心10 min, 留取血清后采用Western blot測(cè)定血清JNK表達(dá)水平,一抗為鼠抗人單克隆JNK抗體(美國(guó)Abcam公司,稀釋比例1∶100), 二抗為羊抗鼠熒光標(biāo)記二抗,以GAPDH為內(nèi)參,采用ECL化學(xué)法對(duì)蛋白轉(zhuǎn)印膜進(jìn)行顯色,置于凝膠成像儀中拍照分析,采用2-△△Ct法計(jì)算JNK相對(duì)表達(dá)量。

1.6 MATRICS共識(shí)認(rèn)知成套測(cè)試(MCCB)評(píng)估認(rèn)知功能

選用中文版MCCB評(píng)估患者的認(rèn)知功能,原版MCCB由美國(guó)國(guó)立精神衛(wèi)生研究院(NIMH)于2003年編制[7]。中文版MCCB由鄒義壯等[8]進(jìn)行翻譯和修改后得到,重測(cè)信度為0.689～0.842, 包括7個(gè)心理維度10個(gè)分測(cè)驗(yàn): ① 注意警覺維度,持續(xù)操作測(cè)驗(yàn)(CP); ② 處理速度維度,連線測(cè)驗(yàn)A(TMAT)、符號(hào)編碼(SC)和范疇流暢測(cè)驗(yàn)(CFT); ③ 工作記憶維度,數(shù)字序列測(cè)驗(yàn)(DST)和空間廣度分測(cè)驗(yàn)(SST); ④ 言語(yǔ)學(xué)習(xí)和記憶維度,霍普金斯詞語(yǔ)學(xué)習(xí)測(cè)驗(yàn)(HVLT); ⑤ 視覺學(xué)習(xí)和記憶維度,簡(jiǎn)短視覺空間記憶(BVM); ⑥ 推理與問題解決能力維度,迷宮分測(cè)驗(yàn)(MT); ⑦ 社會(huì)認(rèn)知維度,Mayer-salovey-caruso情緒智商測(cè)試(MSCEIT)。MCCB能分別測(cè)定精神分裂癥患者的社會(huì)認(rèn)知功能和精神認(rèn)知功能,根據(jù)MCCB標(biāo)準(zhǔn)分[9]將患者分為認(rèn)知功能受損組(<50分)和認(rèn)知功能正常組(≥50分)。

1.7 出院后隨訪

于患者出院前1 d記錄臨床資料和血清JNK表達(dá)水平,以該次記錄為依據(jù)對(duì)出院患者進(jìn)行隨訪,隨訪時(shí)間為出院日至出院1年(隨訪時(shí)間截至2021年4月),通過門診復(fù)查、電話訪談等方式進(jìn)行隨訪。生存時(shí)間按月計(jì)算,結(jié)局指標(biāo)為病情復(fù)發(fā)或死亡,無病生存期(DFS)定義為從出院至復(fù)發(fā)或死亡或隨訪截止的時(shí)間,若患者因意外死亡則定義為刪失數(shù)據(jù)。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 血清JNK表達(dá)水平

試驗(yàn)組血清JNK表達(dá)水平為(67.83±8.54)%, 對(duì)照組為(45.25±8.25)%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=23.962,P<0.001)。根據(jù)有無認(rèn)知功能受損,試驗(yàn)組患者可分為認(rèn)知功能受損組65例和認(rèn)知功能正常組103例,認(rèn)知功能受損組患者血清JNK表達(dá)水平為(78.12±9.28)%, 高于認(rèn)知功能正常組的(59.38±6.17)%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.420,P<0.001)。見圖1。

圖1 各組血清JNK蛋白表達(dá)的Western blot檢測(cè)結(jié)果

2.2 MCCB評(píng)估結(jié)果

試驗(yàn)組患者的10個(gè)分測(cè)驗(yàn)得分和MCCB得分均低于對(duì)照組健康志愿者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表2。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,試驗(yàn)組患者血清JNK表達(dá)水平與MCCB得分呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.492,P<0.001)。

表2 試驗(yàn)組與對(duì)照組MCCB評(píng)估結(jié)果比較 分

2.3 認(rèn)知功能受損組與認(rèn)知功能正常組人口學(xué)資料及臨床特征比較

單因素分析結(jié)果顯示,認(rèn)知功能受損組與認(rèn)知功能正常組患者在年齡、睡眠障礙、焦慮、抑郁、P300潛伏期、P300波幅、MCCB得分和血清IL-6、TNF-α、IL-1β、BDNF、Hcy水平方面比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表3。

