李必為,孫彥,張新黨,黃漢,蘇林海,鄧君明
(云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,云南 昆明 650201)
魚(yú)粉是最重要的飼料蛋白源,但產(chǎn)量和價(jià)格嚴(yán)重制約了其在水產(chǎn)飼料中的添加比例,尋找營(yíng)養(yǎng)豐富、價(jià)格低廉且可被魚(yú)類(lèi)高效利用的魚(yú)粉替代源格外重要。我國(guó)飼料原料種類(lèi)繁多,其中,植物蛋白原料相對(duì)廉價(jià)且容易獲取,受到廣泛關(guān)注。但不同原料間成分各異,品質(zhì)參差不齊,魚(yú)類(lèi)對(duì)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率差異較大。因此,測(cè)定魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料原料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率(ADC),不僅是評(píng)定魚(yú)類(lèi)對(duì)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率的有效舉措,也是編制合理的飼料配方不可或缺的環(huán)節(jié)[1,2]。
絲尾鳠(Hemibagrus wyckioides)隸屬于鲇形目、鲿科、鳠屬,別名長(zhǎng)胡子魚(yú),具有生長(zhǎng)迅速、肉味鮮美、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)且無(wú)同類(lèi)相殘等特點(diǎn)[3],廣泛受到養(yǎng)殖者和消費(fèi)者的喜愛(ài)。近年來(lái),隨著絲尾鳠人工繁育技術(shù)的突破,已在云南省諸多地區(qū)大面積推廣養(yǎng)殖,成為當(dāng)?shù)孛F的土著經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)。但是,由于缺乏絲尾鳠對(duì)飼料原料利用率的相關(guān)數(shù)據(jù),目前市場(chǎng)上尚無(wú)滿(mǎn)足其正常生長(zhǎng)發(fā)育需要的全價(jià)配合飼料,仍然以雜魚(yú)為主要食物或選用其他水產(chǎn)飼料替代。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)比分析絲尾鳠對(duì)魚(yú)粉、豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米蛋白粉、橡膠籽餅、次粉和麥麩等8 種常見(jiàn)飼料原料干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和總能的ADC,挑選出絲尾鳠能高效利用的飼料原料,以期為絲尾鳠優(yōu)質(zhì)環(huán)保型商業(yè)飼料的研發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
試驗(yàn)用8 種飼料原料分別為進(jìn)口魚(yú)粉(FM)、豆粕(SBM)、棉籽粕(CSM)、菜籽粕(RSM)、玉米蛋白粉(CGM)、橡膠籽餅(RSC)、次粉(WM)和麥麩(WB)。根據(jù)Cho 等[2]的方法,采用70%基礎(chǔ)飼料和30%待測(cè)飼料原料組成試驗(yàn)飼料,并添加0.5%三氧化二鉻(Cr2O3)為外源指示劑以測(cè)定絲尾鳠對(duì)上述8種飼料原料中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和總能的ADC?;A(chǔ)飼料配方見(jiàn)表1,飼料原料和試驗(yàn)飼料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及氨基酸組成見(jiàn)表2 和表3。
表2 飼料原料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸組成(干物質(zhì),%)Tab.2 Proximate and amino acid compositions of feed ingredients(dry matter,%)
所有飼料原料粉碎過(guò)60 目篩,將稱(chēng)好的各類(lèi)飼料原料,以少至多逐步混勻,加入適量水,用制粒機(jī)壓成顆粒飼料(φ=1 mm)。將飼料于40℃下鼓風(fēng)干燥12 h,然后放入-20℃冰箱中保存。
