豬附紅細(xì)胞體病研究進(jìn)展及診治

張博

（撫順市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧撫順 113006）

1 研究現(xiàn)狀

1.1 豬附紅細(xì)胞體病在國內(nèi)的研究情況

附紅細(xì)胞體病屬于一種人畜共患傳染病，是由附紅細(xì)胞體在動(dòng)物血液中附著在紅細(xì)胞的表面或游離在血漿中而引起的[1-3]。該病在當(dāng)今全世界較為常見。我國第一次發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞病是在江蘇，發(fā)病時(shí)會(huì)有很多的臨床癥狀出現(xiàn)，若發(fā)現(xiàn)不及時(shí)或者病情嚴(yán)重的會(huì)引發(fā)病畜死亡[4]。在我國發(fā)現(xiàn)第一例以后還陸續(xù)在許多地方出現(xiàn)此病。它是一種很嚴(yán)重的傳染病。然而最讓我們震驚的是“第一例人附紅細(xì)胞體病”[5]。這就更加要引起我們的重視。豬的附紅體對(duì)成豬的危害沒有仔豬和臨產(chǎn)懷孕豬大，仔豬嚴(yán)重的會(huì)死亡，孕豬則會(huì)難產(chǎn)，造成非常大的經(jīng)濟(jì)損失[6-8]。

1.2 豬附紅細(xì)胞體病的研究現(xiàn)狀

附紅細(xì)胞體病導(dǎo)致動(dòng)物生病的原因就是在血液中的附紅細(xì)胞體有一種功能改變細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞膜出現(xiàn)凹凸不平或者直接出現(xiàn)小洞，血液中的物質(zhì)進(jìn)入可以把壞了的細(xì)胞膜溶解和破裂，造成紅細(xì)胞溶解，產(chǎn)生溶血，相繼引發(fā)動(dòng)物機(jī)體紅細(xì)胞和血紅蛋白下降，并發(fā)生貧血、黃疸、電解質(zhì)失衡等臨床癥狀，甚至影響免疫功能。由于免疫系統(tǒng)遭到破壞，機(jī)體對(duì)外界的防御系統(tǒng)變?nèi)?，繼發(fā)其他傳染性疾病的概率增加，然而，附紅細(xì)胞體隱性感染不會(huì)造成凝血現(xiàn)象[9-11]。該病的傳播途徑很廣，感染率也很高，而且我們還沒有研究出有效控制和預(yù)防此病的藥物和設(shè)備，所以，對(duì)于附紅細(xì)胞病的研究對(duì)現(xiàn)在對(duì)未來都有很重要的意義。

1.3 豬附紅細(xì)胞體病的研究歷史

科學(xué)家在20 世紀(jì)20 年代發(fā)現(xiàn)了附紅細(xì)胞體感染病。在20 世紀(jì)30 年代，有研究者發(fā)現(xiàn)在嚙齒類血液里相繼發(fā)現(xiàn)了類球狀血蟲體和二分裂式的菌體[12,13]。Neitz 等于1934 年在綿羊血液樣本中觀察到不規(guī)則形態(tài)的寄生微生物，并將其命名為綿羊附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon ovis）。在同一年，有專家在牛體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了寄生于紅細(xì)胞表面的球狀微生物，并命名為溫氏血蟲體（E.wenyone）。后來有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了豬類邊蟲科病原體可以引起疾病，但豬類邊蟲科病原體與豬附紅細(xì)胞體的關(guān)系并沒有被發(fā)現(xiàn)[14]。研究發(fā)現(xiàn)，溫氏血蟲體是通過嚙齒類動(dòng)物之間互相傳遞來完成傳播的。1942 年，研究者們開始關(guān)注并進(jìn)一步研究溫氏血蟲體在小型嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)的傳播感染情況[13]。在這方面的研究比較深入“直至1950 年被命名為豬附紅細(xì)胞體”[15]。從20 世紀(jì)80 年代開始，隨著被附紅細(xì)胞體感染的人及動(dòng)物越來越多，人們更加關(guān)注該病。因而對(duì)此類病的研究也越來越多。

1.4 豬附紅細(xì)胞體病的傳染分布

1986 年附紅細(xì)胞蹄病在人感染方面得到了補(bǔ)充和完善[16]。隨后華修國等研究發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體同樣可以感染犬，這也是首次發(fā)現(xiàn)了犬感染的病例[17]。近年來，養(yǎng)殖業(yè)由于飼養(yǎng)管理以及飼養(yǎng)密度以及環(huán)境等相關(guān)原因?qū)е略摬”粓?bào)道的次數(shù)逐漸增多。目前，我國境內(nèi)有多個(gè)地區(qū)報(bào)道，發(fā)病種類包括人、豬、牛、羊、犬等多種動(dòng)物?！白顕?yán)重還是豬附紅細(xì)胞體的報(bào)道”[14]。直接威脅到養(yǎng)殖戶的收益和健康。因此，有很多學(xué)術(shù)上有一定成就的人對(duì)附紅細(xì)胞體病的重視程度不斷增強(qiáng)，這種病的分布特別廣，無地域性。匈牙利、尼日利亞、南斯拉夫、愛爾蘭等國家陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，已有30多個(gè)國家及地區(qū)發(fā)現(xiàn)該病，另外，在不同區(qū)域表現(xiàn)的癥狀也會(huì)有所不同。調(diào)查顯示，由于血吸蟲的分布具有地域性和季節(jié)性，因此，在特定季節(jié)與地域中吸血蟲對(duì)豬附紅細(xì)胞體的感染率有所影響[7]。

