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    黑果腺肋花楸葉黃酮的提取工藝優(yōu)化及抗氧化、結(jié)合膽酸鹽能力分析

    2023-01-13 13:14:40何旭華石志嬌王安娜趙春芳
    食品工業(yè)科技 2023年2期
    關(guān)鍵詞:腺肋花楸黑果

    何旭華,石志嬌,王安娜,趙春芳,劉 云,闞 歡

    (西南林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,云南昆明 650224)

    隨著生活質(zhì)量提高和飲食結(jié)構(gòu)改變,高血脂癥已成為人體的易患病,癥狀的形成與氧化應(yīng)激密切相關(guān)。該癥一般采用藥物治療,結(jié)合膽酸鹽能力可反映藥物對高血脂癥的治療效果[1]?;瘜W(xué)合成藥物價格昂貴、毒副作用大,故亟需開發(fā)天然、低毒性且耐受性強(qiáng)的抗氧化劑、降血脂藥物[2]。黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa),薔薇科,腺肋花楸屬,多年生落葉灌木,又稱不老莓、野櫻莓,是具有食用、藥用、園林、生態(tài)價值等的經(jīng)濟(jì)樹種[3]。其果實(shí)和葉均含有多酚[4]、黃酮[5]、多糖等多種活性物質(zhì),具有提高記憶力、抗癌、抗氧化及抗菌等功效[5-9],兩者有較好的食用和藥用價值。葉片與果實(shí)存在共有的生物活性物質(zhì),且葉片的黃酮和多酚含量更高[4-5],故葉片具有一定的降血脂潛力,可作為開發(fā)新型藥物的天然植物資源。

    目前,大量研究表明植物中的黃酮類物質(zhì)能夠安全有效地控制高血脂癥,如金銀花[10]、南非葉[11]的總黃酮提取物均能改善高脂誘導(dǎo)小鼠肝臟的氧化應(yīng)激水平,維持血液中正常脂質(zhì)水平。關(guān)于黑果腺肋花楸葉片的研究報(bào)道僅有多糖提取工藝和抗氧化活性,而黃酮工藝優(yōu)化和降血脂功能的研究鮮有報(bào)道,Do等[12]通過測定黑果腺肋花楸葉片在生長階段中多酚和類黃酮含量的變化,以此評價不同階段的抗氧化能力,表明黑果腺肋花楸葉片具有一定的抗氧化活性;Zduni?等[13]通過研究黑果腺肋花楸葉片的生物活性成分,發(fā)現(xiàn)葉片具有一定的抗氧化能力。因此,研究黑果腺肋花楸葉黃酮的最優(yōu)提取工藝,并測定其抗氧化、結(jié)合膽酸鹽能力,有助于推動黑果腺肋花楸葉生物活性領(lǐng)域的研究。

    本文通過單因素結(jié)合響應(yīng)面法,優(yōu)化超聲波輔助法提取AMF的工藝參數(shù),以DPPH·、ABTS+·的清除率和總還原能力為指標(biāo),考察AMF的抗氧化活性;以膽酸鈉、牛黃膽酸鈉、甘氨酸鈉為指標(biāo),考察AMF的結(jié)合膽酸鹽能力,以期為AMF開發(fā)天然的抗氧化劑和降血脂藥物提供依據(jù),對其生物活性領(lǐng)域的發(fā)展具有重要意義。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    黑果腺肋花楸的干燥葉片 遼寧省瓦房店市駝山鎮(zhèn)前大地村提供;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 HPLC≥98%,上海源葉科技有限公司;牛黃膽酸鈉 分析純,上海源葉科技有限公司;DPPH(>97.0%)、ABTS(>98.0%)

    分析純,合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;膽酸鈉、甘氨酸鈉 分析純,上海麥克林生化科技有限公司;硫酸 分析純,云南楊林工業(yè)開發(fā)區(qū)汕滇藥業(yè)有限公司;鐵氰化鉀、磷酸鹽緩沖液、三氯乙酸、六水合三氯化鐵、抗壞血酸、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、硝酸鋁、無水乙醇 分析純,天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司。

