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    探究不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢驗(yàn)的效果

    2023-05-05 11:59:00郜燕欒和偉田園曹霞
    系統(tǒng)醫(yī)學(xué) 2023年1期
    關(guān)鍵詞:檢驗(yàn)法免疫吸附化學(xué)發(fā)光

    郜燕,欒和偉,田園,曹霞

    江蘇省句容市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇句容 212400

    乙型肝炎病毒是嗜肝脫氧核糖核酸(deoxyribo?nucleic acid, DNA)病毒組成員之一,簡(jiǎn)稱乙肝病毒,主要傳播途為乙肝患者及乙肝病毒攜帶者的血液傳播,可導(dǎo)致肝炎、肝硬化甚至肝癌等嚴(yán)重肝病,威脅患者生命安全[1]。乙肝患者多表現(xiàn)出肝區(qū)疼痛、腹脹、厭食及乏力等癥狀,伴隨疾病進(jìn)一步發(fā)展,可出現(xiàn)肝功能異常、脾大等癥狀[2-4]。既往研究發(fā)現(xiàn),人體免疫系統(tǒng)可與乙肝病毒產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),由此,臨床可通過(guò)檢驗(yàn)乙肝病毒感染患者血清標(biāo)志物,為疾病早期診治提供參考依據(jù)[5]。血清標(biāo)志物檢測(cè)常用免疫檢驗(yàn)法,包括酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法等,相比較而言,酶聯(lián)免疫吸附法雖然可測(cè)定血清標(biāo)志物水平,但無(wú)法評(píng)估病情,且極易受到客觀因素等影響導(dǎo)致檢測(cè)出現(xiàn)誤差,而化學(xué)發(fā)光法可開(kāi)展定量分析,具有較高靈敏度[6]。本文選取江蘇省句容市人民醫(yī)院于2020年3月—2022年4月收治的207例乙肝病毒感染患者為研究對(duì)象,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取本院收治的207例乙肝病毒感染者為研究對(duì)象,入組患者有男113例、女94例,年齡20~80歲,平均(42.29±1.44)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),患者均知情同意。

    1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

    納入標(biāo)準(zhǔn):①符合《乙肝病毒攜帶者就診指南》中診斷標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)實(shí)驗(yàn)室診斷確診者;②年齡>18歲;③病歷等資料完整。

    排除標(biāo)準(zhǔn):①合并精神或血液系統(tǒng)疾病者;②合并惡性腫瘤或其他傳染病者;③其他類型肝炎或肝病者。

    1.3 方法

    207例感染者均采集5 mL空腹靜脈血,經(jīng)離心處理(轉(zhuǎn)速3 000 r/min,時(shí)間10 min)后取血清保存于溫度為-20℃環(huán)境中待檢;對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linked immunosor?bent assay, ELISA)、化學(xué)發(fā)光法。

    化學(xué)發(fā)光法:儀器選用雅培化學(xué)發(fā)光分析儀,配備雅培公司原裝進(jìn)口試劑測(cè)定血液樣本。酶聯(lián)免疫吸附法:儀器選用TECAN酶免儀,配備北京萬(wàn)泰生物有限公司試劑對(duì)血液樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)指標(biāo)包括乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、乙肝表面抗體(hepatitis B surface antibody,HBsAb)、乙肝e抗原(hepatitis eantigen, HBeAg)、乙肝e抗體(hepatitis B eantibody, HBeAb)及乙肝核心抗體(hepatitis B core antibody,HBcAb)。

    1.4 觀察指標(biāo)

    對(duì)比不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率,分析不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染診斷準(zhǔn)確度、誤診率及漏診率,并對(duì)比不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本。

    陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。①化學(xué)發(fā)光法:定量測(cè)定HBsAg及HBsAb,若HBsAb水平>10 IU/mL即陽(yáng)性,HBsAg水平>0.05 IU/mL即陽(yáng)性;以標(biāo)本吸光度值與臨界值的比值(S/CO)確定HBeAg、HBeAb及HBcAb的陰陽(yáng)性,其中HBeAg及HBcAb比值>1.0即陽(yáng)性,HBeAb比值<1.0即陽(yáng)性。②酶聯(lián)免疫吸附法:測(cè)定各血清標(biāo)志物的吸光度值,和cutoff值進(jìn)行比較確定各項(xiàng)血清標(biāo)志物的陰陽(yáng)性,設(shè)定cutoff為0.105,吸光度值>0.105即為陽(yáng)性,<0.105為陰性。

    1.5 統(tǒng)計(jì)方法

    采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù),符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以(±s)表示,差異比較進(jìn)行t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)及百分比表示,差異比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率對(duì)比

    化學(xué)發(fā)光法的 HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫吸附法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

    表1 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)血清標(biāo)志物檢驗(yàn)陽(yáng)性率比較[n(%)]

