探究不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢驗(yàn)的效果

郜燕，欒和偉，田園，曹霞

江蘇省句容市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇句容 212400

乙型肝炎病毒是嗜肝脫氧核糖核酸（deoxyribo?nucleic acid, DNA）病毒組成員之一，簡(jiǎn)稱乙肝病毒，主要傳播途為乙肝患者及乙肝病毒攜帶者的血液傳播，可導(dǎo)致肝炎、肝硬化甚至肝癌等嚴(yán)重肝病，威脅患者生命安全[1]。乙肝患者多表現(xiàn)出肝區(qū)疼痛、腹脹、厭食及乏力等癥狀，伴隨疾病進(jìn)一步發(fā)展，可出現(xiàn)肝功能異常、脾大等癥狀[2-4]。既往研究發(fā)現(xiàn)，人體免疫系統(tǒng)可與乙肝病毒產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，由此，臨床可通過(guò)檢驗(yàn)乙肝病毒感染患者血清標(biāo)志物，為疾病早期診治提供參考依據(jù)[5]。血清標(biāo)志物檢測(cè)常用免疫檢驗(yàn)法，包括酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法等，相比較而言，酶聯(lián)免疫吸附法雖然可測(cè)定血清標(biāo)志物水平，但無(wú)法評(píng)估病情，且極易受到客觀因素等影響導(dǎo)致檢測(cè)出現(xiàn)誤差，而化學(xué)發(fā)光法可開(kāi)展定量分析，具有較高靈敏度[6]。本文選取江蘇省句容市人民醫(yī)院于2020年3月—2022年4月收治的207例乙肝病毒感染患者為研究對(duì)象，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的207例乙肝病毒感染者為研究對(duì)象，入組患者有男113例、女94例，年齡20~80歲，平均（42.29±1.44）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《乙肝病毒攜帶者就診指南》中診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室診斷確診者；②年齡>18歲；③病歷等資料完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神或血液系統(tǒng)疾病者；②合并惡性腫瘤或其他傳染病者；③其他類型肝炎或肝病者。

1.3 方法

207例感染者均采集5 mL空腹靜脈血，經(jīng)離心處理（轉(zhuǎn)速3 000 r/min，時(shí)間10 min）后取血清保存于溫度為-20℃環(huán)境中待檢；對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（enzyme-linked immunosor?bent assay, ELISA）、化學(xué)發(fā)光法。

化學(xué)發(fā)光法：儀器選用雅培化學(xué)發(fā)光分析儀，配備雅培公司原裝進(jìn)口試劑測(cè)定血液樣本。酶聯(lián)免疫吸附法：儀器選用TECAN酶免儀，配備北京萬(wàn)泰生物有限公司試劑對(duì)血液樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)指標(biāo)包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）、乙肝表面抗體（hepatitis B surface antibody,HBsAb）、乙肝e抗原（hepatitis eantigen, HBeAg）、乙肝e抗體（hepatitis B eantibody, HBeAb）及乙肝核心抗體（hepatitis B core antibody,HBcAb）。

1.4 觀察指標(biāo)

對(duì)比不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率，分析不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確度、誤診率及漏診率，并對(duì)比不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本。

陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。①化學(xué)發(fā)光法：定量測(cè)定HBsAg及HBsAb，若HBsAb水平>10 IU/mL即陽(yáng)性，HBsAg水平>0.05 IU/mL即陽(yáng)性；以標(biāo)本吸光度值與臨界值的比值（S/CO）確定HBeAg、HBeAb及HBcAb的陰陽(yáng)性，其中HBeAg及HBcAb比值>1.0即陽(yáng)性，HBeAb比值<1.0即陽(yáng)性。②酶聯(lián)免疫吸附法：測(cè)定各血清標(biāo)志物的吸光度值，和cutoff值進(jìn)行比較確定各項(xiàng)血清標(biāo)志物的陰陽(yáng)性，設(shè)定cutoff為0.105，吸光度值>0.105即為陽(yáng)性，<0.105為陰性。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，差異比較進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)及百分比表示，差異比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率對(duì)比

化學(xué)發(fā)光法的 HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫吸附法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率比較[n(%)]

2.2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本對(duì)比

化學(xué)發(fā)光法的檢驗(yàn)成本更高于酶聯(lián)免疫吸附法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本比較[(±s)，元]

表2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本比較[(±s)，元]

