復(fù)方精油在肉兔日糧中適宜添加量的研究

蘇翔宇，郭升嵐，何劍波，呂繼蓉，余 淼，黃明亞，史海濤，郭春華*

（1.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川成都 610041；2.成都大帝漢克生物科技有限公司四川省動物采食調(diào)控工程技術(shù)研究中心，四川成都 611130）

抗生素自面世以來為人類的健康帶來了美好福音，也為養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。但是隨著時間的發(fā)展，由于人類大劑量的使用抗生素所造成抗藥性和藥物殘留等問題也表現(xiàn)出來。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部已于2020年7月1日正式禁止在日糧中添加促生長類藥物飼料添加劑，現(xiàn)階段尋找一種新型飼料添加劑來替代抗生素已經(jīng)成為飼料研究者不可避免、亟待解決的問題。植物精油廣泛存在于芳香植物體內(nèi)，是易揮發(fā)、有著濃烈香味的油狀液體，密度比水小、不溶于水、易溶于有機(jī)溶劑（王巨媛，2010）。有研究表明，復(fù)方精油獨(dú)特的芳香性氣味，能夠刺激肉兔消化系統(tǒng)的感受器，增強(qiáng)肉兔的食欲，從而提高采食量（王棟得，2013）。董兵等（2011）發(fā)現(xiàn)，加入0.04%的大蒜素可以顯著提高獺兔的日增重，且可降低腹瀉率和飼料消化率。也有研究發(fā)現(xiàn)，在肉兔日糧中添加100 mg/kg的百里香酚，可以改善兔肉的氧化穩(wěn)定性（Ahmed，2018）。現(xiàn)階段復(fù)方精油應(yīng)用于畜禽日糧的研究較多，但由于添加種類不同，導(dǎo)致添加的濃度還未有明確的界定。本研究旨在研究日糧中添加不同濃度（150～600 mg/kg）的復(fù)方精油對肉兔生產(chǎn)性能、健康狀況、屠宰性能、肉品質(zhì)、血清免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)等的影響，以期為復(fù)方精油的合理利用提供試驗數(shù)據(jù)和理論依據(jù)，更好地為肉兔產(chǎn)業(yè)服務(wù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)方精油（CEO），由成都大帝漢克生物科技有限公司提供，主要成分有肉桂醛12.0%，香芹酚6.0%，天然精油提取物3.0%。

1.2 試驗設(shè)計 試驗采用完全隨機(jī)化單因素試驗設(shè)計，選取240只35日齡斷奶、體重相近、公母各半的健康新西蘭兔，分為5個處理組，每組16個重復(fù)，每個重復(fù)3只兔子，1組作為空白對照組，采用當(dāng)?shù)赝脠鲎杂萌占Z作為基礎(chǔ)飼料，其他四組分別添加150、300、450、600 mg/kg的 復(fù)方精油。五組試驗兔光照、溫度、濕度飼養(yǎng)管理一致，正式試驗期為56 d。

1.3 日糧配方及營養(yǎng)水平 肉兔日糧在參照NRC（1998）和法國AEC（1993）兔營養(yǎng)需要的基礎(chǔ)上，結(jié)合生產(chǎn)實踐配制。飼料形態(tài)為顆粒飼料?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理 兔舍共分為上下兩籠，每籠飼養(yǎng)3只，采用顆粒料飼喂，自由采食與飲水。試驗期間按兔場規(guī)定進(jìn)行防疫驅(qū)蟲和消毒，密切觀察試驗兔的日常行為，發(fā)現(xiàn)異常立即處理。

1.5 測定的指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能 記錄試驗肉兔初始體重和終末體重，每兩周在肉兔空腹下稱重1次，記錄每組肉兔的生長情況和每日耗料量，記錄肉兔糞便、精神狀況、生長發(fā)育等情況，每天記錄環(huán)境溫度。

1.5.2 屠宰性能、肉品質(zhì) 待飼養(yǎng)階段試驗完成后，每組抽選出12只接近試驗平均體重的試驗兔，將試驗兔禁食12 h后屠宰取樣。記錄屠宰前樣兔活體重、胴體重及其分別內(nèi)臟器官重。將試驗兔剝皮后，除去腕關(guān)節(jié)處的前肢、跗關(guān)節(jié)處的后肢、腸道及內(nèi)容物（保留其頭部、胸腔、肝臟和腎臟及腎臟周圍的脂肪）稱重，即為半凈膛重，半凈膛重去除所有內(nèi)臟器官（保留腎臟及腎臟周圍脂肪）即為全凈膛重，分別計算半凈膛率和全凈膛率。宰后剝離兩側(cè)全部背腰最長肌，冷凍保存待測。

pH：于宰后24 h采用PHSJ-3F型pH計從肉樣的上、中、下3個部分各取1個點(diǎn)測量pH，將探頭插入肌肉3 mm讀數(shù)，最后求統(tǒng)計數(shù)據(jù)的平均值。