    UV-2600紫外可見分光光度計(jì) 日本島津儀器公司;YB-250A型高速多功能粉碎機(jī) 永康市速峰工貿(mào)有限公司;SHZ-DⅢ循環(huán)水式多用真空泵 上海力辰邦西儀器科技有限公司;SB25-12DTDS超聲波清洗機(jī) 寧波新藝超聲設(shè)備有限公司;Sigma3K15離心機(jī) 德國西格瑪離心機(jī)有限公司;HB 10 S96旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 艾卡儀器設(shè)備有限公司;DK-98-Ⅱ電熱恒溫水浴鍋 天津市泰斯特儀器有限公司;DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥機(jī) 上海齊欣科學(xué)儀器有限公司;SpectraMax190酶標(biāo)儀 美谷分子儀器有限公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 AMF的提取工藝 將黑果腺肋花楸葉置于45 ℃烘箱24 h后,粉碎,過80目篩,儲藏于4 ℃冰箱備用。精確稱量500.0 mg黑果腺肋花楸葉粉末于不同體積的乙醇溶液中,按設(shè)定參數(shù)進(jìn)行超聲,超聲后真空抽濾,將濾液以相應(yīng)提取溶劑定容至50 mL,得AMF粗提液。

    1.2.2 黃酮含量的測定 參照劉佳等[14]的方法稍做改動,繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。配制濃度為0.05 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品母液,蘆丁質(zhì)量濃度(x)和吸光值(y)的線性回歸方程為y=0.01167+7.53571x,R2=0.999。取1.2.1制備的黃酮粗提液1 mL稀釋15倍,取1 mL樣液于25 mL容量瓶,按標(biāo)曲的繪制方法加入相應(yīng)的溶劑顯色后,于510 nm測定吸光值。將吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣液中黃酮濃度,按照公式計(jì)算黃酮得率。

    式中:c為黃酮濃度,mg/mL;n為稀釋倍數(shù);v為待測液體積,mL;M為黑果腺肋花楸葉粉末質(zhì)量,mg。

    1.2.3 AMF提取單因素實(shí)驗(yàn) 以液料比60:1 mL/g、乙醇濃度為70%、超聲功率為80 W、超聲時間為60 min、溫度45 ℃為基本條件,分別考察液料比(40:1、50:1、60:1、70:1、80:1 mL/g)、乙醇濃度(40%、50%、60%、70%、80%)、超聲功率(60、80、100、120、140 W)、超聲時間(20、40、60、80、100 min)對提取AMF得率的影響。

    1.2.4 AMF提取響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn) 基于單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選取液料比、乙醇濃度、超聲功率、超聲時間為響應(yīng)因素,AMF得率為響應(yīng)值,利用Box-Behnken實(shí)驗(yàn)原理設(shè)計(jì)四因素三水平的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。因素及水平編碼如表1。

    表1 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)Table 1 Factors and Levels of response surface methodology

    1.2.5 AMF抗氧化及降血脂活性研究 將黑果腺肋花楸葉經(jīng)最優(yōu)工藝提取,減壓濃縮得黃酮粗提物,分別測定AMF粗提物的抗氧化、降血脂活性。

    1.2.5.1 DPPH·清除能力的測定 參考Li等[15]的方法適當(dāng)調(diào)整,各取2 mL不同濃度樣液與0.05 mg/mL DPPH-無水乙醇溶液,37 ℃孵育30 min,在517 nm處測定吸光值A(chǔ)p。用60%乙醇溶液代替樣液測定吸光值A(chǔ)q,用無水乙醇代替DPPH-無水乙醇溶液測定吸光值A(chǔ)w。按以下公式計(jì)算AMF對DPPH·清除率:

