暈寧顆粒的薄層鑒別研究

孫 賢 趙 穎

南京市中醫(yī)院藥學(xué)部，江蘇南京 210022

醫(yī)院制劑即醫(yī)療機(jī)構(gòu)自制制劑，大多來源于臨床名老中醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)方，體現(xiàn)了中醫(yī)院的特色治療優(yōu)勢，滿足醫(yī)院臨床的需求，也為我國中成藥開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。我國已批準(zhǔn)上市的中成藥品種有90%以上是基于醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑研發(fā)出來的[1-2]，如從醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑衍生的療效顯著、臨床廣泛應(yīng)用的三九胃泰、復(fù)方丹參滴丸等[3]。暈寧顆粒是醫(yī)院制劑，該方由制何首烏、芍藥、丹參、陳皮等十味藥組成，具有補(bǔ)益肝腎、熄風(fēng)化痰等作用。本研究開展了薄層鑒別實(shí)驗(yàn)，以期有效控制該制劑的質(zhì)量。

1 實(shí)驗(yàn)材料

儀器：超聲波清洗機(jī)（昆山市超聲儀有限公司，型號：KQ-500E）。

試藥：丹參對照藥材（批號：120923-201414）；何首烏對照藥材（批號：121454-201405）；橙皮苷對照品（批號：110721-201617），以上對照藥材、對照品均由中國食品藥品鑒定研究院提供。乙酸乙酯、甲醇、甲酸、三氯甲烷、二氯甲烷均為分析純（購自上?；瘜W(xué)試劑有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 丹參的薄層色譜鑒別

取暈寧顆粒10 g，加水50 ml溶解，先加稀鹽酸將pH調(diào)節(jié)至2，再用乙酸乙酯將溶液萃取2次，每次乙酸乙酯應(yīng)用量為30 ml，取乙酸乙酯萃取液將其蒸干，殘?jiān)? ml甲醇溶解。取丹參藥材2 g，加200 ml水煎煮30 min，過濾，濾液再加稀鹽酸將pH調(diào)節(jié)至2，再用乙酸乙酯將溶液萃取2次，每次乙酸乙酯應(yīng)用量為30 ml，取乙酸乙酯萃取液將其蒸干，殘?jiān)? ml甲醇溶液使其溶解。另按照處方取除丹參外的藥材，按制備工藝路線制成缺丹參的陰性樣品溶液，取適量陰性供試品溶液，按供試品溶液的制備方法制備丹參陰性供試品溶液。吸取對照品5 μl、供試品溶液10 μl、陰性樣品溶液10 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，放入展開系統(tǒng)1：三氯甲烷∶丙酮∶甲酸（25∶10∶2）及展開系統(tǒng)2：二氯甲烷∶甲醇∶甲酸（7∶0.4∶0.3）中，晾干后，噴顯色劑5%香草醛濃硫酸溶液至薄層板上，放入105℃的烘箱烘至顯色，斑點(diǎn)清晰，Rf值適中。在供試品溶液與對照品溶液一致的位置上，顯色斑點(diǎn)一致，陰性供試品溶液沒有干擾，因此確定以此展開劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。見圖1。在不同濕度、不同廠家薄層板的情況下，按上述色譜條件展開，結(jié)果良好見圖2～3。