表3 認(rèn)知功能受損組與認(rèn)知功能正常組人口學(xué)資料及臨床特征比較

2.4 首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的多因素Logistic回歸分析

以首發(fā)精神分裂癥患者是否發(fā)生認(rèn)知功能受損為因變量(否=0, 是=1), 以單因素分析中差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量(排除MCCB得分)和JNK表達(dá)水平為自變量,進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,首發(fā)精神分裂癥患者年齡、睡眠障礙、P300潛伏期、P300波幅和血清IL-6、TNF-α、IL-1β、BDNF、Hcy、JNK表達(dá)水平均是發(fā)生認(rèn)知功能受損的獨(dú)立影響因素(P<0.05), 見表4。

表4 首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的多因素Logistic回歸分析

2.5 不同因素預(yù)測(cè)首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的ROC曲線分析

以首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的影響因素為檢驗(yàn)變量,以認(rèn)知功能受損為狀態(tài)變量(未發(fā)生=0, 發(fā)生=1), 繪制ROC曲線。ROC曲線顯示,首發(fā)精神分裂癥患者JNK表達(dá)水平預(yù)測(cè)認(rèn)知功能受損的曲線下面積(AUC)為0.756(95%CI: 0.686～0.827,P<0.001), 僅小于IL-6、Hcy的AUC, 最佳截?cái)嘀禐?3.49, 特異度為0.885, 敏感度為0.913, 約登指數(shù)為0.798, 精度為0.809, 召回率為0.585, 見圖2。

2.6 首發(fā)精神分裂癥患者出院后的隨訪預(yù)后

首發(fā)精神分裂癥患者出院標(biāo)準(zhǔn): ① 癥狀基本緩解; ② 無明顯精神病性癥狀,無傷人、自殺或自殘行為; ③ 社會(huì)功能障礙及自知力明顯改善。本研究168例患者住院時(shí)間為4～13個(gè)月,出院時(shí)血清JNK表達(dá)水平為(55.29±6.24)%, 有睡眠障礙者39例,焦慮者21例,抑郁者24例, P300潛伏期為(402.84±18.28) ms, P300波幅為(7.68±1.35)μV, IL-6為(1.02±0.18) pg/mL, TNF-α為(10.34±2.02) ng/L, IL-1β為(8.38±1.24) ng/L, BDNF為(32.63±6.64) ng/L, Hcy為(8.68±2.18) μmol/L。

根據(jù)血清JNK水平是否>55.29%, 將患者分為高JNK組(>55.29%)59例和低JNK組(≤55.29%)109例。出院后隨訪1年,高JNK組復(fù)發(fā)住院20例、死亡2例、失訪4例,低JNK組復(fù)發(fā)住院21例、死亡0例、失訪6例, Log-rank檢驗(yàn)分析可得,高JNK組患者的DFS短于低JNK組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.786,P<0.05)。

2.7 首發(fā)精神分裂癥患者隨訪預(yù)后的Cox回歸分析

以首發(fā)精神分裂癥患者出院后隨訪1年的生存狀態(tài)(非復(fù)發(fā)、死亡或失訪=0, 復(fù)發(fā)、死亡或失訪=1)為因變量,以人口學(xué)資料及出院時(shí)測(cè)定的臨床特征為自變量,單因素Cox回歸分析顯示,年齡、睡眠障礙、抑郁、焦慮、P300潛伏期、P300波幅、血清BDNF水平、血清JNK表達(dá)水平均為首發(fā)精神分裂癥患者出院后隨訪預(yù)后的影響因素(P<0.05)。進(jìn)一步將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)納入多因素Cox回歸分析,結(jié)果顯示,年齡、睡眠障礙、抑郁、焦慮、血清JNK表達(dá)水平均為首發(fā)精神分裂癥患者出院后隨訪預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素(P<0.05)。見表5。

表5 首發(fā)精神分裂癥患者出院后隨訪預(yù)后的Cox回歸分析

3 討 論

精神分裂癥是臨床常見的精神疾病,目前病因尚不明確。85%的精神分裂癥患者存在持久而嚴(yán)重的認(rèn)知損害,特別是在注意、言語(yǔ)記憶和執(zhí)行功能方面[10]。認(rèn)知功能受損會(huì)導(dǎo)致精神分裂癥患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)升高,影響其社會(huì)功能和生活質(zhì)量,還會(huì)影響患者預(yù)后[11], 故探討精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損相關(guān)因子及機(jī)制具有重要的臨床價(jià)值。

