丙肝肝炎病毒感染后的表觀遺傳和對肝細(xì)胞癌發(fā)生的影響

邢珂雪

（東南大學(xué)，江蘇南京 210000）

肝細(xì)胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）屬于較為常見的惡性腫瘤，受到病情的影響，患者的5 年存活率相對較小，對患者的生命健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅[1]。統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，近年來有關(guān)肝細(xì)胞肝癌的發(fā)病率呈現(xiàn)出上升趨勢，并且其致病因素并不固定，諸如病毒感染、黃曲霉素B1 攝入、酗酒等均可能成為致病因素[2]。結(jié)合國內(nèi)現(xiàn)狀調(diào)查，發(fā)現(xiàn)肝炎病毒感染屬于引起肝細(xì)胞癌的主要原因之一，其中以乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染為代表，相對而言，HCV 感染的發(fā)生率在逐年遞增，其致病性較強(qiáng)，并且容易促使肝臟受到慢性炎癥壞死或者纖維化的影響，并最終發(fā)展成為肝硬化及肝細(xì)胞癌[3]。HCV 能夠引發(fā)急性或者慢性感染，通常在出現(xiàn)急性感染后不會產(chǎn)生顯著癥狀，因此，急性期患者很難得到明確的診斷，在感染HCV 以后，75%～80%的患者會患有慢性肝炎病癥，隨著病情的影響加劇，最終發(fā)展成為肝硬化或肝癌[4]。

1 HCV 感染后的表觀遺傳和對肝細(xì)胞癌發(fā)生的影響

1.1 感染特征

丙型肝炎屬于因丙型肝炎病毒感染的肝臟損傷傳染病，其屬于國內(nèi)規(guī)定的乙類管理傳染病。在丙型肝炎急性期階段，對應(yīng)的癥狀相對較輕，且通常呈現(xiàn)出疲乏、食欲減退、惡心等特征，有時可能不會表現(xiàn)出明顯癥狀，55%～85%的感染者會轉(zhuǎn)為慢性肝炎，并存在發(fā)展成為肝硬化以及肝癌的風(fēng)險(xiǎn)[5]。HCV屬于具備包膜結(jié)構(gòu)特征的單股正鏈RNA 病毒，該病毒表現(xiàn)為球形結(jié)構(gòu)，直徑一般小于80 nm（在肝細(xì)胞中36 ～40 nm，血液中36 ～62 nm），在核衣殼外包繞含脂質(zhì)的囊膜，囊膜上有刺突，其能夠在機(jī)體的肝細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)復(fù)制[6]。結(jié)合HCV 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，其涉及6個基因型，并涵蓋超過50 個亞型結(jié)構(gòu)。HCV 存在顯著異源性、高度可變性等特征，急性臨床型以及無癥狀亞臨床患者通常屬于主要的感染群體，其與乙型肝炎較為類似[7]。HCV 感染機(jī)體后，能夠在患者肝臟中大量繁殖，并進(jìn)一步加劇對肝臟的慢性損傷，隨著時間的推移，該種慢性破壞逐漸導(dǎo)致肝臟纖維化、肝硬化、甚至原發(fā)性肝癌[8]。

（1）患者的自由基產(chǎn)生會明顯增多。在受到HCV 感染以后，機(jī)體中存在的中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞會借助氧化以及黃嘌呤氧化酶的作用產(chǎn)生對應(yīng)的高活性分子（如活性氧自由基等），氧化應(yīng)激能夠在慢性患者中產(chǎn)生重要影響，在HCV 蛋白的影響下，機(jī)體肝細(xì)胞內(nèi)會發(fā)生脂肪病變、胰島素抵抗，并且部分細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)，上述狀況均能夠加重HCV 感染過程中所表現(xiàn)出的氧化應(yīng)激反應(yīng)[9]。

