基于國家專利數(shù)據(jù)庫分析中藥復方治療非酒精性脂肪性肝病的用藥規(guī)律

韋柳婷 胡振斌 高松林 韋玉珍 張家增 張臻

1.廣西中醫(yī)藥大學研究生院，廣西南寧 530000；2.廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院肝病一區(qū)，廣西南寧 530000

非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是一種與胰島素抵抗和遺傳易感密切相關的代謝應激性肝損傷[1]。目前，NAFLD 的患病率正在迅速增加，在我國和全球的患病率分別約為29%和25%，是引發(fā)肝硬化、肝癌等多種肝病的主要原因[2-4]。其發(fā)病機制與胰島素抵抗、自噬、腸道菌群、遺傳因素、細胞外囊泡等多種因素有密切的聯(lián)系[5]。NAFLD目前尚無特效藥物，主要的治療方法有低熱量飲食、運動療法和防治其合并癥等[6]。祖國醫(yī)學中尚無有關NAFLD 的病名記錄，大多數(shù)醫(yī)家針對其脅下痞塊、脅肋疼痛等特征，將其納入“肝癖”“積聚”和“脅痛”病等范疇[7]。中國專利庫中具有豐富的治療NAFLD 的專利復方，不僅具有明確的效果，而且是高效新藥上市的一個重要來源。本研究擬通過挖掘治療NAFLD 的中藥專利復方配伍規(guī)律，以期為NAFLD 的新藥研發(fā)和臨床用藥提供參考。

1 資料與方法

1.1 資料來源

在中國知網(wǎng)專利數(shù)據(jù)庫和中國國家知識產(chǎn)權局專利檢索與分析系統(tǒng)（http：//pss-system.cnipa.gov.cn/）的高級檢索中分別以“非酒精性脂肪肝AND 中藥/方劑/中成藥”“非酒精性脂肪性肝病AND 中藥/中成藥/方劑”為檢索詞，均檢索建庫至2022 年4 月所有治療NAFLD 的中藥專利復方，再分配專人仔細閱覽所有復方專利中的內容，依據(jù)納入及排除標準，歸納整理后建立數(shù)據(jù)庫。

1.2 納入及排除標準

1.2.1 納入標準 專利名稱或詳情或全文中明確指出具有治療NAFLD 作用的中藥專利復方，且具有完整的中藥組成。

1.2.2 排除標準①僅含有單味中藥的處方；②組方重復或不明確的處方；③外用、保健品或食品類專利處方。

1.3 數(shù)據(jù)規(guī)范及數(shù)據(jù)表建立

將納入的所有專利復方的中藥組成依次錄入Microsoft Excel 中。根據(jù)《中藥學》[8]（人民衛(wèi)生出版社第3 版）和《中華人民共和國藥典》[9]（2020 年版）規(guī)范中藥名稱，若在二者中均未出現(xiàn)則保留原名。

1.4 數(shù)據(jù)導入與核對

將整理后的Microsoft Excel 表從中醫(yī)傳承計算平臺（V3.0）中的“數(shù)據(jù)管理”模塊中進行導入，由2 名研究人員負責對Microsoft Excel 表和中醫(yī)傳承計算平臺（V3.0）進行雙向核查，以防出現(xiàn)遺漏、錄錯等情況影響研究結果。

1.5 數(shù)據(jù)處理

運用中醫(yī)傳承計算平臺（V3.0）的“方劑分析”模塊對中藥進行頻次統(tǒng)計、關聯(lián)規(guī)則和聚類分析等，運用Microsoft Excel 表對高頻藥物的四氣、五味、歸經(jīng)和功效進行分析。

2 結果

2 個數(shù)據(jù)庫共檢索得到357 個專利復方，經(jīng)納入及排除標準篩選，最終獲得93 個專利復方。

2.1 用藥頻次統(tǒng)計

93 個專利復方涉及241 種中藥，共885 頻次。其中使用頻次≥5 的中藥有42 味，共558 頻次，占總頻次的63.05%，為高頻藥物。見表1。

表1 中藥專利復方治療NAFLD 使用頻次≥5 的藥物

2.2 高頻藥物功效統(tǒng)計

高頻藥物根據(jù)功效分類可分為12 類。見表2。

表2 高頻藥物功效統(tǒng)計

2.3 高頻藥物四氣、五味、歸經(jīng)統(tǒng)計

高頻中藥藥性以溫、微寒、寒為主，藥味以苦、甘、辛為主，主歸肝、脾經(jīng)。見圖1。

圖1 藥物四氣、五味、歸經(jīng)分布

2.4 藥對頻次

在中醫(yī)傳承計算平臺（V3.0）“方劑分析”的關聯(lián)規(guī)則中將支持度個數(shù)設置為16，即支持度為20.43%，置信度設置為0.9，得到9 對高頻藥對。見表3。

表3 高頻藥對（支持度個數(shù)為16）

2.5 藥物關聯(lián)規(guī)則統(tǒng)計

在“方劑分析-關聯(lián)規(guī)則”中設置支持度個數(shù)11，即支持度為11.83%，置信度設置為0.9，得到藥物關聯(lián)規(guī)則，見表4，核心藥物網(wǎng)絡化展示見圖2。

