• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    Siglec-15抗體在非小細(xì)胞肺癌中的調(diào)控機(jī)制研究

    2023-03-13 07:19:38李延康賀鋼楓
    關(guān)鍵詞:免疫治療受體通路

    李延康賀鋼楓

    (包頭市中心醫(yī)院(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)包頭臨床醫(yī)學(xué)院)心胸外科,內(nèi)蒙古 包頭 014000)

    2020年全球統(tǒng)計(jì)新發(fā)肺癌患者近220萬(wàn)例,死亡人數(shù)占比達(dá)18%。肺癌被認(rèn)為是危害人類健康的主要惡性腫瘤之一[1]。手術(shù)行肺段、肺葉乃至全肺切除是IA期至IIIA期可耐受手術(shù)患者的第一選擇。而針對(duì)無(wú)法耐受手術(shù)的患者或臨床分期在IIIB期至IV期的患者,如果同時(shí)具備表皮因子生長(zhǎng)受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)、細(xì)胞間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)換因子(cellular-mesenchymal epithelial transition factor, c-Met)或Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog, KRAS)等基因位點(diǎn)的陽(yáng)性突變,可以根據(jù)突變結(jié)果選擇針對(duì)性靶向治療藥物[2-3]。但靶向治療藥物的獲益群體僅限于非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)驅(qū)動(dòng)基因突變且有對(duì)應(yīng)藥 物的患者,對(duì)于沒有驅(qū)動(dòng)基因獲益的NSCLC患者群體和小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)患者群體而言,免疫檢查點(diǎn)抑制劑(immune checkpoint inhibitors, ICIs)是除去傳統(tǒng)放療、化療治療外,又一可選治療策略(圖1)。腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment, TME)中的程序性死亡受體-1(programmed cell death 1, PD-1)和程序性死亡受體-配體1(programmed cell death-ligand 1, PD-L1)分子過度表達(dá)是部分實(shí)體腫瘤患者的主要免疫逃逸機(jī)制,抗體阻斷PD-1/PD-L1的相互作用可以使受損的免疫功能恢復(fù)正常,且不會(huì)產(chǎn)生其他過多的副作用。部分PD-1/PD-L1已經(jīng)獲批用于NSCLC和SCLC的一線使用[4-6],是目前ICIs治療NSCLC的主要策略。但需要引起注意的是,多中心、多樣本的統(tǒng)計(jì)回顧表明,PD-1/PD-L1在NSCLC中的獲益占比僅約為20%[7]。針對(duì)PD-1/PD-L1無(wú)應(yīng)答或已產(chǎn)生耐藥性的現(xiàn)狀,后續(xù)抗腫瘤治療策略如何選擇陷入困境之中,目前已有眾多相關(guān)試驗(yàn)開展,以尋求抗腫瘤治療新方向。本文將就唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素 -15(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin, Siglec-15)以及其相關(guān)抗體在小鼠與人源NSCLC中的調(diào)控機(jī)制和臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展作一綜述。

    1 Siglec-15的生物學(xué)特征

    Siglec家族是一類免疫球蛋白樣凝集素,其成員多含有免疫受體酪氨酸抑制基序(immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif,ITIM),通過識(shí)別含有唾液酸(sialic acid, SA)的糖鏈結(jié)構(gòu),介導(dǎo)抑制性受體信號(hào),并在人類癌細(xì)胞和腫瘤浸潤(rùn)髓系細(xì)胞中廣泛表達(dá),在免疫調(diào)節(jié)動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要作用。Siglec家族總體分為兩類,一類是序列可變的,如Siglec-7、Siglec-9;另一類是序列不可變的,如Siglec-15[8]。Siglec家族作為I型跨膜蛋白,其胞外由兩種免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域組成,分別為數(shù)個(gè)2型免疫球蛋白恒定區(qū)(immunoglobulin cinstant 2, IgC2)和1個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)(immunoglobulin variable, IgV),其間由跨膜結(jié)構(gòu)域連接[9]。Siglec-15作為Siglecs家族的成員是非常獨(dú)特的,僅包含1個(gè)IgC2和1個(gè)IgV;而且其胞質(zhì)內(nèi)并沒有ITIM,在免疫細(xì)胞及組織中普遍缺失,僅選擇性在髓系細(xì)胞和破骨細(xì)胞中表達(dá)[10]。研究指出,當(dāng)Siglec-15發(fā)揮免疫作用時(shí),其跨膜區(qū)賴氨酸274位點(diǎn)可以與DNAX激活蛋白-12(DNAX activation protein-12, DAP-12)結(jié)合;而DAP-12自身?yè)碛幸粋€(gè)ITIM,可以募集酪氨酸激酶并使其磷酸化,進(jìn)而向下游傳遞信號(hào)[11]。研究表明,Siglec-15的IgV結(jié)構(gòu)域中含保守的精氨酸(R143)基序,在與SA結(jié)合的過程中起到關(guān)鍵性作用[12],其可以作為巨噬細(xì)胞受體,識(shí)別在腫瘤中廣泛表達(dá)的SATn抗原。而SA作為一種人體上表達(dá)的糖類,可以用來(lái)區(qū)分自體和非自體,同時(shí)介導(dǎo)細(xì)胞與病原體之間的相互作用[13]。另有研究表示,一些病原體包括惡性腫瘤細(xì)胞,可以通過抑制Siglec家族來(lái)抑制自體免疫反應(yīng),延長(zhǎng)自身的存活周期[14]。