試驗(yàn)魚(yú)購(gòu)自云南省河口縣張明漁業(yè)有限公司,暫養(yǎng)在1.2 m×0.5 m×0.6 m 玻璃水族箱中2 周,每天飼喂2 次(7:00、17:00)商業(yè)飼料(TR-2242,北京北歐瑪生物科技有限公司提供)。試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。養(yǎng)殖試驗(yàn)期間用水為曝氣除氯的自來(lái)水,采用內(nèi)循環(huán)流水系統(tǒng)(循環(huán)系統(tǒng)中含機(jī)械和生物過(guò)濾介質(zhì)),水流速10 L/min,水溫維持在27~29℃之間,溶解氧≥6 mg/L,pH 6.8~7.5。24 h 連續(xù)充氧,自然光照。
絲尾鳠幼魚(yú)停食24 h 后開(kāi)始正式試驗(yàn)。挑選規(guī)格相當(dāng)(0.51±0.01)g、體表完好且充滿(mǎn)活力的試驗(yàn)魚(yú),隨機(jī)分配于27 個(gè)玻璃水族箱中,每個(gè)水箱32尾,共9 個(gè)處理組,每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)。每天7:00 和17:00 投喂,投喂量依魚(yú)攝食而定。試驗(yàn)開(kāi)始14 d 后開(kāi)始收集糞便,投喂結(jié)束0.5 h 后將魚(yú)缸內(nèi)殘餌清除,3~4 h 后用虹吸管采集糞便,采集2 周,養(yǎng)殖試驗(yàn)共持續(xù)4 周。將包膜完整的糞便于60℃烘箱內(nèi)烘干,放入-20℃冰柜中保存待測(cè)。
飼料原料、實(shí)驗(yàn)飼料及魚(yú)體常規(guī)成分的分析均采用AOAC(1990)標(biāo)準(zhǔn)方法。其中,水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、能量和氨基酸含量的測(cè)定參考李英等[4]方法。鉻含量采用GB/T13088-2006 法測(cè)定。
飼料干物質(zhì)ADC(%)=(1-飼料中Cr2O3含量/糞便中Cr2O3含量)×100。
飼料某成分ADC(%)=[1-(飼料中Cr2O3含量×糞便中某成分含量)/(糞便中Cr2O3×飼料中某成分含量)]×100。
原料某成分ADC(%)=試驗(yàn)飼料某成分ADC+(試驗(yàn)飼料某成分ADC-基礎(chǔ)飼料某成分ADC)×(0.7×基礎(chǔ)飼料某成分含量/0.3×待測(cè)原料某成分含量)。
其中,飼料某成分包括:粗蛋白質(zhì)、灰分和能量;原料某成分包括:干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和能量。三氧化二鉻、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和灰分含量表示為質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%);能量含量單位為kJ/g。
本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(n=3),以SPSS 17 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。選中“分析(A)”視圖下的“比較均值(M)”選項(xiàng),然后,選擇單因素方差分析(ANOVA)中的“多項(xiàng)式”進(jìn)行對(duì)比分析。如果各組數(shù)據(jù)存在顯著性差異(P<0.05),再用Tukey’s 方法進(jìn)行多重比較。
絲尾鳠對(duì)不同試驗(yàn)飼料與其對(duì)應(yīng)原料的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和能量ADC 變化趨勢(shì)基本一致,且不同處理組間營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)ADC 差異較大(表3、表4)。其中,不同飼料原料干物質(zhì)的ADC 變化在14.69%~86.87%之間,粗蛋白質(zhì)為43.40%~96.50%,灰分18.37%~85.58%,能量5.52%~84.54%。與試驗(yàn)飼料ADC 一樣,魚(yú)粉干物質(zhì)的ADC 最高,顯著高于玉米蛋白粉、棉籽粕、橡膠籽餅、次粉和麩皮(P<0.05),但與豆粕、菜籽粕差異不顯著(P>0.05);麩皮干物質(zhì)ADC 最低,與次粉、橡膠籽粕差異不顯著(P>0.05);干物質(zhì)ADC 由高至低依次為:魚(yú)粉>豆粕>菜籽粕>玉米蛋白粉>棉籽粕>橡膠籽餅>次粉>麩皮。不同飼料原料灰分ADC 與干物質(zhì)ADC 類(lèi)似,灰分ADC 由高至低依次為:魚(yú)粉>豆粕>菜籽粕>玉米蛋白粉>棉籽粕>橡膠籽餅>次粉>麩皮。絲尾鳠對(duì)橡膠籽餅粗蛋白質(zhì)ADC 最低,僅為43.40%,相反,魚(yú)粉最高,高達(dá)96.50%,除橡膠籽粕外,各原料粗蛋白ADC 無(wú)明顯差異(P>0.05);粗蛋白質(zhì)ADC 順序?yàn)椋呼~(yú)粉>棉籽粕>菜籽粕>次粉>麩皮>豆粕>玉米蛋白粉>橡膠籽粕。魚(yú)粉能量ADC 最高,顯著高于其他原料(P<0.05);反之,麩皮能量ADC 最低,僅為5.52%,顯著低于其他原料(P<0.05),能量ADC 順序?yàn)椋呼~(yú)粉>玉米蛋白粉>豆粕>橡膠籽餅>菜籽粕>棉籽粕>次粉>麩皮。
