肝細胞癌患者血清SLC7A11的變化及臨床意義

詹有芳 張玨 王鵬

作者單位：200021 上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院檢驗科(詹有芳，張玨)；上海市第七人民醫(yī)院檢驗科(王鵬)

肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)作為原發(fā)性肝癌(Primary hepatocarcinoma, PHC)的主要組織學類型，是全球高發(fā)的惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類健康[1-2]。HCC通常發(fā)病隱匿，初期缺乏特異性臨床表現(xiàn)，但病情進展迅速，多數(shù)患者至疾病晚期因各類并發(fā)癥就診時，已失去早期最佳治療機會，導致預后極差[3]。目前，甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)是臨床上常用的篩查HCC的血清標志物，但由于血清AFP水平易受肝炎及其他肝病的影響，導致HCC假陽性率和假陰性率仍然很高[4-5]。因此，尋找高靈敏度和高特異度的HCC早期腫瘤標志物一直是研究熱點。溶質(zhì)載體家族成員(solute carrier family 7 member 11, SLC7A11)為一種氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白，近來研究表明，SLC7A11在HCC患者中表達明顯上升[6]。本研究旨在探討血清SLC7A11在早期HCC診斷中的價值。

資料與方法

一、研究對象

選取2018年1月—2020年12月上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院收治的HCC患者120例作為研究對象，其中HCC早期(Ⅰ期和Ⅱ期)和晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)患者各60例(參考我國肝癌分期方案CNLC[7])，另選取同期的60例肝硬化(LC)患者作為對照組。HCC患者均通過手術(shù)切除或肝穿刺活組織標本進行病理組織學檢查。HCC診斷標準參考《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019年版)》[7]；LC診斷標準參考《肝硬化診治指南》[8]。納入標準：①經(jīng)病理診斷為HCC，或經(jīng)組織學檢查或門脈高壓檢測診斷為LC，且經(jīng)影像學檢查排除HCC可能性；②無其他重大功能障礙。排除標準：①不符合納入標準；②合并有其他惡性腫瘤；③妊娠期或哺乳期女性。所有患者均簽訂知情同意書并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準同意。

二、研究方法

詢問患者詳細病史，包括年齡、性別、腫瘤病理分期等相關參數(shù)。采集研究對象清晨空腹全血5 mL，分離血清后保存于-80 ℃冰箱待測。肝臟生化指標丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)等采用全自動生化分析儀測定。AFP采用化學發(fā)光法定量檢測，按《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019年版)》[7]，AFP≥400 ng/mL判定為陽性。采用SLC7A11 ELISA檢測試劑盒檢測血清SLC7A11水平，檢測過程嚴格按照試劑盒說明書完成，操作步驟如下：(1)分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00 μL，其余孔分別加標準品或待測樣品100 μL，37 ℃反應120 min；(2)棄去液體，甩干，每孔加生物素標記抗體工作液100 μL，37 ℃，60 min；(3)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次；(4)每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液100 μL，37 ℃，60 min；(5)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次；(6)依序每孔加底物溶液90 μL，37 ℃避光顯色；(7)依序每孔加終止溶液50 μL，終止反應；(8)用酶標儀在450 nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

三、統(tǒng)計學方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗；計量資料以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用獨立樣本的t檢驗。診斷評價采用ROC曲線分析。

結(jié) 果

一、兩組患者一般資料比較

HCC組120例，男75例，女35例，年齡39～92歲，LC組78例，男52例，女26例，年齡35～92歲，兩組性別、年齡、TBil、ALT差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；HCC組的PT水平低于LC組，而HCC組的Alb水平高于LC組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。并發(fā)癥發(fā)生及病因差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表1)。

二、早期HCC患者與晚期HCC和LC患者血清SLC7A11、AFP等指標比較

早期HCC患者血清TBil、PT指標明顯低于晚期HCC組，Alb則高于晚期HCC組，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)，而AFP及ALT差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05), 早期HCC患者血清 SLC7A11低于晚期HCC組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義；早期HCC患者血清TBil、PT明顯低于LC組，SLC7A11、AFP、Alb則明顯高于LC組(P均<0.01)，差異有統(tǒng)計學意義，晚期HCC組，ALT差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表2)。

三、AFP和SLC7A11單獨及聯(lián)合診斷HCC、早期HCC的ROC曲線分析比較

AFP診斷HCC的AUC為0.792，95%CI為0.725～0.858，靈敏度為67.50%，特異度為75.64%；SLC7A11診斷的AUC為0.801，95%CI為0.740～0.862，靈敏度為68.33%，特異度為80.77%。兩項指標聯(lián)合檢測時，AUC為0.869，95%CI為0.817～0.920，靈敏度為73.50%，特異度為85.55%(圖1)。

在早期HCC組中，單項檢測時，AFP診斷的AUC為0.752，95%CI為0.663～0.842，靈敏度為65.00%，特異度為70.51%；SLC7A11診斷的AUC為0.765，95%CI為0.685～0.846，靈敏度為66.67%，特異度為75.64%。兩項指標聯(lián)合檢測時，AUC為0.802，95%CI為0.725～0.878，靈敏度為71.67%，特異度為78.33%(圖2)。

討 論

本研究中，我們發(fā)現(xiàn)HCC患者血清SLC7A11水平顯著高于LC患者，同時，晚期HCC患者血清SLC7A11水平顯著高于早期HCC患者，提示血清SLC7A11水平可能與肝臟疾病進程相關，對HCC的早期篩查診斷具有潛在的臨床應用價值。進一步分析發(fā)現(xiàn)，診斷HCC及早期HCC患者時，SLC7A11的AUC、靈敏度以及特異度等均優(yōu)于AFP。評估血清中SLC7A11和AFP聯(lián)合診斷HCC的能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測診斷HCC或早期HCC的AUC、靈敏度以及特異度等指標均高于單獨檢測，診斷能力明顯優(yōu)于單項指標。

表1 HCC患者和LC患者一般資料比較

表2 早期HCC患者與晚期HCC和LC患者血清SLC7A11、AFP等指標比較(±s)

圖1 AFP和SLC7A11及聯(lián)合診斷HCC的ROC曲線

圖2 AFP和SLC7A11及聯(lián)合診斷早期HCC的ROC曲線

SLC7A11作為溶質(zhì)載體家族成員之一，是胱氨酸/谷氨酸反向轉(zhuǎn)運體(也稱Xc-系統(tǒng))的輕鏈亞基，主要功能是將細胞內(nèi)的谷氨酸鹽轉(zhuǎn)運至細胞外，而將細胞外液內(nèi)的胱氨酸攝取到細胞內(nèi)[9]。既往研究表明，在多種惡性腫瘤中SLC7A11呈高表達水平[10]。已有大量研究證明，SLC7A11與腫瘤生長轉(zhuǎn)移、化療耐藥、營養(yǎng)依賴等密切相關[11]。有研究者利用公共數(shù)據(jù)庫中大量的HCC患者數(shù)據(jù)，構(gòu)建了HCC診斷和預后模型，證明SLC7A11具有一定的HCC診斷和預后判別能力[12]。也有研究者檢測了HCC患者外周血中SLC7A11濃度，發(fā)現(xiàn)SLC7A11針對HCC的檢測陽性率可達80.2%，初步確定了其作為HCC腫瘤標志物的潛在價值[13]。

綜上所述，血清SLC7A11水平在HCC發(fā)展進程中呈現(xiàn)增高趨勢，與AFP聯(lián)合檢測可提高HCC診斷性能，尤其在HCC的早期診斷上表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢，具有良好的臨床應用價值。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。