    2 Siglec-15參與免疫調(diào)節(jié)

    Siglec家族成員作為抑制性受體在多種淋巴和髓系來(lái)源的免疫細(xì)胞上表達(dá),通過在抗原呈遞細(xì)胞上的相關(guān)實(shí)驗(yàn)證明,Siglec-15的表達(dá)抑制了小鼠T細(xì)胞的增殖,同時(shí)削弱了細(xì)胞因子的分泌以及殺傷力[15],而這些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,Siglec-15可能通過某種機(jī)制尚不完全明確的受體,達(dá)到抑制小鼠T細(xì)胞,進(jìn)而可能影響人類的T細(xì)胞的工作(圖1)。由此進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠模型,驗(yàn)證Siglec-15對(duì)T細(xì)胞的體內(nèi)作用。與對(duì)照組相比,Siglec-15基因敲除(knock out, KO)小鼠和注射Siglec-15胞外區(qū)融合蛋白的小鼠中,EAE程度加重明顯,T細(xì)胞反映顯著增強(qiáng)。在另一方面,與PD-L1 KO小鼠表達(dá)類似的是:Siglec-15 KO小鼠在雞卵白蛋白多肽刺激下,在血液中表現(xiàn)出比野生型(wild type, WT)小鼠更多的I型T特異性識(shí)別雞卵白蛋白(ovalbumin T-I, OT-I)細(xì)胞增殖。探究其作用機(jī)制,白介素-10(interleukin-10, IL-10)在其中可能起到關(guān)鍵的作用,因?yàn)镾iglec15 KO小鼠的血清IL-10水平低于WT小鼠,而IL-10單抗消除了WT小鼠和Siglec-15 KO小鼠在OT-I型T細(xì)胞增殖方面的差異[16](圖1)。分析細(xì)胞增殖以及利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)可證實(shí)Siglec-15通過調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制T細(xì)胞作用[17]。另有研究指出,Siglec-15的抗體可由核因子κB受體活化因子配體和巨噬細(xì)胞集落刺激因子共同誘導(dǎo)的多核破骨細(xì)胞生成[18]。因腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)中的TNF-α和TNF-β可由多種上皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、干細(xì)胞釋放,有理由推測(cè)Siglec-15上調(diào)巨噬細(xì)胞表達(dá)可能是自然免疫以及獲得性免疫的負(fù)反饋調(diào)節(jié)途徑。值得一提的是,一些病原體,例如乙型鏈球菌,甚至已經(jīng)衍生出相關(guān)的蛋白質(zhì),與髓系細(xì)胞上的抑制性Siglec家族成員結(jié)合,從而逃避免疫介導(dǎo)的殺傷[19]。

