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    濕熱處理對糯米粉血糖生成指數(shù)值及相關(guān)指標(biāo)的影響

    2023-01-03 07:14:48王東旭郭美玲劉一銳郭元新
    食品工業(yè)科技 2023年1期
    關(guān)鍵詞:糯米粉直鏈水解

    王東旭,郭美玲,劉一銳,郭 宇,葉 華,郭元新

    (江蘇科技大學(xué)糧食學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江 212100)

    糯米作為稻米的一個品種,約含蛋白質(zhì)9%、脂肪1%、碳水化合物75%,并含有鈣、磷、鐵、B族維生素等多種營養(yǎng)物質(zhì),可作為食療藥補(bǔ)的輔料,具有暖胃止寒、補(bǔ)氣養(yǎng)血等功效,深受廣大消費(fèi)者喜愛[1-2]。糯米淀粉中支鏈淀粉含量達(dá)95%以上,有獨特的口感和黏性,常被磨成糯米粉制作各種食品,如麻球、糍粑、湯圓、年糕等[3]。糯米制品在人體內(nèi)消化速度快,血糖反應(yīng)高,是典型的高血糖生成指數(shù)(glycemic index,GI)值食品[4-5]。所以高血糖患者、幼童及老人等特殊人群不宜過多食用糯米制品,這嚴(yán)重限制了糯米的應(yīng)用范圍[6-7]。如何在糯米粉制備過程中降低其GI值,已成為近年來糯米高值化開發(fā)領(lǐng)域的研究熱點。

    濕熱處理是一種物理改性淀粉的方法,可以使淀粉的結(jié)構(gòu)及功能特性發(fā)生有利的變化[8]。周顯青等[9]分析了不同制粉工藝對糯米粉理化性質(zhì)、熱力學(xué)特性及質(zhì)構(gòu)的差異,發(fā)現(xiàn)濕熱處理的糯米粉品質(zhì)最好。楊風(fēng)等[10]研究發(fā)現(xiàn)利用濕熱處理會明顯降低直鏈淀粉浸出值及淀粉顆粒膨脹度,淀粉顆粒將更耐高溫,剪切力更加穩(wěn)定。對淀粉含量比較高的山藥、大米進(jìn)行濕熱處理時,其顆粒外形變化不顯著[11],而對玉米和甘薯進(jìn)行濕熱處理時,其淀粉結(jié)晶度增加[12],說明不同類型的淀粉進(jìn)行濕熱處理,其結(jié)構(gòu)變化不同。這可能是因為在對淀粉進(jìn)行濕熱處理時,水分子可以破壞淀粉結(jié)晶結(jié)構(gòu),使其分子鏈發(fā)生移動,而無定形區(qū)的淀粉分子更易重排產(chǎn)生更多的結(jié)晶[13]。濕熱處理參數(shù)對糯米粉血糖生成指數(shù)值及相關(guān)指標(biāo)的影響研究還未見報道。直鏈淀粉含量測定方便,且與抗消化淀粉(resistant starch,RS)顯著正相關(guān),直鏈淀粉含量越高,對酶的抗性越強(qiáng),酶對淀粉的水解就越慢,淀粉的GI值則越低[14]。采用直連淀粉的含量間接反應(yīng)糯米粉GI值的變化,可以大大減少實驗量。因此本研究以水分含量、溫度、處理時間為考察因素,直鏈淀粉含量為指標(biāo),通過Box-Behnken響應(yīng)面法確定其最佳濕熱處理條件;經(jīng)過響應(yīng)面優(yōu)化工藝所得的糯米粉,將其和普通糯米粉(WR)、僅進(jìn)行酶解后的糯米粉(ER)進(jìn)行對比研究,分別進(jìn)行消化性能測定、水解指數(shù)(hydrolysis index, HI)及GI值測定,驗證了濕熱處理對糯米粉GI值的降低效果,為低GI糯米粉的開發(fā)提供可靠的數(shù)據(jù)資料。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    供試粳糯米(鎮(zhèn)糯20) 2021年2月由常州金壇江南制粉有限公司出品;中性蛋白酶(50 U/mg)、淀粉葡萄糖苷酶(10×104U/mL)、3,5-二硝基水楊酸

    上海麥克林生化科技有限公司;豬胰腺α-淀粉酶(2000 U/g) 上海阿拉丁生化科技股份有限公司;碘化鉀、氫氧化鈉、95%乙醇、乙酸(冰醋酸)、無水乙醇、無水亞硫酸鈉、無水葡萄糖、苯酚、酒石酸鉀鈉、無水乙酸鈉 分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)樣品 源葉生物科技有限公司。