表3 試驗(yàn)飼料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分和氨基酸組成(干物質(zhì),%)Tab.3 Proximate and amino acid compositions of the test diets(dry matter,%)
表4 絲尾鳠對(duì)試驗(yàn)飼料中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和能量的表觀消化率Tab.4 Appear digestibility coefficient of dry matter,crude protein,ash and energy in different experimental diets by Asian red-tailed catfish Hemibagrus wyckioides
表5 絲尾鳠對(duì)8 種飼料原料中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、灰分和能量的表觀消化率Tab.5 Appear digestibility coefficient of dry matter,crude protein,ash and energy in different feed ingredients for Hemibagrus wyckioides
本實(shí)驗(yàn)飼料配制方法參考Cho 等[2],即30%待測(cè)飼料原料與70%基礎(chǔ)飼料配制成實(shí)驗(yàn)飼料。該方法可使實(shí)驗(yàn)飼料的營(yíng)養(yǎng)更加接近試驗(yàn)魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)需求,受到了眾多研究者的采納。Cho 等[2]所采用的計(jì)算公式:原料某成分ADC=(試驗(yàn)飼料某成分ADC-0.7×基礎(chǔ)飼料某成分ADC)/0.3,忽略了基礎(chǔ)飼料與原料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的差異對(duì)待測(cè)原料消化率的干擾,因此本研究采用Bureau 等[5]校正的公式:原料某成分ADC(%)=試驗(yàn)飼料某成分ADC+(試驗(yàn)飼料某成分ADC-基礎(chǔ)飼料某成分ADC)×(0.7×基礎(chǔ)飼料某成分含量/0.3×待測(cè)原料某成分含量)進(jìn)行計(jì)算,進(jìn)而確保了研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。
待測(cè)飼料原料ADC 決定試驗(yàn)飼料的ADC。本試驗(yàn)絲尾鳠對(duì)各試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)ADC 與其對(duì)應(yīng)原料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)ADC 的變化趨勢(shì)基本一致。干物質(zhì)ADC 反映了魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料原料總體的消化吸收水平[6]。其中,絲尾鳠對(duì)魚(yú)粉干物質(zhì)ADC(86.87%)最高,與同食性魚(yú)類(lèi)蘇氏圓腹(Pangasias sutchi)(85.8%)[7]、鳙(Aristichthys nobilis)(85.7%)[8]研究結(jié)果相近,但明顯高于泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)(65.9%)[9]和建鯉(Cyprinus carpio var.Jian)(56.15%)[10]對(duì)魚(yú)粉干物質(zhì)的ADC,低于羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus×O.aureus)(96.8%)[11]對(duì)魚(yú)粉干物質(zhì)的ADC。