油菜種子純度的田間小區(qū)種植鑒定方法

洪 勇, 唐 谷

（1. 貴州省安順市種子管理站, 貴州 安順 561000；2. 貴州省安順市農(nóng)業(yè)科學院, 貴州 安順 562100）

貴州是我國長江流域油菜優(yōu)勢主產(chǎn)區(qū)，也是全國油菜主產(chǎn)省之一。貴州省常年油菜種植面積約43 萬hm2，種植面積居全國第5 位。種子質(zhì)量是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中至關(guān)重要的因素，油菜種子質(zhì)量是提高油菜產(chǎn)量、增加油菜種植收入的基本保證。隨著大量品種的審定、引進和品種加速更替，雜交油菜品種呈現(xiàn)井噴之勢。品種純度是評價種子質(zhì)量的重要指標，對產(chǎn)量及品質(zhì)均有直接而明顯的影響[1]，開展品種純度鑒定是保證良種遺傳特性充分發(fā)揮、防止良種混雜退化、提高種子質(zhì)量和品質(zhì)的必要手段[2]。目前，我國鑒定種子純度常用的方法有小區(qū)種植鑒定法和鹽溶蛋白電泳法。鹽溶蛋白電泳法雖然檢測成本低廉，但區(qū)分能力較弱，難以區(qū)分異型株，對部分品種也無法鑒定自交苗。小區(qū)種植鑒定法可在花期同時觀測多個性狀，有較多的性能用于純度鑒定[3]，是經(jīng)典的表型鑒定方法。盡管田間小區(qū)種植鑒定法費工費時，但在一定時期內(nèi)仍然是商品種子純度鑒定唯一認可的方法[4]。田間小區(qū)種植鑒定應用廣泛，國內(nèi)已有多篇報道總結(jié)田間小區(qū)種植法開展玉米[5]、水稻[6]、小麥[7]、大豆[8]、辣椒[9]等作物品種純度鑒定程序和關(guān)鍵技術(shù)，但油菜品種田間小區(qū)種植鑒定方法鮮見報道。安順市種子管理站多年來承擔貴州省油菜種子純度田間小區(qū)種植鑒定任務，通過試驗實踐探索積累，已掌握關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。為油菜品種純度田間小區(qū)種植鑒定規(guī)程的制定與應用提供參考，總結(jié)油菜品種純度田間小區(qū)種植鑒定的鑒定程序及田間操作技術(shù)要點。

1 鑒定地塊選擇

鑒定地塊應選擇具備油菜品種廣泛種植的生產(chǎn)條件和自然環(huán)境條件，不易發(fā)生自然災害。選擇地勢平坦、土壤疏松、均勻、肥力中等偏下、交通便利、水源有保障、排灌方便良好的田塊。鑒定地塊前作最好是玉米或水稻，不能選擇前作為十字花科同科（種）作物的地塊。地塊形狀規(guī)則，未發(fā)生過嚴重病蟲害。

2 種子樣品準備

為加強種子質(zhì)量源頭監(jiān)管，全面掌控油菜種子質(zhì)量，使品種特征特性得到客觀、真實的反映，貴州省種子管理部門定期對市場銷售量大、推廣種植面積較大及群眾反饋疑似有問題的品種進行扦樣，嚴格按照規(guī)定的程序、數(shù)量進行，做好鑒定油菜品種信息收集、登記工作，妥善保存樣品。所有樣品統(tǒng)一編號，并將樣品保存在陰涼、通風的室內(nèi)，避免因環(huán)境變化影響種子質(zhì)量。在播種前，再次對參加種植鑒定的油菜種子樣品數(shù)量、品種名稱、樣品編號、種子質(zhì)量標簽標注值等進行核查，確保油菜樣品準確性。根據(jù)播種粒數(shù)隨機選取種子粒數(shù)，試驗種子樣品不得進行包衣、浸種、選種等處理[7]。

為確保田間小區(qū)種植試驗的有效性，同時考慮節(jié)約占地成本，應合理確定播種數(shù)量。測定品種純度百分率，田間設(shè)計應滿足GB/T 3543.2—1995 鑒定品種純度的基本株數(shù)，計算公式為鑒定株數(shù)=4×100/（100-純度標注值）；田間種植粒數(shù)≥鑒定株數(shù)/發(fā)芽率。GB 4407.2—2008中規(guī)定了油菜種子的質(zhì)量要求、檢驗方法和檢驗規(guī)則，大田用種中油菜雜交種的品種純度不低于85%，常規(guī)種的品種純度不低于95%，即種植株數(shù)達80 株即可。在實際工作中，為提高準確度，保證種植總數(shù)量在300株以上。

