APN、OX-LDL 和TBIL 水平與冠心病患者發(fā)生冠狀動脈病變的關(guān)系研究

寇 天，郝振偉，陳 曦

（佳木斯市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科1，神經(jīng)內(nèi)科2，黑龍江 佳木斯 154002）

冠心?。╟oronary heart disease）具有較高的發(fā)病率和致殘率[1]。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計[2]，該病發(fā)病率可達（293～594）/1 萬人左右[2]。冠心病的發(fā)生會增加惡性心血管不良結(jié)局風(fēng)險，甚至出現(xiàn)多器官功能衰竭，嚴重威脅患者的健康安全。研究顯示[3]，冠心病病情進展與氧化應(yīng)激損傷相關(guān)，可通過影響氧化應(yīng)激性損傷，加劇冠狀動脈血管內(nèi)皮細胞的凋亡，進而促進冠心病病情的進展。脂聯(lián)素（APN）是脂肪細胞相關(guān)因子，其表達濃度的上升能夠保護血管內(nèi)皮細胞，抑制血管內(nèi)皮細胞的凋亡，降低血管平滑肌細胞的痙攣程度[4]。氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）的表達上升能夠通過誘導(dǎo)脂質(zhì)的沉積，促進泡沫細胞對于血管內(nèi)皮細胞的損傷，進而促進粥樣斑塊的形成[5]?？偰懠t素（TBIL）是衰老紅細胞釋放的相關(guān)因子，近年來相關(guān)研究認為TBIL 能夠保護心血管，降低氧化應(yīng)激反應(yīng)的激活程度[6]。為了揭示APN、OX-LDL 和TBIL 的表達與冠心病的病情關(guān)系，從而為臨床上冠心病患者的病情評估提供參考，本次研究選取2017 年2 月-2018 年2 月在我院接受治療的冠心病患者為研究對象，探討APN、OX-LDL 和TBIL 的表達及其與冠心病患者的病情關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年2 月-2018 年2 月在佳木斯市中醫(yī)醫(yī)院接受治療的60 例冠心病患者為研究對象，定義為冠心病組，同時選取同期在我院接受體檢的60 例健康成年人作為對照組。冠心病組男32 例，女28 例；年齡52～78 歲，平均年齡（64.35±2.98）歲；對照組男30 例，女30 例；年齡55～76 歲，平均年齡（64.32±3.14）歲。根據(jù)冠狀動脈病變支數(shù)，冠心病組患者又分為單支血管病變患者40 例，雙支及以上血管病變患者20 例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會通過，且患者均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均為成年患者；②均經(jīng)心臟超聲或冠脈造影確診為冠心病者[7]；③無其他系統(tǒng)嚴重疾病者[8]；④對照組均未體檢健康成年者，無嚴重基礎(chǔ)疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全者；②合并肥胖癥等影響血脂的原發(fā)性疾病者。