    2.2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本對(duì)比

    化學(xué)發(fā)光法的檢驗(yàn)成本更高于酶聯(lián)免疫吸附法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

    表2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本比較[(±s),元]

    表2 不同免疫檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)成本比較[(±s),元]

    方法化學(xué)發(fā)光法(n=207)酶聯(lián)免疫吸附法(n=207)t值P值檢驗(yàn)成本113.29±2.98 30.59±2.46 304.367<0.001

    2.3 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染的診斷效能對(duì)比

    化學(xué)發(fā)光法的誤診率、漏診率均低于酶聯(lián)免疫吸附法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);化學(xué)發(fā)光法的診斷準(zhǔn)確率高于酶聯(lián)免疫吸附法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

    表3 不同免疫檢驗(yàn)法對(duì)乙肝病毒感染的診斷效能比較[n(%)]

    3 討論

    乙肝為一種乙肝病毒感染所致傳染病,臨床治療難度較大。乙肝病毒體積極小,不僅可耐低溫及紫外線,還具有耐熱特點(diǎn),一旦感染經(jīng)潛伏期后可發(fā)展為乙型肝炎[7]。既往研究證實(shí),乙肝病毒感染者發(fā)病后隨著疾病進(jìn)展可損傷機(jī)體肝臟,甚至導(dǎo)致肝硬化、肝癌等發(fā)生,病死率極高。血清標(biāo)志物可準(zhǔn)確反映機(jī)體免疫反應(yīng),而HBsAg、HB?sAb、HBeAg、HBeAb及 HBcAb作為乙肝病毒感染的血清標(biāo)志物,不僅可反映機(jī)體感染情況,還可反映乙肝病毒水平[8]。在乙肝病毒中,HBsAg為其結(jié)構(gòu)中的外殼蛋白成分,一旦感染乙肝病毒,可于1~2周內(nèi)檢測(cè)出高水平的HBsAg,且隨著疾病進(jìn)展該指標(biāo)水平可進(jìn)一步升高。HBeAb為機(jī)體受到HBeAg刺激后產(chǎn)生的一種抗體,可準(zhǔn)確反映乙肝病毒復(fù)制情況,可用于評(píng)估疾病轉(zhuǎn)歸、治療效果等?;瘜W(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法均為血清標(biāo)志物常用免疫檢驗(yàn)方法,其中化學(xué)發(fā)光法通過(guò)儀器對(duì)發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定,以確定待測(cè)物含量,具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高等優(yōu)勢(shì),而酶聯(lián)免疫吸附法是通過(guò)底物與酶產(chǎn)生一定反應(yīng)開(kāi)展半定量檢測(cè),雖然檢測(cè)成本較低,但靈敏度不高,臨床應(yīng)用具有一定局限性[9]。

    本研究中入組者均采用化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清標(biāo)志物,結(jié)果顯示,化學(xué)發(fā)光法的HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb檢驗(yàn)陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫吸附法,化學(xué)發(fā)光法的誤診率、漏診率低于酶聯(lián)免疫吸附法,化學(xué)發(fā)光法的診斷準(zhǔn)確率(97.58%)高于酶聯(lián)免疫吸附法(84.06%)(P<0.05);提示化學(xué)發(fā)光法用于測(cè)定血清標(biāo)志物,可降低漏診、誤診率,提高檢出陽(yáng)性率。林麗[10]選取96例乙肝病毒感染患者開(kāi)展研究,經(jīng)化學(xué)發(fā)光法測(cè)定的診斷準(zhǔn)確率為96.9%,高于酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)88.50%(P<0.05),與本研究結(jié)果一致。分析原因,酶聯(lián)免疫吸附法用于血清標(biāo)志物檢測(cè),雖然檢測(cè)成本較低,但檢測(cè)步驟較多,且極易受到多種因素影響導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果誤差,影響其臨床應(yīng)用價(jià)值[11-13]?;瘜W(xué)發(fā)光法是一種自動(dòng)化操作過(guò)程,原理在于電磁鐵對(duì)順磁性微粒的控制作用,無(wú)需人工操作,有利于減少或避免因人為操作而導(dǎo)致的失誤情況,此外,該種方法還可開(kāi)展精確定量分析?;瘜W(xué)發(fā)光法不僅操作簡(jiǎn)便,且操作時(shí)間短,不易受到其他因素影響,可于短時(shí)間內(nèi)獲得準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果[14-17]。本研究還發(fā)現(xiàn),與酶聯(lián)免疫吸附法比較,化學(xué)發(fā)光法的檢驗(yàn)成本更高(P<0.05),分析原因,可能是由于化學(xué)發(fā)光法的操作步驟多,在一定程度上增加成本[18]。

    綜上所述,化學(xué)發(fā)光法用于乙肝病毒感染血清標(biāo)志物檢驗(yàn),可促進(jìn)診斷準(zhǔn)確率提高,為臨床診治提供可靠依據(jù)。

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