    式中:Ap為樣品組的吸光值;Aw為樣品控制組的吸光值;Aq為空白組的吸光值。

    1.2.5.2 ABTS+·清除能力的測定 參考Feng等[16]的方法適當(dāng)調(diào)整,將7 mmol/L ABTS·與5 mmol/L過硫酸鉀溶液等體積混合,靜置反應(yīng)12 h,得ABTS+·反應(yīng)液。用蒸餾水稀釋ABTS+·反應(yīng)液吸光值至0.700(±0.02),現(xiàn)用現(xiàn)配。取200 μL不同濃度的樣液與3.8 mL ABTS+·反應(yīng)液,暗反應(yīng)6 min,在734 nm測定吸光值A(chǔ)p。用60%乙醇溶液代替樣液測定吸光值A(chǔ)q,用蒸餾水代替ABTS+·溶液測定吸光值A(chǔ)w。按以下公式計(jì)算AMF對ABTS+·清除率:

    式中:Ap為樣品組的吸光值;Aw為樣品控制組的吸光值;Aq為空白組的吸光值。

    1.2.5.3 總還原能力的測定 參照Liu等[17]的方法適當(dāng)調(diào)整,采用鐵氰化鉀還原法,各取不同濃度的樣液、pH=6.6磷酸緩沖液、1%鐵氰化鉀1 mL均勻混合于50 ℃的水浴中20 min,加入10%三氯乙酸溶液1 mL,混勻后離心(4000 r/min)10 min。分別取1 mL上清液、蒸餾水和0.1%三氯化鐵,均勻混合靜置10 min,700 nm處測定吸光值。還原力的大小用樣品的吸光值表示。

    1.2.5.4 結(jié)合膽酸鹽能力的測定 參照蘆宇等[18]的方法適當(dāng)調(diào)整,各取1 mL不同濃度的樣液,加入4 mL 0.3 mmol/L膽酸鹽溶液(pH為6.3的膽酸鈉、牛黃膽酸鈉、甘氨膽酸鈉溶液),在37 ℃、120 r/min的恒溫振蕩器振蕩1 h后,離心(5000 r/min)5 min,取1 mL上清液加入3 mL 60%的硫酸溶液,于70 ℃水浴20 min,再冰浴5 min,387 nm處測定吸光度Ap。用60%乙醇溶液代替樣液測定吸光值A(chǔ)q,用pH=6.3磷酸鹽緩沖液代替膽酸鹽溶液測定吸光值A(chǔ)w。按以下公式計(jì)算AMF對膽酸鹽的結(jié)合率:

    式中:Ap為樣品組的吸光值;Aw為樣品控制組的吸光值;Aq為空白組的吸光值。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    上述實(shí)驗(yàn),均平行實(shí)驗(yàn)三次,以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差為結(jié)果。采用Design-Expert.V8.0.6.1軟件進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì);用SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;用GraphPad Prism 8軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行繪圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

    2.1.1 液料比對AMF得率的影響 圖1可知,液料比為40:1~60:1 mL/g范圍內(nèi),黃酮得率隨液料比增大呈顯著(P<0.05)上升趨勢,在液料比為60:1 mL/g時,黃酮得率達(dá)到最大值,為20.24%;當(dāng)液料比大于60:1 mL/g時,黃酮得率呈顯著(P<0.05)下降趨勢。其原因?yàn)橐毫媳冗^小,黑果腺肋花楸葉未被溶劑完全浸沒,不利于黃酮充分溶出;當(dāng)液料比為60:1 mL/g時,黑果腺肋花楸葉被充分浸沒,其黃酮成分已充分溶出;繼續(xù)增大液料比,黑果腺肋花楸葉中的其他醇溶成分溶出,使黃酮在提取劑中溶解量減小,導(dǎo)致黃酮得率下降[19]。因此,選擇液料比為50:1、60:1、70:1 mL/g進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。

    圖1 液料比對黃酮得率的影響Fig.1 Effect of liquid-to-material ratio on the yield of flavonoids