圖1 丹參薄層色譜圖

圖2 不同濕度下丹參的薄層色譜圖

圖3 不廠家薄層板下丹參的薄層色譜圖

2.2 何首烏的薄層色譜鑒別

取暈寧顆粒10 g，加水50 ml使其溶解，過濾，濾液用20 ml二氯甲烷萃取2次，萃取液放置水浴上蒸干，殘?jiān)? ml甲醇溶液使其完全溶解，作為供試品溶液。取制何首烏對照藥材2 g，加水200 ml煎煮30 min，過濾，濾液用20 ml二氯甲烷萃取2次，萃取液放置水浴上蒸干，殘?jiān)? ml甲醇使其完全溶解，作為供試品溶液。再按照處方取除何首烏以外的其他藥材，按制備工藝路線制成缺何首烏的陰性供試品溶液，取適量的陰性供試品溶液，按供試品溶液的制備方法制備何首烏陰性供試品溶液。依照薄層色譜法，吸取對照品5 μl、供試品溶液8 μl、陰性制劑溶液8 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，分別放入展系統(tǒng)1：二氯甲烷∶乙酸乙酯（18∶0.8）和展開系統(tǒng)2：三氯甲烷∶乙酸乙酯（10∶1）中，取出晾干，于365 nm紫外燈下觀視，在供試品與對照品溶液一致的位置上，顯色斑點(diǎn)一致，因此確定以此展開劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。見圖4。本文還在不同濕度、不同廠家薄層板的情況下，按上述色譜條件展開，結(jié)果良好。見圖5～6。

圖4 何首烏薄層色譜圖

圖5 不同濕度條件下何首烏的薄層色譜圖

圖6 不同薄層板廠家下何首烏的薄層色譜圖

2.3 陳皮的薄層色譜鑒別

取暈寧顆粒10 g，研細(xì)，加入甲醇溶液20 ml，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? ml使其完全溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對照品1 mg，加入甲醇2 ml使其完全溶解，作為對照品溶液。再取除陳皮外的其他處方量藥材，按制備工藝路線制成缺陳皮的陰性樣品，取適量陰性樣品按供試品溶液的制備方法制備陳皮陰性供試品溶液。照薄層色譜法，吸取對照品溶液5 μl、供試品溶液1 μl、陰性供試品溶液1 μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以展開系統(tǒng)1：乙酸乙酯∶甲酸∶水（12∶2∶3）和展開系統(tǒng)2：三氯甲烷∶甲醇∶水（13∶6∶2）的下層液為展開劑，展開后，取出晾干，噴顯色劑3%三氯化鋁-乙醇至薄層G板上，顯色后，于365 nm的紫外燈下觀視。在供試品溶液與對照品溶液一致位置上，顯色斑點(diǎn)一致，Rf值適中，因此確定以此展開劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。見圖7。本文還在不同濕度、不同廠家薄層板的情況下，按上述色譜條件展開，結(jié)果良好。見圖8～9。

圖7 陳皮薄層色譜圖

圖8 不同濕度條件下陳皮的薄層色譜圖

圖9 不同廠家薄層板下陳皮的薄層色譜圖

3 討論

本實(shí)驗(yàn)分別摸索了不同的展開系統(tǒng)，確定了一個最佳的展開系統(tǒng)，同時還摸索了不同濕度以及不同薄層板的條件下色譜展開情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果均良好，說明上述實(shí)驗(yàn)方法穩(wěn)定、可行。

在丹參薄層色譜中，本實(shí)驗(yàn)試用了以下展開劑：三氯甲烷∶丙酮∶甲酸，二氯甲烷∶甲醇∶甲酸，二氯甲烷∶醋酸乙酯[4-7]。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)對比，最終確定將三氯甲烷∶丙酮∶甲酸（5∶2∶0.4）展開系統(tǒng)列入標(biāo)準(zhǔn)正文。

在何首烏薄層色譜中，本實(shí)驗(yàn)試用了以下展開劑：二氯甲烷∶乙酸乙酯，三氯甲烷∶乙酸乙酯，石油醚（30℃～60℃）∶甲酸乙酯∶甲酸層溶液[8-11]。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)對比，最終確定將二氯甲烷∶乙酸乙酯（18∶0.8）展開系統(tǒng)列入標(biāo)準(zhǔn)正文。

在陳皮薄層色譜中，本實(shí)驗(yàn)試用了以下展開劑：乙酸乙酯∶甲酸∶水，三氯甲烷∶甲醇∶水的下層液，乙酸乙酯∶甲醇∶水[12-15]。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)對比，最終確定將乙酸乙酯∶甲酸∶水（12∶2∶3）展開系統(tǒng)列入標(biāo)準(zhǔn)正文。