我國(guó)人用疫苗GMP管理中生物安全要求

劉芬 吳浩 王沖

（上海藥品審評(píng)核查中心 上海 201210）

新冠肺炎疫情以來(lái)，我國(guó)疫苗領(lǐng)域的研究呈明顯上升趨勢(shì)，生物安全貫穿于整個(gè)疫苗生命周期。疫苗生產(chǎn)過(guò)程中可能有活的病原生物體存在，這也就意味著可能有相關(guān)人員暴露并擴(kuò)散的危險(xiǎn)。本文從疫苗生產(chǎn)角度，分析疫苗生物安全管理存在的問(wèn)題，提出加強(qiáng)疫苗生產(chǎn)環(huán)節(jié)生物安全管理的建議。

1 疫苗質(zhì)量管理及生物安全的內(nèi)涵

疫苗是人類醫(yī)學(xué)史上重大的發(fā)明之一，在預(yù)防控制疾病的發(fā)生和流行中發(fā)揮著舉足輕重的作用。通過(guò)廣泛人群疫苗接種，建立群體免疫屏障，可有效阻斷傳染病流行[1]。按照生產(chǎn)技術(shù)路徑，疫苗可分為滅活疫苗、減毒活疫苗、基因工程重組蛋白疫苗以及新型mRNA核酸疫苗、腺病毒載體疫苗等類型。而無(wú)論采用何種技術(shù)路徑，安全有效、質(zhì)量可靠是疫苗最關(guān)鍵的標(biāo)準(zhǔn)。這就要求疫苗生產(chǎn)企業(yè)必須嚴(yán)格執(zhí)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（Good Manufacture Practice for Drugs, GMP）及其相關(guān)附錄要求，確保持續(xù)穩(wěn)定生產(chǎn)出符合預(yù)定用途的疫苗。GMP作為質(zhì)量管理體系的一部分，是藥品生產(chǎn)管理和質(zhì)量控制的基本要求，旨在最大限度地降低藥品生產(chǎn)過(guò)程中污染、交叉污染以及混淆、差錯(cuò)等風(fēng)險(xiǎn)，確保持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合預(yù)定用途和注冊(cè)要求的藥品[2]。

《中華人民共和國(guó)生物安全法》[3]第二條規(guī)定：生物安全的內(nèi)涵是指“國(guó)家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒(méi)有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國(guó)家安全和持續(xù)發(fā)展的能力”。由此可見(jiàn)，生物安全既包括給人類社會(huì)帶來(lái)的安全方面的影響，也指對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類生存產(chǎn)生的現(xiàn)實(shí)或潛在威脅，還包括國(guó)家有效應(yīng)對(duì)生物相關(guān)的內(nèi)外各種損害性、破壞性因素的影響和威脅，以及對(duì)其所采取的一系列有效的生物安全預(yù)防和控制措施[4]。

2 疫苗GMP管理中的生物安全相關(guān)法律法規(guī)要求

現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的生物制品附錄[5]規(guī)定，生物制品生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)質(zhì)量管理過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)按照國(guó)家有關(guān)生物安全管理法律法規(guī)、生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理規(guī)程等（表1），建立完善生物安全管理制度體系，應(yīng)當(dāng)對(duì)整個(gè)生物制品生產(chǎn)活動(dòng)的生物安全進(jìn)行評(píng)估，并采取有效的控制措施。

表1 我國(guó)疫苗GMP管理中生物安全相關(guān)法律法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)

隨著全球化進(jìn)程的加快和生物技術(shù)的進(jìn)步，生物安全得到空前的重視和加強(qiáng)。在新冠肺炎疫情背景下，我國(guó)先后出臺(tái)了《疫苗生產(chǎn)車間安全通用要求》和《中華人民共和國(guó)生物安全法》。疫苗生產(chǎn)過(guò)程涉及病原微生物，而對(duì)涉及病原微生物操作的生產(chǎn)車間的生物安全管理，應(yīng)依照生物安全法中有關(guān)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定和其他生物安全管理規(guī)范進(jìn)行。