    2.1.2 乙醇濃度對AMF得率的影響 圖2可知,乙醇濃度為40%~60%范圍內(nèi),乙醇濃度越大越有利于黑果腺肋花楸葉中黃酮成分溶出,黃酮得率與乙醇濃度呈正相關(guān);乙醇濃度為60%時,黃酮成分基本溶出,得率達(dá)到最大值,為21.06%;但繼續(xù)增大乙醇濃度,黃酮得率呈顯著(P<0.05)下降趨勢。其原因是細(xì)胞內(nèi)外的濃度差與乙醇濃度相關(guān),乙醇濃度過高易使其他醇溶性物質(zhì)溶出,阻礙黃酮成分溶出[20],黃酮得率降低。因此,選擇50%、60%、70%進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。

    圖2 乙醇濃度對黃酮得率的影響Fig.2 Effect of ethanol concentration on the yield of flavonoids

    2.1.3 超聲功率對AMF得率的影響 圖3可知,超聲功率為60 W與超聲功率為80 W對黃酮得率無顯著影響,當(dāng)超聲功率為100 W時,黃酮得率達(dá)到最大值,為22.06%;繼續(xù)加大功率,黃酮得率呈顯著(P<0.05)下降趨勢。其原因是超聲功率低產(chǎn)生的機(jī)械及空化效應(yīng)對細(xì)胞壁的破壞程度小,不利于黃酮成分溶出;增大超聲功率能增強(qiáng)對細(xì)胞壁的破壞作用,但過大的超聲功率,產(chǎn)生的強(qiáng)大機(jī)械振動會使提取劑流動加快,導(dǎo)致超聲波的停留時間減少,并且空化作用增強(qiáng)后產(chǎn)生的大量無用空化泡會增加超聲波的散射衰減,黃酮得率降低[21]。因此,選擇80、100、120 W進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。

    圖3 超聲功率對黃酮得率的影響Fig.3 Effect of ultrasonic power on the yield of flavonoids

    2.1.4 超聲時間對AMF得率的影響 由圖4可知,超聲時間在20~60 min范圍內(nèi),黃酮得率呈顯著(P<0.05)上升趨勢,當(dāng)超聲時間為60 min時,黃酮得率有最大值,為19.41%;延長超聲時間至100 min時,黃酮得率呈顯著(P<0.05)的下降趨勢。其原因是超聲時間過短,黑果腺肋花楸葉中的黃酮不能充分溶出,但超聲時間過長,超聲波的空化效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)以及熱效應(yīng)會導(dǎo)致黃酮空間構(gòu)型被改變,且其他醇溶性成分的溶出量增大,黃酮得率下降[22,23]。因此,選擇40、60、80 min進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。

    圖4 超聲時間對黃酮得率的影響Fig.4 Effect of ultrasound time on the yield of flavonoids

    2.2 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果與分析

    2.2.1 響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)及結(jié)果 在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上,選液料比(A)、乙醇濃度(B)、超聲功率(C)、超聲時間(D)為響應(yīng)設(shè)計(jì)變量,AMF得率為響應(yīng)值,用Design-Expert 8.0設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),優(yōu)化AMF提取工藝。表2為響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果。

    表2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Design and results of response surface experiment

    2.2.2 響應(yīng)面方差分析 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過多元回歸方程擬合,得液料比、乙醇濃度、超聲功率、超聲時間為影響因子的多元二次方程為Y=24.20+0.57A-0.083B-0.55C-0.19D-0.73AB-1.24AC-0.29AD+0.21BC-0.19BD-0.37CD-3.02A2-3.03B2-3.28C2-2.34D2。由表3可知,模型F=16.43,P<0.0001,模型差異性極顯著,表明方程與實(shí)際情況擬合良好,反應(yīng)黃酮得率與各因素之間的關(guān)系。失擬項(xiàng)P=0.0610>0.05,表明非實(shí)驗(yàn)因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較小,該模型和方程可用于優(yōu)化AMF提取工藝。決定系數(shù)R2=0.9426,該值越接近1,表明實(shí)驗(yàn)實(shí)測值與模型預(yù)測值之間的相關(guān)性越高[24]。CV(變異系數(shù))=4.34%<10%,精密度為12.519>4,表明模型可靠。分析F值和P值可知各工藝因素對響應(yīng)值的顯著差異,F(xiàn)值越大,影響作用越明顯,P值越小,越顯著[25]。一次項(xiàng)A、C,交互項(xiàng)AC對黃酮得率差異顯著(P<0.05);二次項(xiàng)A2、B2、C2、D2對黃酮得率差異極顯著(P<0.01),影響AMF得率的因素順序?yàn)椋篈(液料比)>C(超聲功率)>D(超聲時間)>B(乙醇濃度)。