3 小區(qū)設(shè)計

為保證油菜品種的特征特性得到充分表現(xiàn)，需有足夠的行株距保證植株正常生長，密度過小，不利于植株性狀的表現(xiàn)和專家開展現(xiàn)場鑒定；密度過大，則造成土地浪費，增加成本。經(jīng)過多年試驗實踐得出，每個樣品為1 個小區(qū)，每個小區(qū)種植4～6 行，種植密度90 000 株/hm2左右。小區(qū)之間走道80 cm，便于觀察鑒定和田間管理。鑒定地塊四周設(shè)置80 cm 的保護行，避免鑒定地塊受人畜危害。田間小區(qū)采用隨機區(qū)組排列設(shè)計，并繪制田間小區(qū)示意圖。設(shè)2次重復，有條件的可設(shè)置3 次重復，同一樣品的2 次重復不能在同一垂直線上。

4 田間種植技術(shù)

4.1 播種

按貴州省當?shù)厣鷳B(tài)及栽培條件，當?shù)赝痉N植鑒定一般安排在9月下旬至10月上旬播種?？刹捎弥辈セ蛴缫圃苑绞?，直播方式需單粒播種；育苗移栽方式播種時，可采用穴盤育苗或漂浮盤育苗，育苗盤須消毒處理后再使用。為培育壯苗，應做好育苗大棚溫度管理，溫度高時注意大棚防風，防止燒苗，苗旺盛生長期應適當降溫，防止徒長，保持白天溫度20～30℃，夜間13～18℃，視墑情適當補水，需在每個小區(qū)或每個營養(yǎng)缽（穴盤）上標注種植編號，經(jīng)核查無誤后將小區(qū)標識牌插在行（區(qū)）頭，再次核查無誤后開始單株移栽。移栽時隨機取單株種植，不得選苗。根據(jù)種植總數(shù)量要求，綜合考慮油菜發(fā)芽率、成苗率等因素，建議育苗總數(shù)量在種植總數(shù)量的基礎(chǔ)上增加40%～50%，若個別品種發(fā)芽率低，播種量應當適當增加，避免移栽定植時缺苗。

4.2 田間管理

種植前精細整地，旋耕2 遍以上，深度達15 cm 以上，耕后平整土地。澆足底墑水，保持土壤相對含水量為70%～80%。合理施肥，小區(qū)種植鑒定只要求觀察品種的特征特性，不要求高產(chǎn)，土壤肥力不宜過高。整個生育期間盡量少施化肥，特別是氮肥，若需施用化肥，要求施肥均勻一致。

整個生長周期不補種、不勻苗、不間苗、不去雜，不得使用除草劑和植物生長調(diào)節(jié)劑。 種植后加強田間管理，及時中耕除草、培土、保持土壤疏松。及時澆水，保持土表濕潤，同時注意排澇，下雨及時清溝，確保田間無明顯積水。可在蕾薹期和初花期噴施0.2%速樂硼50～60 kg/667m2，栽培管理要求一致，同一管理措施應在同一天內(nèi)完成。

4.3 病蟲害防治

加強田間調(diào)查，及時及早開展病蟲害防治，特別注意防治苗期菌核病、病毒病，生長期霜霉病、白粉病等病害，蚜蟲、菜青蟲、菜粉蝶等蟲害，以保護油菜正常生長，充分表現(xiàn)其品種的特征特性[10]。在生長中后期階段，清理病葉、老葉并帶出田塊集中處理，防止病菌的擴散和蔓延。

5 鑒定

5.1 鑒定時期

花期和成熟期是品種特征特性表現(xiàn)最明顯的時期，也是鑒定的最佳時期，在花期或成熟期集中組織專家鑒定。

5.2 鑒定程序

5.2.1 初步篩查 鑒定專家根據(jù)《農(nóng)作物種子質(zhì)量監(jiān)督抽查管理辦法》《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 真實性和品種純度鑒定》（GB/T 3543.5—1996）等規(guī)定，按照科學、公正、公平的原則，對田間生長情況進行整體巡檢，確保符合鑒定要求后，分組開展初步篩查。對所有樣品的種植小區(qū)，仔細觀察本品種植株和非本品種植株（包括自交株、非典型株）的主要特征，并對其進行篩查鑒定，對初步確認為非本品種的植株進行標記并計數(shù)。初步篩查鑒定結(jié)果填寫在《品種純度田間種植鑒定原始記載表》中，對實測值＋容許誤差＜標準值的，列為初步篩查疑似不合格樣品。

5.2.2 復查不合格樣品 對照品種純度判斷規(guī)則，對初步篩查結(jié)果進行判定，將預期可能不合格的種子樣品列為復查對象。所有鑒定專家組成復核組，對疑似不合格樣品進行復查并計數(shù)。若復查結(jié)果與初篩結(jié)果無顯著差異，以復查結(jié)果作為最終鑒定結(jié)果，復查專家組負責對最終確定的非本品種植株予以明顯標記。若復查結(jié)果與初篩結(jié)果差異顯著，報鑒定組織者進行會商后確定檢查方案再進行鑒定，最終結(jié)果以末次鑒定為準。