肉色：采用HP-C210型色差儀，從肉樣的上、中、下3個部分各取1個點(diǎn)分別測量亮度（L*）、紅度（a*）、黃度（b*）值，取平均值。

蒸煮損失：將新鮮肉樣稱重記為m1（g）后，放入封口袋密封，袋口向上放入80℃恒溫水浴鍋內(nèi)蒸煮1 h后，取出肉樣，吊掛于室內(nèi)，冷卻30 min后，將袋內(nèi)液體排出，取出肉樣稱重記為m2（g）。

蒸煮損失/%＝[（m1-m2）/m1]×100。

剪切力：將肉樣裝入封口袋密封中，放入80℃恒溫水浴鍋內(nèi)水浴2 h后，取出肉樣，用流水冷卻30 min，將肉樣順肌肉纖維方向截取長寬厚分別為1.5、1.0、0.5 cm的肉樣，此項試驗數(shù)據(jù)借助器材為南京銘奧儀器設(shè)備有限公司，產(chǎn)品型號：MAQC-12，剪切力儀。

1.5.3 血清免疫、抗氧化指標(biāo)的測定 在試驗結(jié)束后第一天，試驗兔禁食24 h后，每組隨機(jī)挑選12只進(jìn)行心臟采血，每只抽取10 mL心臟血靜置后，3500 r/min離心10 min收集上層血清樣品，分裝于離心管中，-20℃保存。后送至成都里來生物科技有限公司采用酶聯(lián)免疫分析檢測法（ELISA）測定血清中IgA、IgG、IgM含量，檢測試劑盒均購于上海茁彩生物科技有限公司。采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定血清中超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化氫酶（CAT）及總抗氧化能力（T-AOC）。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計 試驗數(shù)據(jù)用Excel整理，指標(biāo)通過SPSS 18.0分別進(jìn)行單因素方差分析（One Way ANOVA）、單一自由度比較和回歸趨勢分析中的線性（Linear）效應(yīng)和二次曲線（Quadratic）效應(yīng)，單因素方差分析達(dá)到顯著水平采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較。P＜0.05表示差異顯著，P＜0.10表示有趨勢，結(jié)果用平均值表示，變異程度用標(biāo)準(zhǔn)誤（SEM）表示。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度復(fù)方精油對肉兔生產(chǎn)性能的影響由表2可知，不同濃度復(fù)方精油對各階段體重、日增重的影響都不顯著，但對1～14、15～28、1～56 d的采食量影響顯著，且全程試驗組顯著高于對照組（P＜0.05）。添加復(fù)方精油改善了料重比，1～56 d全期下降了5.53%，但差異不顯著（P＞0.05）。

表2 不同濃度復(fù)方精油對肉兔生產(chǎn)性能的影響

2.2 不同濃度復(fù)方精油對肉兔屠宰性能的影響由表3可知，添加不同濃度的復(fù)方精油對肉兔活體重、胴體重、全凈膛率、半凈膛率的影響不顯著，但胴體重有高于對照組的趨勢（P=0.09），且試驗組與對照組在胴體重方面有符合二次曲線的趨勢（P=0.06），即肉兔胴體重隨著復(fù)方精油濃度的增加而增加，后隨著濃度的增加而降低。

表3 不同濃度復(fù)方精油對肉兔屠宰性能的影響

2.3 不同濃度復(fù)方精油對肉兔肉品質(zhì)的影響由表4可知，添加復(fù)方精油試驗組的蒸煮損失率顯著低于對照組（P＜0.05），且有符合二次曲線的趨勢（P=0.07）。試驗組肉色a*也顯著高于對照組（P＜0.01），即試驗組的肉色更加鮮艷，并且符合線性趨勢（P＜0.01）。復(fù)方精油對滴水損失率、pH24h、肉色L*、b*、剪切力影響不顯著（P＞0.05）。