（2）HCV 的核心蛋白出現(xiàn)。結(jié)合HCV 蛋白特性，其核心蛋白的作用尤為關(guān)鍵，其不僅是病毒衣殼重要成分，還具有調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、調(diào)控胞內(nèi)信號通路、干擾脂質(zhì)代謝、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及死亡、抑制機(jī)體免疫反應(yīng)等作用。HCV 的核心蛋白通過氧化應(yīng)激誘導(dǎo)肝脂肪病變，在肝細(xì)胞癌發(fā)生過程中扮演著極其重要的角色，在發(fā)生HCV 核心蛋白表達(dá)的細(xì)胞內(nèi)，高活性分子（如活性氧自由基）的水平會顯著上調(diào)，此時細(xì)胞線粒體DNA 由于缺乏組蛋白的保護(hù)，極容易受到損傷，進(jìn)而表現(xiàn)為線粒體電子轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)故障，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[7]。同時，在線粒體受損的狀況下，又促使氧化應(yīng)激效應(yīng)加重，致使細(xì)胞受損并引發(fā)肝細(xì)胞癌變。

1.2 對肝細(xì)胞癌發(fā)生的影響

在機(jī)體受到HCV 感染后，隨著病毒的持續(xù)影響，機(jī)體肝細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生變化，對腫瘤抑制因子的表達(dá)產(chǎn)生負(fù)面影響，在有效激活癌基因級聯(lián)信號的條件下，機(jī)體產(chǎn)生持續(xù)性的慢性炎癥[10]。此外，若患者同時罹患有關(guān)的代謝類綜合征，加上日常生活中酗酒等因素的影響，會進(jìn)一步增加機(jī)體肝損傷的風(fēng)險(xiǎn)，在病情日益加劇時，會導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化、肝細(xì)胞癌的發(fā)生?，F(xiàn)階段，HCV 在世界范圍內(nèi)呈現(xiàn)流行趨勢，是導(dǎo)致肝硬化及肝細(xì)胞癌的主要因素。在實(shí)施抗HCV 治療期間，可應(yīng)用抗病毒藥物（DAA）治療獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR），能夠有效降低HCV 相關(guān)HCC 的發(fā)生率。不過，結(jié)合近年來對HCV 感染后的表觀遺傳的研究，發(fā)現(xiàn)DAA 治療可能增高HCC 發(fā)生率或者導(dǎo)致復(fù)發(fā)[11]。

周莉[12]在探討慢性HCV 感染患者進(jìn)行抗病毒治療獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答后肝細(xì)胞癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素時，了解到肝硬化患者獲得SVR 后仍有發(fā)生肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)，并且針對年齡≥60 歲、Child-Pugh 分級B 級以上、存在重度脂肪肝、有飲酒史或惡性腫瘤家族史等高危因素的患者，要強(qiáng)化對肝細(xì)胞癌的監(jiān)測。受到致癌基因表達(dá)抑制的影響，與其他肝細(xì)胞病毒感染有所不同，HCV 通常不會在機(jī)體的腫瘤組織內(nèi)完成復(fù)制過程，而是集中在感染細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，在有效分析致癌基因的來源時，發(fā)現(xiàn)其多由處于感染狀態(tài)下的細(xì)胞或者周圍細(xì)胞發(fā)生基因突變所導(dǎo)致。

從上述分析可知，在HCV 感染過程中，其能夠創(chuàng)造出獨(dú)特的致癌環(huán)境，并且在該環(huán)境下可對細(xì)胞生長產(chǎn)生干擾抑制，并非是直接改變細(xì)胞特性，且未曾出現(xiàn)顯著的病毒癌基因。開展研究時，可以設(shè)定的“極限點(diǎn)”為參考，有效分析HCV 引起的腫瘤，發(fā)現(xiàn)最初階段通常與病毒感染沒有直接聯(lián)系[13]。同時，在有效清除HCV 病毒以后，HCC 發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)依舊存在，這也意味著HCC 存在著其特定的分子機(jī)制。從遺傳學(xué)層面出發(fā)，難以直接獲取相關(guān)證據(jù)，通常認(rèn)為在機(jī)體受到HCV 感染以后，促使致癌基因的表達(dá)發(fā)生變化，并由此導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[14]。李曉鶴等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在有效指導(dǎo)患者直接口服抗病毒藥物（DAA）時，超過95%丙型肝炎患者能夠?qū)崿F(xiàn)HCV 清除目標(biāo)，表明丙型肝炎可實(shí)現(xiàn)治愈。不過，HCV 感染所帶來的風(fēng)險(xiǎn)依舊不容忽視，在DAA 治療并可實(shí)現(xiàn)HCV 清除的條件下，并不能夠說明機(jī)體患有肝癌的風(fēng)險(xiǎn)會隨之消失，換言之，受到DAA、有關(guān)干擾素的影響以后，獲得SVR 患者患有肝癌病癥的風(fēng)險(xiǎn)可能呈現(xiàn)出降低趨勢，但并不意味著治療初期機(jī)體能夠完全擺脫肝硬化的困擾，即便是獲得SVR，對應(yīng)HCC 的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)仍然處于較高狀態(tài)[16]。