1.3 方法 患者入院后采集晨起空腹靜脈血6 ml，分為2 個試管，第1 個試管，以1000 r/min 轉(zhuǎn)速離心5 min，離心半徑10 cm。離心后取上清液，采用CA-1600 全自動生化分析儀（北京生物科技有效公司）及配套試劑盒均由南京碧云天生物檢測公司提供，檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平。HDL-C 和TC、TG 測定采用酶法，LDL-C 測定采用清除法，TBIL 采用重氮鹽法檢測，APN、OX-LDL 采用酶聯(lián)免疫吸附法。應(yīng)用科華ST-360 酶標(biāo)儀（Abbott Laboratories 公司提供）進行檢測。具體方法：取第2 個試管靜脈血3 ml，加入APN、OX-LDL 單抗，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的APN、OX-LDL 會與單抗結(jié)合，PBS 液體洗滌5 min。按照1∶500 的比例加入羊標(biāo)志的一抗5 ml，4 ℃放置過夜，PBS 緩沖液洗滌3 次，5 min/次，加入鼠來源的二抗（1∶1000）2 ml，室溫放置2 h，PBS液體洗滌5 min。加入顯色底物，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃，在每孔中迅速加入100 μl 終止液，終止反應(yīng)，在反應(yīng)終止的10 min 內(nèi)，用450 nm 檢測波長讀值。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組血脂指標(biāo)（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、APN、OX-LDL 和TBIL 水平，以及不同冠狀動脈病變支數(shù)和不同狹窄程度患者患者以上各指標(biāo)水平，并分析APN、OX-LDL 和TBIL 水平與冠心病患者血脂指標(biāo)的相關(guān)性。根據(jù)動脈造影計算Gensini積分分為輕度狹窄：≤50%；中度狹窄：51%～75%；重度狹窄：76%～90%；極重度狹窄：91%～100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用統(tǒng)計軟件包SPSS 21.0 進行處理，用（）表示符合正態(tài)分布的計量資料，組間比較分析采用t檢驗；計數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平與血脂水平的相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析，P＜0.05 說明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病組和對照組血脂、APN、OX-LDL 和TBIL水平的比較 冠心病組TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于對照組，HDL-C、APN、TBIL 水平低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 冠心病組和對照組APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（n=60，）

表1 冠心病組和對照組APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（n=60，）

2.2 不同冠狀動脈病變支數(shù)患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較 雙支及以上病變患者APN 和TBIL 水平低于單支病變患者，OX-LDL 水平高于單支病變患者（P＜0.05），見表2。

表2 不同冠狀動脈病變支數(shù)患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

表2 不同冠狀動脈病變支數(shù)患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

2.3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較 雙支及以上病變患者APN 和TBIL 水平低于單支病變患者，OX-LDL 水平高于單支病變患者（P＜0.05）；91%～100%患者APN 和TBIL 水平均低于≤50%患者、51%～75%患者，OX-LDL 水平高于≤50%患者、51%～75%患者（P＜0.05），且APN 和TBIL水平隨患者狹窄程度嚴重逐漸降低，OX-LDL 水平逐漸升高，見表3。

表3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

表3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

注：與91%～100%患者比較，*P＜0.05

2.4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平與血脂水平的相關(guān)性 冠心病患者的APN、TBIL 水平與TC、TG、LDL-C 水平負相關(guān)，與HDL-C 正相關(guān)，OXLDL 水平與TC、TG、LDL-C 水平正相關(guān)，與HDL-C負相關(guān)（P＜0.05），見表4。

表4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平與血脂水平的相關(guān)性

3 討論

基礎(chǔ)性高血壓、高血脂癥或者體內(nèi)過度激活的氧化應(yīng)激性反應(yīng)，均可促進冠狀動脈粥樣硬化，造成血管內(nèi)皮細胞的損傷，進一步造成冠狀動脈狹窄[9]。冠心病肺栓塞、腦損傷患者多器官功能衰竭的發(fā)生風(fēng)險會顯著提高，影響患者的預(yù)后效果[10]。目前臨床缺乏對于冠心病患者病情評估的有效指標(biāo)。雖然可通過冠狀動脈介入造影評估冠心病的病情嚴重程度，但冠造影檢查屬于有創(chuàng)檢查，且對于操縱者專業(yè)技術(shù)要求較高，在臨床應(yīng)用具有一定的局限性，難以普及。此外，造影檢查費用較高，部分患者難以接受[11]。血清學(xué)指標(biāo)檢測在心血管疾病患者病情評估中具有重要的作用。APN 是脂肪細胞分泌的相關(guān)因子，其能夠通過抑制脂肪酸的過度氧化，降低氧化自由基的激活程度，進而保護冠狀動脈血管內(nèi)皮細胞，降低血管粥樣硬化性病變的發(fā)生風(fēng)險[12]。APN 的表達上升還能夠抑制血管內(nèi)皮細胞的線粒體損傷，降低內(nèi)皮細胞的凋亡程度[13]。OX-LDL 是心血管系統(tǒng)的危險性因子，其表達濃度的上升能夠促進泡沫細胞的沉積，提高脂質(zhì)在內(nèi)皮下的富集，進而促進粥樣斑塊的形成和血管的狹窄[14]。研究顯示[15]，OX-LDL 的表達上升還能夠?qū)е聠魏思毎途奘杉毎患潭鹊脑黾樱M一步促進心血管系統(tǒng)的病情進展。TBIL 是反映膽紅素代謝的相關(guān)指標(biāo)，且近年來相關(guān)研究已證實，TBIL對降低心血管不良臨床結(jié)局的發(fā)生風(fēng)險具有一定的預(yù)測價值[16，17]。因此，研究冠心病患者機體APN、OXLDL 和TBIL 的表達情況，可一定程度提升冠心病患者的病情進展情況。但是目前，關(guān)于APN、OXLDL 和TBIL 水平與冠心病患者發(fā)生冠狀動脈病變的關(guān)系方面的研究存在爭議，無明確定論。