    3 Siglec-15參與腫瘤相關(guān)表達(dá)

    不可手術(shù)的NSCLC的治療策略一直是困擾臨床醫(yī)生抉擇的難題。不同病理類型的NSCLC、不同患者的自身個(gè)體差異等諸多因素,使得腫瘤治療策略的個(gè)體化制定尤為重要。盡管PD-1/PD-L1為主要代表的免疫治療在全世界范圍內(nèi)取得了優(yōu)良的治療效果,但并不是所有患者都具備PD-1/PD-L1陽(yáng)性獲益,而且免疫治療后期的耐藥現(xiàn)象也不可避免[20]。在一項(xiàng)入組291例患者的胰腺導(dǎo)管腺癌的隊(duì)列研究中表明,Siglec-15和PD-L1的單獨(dú)陽(yáng)性表達(dá)率分別為18.6%和30.3%,Siglec15和PD-L1共同陽(yáng)性表達(dá)率為6.1%,而PD-L1陰性表達(dá)同時(shí)Siglec-15陽(yáng)性表達(dá)率則為18%[21]。Siglec-15作為近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的腫瘤免疫逃逸途徑,有研究指出,PD-L1的主要誘導(dǎo)劑干擾素-γ(interferon-γ, IFNγ)顯著抑制了巨噬細(xì)胞中Siglec-15的表達(dá),使得Siglec-15與PD-L1的表達(dá)互斥[22](圖1)。換而言之,Siglec-15會(huì)出現(xiàn)與PD-L1互補(bǔ)的表達(dá)譜,使其可能成為解決免疫抑制的新靶點(diǎn)。與各自正常組織相比,Siglec-15mRNA在肺癌、結(jié)腸癌以及腎癌等多種腫瘤中表達(dá)顯著上調(diào),通過定量免疫熒光對(duì)200余例NSCLC標(biāo)本進(jìn)行免疫組化分析的進(jìn)一步細(xì)化研究表明,共有25.7%的樣本表達(dá)Siglec-15蛋白[15]。而一項(xiàng)多中心的針對(duì)超過600余例NSCLC標(biāo)本的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn),與KRAS突變相比,EGFR突變的腫瘤中Siglec-15表達(dá)更高,且與其它病理學(xué)特征無(wú)關(guān)[23]。具體到NSCLC中不同的病理分型而言,腺癌中的Siglec-15表達(dá)量顯著高于鱗癌,而鱗癌中的PD-L1表達(dá)量卻又高于腺癌[24]。不同病理類型腫瘤中TME的免疫逃逸機(jī)制高度不同,其中TME由腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞(tumor-infiltrating lymphocytes, TILs)等組成。而TILs含有不同的細(xì)胞亞群,并在TME中發(fā)揮不同的作用,擁有正向免疫調(diào)節(jié)的細(xì)胞中則包含樹突細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell, NK)和CD8+T細(xì)胞(cluster of differentiation 8 positive cell, CD8+T)等。這類細(xì)胞可以識(shí)別腫瘤細(xì)胞,并達(dá)到殺傷和清理的目的。Hao等[24]實(shí)驗(yàn)證明了Siglec-15在肺腺癌的表達(dá)與TILs中CD8+T細(xì)胞的密度呈正相關(guān),但值得注意的是,Siglec-15表達(dá)含量多寡并不能用來(lái)判斷NSCLC預(yù)后,與TME中的TILs關(guān)系也尚不完全明了(圖1)。與人患腫瘤相對(duì)的是,常見的小鼠肺癌、結(jié)腸癌和黑色素瘤的模型中,均未檢測(cè)到Siglec-15 mRNA的表達(dá)。但在含有豐富的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophage, TAM)浸潤(rùn)的B16-粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(B16-granulocyte macrophagecolony stimulating factor, B16-GMCSF)模型(PD-1不敏感)中,可以檢測(cè)到Siglec-15mRNA的表達(dá)[25]。Siglec-15 KO小鼠在移植了B16-GMCSF后,利用質(zhì)譜流式細(xì)胞儀分析提示TILs中CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞和部分髓系細(xì)胞顯著增加,而TAM減少;對(duì)比WT小鼠,KO小鼠的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度減緩,其生存時(shí)間延長(zhǎng)。上述相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,巨噬細(xì)胞以及Siglec-15在腫瘤免疫中具有重要的抑制作用。雖然在功能上與PD-1/PDL1相似,但Siglec-15介導(dǎo)的免疫抑制機(jī)制卻是與PD-1/PD-L1途徑不同,這兩條途徑代表了各自獨(dú)立的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制,因此,阻斷Siglec-15通路可以為PD-1/PD-L1途徑失敗的患者提供一個(gè)新的免疫治療方向。

    圖1 Siglec-15對(duì)非小細(xì)胞肺癌的調(diào)控作用Figure 1 Regulatory effect of Siglec-15 in non-small cell lung cancer