5.2.3 鑒定結(jié)果的計算與判定 根據(jù)《農(nóng)作物種 子標 簽通 則》（GB 20464—2006）和《農(nóng)作物種子質(zhì)量標準》（GB 4404.1—2008）的規(guī)定，按照種子標簽標注值和國家種子質(zhì)量標準規(guī)定值就高不就低的原則，對田間小區(qū)種植鑒定計算出的品種純度值逐一進行判定，判定采用規(guī)定的容許誤差。鑒定嚴格按照GB/T 3543.5—1995 執(zhí)行，逐行逐株進行鑒別，記錄調(diào)查品種總株數(shù)、變異株數(shù)。品種純度結(jié)果以百分率表示。計算公式：

品種純度=［（本品種總株數(shù)-變異株數(shù)）/本品種總株數(shù)］×100%

式中，T為容許誤差，p為表格中純度標準值，q=100-p，N為鑒定株數(shù)。

5.2.4 結(jié)果填報與匯總 將計算數(shù)值和判定結(jié)果填入品種純度田間小區(qū)種植鑒定記載表，并根據(jù)各檢驗機構(gòu)分工對鑒定結(jié)果進行分類匯總。根據(jù)原始記載表填寫純度鑒定結(jié)果匯總表和鑒定意見，結(jié)果匯總表及鑒定意見由所有鑒定專家簽字。對不合格樣品每個樣品單獨填寫《品種純度田間種植鑒定原始記載表》，并由初次鑒定專家及記錄人在初次鑒定結(jié)果欄鑒定人處簽字。根據(jù)初步篩查和復核結(jié)果，填寫《品種純度田間種植鑒定結(jié)果匯總表》，鑒定地點填寫詳細至村，所有復核專家在復核結(jié)果欄鑒定人處簽字。參與鑒定的所有專家及工作人員在《品種純度田間種植鑒定簽到表》上簽到。

5.2.5 檔案資料管理 田間種植鑒定結(jié)果是農(nóng)業(yè)行政管理部門行使行政管理職責，進行種子執(zhí)法的重要依據(jù)，需強化保密原則和可追溯原則。在田間鑒定期間和鑒定結(jié)果未正式公布前，不得事先轉(zhuǎn)換種植編號，不得查詢樣品所屬企業(yè)等相關(guān)信息，應對相關(guān)事宜予以保密，所有人員禁止以任何形式向外透露鑒定結(jié)果的相關(guān)信息。建立生產(chǎn)檔案及田間現(xiàn)場鑒定檔案，生產(chǎn)檔案應實事求是記錄品種的田間管理事項、農(nóng)事、氣象、病蟲害發(fā)生等情況，田間現(xiàn)場鑒定檔案應記錄好品種總株數(shù)、變異株數(shù)。做好數(shù)據(jù)整理匯總，形成鑒定意見，鑒定結(jié)束后，將品種純度田間種植鑒定簽到表、品種純度田間種植鑒定意見、品種純度田間種植鑒定結(jié)果匯總表、品種純度田間種植鑒定原始記載表等田間小區(qū)種植鑒定原始記錄和生產(chǎn)記錄保存好，保證田間鑒定結(jié)果、相關(guān)記載信息均能溯源到原始樣品，保證可追溯。

6 結(jié)果通知與異議處理

6.1 結(jié)果通知

根據(jù)種植編號信息轉(zhuǎn)換成樣品登記號，確認純度不合格的種子樣品和企業(yè)信息，在現(xiàn)場將鑒定結(jié)果電話通知被抽查對象，被抽查對象不是該品種的種子生產(chǎn)經(jīng)營者的，同時通知種子生產(chǎn)經(jīng)營者。在鑒定結(jié)束后，將結(jié)果通知單書面材料按程序快遞給企業(yè)，并做好相應的收發(fā)記錄。

6.2 異議處理

不合格樣品所屬企業(yè)提出異議，要求到現(xiàn)場查看結(jié)果的，檢驗機構(gòu)應告知其要在3日內(nèi)到達鑒定現(xiàn)場，跟蹤處理并根據(jù)不合格樣品的鑒定意見做好釋疑工作。田間小區(qū)種植鑒定承擔單位負責有異議企業(yè)查看現(xiàn)場的接洽工作，并確保鑒定小區(qū)在鑒定異議期結(jié)束前保持完好，不被破壞。

7 小結(jié)

科學規(guī)范的種植方法與合理的管理技術(shù)是保障種子純度種植鑒定結(jié)果準確性的關(guān)鍵。油菜小區(qū)種植鑒定法在花期同時觀測多個性狀，可直觀地判定品種真?zhèn)?。實施油菜種子純度田間小區(qū)種植鑒定試驗必須把握好每個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，確保準確到位，保障鑒定結(jié)果真實可靠。對鑒定不合格的樣品批次進行封存，有效防止假冒偽劣油菜種子在市場上流通，防止低純度的油菜種子對油菜生產(chǎn)造成不良影響，保障秋冬季油菜用種安全，切實保障農(nóng)民切身利益，為油菜產(chǎn)業(yè)持續(xù)穩(wěn)定健康發(fā)展提供保障。