研究[12]指出,凋亡調(diào)節(jié)基因表達(dá)變化所致的細(xì)胞凋亡數(shù)目增加可能與認(rèn)知功能受損有關(guān),而JNK蛋白表達(dá)與細(xì)胞凋亡有直接聯(lián)系。本研究發(fā)現(xiàn),認(rèn)知功能受損組患者JNK表達(dá)水平顯著高于認(rèn)知功能正常組患者,且患者M(jìn)CCB得分與JNK表達(dá)水平呈顯著負(fù)相關(guān),即MCCB得分越低,首發(fā)精神分裂癥患者JNK表達(dá)水平越高。本研究還發(fā)現(xiàn), JNK表達(dá)水平是首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能受損的獨(dú)立影響因素(OR=3.080, 95%CI: 1.864～12.157), 這可能是因?yàn)镴NK能通過線粒體途徑和死亡受體途徑上調(diào)促凋亡蛋白的表達(dá),進(jìn)而調(diào)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡過程,最終影響腦神經(jīng)認(rèn)知功能[13]。本研究多因素Logistic分析顯示,血清IL-6、TNF-α、IL-1β、BDNF、Hcy、JNK表達(dá)水平均是患者認(rèn)知功能受損的獨(dú)立影響因素(P<0.05), 提示首發(fā)精神分裂癥患者血清JNK表達(dá)可能與血清IL-6、TNF-α、IL-1β、BDNF、Hcy水平共同影響認(rèn)知功能。陸玲娜等[14]研究證實(shí),血清JNK表達(dá)水平與IL-6、TNF-α、IL-1β等炎性因子水平存在正相關(guān)性,可共同反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害程度。王增強(qiáng)等[15]發(fā)現(xiàn),大鼠血清磷酸化JNK能激活細(xì)胞凋亡,提升血清Hcy表達(dá)水平。研究[16]證明,大鼠脊髓內(nèi)BDNF蛋白能夠激活阻止JNK逆轉(zhuǎn)錄相關(guān)信號(hào)通路,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)JNK表達(dá)的抑制。本研究結(jié)果顯示,年齡、睡眠障礙、P300潛伏期、P300波幅也是精神分裂癥患者認(rèn)知功能的獨(dú)立影響因素,表明年齡、睡眠障礙、P300潛伏期、P300波幅與JNK表達(dá)水平也能相互作用影響精神分裂癥患者的認(rèn)知功能。這可能是因?yàn)镴NK信號(hào)通路能夠與TLR4、P38信號(hào)通路相互影響,造成海馬神經(jīng)元凋亡,干擾生物體正常睡眠,而睡眠障礙又可通過影響代謝和呼吸功能,造成機(jī)體腦組織損傷[17-18]。本研究還發(fā)現(xiàn),首發(fā)精神分裂癥患者JNK表達(dá)水平預(yù)測(cè)認(rèn)知功能受損的AUC為0.756,僅小于IL-6、Hcy的AUC, 表明JNK表達(dá)水平對(duì)患者認(rèn)知功能受損的預(yù)測(cè)效能相對(duì)較高。臨床醫(yī)務(wù)工作者可將年齡、睡眠障礙和血清IL-6、TNF-α、BDNF、Hcy、JNK表達(dá)水平作為精神分裂癥患者認(rèn)知障礙的聯(lián)合篩查指標(biāo),并根據(jù)篩查結(jié)果及時(shí)采取有效措施,以降低患者認(rèn)知障礙發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

本研究隨訪結(jié)果顯示,高JNK表達(dá)患者的DFS顯著短于低JNK表達(dá)患者,且JNK表達(dá)水平是首發(fā)精神分裂癥患者出院后1年預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素。由此提示,高JNK表達(dá)的首發(fā)精神分裂癥患者出院后生存率較低,且JNK水平高是首發(fā)精神分裂癥患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。因此,臨床醫(yī)務(wù)工作者應(yīng)對(duì)出院的首發(fā)精神分裂癥患者加強(qiáng)隨訪,定期檢測(cè)其血清JNK表達(dá)水平,以降低患者出院后不良事件發(fā)生率。

綜上所述,首發(fā)精神分裂癥患者血清JNK表達(dá)水平與認(rèn)知功能顯著相關(guān),能較好地預(yù)測(cè)認(rèn)知功能受損發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),且高JNK水平會(huì)顯著降低患者出院后生存率。本研究納入的研究對(duì)象較少,未來可擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步探討血清JNK表達(dá)水平對(duì)首發(fā)精神分裂癥患者認(rèn)知功能與預(yù)后的影響及其相關(guān)機(jī)制。