根據(jù)車間涉及病原微生物操作的風(fēng)險(xiǎn)，車間生物安全防護(hù)水平分為低生物安全風(fēng)險(xiǎn)車間和高生物安全風(fēng)險(xiǎn)車間[6]。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物，對(duì)應(yīng)生物安全防護(hù)水平的要求也最高，分別對(duì)應(yīng)在四級(jí)、三級(jí)實(shí)驗(yàn)室或高生物安全風(fēng)險(xiǎn)車間從事實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)活動(dòng)；第三類、第四類病原微生物為低致病性病原微生物，對(duì)應(yīng)二級(jí)及以下實(shí)驗(yàn)室或低生物安全風(fēng)險(xiǎn)車間。對(duì)于國(guó)家正式批準(zhǔn)的疫苗生產(chǎn)用減毒、弱毒毒種的分類為另行規(guī)定[7]，如在現(xiàn)行2020版《中華人民共和國(guó)藥典》中，除部分菌毒種（如出血熱病毒和森林腦炎病毒）為二類病原微生物外，其他疫苗品種生產(chǎn)用菌毒種均為三類或四類。當(dāng)前，我國(guó)現(xiàn)有的大多疫苗生產(chǎn)可在低生物安全風(fēng)險(xiǎn)車間內(nèi)進(jìn)行，滅活新冠疫苗的原液生產(chǎn)須在高級(jí)別生物安全生產(chǎn)車間內(nèi)[8]。

3 疫苗生產(chǎn)及檢定中存在的生物安全風(fēng)險(xiǎn)

疫苗包括病毒性疫苗和細(xì)菌性疫苗。病毒性疫苗其生產(chǎn)工藝流程基本包括細(xì)胞制備、病毒接種、病毒培養(yǎng)、病毒收獲、滅活、純化、半成品配制和灌裝等工序。細(xì)菌性疫苗包括基于基因工程的重組蛋白疫苗，其生產(chǎn)工藝流程一般包括菌種（重組工程菌種）培養(yǎng)、發(fā)酵、收獲、殺菌、純化、脫毒、蛋白結(jié)合、半成品配制和灌裝等工序[9]。

結(jié)合上述疫苗生產(chǎn)工藝流程可見(jiàn)，在疫苗規(guī)?；a(chǎn)制備過(guò)程中，菌毒種接種后培養(yǎng)、收獲、至滅活前，所產(chǎn)生的細(xì)菌或病毒數(shù)量極其巨大，特別是當(dāng)涉及敞口操作時(shí)，如病毒/細(xì)菌的接種、離心、超濾、層析、收獲等環(huán)節(jié)時(shí)，是最為主要的生物安全風(fēng)險(xiǎn)因素。

在疫苗的檢驗(yàn)檢定過(guò)程中，可能涉及比較多的二類病原微生物，如鼠疫桿菌、炭疽桿菌、羊布氏菌、結(jié)核分枝桿菌強(qiáng)毒株、乙型腦炎病毒強(qiáng)毒株、出血熱病毒、森林腦炎病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒等，也同樣存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。這包括但不限于陽(yáng)性菌毒種的使用、檢驗(yàn)用細(xì)胞與動(dòng)物的使用、檢驗(yàn)用動(dòng)物源性材料的使用（如檢測(cè)抗體），具體實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)如病毒滴度測(cè)定、免疫原性測(cè)定/效價(jià)測(cè)定（包括或不包括動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)）、無(wú)菌檢查、支原體檢查、控制菌檢查等。

綜上可見(jiàn)，疫苗生產(chǎn)及檢定中有關(guān)微生物學(xué)、免疫學(xué)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等環(huán)節(jié)的操作中所涉及的病原微生物種類多、數(shù)量大，其潛在的生物安全風(fēng)險(xiǎn)涵蓋疫苗菌毒種的保藏運(yùn)輸、生產(chǎn)過(guò)程、動(dòng)物效力評(píng)價(jià)、廢棄物處理以及生產(chǎn)操作人員等多個(gè)方面。

4 疫苗GMP監(jiān)管中的生物安全問(wèn)題及建議

我國(guó)生物安全法規(guī)相關(guān)條款及指南要求與我國(guó)現(xiàn)行GMP要求之間更多的是相輔相成、互相補(bǔ)充的關(guān)系，如廢水廢氣廢料按照生物安全要求規(guī)范處理、生物安全隔離系統(tǒng)和無(wú)菌隔離屏障、緩沖間的設(shè)置、新風(fēng)口及排風(fēng)口選擇、菌毒種管理等諸如此類，即在保證生物安全設(shè)計(jì)要求的同時(shí)也降低了污染及交叉污染的可能。此外，大多用于疫苗生產(chǎn)及檢定用的病原體均應(yīng)驗(yàn)明其歷史、來(lái)源和生物學(xué)特征，確保疫苗質(zhì)量的持續(xù)穩(wěn)定和檢定結(jié)果可靠，從生物安全角度考慮，風(fēng)險(xiǎn)也更可控。