這種差異可能與試驗(yàn)魚(yú)的規(guī)格、養(yǎng)殖條件、魚(yú)粉類(lèi)型和魚(yú)粉加工工藝等差異有關(guān)。植物原料中豆粕(61.41%)和菜籽粕(59.63%)干物質(zhì)ADC 最高,其中,絲尾鳠對(duì)豆粕干物質(zhì)ADC 與蘇氏圓腹(59.1%)[7]和異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)(57.9%)[12]相近,對(duì)玉米蛋白粉、棉籽粕和麩皮ADC 明顯低于鳙(80.1%、81.2%、76.1%)。研究發(fā)現(xiàn),飼料中高含量的粗纖維和粗灰分可明顯抑制飼料原料干物質(zhì)的ADC[13]。本試驗(yàn)中,植物蛋白組粗纖維含量(豆粕2.27%、棉籽粕3.56%、菜籽粕4.04%、玉米蛋白粉1.13%、橡膠籽餅5.45%、次粉1.34%、麥麩2.54%)明顯高于魚(yú)粉組(0.60%)(表3)。這可能與絲尾鳠對(duì)植物原料干物質(zhì)表觀消化率較低有關(guān)。飼料原料干物質(zhì)ADC 還受蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率的制約[4]。本試驗(yàn)中,魚(yú)粉粗蛋白質(zhì)ADC 最高,這可能與魚(yú)粉干物質(zhì)ADC 最高有關(guān)。類(lèi)似地,由于豆粕、棉籽粕、菜籽粕和玉米蛋白粉含有較高的粗蛋白質(zhì)ADC,所以其可以保持較高的干物質(zhì)ADC;相反,橡膠籽粕組粗纖維最高,粗蛋白質(zhì)ADC 最低,所以絲尾鳠對(duì)橡膠籽粕干物質(zhì)ADC 較差。然而,次粉和麩皮組粗纖維含量較低,有較高的粗蛋白ADC,但是其干物質(zhì)ADC 卻最低,具體原因有待進(jìn)一步分析。
絲尾鳠對(duì)魚(yú)粉粗蛋白質(zhì)的ADC(96.50%)最高,與同食性魚(yú)類(lèi)荷包紅鯉(Cyprinus carpio Red var.vuyuanensis)(94.77%)[14]和羅非魚(yú)(99.4%)[12]相近。除橡膠籽粕外,絲尾鳠對(duì)豆粕(73.30%)、棉籽粕(82.58%)、菜籽粕(78.48%)、玉米蛋白粉(70.66%)、次粉(75.86%)和麩皮(74.13%)粗蛋白質(zhì)的ADC 較高,且與魚(yú)粉無(wú)顯著差異,說(shuō)明絲尾鳠對(duì)其蛋白質(zhì)利用率較高,是絲尾鳠理想的飼料蛋白源。與同食性魚(yú)類(lèi)相比,絲尾鳠對(duì)豆粕和菜粕粗蛋白質(zhì)的ADC明顯低于黃顙魚(yú)(Pelteobagrus fulvidraco)(92.625、91.13%)[15]和斑點(diǎn)叉尾(94.2%、91.41%)[16,17],而鳙對(duì)豆粕(84.4%)、菜粕(83.7%)、棉籽粕(85.3%)粗蛋白質(zhì)ADC 與本試驗(yàn)相近,這種差異可能與試驗(yàn)魚(yú)的規(guī)格、養(yǎng)殖條件、原料加工工藝以及魚(yú)類(lèi)對(duì)植物原料中抗?fàn)I養(yǎng)因子耐受力的差異有關(guān)。橡膠籽粕粗蛋白質(zhì)ADC 顯著低于其他植物原料,僅為43.30%,這可能與絲尾鳠對(duì)橡膠籽粕中氫氰酸和橡膠烴等抗?fàn)I養(yǎng)因子耐受能力較差有關(guān)[18],也可能是橡膠籽粕氨基酸平衡性較差(蛋氨酸和賴(lài)氨酸含量較低)所致[19]。飼料中添加30%橡膠籽粕可明顯抑制羅非魚(yú)和絲尾鳠腸道胰蛋白酶活性,進(jìn)而抑制蛋白質(zhì)消化能力[20,21];蛋白質(zhì)消化能力降低可能是絲尾鳠對(duì)橡膠籽粕粗蛋白ADC 最低的直接原因。
植物原料中含有大量的非淀粉多糖,魚(yú)類(lèi)缺乏相應(yīng)的消化酶,難以被魚(yú)類(lèi)利用,降低了其他能量物質(zhì)的利用率[22]。本試驗(yàn)中,絲尾鳠對(duì)魚(yú)粉的能量ADC(85.29%)最高,與異育銀鯽(86.3%)[12]和泥鰍(79.0%)[9]相近。絲尾鳠對(duì)植物飼料原料能量ADC明顯低于魚(yú)粉能量ADC,這可能是植物原料中較多的不可消化碳水化合物所致。植物原料中玉米蛋白粉能量ADC 最高,這可能與其粗蛋白質(zhì)含量最高,且粗纖維含量最低有關(guān);麩皮和次粉的能量ADC最低,與羅非魚(yú)[23]研究結(jié)果類(lèi)似;這可能與麩皮和次粉中其他能量物質(zhì)(粗蛋白與粗脂肪)含量較低有關(guān)。
絲尾鳠對(duì)魚(yú)粉的ADC 最高,植物原料中,豆粕、菜粕、棉籽粕和玉米蛋白粉ADC 較高;而對(duì)橡膠籽餅、次粉和麩皮ADC 較差。