本研究結(jié)果顯示，冠心病組患者的TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于對照組，HDL-C、APN、TBIL 水平低于對照組（P＜0.05），該結(jié)論表明冠心病患者中不僅存在明顯的高血脂癥，同時APN、TBIL的表達明顯下降，而OX-LDL 的表達明顯上升，進一步提示了APN、TBIL、OX-LDL 的異常表達與冠心病患者的病情關(guān)系。分析原因主要與相關(guān)細胞因子的下列病理性作用有關(guān)[18]：①APN 的表達下降，失去了其對于氧化應(yīng)激性反應(yīng)的穩(wěn)定作用，導(dǎo)致還原性谷胱甘肽芳基轉(zhuǎn)移酶的顯著下降，降低了還原型化合物對于心血管的保護性作用；②TBIL 的下降影響到共軛雙鍵及過氧化基團中和，進而促進相關(guān)游離自由基對于冠狀動脈的損傷；③OX-LDL 對于心血管的損傷作用，主要由于其能夠加劇心血管的粥樣斑塊的形成。宋瑩等[19]研究也認為，在冠心病患者中，APN 的表達濃度可平均下降40%以上，與賈國偉等[20]的研究結(jié)果相似。同時在合并有急性冠脈綜合癥的患者中，APN 的表達濃度可進一步的下降。在探討相關(guān)指標(biāo)與冠心病患者血管病變數(shù)量的關(guān)系過程中發(fā)現(xiàn)，雙支或者多支病變的患者APN、TBIL 明顯下降，而OX-LDL 明顯上升，提示了相關(guān)細胞因子與冠狀動脈血管病變數(shù)量的關(guān)系，這主要由于APN、TBIL、OX-LDL 的表達波動，能夠影響到冠狀動脈血管分支的脂質(zhì)沉積和斑塊面積的擴大，進而促進血管病變數(shù)量的增加。在不同的血管狹窄程度的患者中，可以發(fā)現(xiàn)血管狹窄程度越高，APN、TBIL的表達濃度越低，而OX-LDL 的表達濃度越高，提示不同指標(biāo)與血管狹窄程度的關(guān)系。對于介入手術(shù)困難或者無法開展的患者，可以選擇檢測APN、TBIL、OX-LDL 水平，進而評估血管的病變程度。最后，本次研究還探討了APN、TBIL、OX-LDL 的表達與血脂的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)相關(guān)指標(biāo)與血脂水平密切相關(guān)，進一步提示了相關(guān)指標(biāo)與冠心病患者綜合性病情的關(guān)系。

綜上所述，在冠心病患者中，APN、TBIL 的表達下降，而OX-LDL 的表達上升，同時相關(guān)指標(biāo)的表達與冠心病患者的血管病變數(shù)量、血管狹窄程度或者血脂水平密切相關(guān)。本研究的局限性在于未能探討APN、TBIL、OX-LDL 的表達與冠狀動脈斑塊特征的關(guān)系，有待進一步研究。