值得關(guān)注的是，在表觀遺傳發(fā)生變化時，雖然可能對基因表達(dá)產(chǎn)生影響，卻并不會造成核苷酸序列的改變。研究發(fā)現(xiàn)，核小體重塑、DNA 甲基化可能對基因表達(dá)帶來影響；在對組蛋白進(jìn)行修飾時，通常會涉及不同種類賴氨酸殘基的乙?；幚恚訦3K27 為例，其作為能夠與染色質(zhì)保持開放關(guān)系的修飾體，能夠促使基因表達(dá)上調(diào)，這也展現(xiàn)出其通過對表現(xiàn)遺傳進(jìn)行修飾影響腫瘤發(fā)展過程的特點(diǎn)[17]。以H3K27ac為研究樣本，分別利用染色質(zhì)免疫沉淀與DNA 測序?qū)Ρ透窝谆颊吆徒】但I(xiàn)血人員的肝活檢結(jié)果予以檢查，發(fā)現(xiàn)在表觀遺傳發(fā)生變化時，確實(shí)會通過轉(zhuǎn)錄途徑對基因的表達(dá)產(chǎn)生影響[18]。在機(jī)體患有肝細(xì)胞癌時會如此，而在對患者實(shí)施治療時，同樣可借助上述途徑來實(shí)現(xiàn)。此外，在明確腫瘤的生成路徑以后，發(fā)現(xiàn)上述狀況的改變與基因型、治療方式不存在聯(lián)系，這也反映出在表觀遺傳發(fā)生改變的條件下，其持續(xù)性和肝纖維化的程度存在聯(lián)系，并且在機(jī)體肝損傷逐漸加重的條件下，其影響程度在不斷下降。

李曉青[19]在有效分析慢性丙型肝炎病毒感染者血清自身抗體的檢測時，以接診的45 例慢性丙型肝炎病毒感染患者為研究對象，并同期選擇45 例健康體檢者為對照，以丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、總膽紅素（TBiL）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（AST）水平、丙型肝炎病毒感染者血清自身抗體陽性、肝功能等為指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)觀察組的血清抗核抗體（ANA）、抗平滑肌抗體（SMA）、抗線粒體抗體（AMA）及總陽性率均高于對照組，不同組別的血清抗肝腎微粒體抗體（LKM）、抗Ro-52 抗體陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，觀察組血清自身抗體陽性患者的ALT、AST、TBiL 水平高于陰性患者，表明慢性丙型肝炎病毒感染患者血清自身抗體陽性率大于健康體檢者，并且其血清自身抗體陽性與肝功能ALT、AST、TBiL 水平呈正相關(guān)。

2 結(jié)語

總之，丙肝呈現(xiàn)出慢性化程度高的特點(diǎn)，并具有較強(qiáng)的隱匿性，其漏診率相對較高，這也會增大肝癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。本文探討丙型肝炎病毒在肝細(xì)胞癌發(fā)生及發(fā)展中的作用，分析感染后表觀遺傳對肝細(xì)胞癌發(fā)生的影響，倡導(dǎo)在表觀遺傳改變前實(shí)施有效干預(yù)治療，最終有效預(yù)防肝癌的發(fā)生。