根據(jù)兩者概念可見(jiàn)，GMP與生物安全所考慮的出發(fā)點(diǎn)是不同的。GMP條款以產(chǎn)品質(zhì)量為中心，確保生產(chǎn)出質(zhì)量可靠的藥品。而生物安全是以人為中心，從人類健康、生態(tài)平衡及國(guó)家安全等多個(gè)維度出發(fā)。在藥品監(jiān)督管理部門針對(duì)疫苗生產(chǎn)企業(yè)的檢查重點(diǎn)偏重于防止污染、交叉污染和生產(chǎn)用病原微生物對(duì)生產(chǎn)操作人員的安全風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于生物安全監(jiān)管內(nèi)容較少；其監(jiān)管依據(jù)也主要偏重于生產(chǎn)設(shè)施的“廠房與設(shè)備”部分，往往忽視了生物安全的管理制度。另外，在實(shí)際藥品監(jiān)管過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，疫苗生產(chǎn)企業(yè)對(duì)于生物安全并未給予足夠重視，尤其是對(duì)生物安全相關(guān)人員培訓(xùn)及微生物防護(hù)等方面，但這些生物安全問(wèn)題往往會(huì)成為制品質(zhì)量不佳的關(guān)鍵誘因[10]。

對(duì)于涉及活病原體的疫苗生產(chǎn)車間在廠房設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)充分評(píng)估GMP合規(guī)與生物安全的風(fēng)險(xiǎn)防控，如制劑無(wú)菌灌裝線核心區(qū)域產(chǎn)品暴露較多，GMP要求B＋A級(jí)潔凈度，對(duì)外圍的洗瓶區(qū)和軋蓋區(qū)設(shè)置相對(duì)正壓，以確保核心生產(chǎn)區(qū)產(chǎn)品暴露風(fēng)險(xiǎn)得到有效控制。但從生物安全角度考慮，對(duì)于內(nèi)含活病原體的暴露區(qū)域，應(yīng)相對(duì)外圍區(qū)域負(fù)壓控制，以降低病原微生物外泄和擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于此類問(wèn)題，企業(yè)應(yīng)提高主體責(zé)任意識(shí)，根據(jù)品種特性及工藝充分考量和評(píng)估可能的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，在保證產(chǎn)品合規(guī)生產(chǎn)的基礎(chǔ)上，制定相應(yīng)的生物安全預(yù)防及控制措施。

5 小結(jié)

得益于GMP標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和持續(xù)推行，國(guó)內(nèi)藥品生產(chǎn)行業(yè)日益規(guī)范。而隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和對(duì)生物安全認(rèn)知的逐漸加深，生物安全方面的問(wèn)題越來(lái)越得到重視，并逐步走上正軌[11]。特別是在應(yīng)對(duì)新冠肺炎疫情的形勢(shì)下，為確保疫苗生產(chǎn)過(guò)程的生物安全，國(guó)家連續(xù)出臺(tái)了多部疫苗生物安全相關(guān)行政法規(guī)和規(guī)范性文件，這為我國(guó)疫苗生物安全管理提供了重要的法律依據(jù)，可有效用于指導(dǎo)和規(guī)范疫苗生物安全車間建設(shè)、硬件配套、設(shè)施條件、人員培訓(xùn)及生物防護(hù)等。但是，在疫苗GMP實(shí)際監(jiān)管過(guò)程中，還存在一些共性問(wèn)題：一是部分企業(yè)對(duì)生物安全的重視還不夠；二是GMP監(jiān)管過(guò)程中更多偏向質(zhì)量體系建設(shè)和管理，往往忽視了生物安全相關(guān)管理；三是生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估還不夠充分，未能有效識(shí)別和控制生物安全風(fēng)險(xiǎn)；四是生物安全相關(guān)領(lǐng)域人才儲(chǔ)備還不夠充足。因此，面對(duì)新形勢(shì)新要求，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)生物安全管理體系建設(shè)，其前提是提高生物安全認(rèn)知，其關(guān)鍵是健全生物安全風(fēng)險(xiǎn)防控機(jī)制，其基礎(chǔ)是加強(qiáng)生物安全研究和人才培養(yǎng)，由此守好疫苗生物安全底線，加快生物安全強(qiáng)國(guó)建設(shè)[12]。