表4 不同濃度復(fù)方精油對肉兔肉品質(zhì)的影響

2.4 不同濃度復(fù)方精油對肉兔血清免疫指標(biāo)的影響 由表5可知，試驗組與對照組相比血液中IgG的含量顯著提高（P=0.01），且當(dāng)添加量為300 mg/kg時血液中IgG的含量最高。各組血液中IgA、IgM的含量差異不顯著（P＞0.05）。

表5 不同濃度復(fù)方精油對肉兔血清免疫指標(biāo)的影響

2.5 不同濃度復(fù)方精油對肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表6可知，與對照組相比，試驗組肉兔血清中MDA的含量顯著降低（P=0.03），而復(fù)方精油對肉兔血清中GSH-PX、CAT、T-AOC含量的影響不顯著（P＞0.05）。

表6 不同濃度復(fù)方精油對肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 不同濃度復(fù)方精油對肉兔生長性能的影響田梅等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，添加百里香酚與對照組相比肉兔的采食量提高了6%左右，日增重提高了22%左右，其中150 mg/kg組效果最好。在35 d斷奶伊拉兔日糧中加入0.05%大蒜素和0.04%黃芪多糖的植物精油混合物，對平均日增重、平均日采食、料重比有顯著的影響（田河，2015）。孫海濤等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加5%的牛至油素可以顯著增加日采食和平均日增重，顯著降低料重比。Elghalid（2020）在肉兔飲用水中添加混合植物精油提取物（每升含有2.5 g香芹醇、0.75 g百里香酚、17.8 g薄荷醇和50 g丙二醇）。結(jié)果表明混合植物精油提取物提高了飼料轉(zhuǎn)化率和日增重。本試驗中，試驗組與對照組1～14、15～28、1～56 d的采食量差異顯著，且全程試驗組采食量顯著高于對照組。與上述試驗結(jié)果相似，這可能由于植物精油有著獨(dú)特的芳香性氣味，能夠刺激肉兔消化系統(tǒng)的感受器，增強(qiáng)肉兔的食欲提高采食量（王棟得，2013）?？梢娡ㄟ^添加復(fù)方精油確實能夠通過提高肉兔的采食量來提高肉兔的生產(chǎn)性能。本試驗中，添加復(fù)方精油改善了料重比，1～56 d全期下降了5.53%，有降低的趨勢。這與前人的試驗結(jié)果基本一致，復(fù)方植物精油在促進(jìn)采食降低料重比方面得到進(jìn)一步證實。

3.2 不同濃度復(fù)方精油對肉兔屠宰性能的影響屠宰性能的優(yōu)劣在畜禽生產(chǎn)上面具有重要意義，是反映畜禽生產(chǎn)性能的主要指標(biāo)之一。Al-Ramamneh（2018）發(fā)現(xiàn)，在熱應(yīng)激肉雞飼糧中添加洋蔥提取物，可提高其胴體重、胸肌重和腿肌重，并改善肌肉品質(zhì)。權(quán)根花（2019）研究日糧中添加不同水平大蒜素作為促生長劑對肉仔雞屠體性能影響時發(fā)現(xiàn)，2%、4%的大蒜素對肉仔雞屠宰率無顯著影響，2%大蒜素組胸肌重量最高，而4%大蒜素組胸肌重最低。田梅等（2019）發(fā)現(xiàn)，日糧添加百里香酚顯著提高了肉兔的屠體標(biāo)準(zhǔn)，顯著降低了腎和肩胛周圍脂肪含量，但對其他器官重量無顯著影響。初漢平（2019）等在濟(jì)寧青山羊日糧中添加200、500、800 mg/kg牛至油發(fā)現(xiàn)，500 mg/kg試驗組的屠宰率顯著高于對照組，各組間的凈肉率、肉骨比和眼肌面積沒有顯著差異。

通過前人的試驗發(fā)現(xiàn)，復(fù)方精油對畜禽屠體性能的改善有一定的影響，本試驗發(fā)現(xiàn)添加不同濃度的復(fù)方精油對肉兔的活體重、胴體重、全凈膛率、半凈膛率的影響差異不顯著，可能是由于試驗屠宰時，已經(jīng)超過了新西蘭肉兔生長發(fā)育快速的時期，肉兔生長放緩，導(dǎo)致復(fù)方精油的優(yōu)勢沒有體現(xiàn)出來。