    4 Siglec-15作為免疫抑制分子的意義

    Siglec-15通路的發(fā)現(xiàn)在部分程度上解釋了現(xiàn)階段免疫治療的困境:為什么PD-1/PD-L1治療只對(duì)約20%NSCLC患者有效。這些研究從側(cè)面證實(shí)PD-1/PD-L1是腫瘤免疫逃逸機(jī)制之一,而并非唯一通路。對(duì)于PD-1/PD-L1治療失敗或無(wú)應(yīng)答的患者而言,抗Siglec-15可以作為一個(gè)新的治療靶點(diǎn):作為單藥應(yīng)用在臨床抗實(shí)體腫瘤當(dāng)中,亦或是尋求與PD-1/PD-L1聯(lián)合使用,尋求雙單抗聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)。Siglec-15在體內(nèi)的高表達(dá)提示在部分患者的TME中,Siglec-15免疫抑制通路發(fā)揮主要作用[16]。因?yàn)槠渑cPD-1/PD-L1天然的表達(dá)互斥,意味著此時(shí)PD-1/PD-L1通路并不是免疫抑制的主要因素,進(jìn)而可以用Siglec-15的表達(dá)作為生物標(biāo)記物,來(lái)預(yù)估PD-1/PD-L1的治療效果。繼PD-1/PD-L1信號(hào)通路獲得成功之后,針對(duì)Siglec-15通路的發(fā)現(xiàn)及目前臨床應(yīng)用反饋而言,腫瘤免疫逃逸的潛在機(jī)制值得更深入的研究。利用免疫組化定量分析為進(jìn)一步研究TME提供工具基礎(chǔ),積極尋找TME免疫調(diào)控的新方向,用以指導(dǎo)NSCLC的精準(zhǔn)免疫治療。

    5 Siglec-15抗體治療NSCLC的探索

    基于對(duì)Siglec-15的通路特征和表達(dá)模式的臨床前研究,一款靶向Siglec-15的單克隆抗體NC318被投入到I/II期臨床試驗(yàn)(NCT03665285)當(dāng)中。NC318通過B淋巴骨髓細(xì)胞雜交瘤制備,可以與人/鼠的Siglec-15特異性結(jié)合。此單抗可以在體外環(huán)境下與Siglec-15結(jié)合并破壞TAM介導(dǎo)的活動(dòng),例如促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移、抑制T細(xì)胞作用以及刺激腫瘤血管生成,進(jìn)而直接影響疾病的進(jìn)展[26]。對(duì)于人實(shí)體腫瘤而言,它可以阻斷Siglec-15信號(hào)通路,使免疫環(huán)境正常化,恢復(fù)免疫系統(tǒng)對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞的殺傷能力[26]。在非隨機(jī)、開放標(biāo)簽、多中心的I/II期臨床試驗(yàn)中,主要以NSCLC、乳腺癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌以及黑色素瘤患者為入組對(duì)象,而針對(duì)于PD-1耐藥的NSCLC患者群體,則單獨(dú)分組治療觀察。根據(jù)公布的前期給藥方式及劑量顯示[27],NC318采用靜脈注射的方式應(yīng)用給所有入組的晚期實(shí)體腫瘤的患者,劑量為8~1600 mg,每周2次(quaque 2 weekly, q2w)。值得注意的是,所有入組患者均未檢測(cè)體內(nèi)PD-1或Siglec-15的表達(dá)水平,而所有入組的NSCLC患者均曾接受過PD-1/PD-L1的單藥或聯(lián)合治療。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示在NSCLC患者群體中應(yīng)用NC318后,有1例患者完全緩解,1例患者部分緩解、3例患者疾病穩(wěn)定、7例對(duì)PD-1/PD-L1治療無(wú)效的受試者中,有5例觀察到單藥的抗腫瘤活性;統(tǒng)計(jì)分析其客觀緩解率(objective response rate, ORR)為29%,疾病控制率為71%。在藥物毒副作用方面,NC318在多種劑量水平中表現(xiàn)出了良好的耐受性,沒有涉及劑量限制性毒性的相關(guān)問題。常見的治療不良事件包括了腹瀉、淀粉酶升高、脂肪酶升高和瘙癢等;而免疫相關(guān)不良事件包括了葡萄膜炎、肺炎和白癜風(fēng)等。在第2階段臨床試驗(yàn)中,調(diào)整NC318的應(yīng)用劑量為400 mg,q2w。2021年8月,對(duì)NC318 II期臨床試驗(yàn)做出調(diào)整,更改治療方案為800 mg,q1w。目前臨床患者招募仍在進(jìn)行中,更多的相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果有待進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析。