2 致病機(jī)理

2.1 自身免疫溶血性貧血

當(dāng)紅細(xì)胞膜被吸附后，會(huì)啟動(dòng)自身免疫系統(tǒng)從而產(chǎn)生抗體，稱為M 型冷凝集素。M 型冷凝集素會(huì)破壞自身的紅細(xì)胞，從而產(chǎn)生溶血，該反應(yīng)的發(fā)生跟溫度有關(guān)。除此之外，感染的紅細(xì)胞還會(huì)產(chǎn)生另一種免疫反應(yīng)，稱為H 型過敏反應(yīng)，該種反應(yīng)可以導(dǎo)致機(jī)體的紅細(xì)胞數(shù)量減少。血紅蛋白相對(duì)含量會(huì)變低，最后出現(xiàn)貧血。

2.2 紅細(xì)胞凝集溶解

凝集素會(huì)在紅細(xì)胞表面引起凝集反應(yīng)，其中溫度是影響凝集反應(yīng)的重要因素。在溫度較高時(shí)，它會(huì)從紅細(xì)胞表面脫離，不再吸附。在溫度低時(shí)“如在0℃時(shí)凝集素會(huì)一個(gè)挨一個(gè)地附著在紅細(xì)胞表面”[15,16]。身體中心與身體表面溫度不同，冷凝素的敏感程度也不一樣，由于體表溫度低，冷凝素作用弱，這樣微凝血和血栓就會(huì)在外周毛細(xì)血管中形成。由于血凝素的作用，血管中的血液流動(dòng)速度變低，從而發(fā)生凝血。以至于受感染的紅細(xì)胞數(shù)量會(huì)變多，造成血栓，或延長促凝血的時(shí)間。發(fā)生急性附紅細(xì)胞蹄病時(shí)，“凝時(shí)間變長，血栓增多，細(xì)胞脆性增加，細(xì)胞易出血破裂。但隱性感染不會(huì)造成凝血[18]。

2.3 免疫抑制

附紅細(xì)胞體附著在紅細(xì)胞表面導(dǎo)致紅細(xì)胞的細(xì)胞膜產(chǎn)生抗性，無法識(shí)別機(jī)體的免疫系統(tǒng)不，進(jìn)而被攻擊，導(dǎo)致細(xì)胞破裂，出現(xiàn)貧血現(xiàn)象。嚴(yán)重的會(huì)變成免疫抑制性疾病，血液中的免疫細(xì)胞會(huì)吞噬和清除血液中抗原，這個(gè)特性減少了脾臟的很多壓力。但如果切除動(dòng)物脾臟后，這個(gè)免疫功能就會(huì)消失，使病畜整個(gè)免疫系統(tǒng)出現(xiàn)缺陷，畜體免疫功能下降，被附紅細(xì)胞感染的紅細(xì)胞數(shù)目增多，提高了溶血性貧血黃疸的發(fā)生率。此外，急性的豬附紅細(xì)胞體感染會(huì)使機(jī)體凝血因子不發(fā)揮作用，導(dǎo)致血流不止。病原體的大量繁殖和代謝使畜體在糖分解方面的功能升高，體內(nèi)糖分變少，出現(xiàn)低血糖癥狀。

2.4 機(jī)體酸中毒

研究表明，患有附紅細(xì)胞體病的生豬常伴有酸中毒現(xiàn)象，在其血液中檢出大量的乳酸和丙酮酸[19,20]，從而使紅細(xì)胞攜氧能力下降，心臟、肺部由于缺氧導(dǎo)致病畜呼吸困難，這大部分是由于附紅細(xì)胞體吸附在紅細(xì)胞上需要消耗大量葡萄糖所造成的[21]。

3 臨床癥狀

感染生豬發(fā)病時(shí)間短則幾天長則幾年，急性感染的重癥生豬死亡率較高[22,23]。感染生豬主要表現(xiàn)為高熱、貧血、黃疸，一般在感染后3～20d 發(fā)病，感染一周后發(fā)病的最為常見。不同生長時(shí)期感染的生豬，癥狀有所不同。斷奶仔豬和閹割后的仔豬最容易感染，一般表現(xiàn)為體溫迅速升高，高達(dá)42℃，消化系統(tǒng)紊亂，有的出現(xiàn)黃疸，呼吸系統(tǒng)受損，呼吸困難，伴隨淋巴結(jié)腫大等免疫系統(tǒng)機(jī)能下降等癥狀[24-27]。