3.3 不同濃度復(fù)方精油對肉兔肉品質(zhì)的的影響此次試驗添加復(fù)方精油試驗組的蒸煮損失率顯著低于對照組，這與單琪涵（2020）、武進(jìn)（2012）的研究結(jié)果基本一致，這可能是由于復(fù)方精油提高了細(xì)胞的抗氧化能力，減少了細(xì)胞的氧化損傷，保護(hù)了對兔肉肌肉纖維完整性（田梅，2019），降低了兔肉的蒸煮損失率。肉色即肌肉表面的顏色，是消費(fèi)者非常關(guān)心的指標(biāo)之一。有研究發(fā)現(xiàn)畜禽在屠宰時會發(fā)生應(yīng)激，從使肌肉的L*出現(xiàn)先上升后下降的現(xiàn)象，肉色b*和肉色a*則會出現(xiàn)下降的趨勢，但整體在一個正常的范圍（單琪涵，2020），而低于這個范圍就會出現(xiàn)白肌肉（PSE）和黑干肉（DFD）的現(xiàn)象，影響肉品質(zhì)。此次研究中通過添加復(fù)方精油發(fā)現(xiàn)，試驗組肉色a*顯著高于對照組，可見添加復(fù)方精油不僅可以使兔肉顏色更加鮮艷，也有利于緩解肉兔的屠宰應(yīng)激。

3.4 不同濃度復(fù)合精油對肉兔血清免疫指標(biāo)的影響 周洪彬等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，肉桂醛和百里香酚的復(fù)合精油可以顯著提高肉仔雞血清中IgM的含量。朱曉磊（2014）研究也發(fā)現(xiàn)，添加0.25 mg/kg的百里香精油（主要成分為香芹酚、百里酚等）在麻花雞飼糧中 可以顯著提高肉雞血清IgA、IgG和IgM含量。周選武等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬日糧中添加200 mg/kg的植物精油（主要成分是3.5%百里香酚和4.5%肉桂醛）其血清中免疫球蛋白G（IgG）含量與其他組相比最高。李萬利等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，添加0.1%、1%、2.5%、5%的牛至精油在斷奶伊拉兔日糧中能顯著增加血清中IgA、IgG、IgM的含量。

此次試驗發(fā)現(xiàn)添加不同濃度的復(fù)合精油對肉兔血液中IgA的含量影響不顯著，對肉兔血液中的IgG含量影響顯著，且當(dāng)添加量為300mg/kg時血液中IgG的含量最高。此次試驗組對血液中IgM的含量影響不顯著，但I(xiàn)gM的含量符合線性曲線，血液中IgM的含量隨著復(fù)方精油濃度的增加而增加。可見在肉兔日糧中添加復(fù)合精油能夠增強(qiáng)肉兔機(jī)體的免疫力。3.5 不同濃度復(fù)方精油對肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響 有研究發(fā)現(xiàn)添加150 mg/kg的迷迭香精油在畜禽日糧中顯著提高了血清中GSH-Px和T-SOD活性，顯著降低了血清MDA含量（Jang，2004），秦國棟等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，在白羽肉雞日糧中添加桉樹精油能極顯著降低血清中的MDA含量。姚佳等（2016）發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加300 mg/kg的肉桂醛也能顯著提高東北白鵝血清中的TAOC、GSH-Px和SOD活性，降低MDA含量。此次試驗與上述試驗的結(jié)果相似，試驗組肉兔血清中MDA的含量顯著降低，其中丙二醛（MDA）是脂質(zhì)的降解產(chǎn)物，可作為脂質(zhì)過氧化和氧化應(yīng)激的生物標(biāo)志物（Chen，2009），通過檢測丙二醛的含量高低，能夠了解到動物機(jī)體氧化損傷的程度（唐鎮(zhèn)海，2021），可見通過此次試驗在肉兔日糧中添加復(fù)方精油能夠減少脂質(zhì)過氧化水平，提高肉兔的抗氧化能力，促進(jìn)生產(chǎn)力的提高。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明：（1）復(fù)方精油可以提高肉兔的采食量、降低料重比，提高肉兔的生產(chǎn)性能。（2）復(fù)方精油提高了肉品質(zhì)，改善了肉色。同時在肉兔日糧中添加復(fù)方精油能夠增強(qiáng)肉兔機(jī)體的免疫力、提高肉兔的抗氧化能力。（3）日糧中添加0～600 mg/kg的復(fù)方精油，其中胴體重、蒸煮損失率與肉色a*等呈現(xiàn)出二次曲線的劑量效應(yīng)，即隨添加量的增加，效應(yīng)增強(qiáng)，但復(fù)方精油添加過高，則表現(xiàn)出負(fù)面效應(yīng)。因此，本試驗條件下，適宜添加量為300 mg/kg。