    2022年,美國(guó)癌癥研究協(xié)會(huì)年會(huì)上報(bào)告了有關(guān)Siglec-15抗體的最新研究,表明另一款Siglec-15的單克隆抗體BSI-060T在體外及小鼠實(shí)驗(yàn)中獲得了良好的數(shù)據(jù),作為一款全人源的單克隆抗體,BSI-060T與NC-318相比其在親和力、生物活性和半衰期方面具有良好的數(shù)據(jù)回報(bào)[27]。臨床前研究指出,BSI-060T與Siglec-15結(jié)合,在體外阻斷了Siglec-15與其受體之間的相互作用;在體外T細(xì)胞反應(yīng)測(cè)定中,BSI-060T可減輕Siglec-15介導(dǎo)的CD8+T細(xì)胞的增殖抑制和IFNγ的釋放;在人源化Siglec-15小鼠腫瘤模型中,BSI-060T表現(xiàn)出對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的顯著抑制作用且耐受性良好;在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的研究中,BSI-060T展現(xiàn)出良好的藥代動(dòng)力學(xué)[27]。目前BSI-060T正在申請(qǐng)開始I期臨床試驗(yàn),更多的相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果仍需進(jìn)一步回報(bào)。期待Siglec-15抗體在NSCLC治療中獲得突破性進(jìn)展。

    6 Siglec-15抗體治療NSCLC的展望

    確定哪些患者可以從Siglec-15單抗的治療中獲益最大,是目前臨床相關(guān)研究中爭(zhēng)論最多的一環(huán)。結(jié)合沒有采用任何生物標(biāo)志物檢測(cè)的NC318 I期臨床試驗(yàn)結(jié)果分析,在全部入組的實(shí)體瘤患者當(dāng)中,NSCLC的治療效果最為明顯[28],而具體的反應(yīng)機(jī)制尚未明確,初步分析可能與腫瘤內(nèi)部Siglec-15表達(dá)水平有關(guān)。在對(duì)NSCLC的Siglec-15檢測(cè)表明,有25%的樣本呈現(xiàn)Siglec-15陽(yáng)性表達(dá)[15],而這一數(shù)據(jù)又與NC318在NSCLC中的ORR相近,結(jié)合Siglec-15與PD-1/PD-L1相反的表達(dá)模式特性,確定哪些生物標(biāo)志物可以指導(dǎo)患者的治療選擇,以及預(yù)測(cè)Siglec-15單抗的療效,仍需更多的臨床數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析。Siglec-15作為具有與PD-1/PD-L1不同表達(dá)及功能的新一代腫瘤相關(guān)免疫抑制因子,可能在未來(lái)為NSCLC免疫治療提供新的選擇方向。進(jìn)一步深入研究Siglec-15抗體的作用機(jī)制,探討可能的治療策略,將有助于設(shè)計(jì)雙特異性抗體以及探索聯(lián)合治療方案,提高腫瘤患者的自身免疫力,完善對(duì)PD-1/PD-L1治療不敏感的腫瘤免疫治療。