圖2 核心藥物復雜網(wǎng)絡化展示

表4 藥物關聯(lián)規(guī)則

2.6 藥物聚類分析

對93 個專利復方中241 種中藥進行聚類分析，根據(jù)中醫(yī)傳承計算平臺（V3.0）設置聚類個數(shù)為3，見表5、圖3。

圖3 方劑聚類分析圖（K-means 算法+回歸模擬）

表5 藥物聚類分析核心組合

3 討論

3.1 用藥頻次分析

丹參、山楂、澤瀉、柴胡和白術使用頻次最高，與其他數(shù)據(jù)庫研究結果類似[10]。丹參善于活血祛瘀，可見逐瘀是治療NAFLD 的重點。丹參能夠抑制白細胞介素-6、白細胞介素-17、腫瘤壞死因子-α 等炎癥因子表達，減少RORγt 基因水平，修復Th17/Treg 細胞平衡，從免疫調節(jié)方面來治療NAFLD[11]。山楂兼具行氣散瘀、化濁降脂之功，有效成分山楂酸能夠抑制炎癥反應和氧化應激反應達到護肝作用[12]。澤瀉性寒清熱，味淡入腎，利水滲濕，亦有化濁降脂之效。澤瀉提取物一方面能夠通過抑制內質網(wǎng)應激反應，發(fā)揮減少細胞凋亡的作用；另一方面能抑制JNK 信號通路的激活，減少肝細胞死亡[13]。柴胡為肝經(jīng)的引經(jīng)藥，具有疏肝解郁的藥效，有抗腫瘤、抗感染、抗衰老和保護內臟等作用[14-19]。柴胡的活性成分柴胡皂苷A 可能通過改善胰島素抵抗，調節(jié)脂肪代謝紊亂，從而降低NAFLD 小鼠的肝損傷[20-21]。白術益氣健脾，其提取物能夠升高高密度脂蛋白水平，具有調節(jié)脂肪代謝和護肝的藥效[22-23]。

3.2 高頻藥物功效、性味歸經(jīng)分析

高頻藥物功效分類排名前4 的分別是補虛藥、利水滲濕藥、活血化瘀藥和清熱藥，提示治法是以補虛、化濕、活血、清熱為主，推斷出其病機以虛為本，與濕、瘀、熱等病理因素相關。補虛藥使用次數(shù)最多，且以補氣藥為主，體現(xiàn)治療關鍵在于補益，尤重補氣。補氣藥中以白術、甘草、黃芪、絞股藍、人參等益氣健脾藥為主，可見益氣健脾為主要治法之一。從性味歸經(jīng)來看，藥性以溫、微寒、寒為主，藥味以甘、苦、辛為主，主歸肝、脾經(jīng)，胃、肺經(jīng)次之。故可推導出NAFLD 病機與五臟相關，肝脾尤甚，治療時應注重寒溫并用、辛開苦降、肝脾同調。

3.3 組合頻次及關聯(lián)規(guī)則分析

在出現(xiàn)頻率均＞20%的藥對中，“丹參-澤瀉”藥對清熱利濕、活血降脂，二者配伍治療NAFLD 可能與調節(jié)過氧化物酶體增殖物激活受體α 的基因表達和促進脂肪代謝有關[24]。“丹參-山楂”藥對活血化瘀、消積降脂，丹參活性成分丹參酚酸B 和山楂活性成分山楂黃酮聯(lián)合使用可以降低游離脂肪酸含量，抑制c-Jun 氨基端蛋白激酶的活化，延緩肝細胞的凋亡[25]?！皾蔀a-山楂”藥對利水滲濕、散瘀消積、化濁降脂，配伍使用在抗脂肪肝方面具有交互作用[26]?！暗?白術”藥對健脾利濕、活血化瘀，一“虛”一“瘀”，標本同治。在關聯(lián)規(guī)則中，“山楂，白術→丹參”“澤瀉，山楂，白術→丹參”“丹參，山楂，白術→澤瀉”和“山楂，白術→澤瀉”的置信度最高?？梢姖蔀a、山楂、白術和丹參這4 味藥在治療NAFLD 中聯(lián)系緊密，其兼具益氣健脾、清熱利濕、活血化瘀和化濁降脂之功，標本兼治，既可益氣健脾以治其本，又可消除濕熱濁瘀之標。

3.4 藥物聚類分析

聚類分析將93 首方分為3 類組合，第一類以大黃、茵陳、黃連、丹參和柴胡為基礎：此類內蘊茵陳蒿湯之意，茵陳清利濕熱、利膽退黃，黃連清熱燥濕、瀉火解毒，大黃通腑瀉熱，三藥同用，使?jié)駸嶂皬拇蟊愣?，丹參養(yǎng)血活血，柴胡疏肝清熱，引諸藥入肝，共奏清熱利濕、養(yǎng)血疏肝之功，主治濕熱蘊結證。第二類以丹參、姜黃、虎杖、甘草和荷葉為基礎：姜黃破血行氣，丹參活血化瘀，虎杖化痰散瘀，三者配伍氣血兼治、痰瘀同調，荷葉升清降濁，甘草緩和諸藥，適用于痰瘀互結證。第三類以丹參、澤瀉、山楂、茯苓和白術為基礎：此類為當歸芍藥散化裁，白術、茯苓健脾利水，澤瀉利水滲濕，三者同用益氣健脾以助后天之本，利水滲濕以防水濕困脾，“一味丹參散，功同四物湯”示丹參養(yǎng)血活血，山楂化瘀行氣以助丹參，使肝血得養(yǎng)，肝氣調達，可用于肝郁脾虛證。

4 小結

本研究通過對專利數(shù)據(jù)庫治療NAFLD 的專利復方進行數(shù)據(jù)挖掘，發(fā)現(xiàn)其病機以脾虛為本、濕熱濁瘀為標，治療上以益氣健脾為主，配以疏肝行氣、清熱活血、利濕化濁等方法，相關藥物與類方組合可為NAFLD 的新藥研發(fā)和臨床用藥提供參考。