    表3 響應(yīng)面擬合回歸方程的方差分析結(jié)果Table 3 Variance analysis results of response surface fitting regression equation

    2.2.3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)中交互項(xiàng)作用分析 響應(yīng)面圖能直觀反映出實(shí)驗(yàn)因素兩兩交互作用的顯著程度,響應(yīng)面3D曲面圖坡度越陡峭,等高線越密集并呈橢圓形或馬鞍形時,表明兩因素之間的交互越顯著[26]。由圖5可知,交互作用相液料比與超聲功率的響應(yīng)圖較其他交互作用更為陡峭,表明該交互因素對AMF得率影響顯著,這與表3方差分析結(jié)果一致。

    圖5 各因素交互作用對黃酮得率影響的響應(yīng)面圖Fig.5 Surface graph of the effect of interaction on the yield of flavonoids

    2.2.4 最優(yōu)工藝條件及模型驗(yàn)證 以AMF得率為評價指標(biāo),通過Box-Behnken模型優(yōu)化分析得到黃酮最優(yōu)提取工藝為液料比61.23:1 mL/g、乙醇濃度59.69%、超聲功率97.87 W、超聲時間59.24 min,黃酮得率的預(yù)測值為24.27%。為驗(yàn)證模型的有效性,結(jié)合實(shí)際情況將最優(yōu)工藝調(diào)整為61:1 mL/g、60%、100 W、59 min,該條件下提取黃酮的得率為24.22%±0.29%,與預(yù)測值接近,說明模型可靠。

    2.3 AMF抗氧化及降血脂活性

    2.3.1 DPPH·清除能力 圖6可知,質(zhì)量濃度0.025~0.5 mg/mL范圍內(nèi),VC和AMF對DPPH·清除效果隨濃度升高而顯著(P<0.05)增強(qiáng)。濃度大于0.5 mg/mL時,VC對DPPH·清除率維持在94%~95%,各濃度間的清除效果無顯著(P>0.05)差異。濃度為1.5~2.5 mg/mL范圍內(nèi),AMF對DPPH·清除率隨濃度的升高而顯著(P<0.05)上升,其清除率范圍為65%~78%,DPPH·的IC50為0.32 mg/mL。上述結(jié)果較劉靜等[27]研究黑果腺肋花楸果中黃酮對DPPH·的IC50更小,AMF對DPPH·的清除效果強(qiáng)于果實(shí)中黃酮,原因是AMF含量高于果實(shí)中黃酮含量,而黃酮具備較強(qiáng)的自由基捕捉能力,抗氧化活性的強(qiáng)弱與其含量的高低、結(jié)構(gòu)中取代基的性質(zhì)和位置等均有關(guān)[28]。