    猜你喜歡
    免疫治療受體通路
    腫瘤免疫治療發(fā)現(xiàn)新潛在靶點(diǎn)
    Toll樣受體在胎膜早破新生兒宮內(nèi)感染中的臨床意義
    腎癌生物免疫治療進(jìn)展
    2,2’,4,4’-四溴聯(lián)苯醚對(duì)視黃醛受體和雌激素受體的影響
    Kisspeptin/GPR54信號(hào)通路促使性早熟形成的作用觀察
    proBDNF-p75NTR通路抑制C6細(xì)胞增殖
    通路快建林翰:對(duì)重模式應(yīng)有再認(rèn)識(shí)
    Hippo/YAP和Wnt/β-catenin通路的對(duì)話
    遺傳(2014年2期)2014-02-28 20:58:11
    Toll樣受體:免疫治療的新進(jìn)展
    淋巴細(xì)胞免疫治療在反復(fù)種植失敗和復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)中的作用
    久久久久国产网址| 狠狠精品人妻久久久久久综合| av女优亚洲男人天堂| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 熟女人妻精品中文字幕| 三级毛片av免费| 色视频www国产| 一级av片app| 久久久久久久久中文| 欧美三级亚洲精品| 日韩大片免费观看网站| 禁无遮挡网站| 亚洲在线自拍视频| 免费av不卡在线播放| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲av成人av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 中文字幕制服av| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产黄色免费在线视频| 偷拍熟女少妇极品色| 免费在线观看成人毛片| 日韩成人伦理影院| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久久精品欧美日韩精品| 国产美女午夜福利| 97超碰精品成人国产| 午夜福利高清视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲欧美一区二区三区国产| 18+在线观看网站| 国产成人精品久久久久久| 国产av在哪里看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚州av有码| 国产精品一及| 久久人人爽人人爽人人片va| 最近视频中文字幕2019在线8| 嫩草影院新地址| 日韩欧美精品免费久久| 国产精品一区www在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产乱人偷精品视频| 午夜视频国产福利| 国产在线男女| 国产一区二区三区综合在线观看 | 黄色配什么色好看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 成人特级av手机在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 国产成人精品一,二区| 国产av码专区亚洲av| 久久久久久伊人网av| 精品久久久久久久末码| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国精品久久久久久国模美| 国产精品伦人一区二区| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 最近中文字幕高清免费大全6| 成人二区视频| 伦理电影大哥的女人| 最新中文字幕久久久久| 亚洲综合精品二区| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 嫩草影院新地址| 一级av片app| 亚洲,欧美,日韩| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久久久精品94久久精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 成年女人在线观看亚洲视频 | 少妇的逼好多水| 亚洲精品日本国产第一区| 一级毛片aaaaaa免费看小| 精品一区二区三区人妻视频| 一级毛片电影观看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲av二区三区四区| 日韩伦理黄色片| 久久韩国三级中文字幕| 午夜久久久久精精品| 亚洲成人av在线免费| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品久久视频播放| 丝袜喷水一区| 久久热精品热| av一本久久久久| 国产麻豆成人av免费视频| 99久久精品一区二区三区| 亚洲精品亚洲一区二区| 欧美性感艳星| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美bdsm另类| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久草成人影院| 久久久久久久久久成人| 亚洲怡红院男人天堂| 国产精品久久视频播放| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲av国产av综合av卡| 色播亚洲综合网| 内地一区二区视频在线| 伊人久久精品亚洲午夜| 午夜福利高清视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 毛片女人毛片| 在线免费十八禁| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 日韩一本色道免费dvd| 亚洲乱码一区二区免费版| 日韩欧美三级三区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 少妇熟女aⅴ在线视频| 两个人的视频大全免费| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲av免费在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久久久久久久久久丰满| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲av男天堂| 午夜激情福利司机影院| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 禁无遮挡网站| 中文字幕久久专区| 日日啪夜夜撸| 亚洲国产最新在线播放| 青春草视频在线免费观看| 男女边摸边吃奶| av在线天堂中文字幕| 成人二区视频| 欧美xxⅹ黑人| 国产黄色小视频在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 国产有黄有色有爽视频| 综合色av麻豆| 亚洲国产成人一精品久久久| 国内精品美女久久久久久| 久久久久久久午夜电影| 日本三级黄在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产男人的电影天堂91| 青春草国产在线视频| 日本熟妇午夜| 日韩大片免费观看网站| 一区二区三区乱码不卡18| 好男人视频免费观看在线| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| av在线蜜桃| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 免费看av在线观看网站| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 亚洲自拍偷在线| 国产av不卡久久| 一级毛片我不卡| 18禁动态无遮挡网站| 日韩成人伦理影院| 午夜福利在线在线| 高清av免费在线| 97热精品久久久久久| 日韩一区二区三区影片| 成人午夜精彩视频在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品一及| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 午夜激情欧美在线| 丝袜喷水一区| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 五月伊人婷婷丁香| 观看美女的网站| 水蜜桃什么品种好| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 成年人午夜在线观看视频 | 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品久久久久久精品电影| 男女视频在线观看网站免费| 欧美高清性xxxxhd video| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产男女超爽视频在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久久久精品性色| 精品一区二区三卡| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲怡红院男人天堂| 国产综合精华液| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产一区有黄有色的免费视频 | 精品不卡国产一区二区三区| av播播在线观看一区| 亚洲av福利一区| 一级片'在线观看视频| 色播亚洲综合网| 一区二区三区免费毛片| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲在久久综合| 日韩欧美精品v在线| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | xxx大片免费视频| 五月天丁香电影| 精品国内亚洲2022精品成人| 老司机影院毛片| 中文欧美无线码| 亚洲国产欧美人成| 婷婷色综合www| 丝袜喷水一区| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲国产精品专区欧美| 91精品伊人久久大香线蕉| 99热这里只有是精品在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 两个人的视频大全免费| 国产成人精品婷婷| 丰满少妇做爰视频| 国产色婷婷99| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 成人午夜高清在线视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品酒店卫生间| 婷婷色综合大香蕉| av国产免费在线观看| 99久国产av精品| 看黄色毛片网站| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 午夜福利在线在线| 亚洲成人av在线免费| 亚洲国产欧美在线一区| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲av中文av极速乱| 久久综合国产亚洲精品| 欧美3d第一页| 免费大片黄手机在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| a级毛片免费高清观看在线播放| 在线 av 中文字幕| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲av日韩在线播放| 2018国产大陆天天弄谢| 一本一本综合久久| 国产成人a区在线观看| 我的老师免费观看完整版| 久久久国产一区二区| 毛片女人毛片| 欧美97在线视频| 永久免费av网站大全| 国产精品三级大全| 久久精品国产亚洲网站| 尾随美女入室| 日韩欧美精品v在线| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲不卡免费看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲美女视频黄频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 成人综合一区亚洲| 日韩人妻高清精品专区| 丰满乱子伦码专区| 国产亚洲一区二区精品| 高清视频免费观看一区二区 | 高清欧美精品videossex| 免费少妇av软件| 国产永久视频网站| 久久久久久久国产电影| 久久久久久久久久人人人人人人| 丰满人妻一区二区三区视频av| 在现免费观看毛片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产极品天堂在线| 青青草视频在线视频观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 十八禁网站网址无遮挡 | 美女xxoo啪啪120秒动态图| 韩国高清视频一区二区三区| av在线亚洲专区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美zozozo另类| 欧美高清性xxxxhd video| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲av福利一区| 97精品久久久久久久久久精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 美女大奶头视频| 两个人视频免费观看高清| 内地一区二区视频在线| 最近中文字幕2019免费版| 五月玫瑰六月丁香| 午夜激情欧美在线| 十八禁网站网址无遮挡 | 毛片一级片免费看久久久久| 直男gayav资源| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 成人av在线播放网站| 国产午夜精品一二区理论片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 精品熟女少妇av免费看| 少妇的逼好多水| 三级国产精品片| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日本wwww免费看| 在现免费观看毛片| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久精品国产自在天天线| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| or卡值多少钱| 精品久久久久久成人av| 老司机影院毛片| 国产男人的电影天堂91| 国产视频内射| 人人妻人人看人人澡| 老司机影院毛片| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 一级黄片播放器| 乱码一卡2卡4卡精品| 内射极品少妇av片p| 久久精品人妻少妇| 丰满人妻一区二区三区视频av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 简卡轻食公司| 99热这里只有精品一区| 午夜视频国产福利| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 午夜日本视频在线| 亚洲怡红院男人天堂| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲精品国产av成人精品| 免费看日本二区| 免费观看精品视频网站| 九草在线视频观看| 在线观看av片永久免费下载| 99久久精品热视频| av在线天堂中文字幕| 欧美日韩亚洲高清精品| 成人亚洲精品一区在线观看 | 69人妻影院| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产av码专区亚洲av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲美女视频黄频| 久久久久网色| 欧美日本视频| 亚洲美女视频黄频| 亚洲四区av| 午夜视频国产福利| eeuss影院久久| 毛片女人毛片| 赤兔流量卡办理| 亚洲成人中文字幕在线播放| 一级毛片我不卡| 久久这里有精品视频免费| 亚洲精品,欧美精品| 成人午夜高清在线视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 人妻少妇偷人精品九色| 免费看不卡的av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久久色成人| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲av.av天堂| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲最大成人中文| 亚洲av免费在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产精品一区二区性色av| or卡值多少钱| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 大话2 男鬼变身卡| 观看美女的网站| 国产高清三级在线| 免费看a级黄色片| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 亚洲高清免费不卡视频| 精品一区二区三卡| 3wmmmm亚洲av在线观看| 成人无遮挡网站| 国产久久久一区二区三区| 不卡视频在线观看欧美| 久久精品人妻少妇| 床上黄色一级片| 日本一二三区视频观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 只有这里有精品99| 国产高清国产精品国产三级 | 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产成人aa在线观看| 