方法化學(xué)發(fā)光法（n=207）酶聯(lián)免疫吸附法（n=207）t值P值檢驗(yàn)成本113.29±2.98 30.59±2.46 304.367<0.001

2.3 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染的診斷效能對(duì)比

化學(xué)發(fā)光法的誤診率、漏診率均低于酶聯(lián)免疫吸附法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；化學(xué)發(fā)光法的診斷準(zhǔn)確率高于酶聯(lián)免疫吸附法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染的診斷效能比較[n(%)]

3 討論

乙肝為一種乙肝病毒感染所致傳染病，臨床治療難度較大。乙肝病毒體積極小，不僅可耐低溫及紫外線，還具有耐熱特點(diǎn)，一旦感染經(jīng)潛伏期后可發(fā)展為乙型肝炎[7]。既往研究證實(shí)，乙肝病毒感染者發(fā)病后隨著疾病進(jìn)展可損傷機(jī)體肝臟，甚至導(dǎo)致肝硬化、肝癌等發(fā)生，病死率極高。血清標(biāo)志物可準(zhǔn)確反映機(jī)體免疫反應(yīng)，而HBsAg、HB?sAb、HBeAg、HBeAb及 HBcAb作為乙肝病毒感染的血清標(biāo)志物，不僅可反映機(jī)體感染情況，還可反映乙肝病毒水平[8]。在乙肝病毒中，HBsAg為其結(jié)構(gòu)中的外殼蛋白成分，一旦感染乙肝病毒，可于1~2周內(nèi)檢測(cè)出高水平的HBsAg，且隨著疾病進(jìn)展該指標(biāo)水平可進(jìn)一步升高。HBeAb為機(jī)體受到HBeAg刺激后產(chǎn)生的一種抗體，可準(zhǔn)確反映乙肝病毒復(fù)制情況，可用于評(píng)估疾病轉(zhuǎn)歸、治療效果等?；瘜W(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法均為血清標(biāo)志物常用免疫檢驗(yàn)方法，其中化學(xué)發(fā)光法通過(guò)儀器對(duì)發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定，以確定待測(cè)物含量，具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，而酶聯(lián)免疫吸附法是通過(guò)底物與酶產(chǎn)生一定反應(yīng)開(kāi)展半定量檢測(cè)，雖然檢測(cè)成本較低，但靈敏度不高，臨床應(yīng)用具有一定局限性[9]。

本研究中入組者均采用化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清標(biāo)志物，結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法的HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb檢驗(yàn)陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫吸附法，化學(xué)發(fā)光法的誤診率、漏診率低于酶聯(lián)免疫吸附法，化學(xué)發(fā)光法的診斷準(zhǔn)確率（97.58%）高于酶聯(lián)免疫吸附法（84.06%）（P<0.05）；提示化學(xué)發(fā)光法用于測(cè)定血清標(biāo)志物，可降低漏診、誤診率，提高檢出陽(yáng)性率。林麗[10]選取96例乙肝病毒感染患者開(kāi)展研究，經(jīng)化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的診斷準(zhǔn)確率為96.9%，高于酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)88.50%（P<0.05），與本研究結(jié)果一致。分析原因，酶聯(lián)免疫吸附法用于血清標(biāo)志物檢測(cè)，雖然檢測(cè)成本較低，但檢測(cè)步驟較多，且極易受到多種因素影響導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果誤差，影響其臨床應(yīng)用價(jià)值[11-13]?；瘜W(xué)發(fā)光法是一種自動(dòng)化操作過(guò)程，原理在于電磁鐵對(duì)順磁性微粒的控制作用，無(wú)需人工操作，有利于減少或避免因人為操作而導(dǎo)致的失誤情況，此外，該種方法還可開(kāi)展精確定量分析?；瘜W(xué)發(fā)光法不僅操作簡(jiǎn)便，且操作時(shí)間短，不易受到其他因素影響，可于短時(shí)間內(nèi)獲得準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果[14-17]。本研究還發(fā)現(xiàn)，與酶聯(lián)免疫吸附法比較，化學(xué)發(fā)光法的檢驗(yàn)成本更高（P<0.05），分析原因，可能是由于化學(xué)發(fā)光法的操作步驟多，在一定程度上增加成本[18]。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光法用于乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢驗(yàn)，可促進(jìn)診斷準(zhǔn)確率提高，為臨床診治提供可靠依據(jù)。