    圖6 AMF對DPPH·清除能力Fig.6 DPPH free radical scavenging ability of AMF

    2.3.2 ABTS+·清除能力 圖7可知,質(zhì)量濃度為0.025~0.15 mg/mL范圍內(nèi),VC對ABTS+·清除效果隨濃度升高而顯著(P<0.05)增強(qiáng);質(zhì)量濃度為0.075 mg/mL時,VC對ABTS+·清除率為71.89%±1.19%,大于AMF對ABTS+·清除率25.03%±0.26%。在質(zhì)量濃度為0.025~0.5 mg/mL范圍內(nèi),AMF對ABTS+·清除效果隨濃度升高而顯著(P<0.05)增強(qiáng),ABTS+·清除率的IC50為0.16 mg/mL,在濃度0.5 mg/mL時,AMF對ABTS+·清除率與VC一致,清除率為99.47%。AMF對ABTS+·清除率的IC50小于對DPPH·清除率IC50,其原因?yàn)榭寡跣阅芰Σ粌H取決于類黃酮的極性,還取決于自由基的選擇性和作用機(jī)理,黃酮類化合物的不同化學(xué)結(jié)構(gòu)導(dǎo)致了其對不同自由基的清除能力的差異[29],AMF對ABTS+·的清除能力強(qiáng)于對DPPH·的清除能力。

    圖7 AMF對ABTS+·清除能力Fig.7 ABTS+ free radical scavenging ability of AMF

    2.3.3 總還原能力 圖8可知,質(zhì)量濃度為0.025~0.5 mg/mL范圍內(nèi),VC和AMF的還原能力隨濃度增大而顯著(P<0.05)增強(qiáng)。質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL,AMF的吸光值為1.09,低于VC的吸光值。AMF的總還原能力雖不及VC,但AMF的自然資源豐富,制備方法簡單,生產(chǎn)成本低,是一種較理想的天然抗氧化劑。

    圖8 AMF的總還原能力Fig.8 Reducing power of AMF

    2.3.4 結(jié)合膽酸鹽能力 甘氨膽酸、牛黃膽酸、膽酸均屬于結(jié)合型初級膽汁酸,與Na+或K+形成結(jié)合性初級膽酸鹽。膽汁酸鹽是膽固醇的降解產(chǎn)物,黃酮類化合通過與膽酸鹽結(jié)合,降低膽汁酸的重吸收率,從而降低膽固醇的含量[30]。圖9可知,質(zhì)量濃度為0.25~0.5 mg/mL范圍內(nèi),AMF對膽酸鈉、牛黃膽酸鈉、甘氨膽酸鈉的結(jié)合率隨濃度增加顯著(P<0.05)上升;在質(zhì)量濃度為2~6 mg/mL時,結(jié)合率隨濃度增加呈緩慢增長趨勢,差異不顯著(P>0.05);在質(zhì)量濃度為6 mg/mL時,對膽酸鈉、牛黃膽酸鈉、甘氨膽酸鈉的結(jié)合率分別為58.38%、51.40%、46.36%。AMF對膽酸鈉的結(jié)合率高于牛黃膽酸鈉、甘氨膽酸鈉,其IC50分別為0.76、3.01、6.49 mg/mL,說明AMF對膽酸鹽的結(jié)合能力較好,具有潛在的降血脂功效。

    圖9 AMF對膽酸鹽的結(jié)合能力Fig.9 Binding ability of AMF to bile salts

    3 結(jié)論

    本文采用超聲波輔助法提取AMF,經(jīng)單因素和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,確定最優(yōu)工藝條件為:液料比61:1 mL/g、乙醇濃度60%、超聲功率100 W、超聲時間59 min,該條件下的黃酮得率為24.22%±0.29%(n=3),與預(yù)測值(24.27%)接近,模型可靠。AMF對DPPH·和ABTS+·清除率的IC50值分別 為0.32和0.16 mg/mL,在濃度為0.5 mg/mL時,對鐵離子還原力較好,吸光值為1.09;AMF對膽酸鈉、牛黃膽酸鈉和甘氨膽酸鈉結(jié)合率的IC50值分別為0.76、3.01和6.49 mg/mL。綜上,AMF具有較好的抗氧化、結(jié)合膽酸鹽能力,且在一定的濃度范圍內(nèi)抗氧化、結(jié)合膽酸鹽能力與黃酮含量呈劑量效應(yīng)。

    本研究為AMF開發(fā)天然抗氧化劑和降血脂藥物提供理論依據(jù),但需對其組分進(jìn)行測定,分離單體化合物,確定具體的抗氧化、降血脂物質(zhì),同時對其體內(nèi)降血脂機(jī)制進(jìn)一步研究。

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