慢性附紅細(xì)胞體感染的生豬，精神沉郁，食欲廢絕，體態(tài)消瘦并伴有麻疹和斑疹癥狀。繁育母豬會(huì)出現(xiàn)繁殖障礙、流產(chǎn)、胎兒液化、胎停、死胎等臨床癥狀。一般情況下母豬會(huì)在生產(chǎn)后一周內(nèi)發(fā)病，隨之表現(xiàn)為乳汁質(zhì)量下降，乳房也會(huì)發(fā)生一定程度的水腫。育肥豬成長發(fā)育緩慢、免疫機(jī)能下降，進(jìn)而導(dǎo)致其容易感染其他疾病，如低血糖等營養(yǎng)代謝病、酸中毒等電解質(zhì)代謝失衡疾病。感染附紅細(xì)胞體后的生豬通常會(huì)出現(xiàn)貧血癥狀，并伴有食欲缺乏、厭食和消化不良等消化系統(tǒng)疾病。

4 診斷

4.1 直接血液涂片鏡檢

附紅細(xì)胞體病一般通過鏡檢來進(jìn)行診斷。采集患病生豬靜脈血樣品，取全血一滴并加入0.9%生理鹽水，置于載玻片上，在顯微鏡下觀察紅細(xì)胞形態(tài)是否出現(xiàn)異常。視野下可見球狀、桿狀或點(diǎn)狀蟲體，紅細(xì)胞呈放射狀、星狀等不規(guī)則形態(tài)。該方法可以直觀辨別被檢血液的健康狀態(tài)，但有專家表明，直接血液涂片鏡檢的方法特異敏感性較低[28-30]。

4.2 電鏡檢查

在顯微鏡下可觀察到桿狀或多個(gè)星狀、團(tuán)狀的附紅細(xì)胞體寄生于細(xì)胞表面。紅細(xì)胞上出現(xiàn)凹陷，是因?yàn)楦郊t細(xì)胞附著導(dǎo)致的，有的甚至在細(xì)胞膜上形成孔洞。

電鏡下，感染的紅細(xì)胞形狀為不規(guī)則的圓形小體，細(xì)胞膜上有高低不平的突起。在5600 倍的顯微鏡下還看見直徑為0.3～1.5nm 球形細(xì)胞體。

4.3 血清學(xué)診斷方法

診斷附紅細(xì)胞體的血清學(xué)方法主要通過抗原抗體反應(yīng)開展血凝試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試驗(yàn)以及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。血清學(xué)診斷具有試驗(yàn)操作簡單嗎，試驗(yàn)結(jié)果判定效率較高的特點(diǎn)，但由于附紅細(xì)胞體的收集率低，方法因此抗原制備困難以及抗原標(biāo)準(zhǔn)化的問題。

4.4 PCR 方法

PCR 診斷方法是將微量的附紅細(xì)胞體的DNA 大量擴(kuò)增，從而得到目的基因的擴(kuò)增片段，一般選擇16SrRNA 基因和MSGL 基因。通過片段的擴(kuò)增量來判斷是否發(fā)生附紅細(xì)胞體感染。PCR 診斷方法敏感性和特異性較高，可以定性附紅細(xì)胞體的感染情況，并且具有檢測(cè)速度快、過程簡潔、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。

5 預(yù)防治療

治療豬附紅細(xì)胞體的藥物的種類較多，現(xiàn)在多數(shù)應(yīng)用貝尼爾、小檗堿、土霉素、鹽酸咪唑苯脲等。雖沒有特異性疫苗進(jìn)行防疫，但可以采用一定的預(yù)防措施，降低本病發(fā)病率，一是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高動(dòng)物免疫力，減少對(duì)動(dòng)物不利因素的出現(xiàn)；二是溫度控制，豬場(chǎng)要保持溫度的恒定和空氣的流通；三是殺滅蚊蟲，在夏季由于蚊子、蒼蠅大量繁殖，要十分注意飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生，一般會(huì)通過切斷蚊蟲叮咬傳染的途徑，從而降低通過吸血昆蟲來傳播本病的機(jī)會(huì)。四是消毒滅菌，在衛(wèi)生防疫時(shí)要注意衛(wèi)生，對(duì)針頭進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

6 小結(jié)

該文通過對(duì)豬附紅細(xì)胞體病的論述，歸納總結(jié)了該病的主要特點(diǎn)。在臨床上對(duì)患有附紅細(xì)胞體病的生豬一般采用抗生素進(jìn)行治療，但近年來抗生素的濫用和過度使用對(duì)生豬產(chǎn)生一定的耐藥性，而抗生素殘留對(duì)人類公共衛(wèi)生安全造成了嚴(yán)重威脅。豬附紅細(xì)胞體病的預(yù)防，尤其是相關(guān)免疫抗體研制會(huì)很大程度上減少該病的發(fā)生，因此，豬附紅細(xì)胞體病的疫苗研制是預(yù)防該病的關(guān)鍵，也是我們目前深入探索的目標(biāo)。