夜夜爽夜夜爽视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 日本黄大片高清| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲最大成人av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 久久久久久久国产电影| 特级一级黄色大片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 午夜亚洲福利在线播放| 国产色爽女视频免费观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 色5月婷婷丁香| 夫妻午夜视频| 99久国产av精品| 久久精品人妻少妇| 国产精品久久久久久av不卡| 丝瓜视频免费看黄片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产成人a区在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 免费观看的影片在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲av成人av| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产黄a三级三级三级人| 成人综合一区亚洲| 男女边吃奶边做爰视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 精品久久久久久久久av| 少妇的逼水好多| 成人特级av手机在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 有码 亚洲区| 中文字幕久久专区| 男女国产视频网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 乱人视频在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 两个人视频免费观看高清| 久久久久国产网址| 性插视频无遮挡在线免费观看| 黄色日韩在线| 能在线免费看毛片的网站| 99视频精品全部免费 在线| 最后的刺客免费高清国语| 精品国产露脸久久av麻豆 | 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产成人freesex在线| 亚洲av一区综合| 麻豆成人av视频| 中国国产av一级| 伊人久久精品亚洲午夜| 男女视频在线观看网站免费| 人体艺术视频欧美日本| 在现免费观看毛片| 中文字幕av成人在线电影| 99热6这里只有精品| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 欧美丝袜亚洲另类| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 人妻夜夜爽99麻豆av| 在线免费十八禁| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲精品456在线播放app| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产成人91sexporn| 天堂影院成人在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 色网站视频免费| 天美传媒精品一区二区| 成人毛片a级毛片在线播放| 最近中文字幕高清免费大全6| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 直男gayav资源| 精品久久久久久久久亚洲| 一级黄片播放器| 人妻夜夜爽99麻豆av| 精品久久久精品久久久| www.av在线官网国产| 免费大片18禁| 国产成人精品一,二区| 看非洲黑人一级黄片| 韩国高清视频一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看| 久久久久精品性色| 国产一级毛片七仙女欲春2| 大片免费播放器 马上看| 伦精品一区二区三区| 97在线视频观看| 中文字幕久久专区| 午夜激情久久久久久久| 亚洲在线观看片| 国产 亚洲一区二区三区 | 久热久热在线精品观看| 国产三级在线视频| 韩国av在线不卡| 久久久亚洲精品成人影院| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产精品久久久久久精品电影| 日韩视频在线欧美| 我要看日韩黄色一级片| 国产精品.久久久| 毛片女人毛片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲av电影不卡..在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 18+在线观看网站| 久久韩国三级中文字幕| 一区二区三区高清视频在线| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲在线观看片| 欧美一区二区亚洲| 全区人妻精品视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| av国产免费在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 国产 一区精品| 色尼玛亚洲综合影院| 久久久国产一区二区| 国产午夜精品论理片| 亚洲国产最新在线播放| 在线观看av片永久免费下载| 久热久热在线精品观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久6这里有精品| 国产av码专区亚洲av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 日本一本二区三区精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 免费观看在线日韩| 久久精品久久久久久久性| 亚洲国产精品专区欧美| 97超碰精品成人国产| videossex国产| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲av在线观看美女高潮| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 国产伦精品一区二区三区视频9| 秋霞伦理黄片| 男女视频在线观看网站免费| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美成人午夜免费资源| 成人特级av手机在线观看| h日本视频在线播放| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 成人国产麻豆网| 18+在线观看网站| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 永久免费av网站大全| 特大巨黑吊av在线直播| 国产成人福利小说| h日本视频在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美三级亚洲精品| av女优亚洲男人天堂| 日韩av不卡免费在线播放| 简卡轻食公司| 亚洲av国产av综合av卡| 国产视频内射| 五月伊人婷婷丁香| 欧美高清性xxxxhd video| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| av专区在线播放| 嫩草影院入口| 亚洲精品自拍成人| 天堂影院成人在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 国产久久久一区二区三区| 91久久精品国产一区二区三区| 大香蕉久久网| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久99热这里只有精品18| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲欧美清纯卡通| 国产 一区精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日韩欧美 国产精品| 18禁动态无遮挡网站| av一本久久久久| 免费观看在线日韩| 99热这里只有精品一区| 一级二级三级毛片免费看| 国产免费一级a男人的天堂| 欧美成人午夜免费资源| 欧美一区二区亚洲| 成人毛片a级毛片在线播放| 天堂影院成人在线观看| 久久精品久久精品一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 免费高清在线观看视频在线观看| 夜夜爽夜夜爽视频| 午夜福利在线观看吧| 亚洲精品日韩av片在线观看| 成人欧美大片| 国产在视频线精品| 日韩中字成人| 中国美白少妇内射xxxbb|