    TU-1810紫外可見分光光度計 屹譜儀器制造(上海)有限公司;DHG-9240A電熱鼓風(fēng)干燥箱、HWS-26電熱恒溫水浴鍋 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;DF-101T集熱式磁力攪拌器 上海力辰邦西儀器科技有限公司;5810R高速冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf公司;PHSJ-4F pH計 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;MB25谷物水分測定儀 寧波奧克斯集團(tuán)有限公司;L18-Y22高速破壁調(diào)理機(jī) 九陽股份有限公司。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 糯米粉的制備 參考前期的研究成果[15],將糯米和純水按1:3(w/v)在45 ℃條件下浸泡1 h,隨后利用破壁調(diào)理機(jī)制成米漿,使用25%稀鹽酸和20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.5后,按4000 U/g(以大米質(zhì)量計算)的比例加入中性蛋白酶,在50 ℃水浴條件下按160 r/min攪拌3 h進(jìn)行酶解反應(yīng),而后利用4000 r/min離心10 min,取出沉淀物,通過調(diào)節(jié)烘干時間,利用水分測定儀分別獲得10%、15%、20%、25%和30%水分含量的糯米粉樣品,研磨后過100目篩,密封后置于4 ℃冰箱中平衡水分24 h備用。

    1.2.2 糯米粉濕熱處理的單因素實驗

    1.2.2.1 不同水分含量對直鏈淀粉含量的影響 按1.2.1糯米粉的制備方法操作得到備用樣品,實驗時將樣品放入溫度110 °C的鼓風(fēng)干燥箱中(下同)處理2 h,研究糯米粉水分含量(10%、15%、20%、25%和30%)對直鏈淀粉含量的影響,并對比未處理糯米粉(WR)和不同水分含量濕熱處理樣品。

    1.2.2.2 濕熱處理溫度對直鏈淀粉含量的影響 按1.2.1糯米粉的制備方法操作得到備用樣品,固定糯米粉水分含量為20%,處理時間為2 h,研究濕熱處理溫度(90、100、110、120和130 °C)對直鏈淀粉含量及體外消化特性的影響。

    1.2.2.3 濕熱處理時間對直鏈淀粉含量的影響 按1.2.1糯米粉的制備方法操作,固定糯米粉水分含量為20%,處理溫度110 °C,研究濕熱處理時間(1、2、3、4和5 h)對直鏈淀粉含量及體外消化特性的影響。

    1.2.3 糯米粉濕熱處理條件的響應(yīng)面試驗設(shè)計 為選擇最佳試驗條件,以水分含量、處理溫度、處理時間為獨立變量,糯米粉的直鏈淀粉含量為響應(yīng)變量,采用Design Export 8.0.6的Box-Behnken響應(yīng)面方法(RSM)優(yōu)化過程。各組平行3次,響應(yīng)面試驗因素和水平見表1。

    表 1 響應(yīng)面因素水平設(shè)計Table 1 Response surface factor and level coding table

    1.2.4 不同處理糯米粉消化性能、HI指數(shù)及GI值的比較 將經(jīng)過響應(yīng)面優(yōu)化工藝所得的糯米粉命名為HMT-R(濕熱和酶解聯(lián)合處理),并和普通糯米粉(WR)、僅進(jìn)行酶解后的糯米粉(ER)進(jìn)行對比研究,處理方法同1.2.1,分別進(jìn)行消化性能、HI指數(shù)及GI值的測定,進(jìn)而對比濕熱處理對糯米粉GI值及理化性質(zhì)的影響。

    1.2.4.1 直鏈淀粉含量的測定 參考王肇慈[16]的碘比色法,稱取40±0.2 mg直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)樣品,加入1 mL的95%乙醇和9 mL的NaOH(1 mol/L)溶液,在沸水浴中糊化10 min,冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶定容,分別吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL上述溶液于100 mL容量瓶中,分別加入醋酸(1 mol/L)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL,而后分別加入2 mL碘液定容。在室溫下靜置30 min后,在620 nm處測定溶液的吸光度,繪制直鏈淀粉的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.2371x+0.0234(R2=0.9965)。準(zhǔn)確稱取100±0.2 mg淀粉樣品按上述步驟利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算其直鏈淀粉含量。

    1.2.4.2 糯米粉消化性能的測定 淀粉根據(jù)其生物可利用性被分為三類[17]:快速消化淀粉(rapidly digestible starch,RDS)是指在20 min內(nèi)能在小腸內(nèi)被迅速消化吸收的淀粉;慢消化淀粉(slowly digestible starch,SDS)指在20~120 min內(nèi)能在小腸被完全吸收但吸收速度比較慢的淀粉;抗性淀粉(resistant starch,RS)是指120 min內(nèi)未被人體小腸消化。吸收的淀粉參考ENGLYST等[18]的測定方法,稱取淀粉樣品200 mg加入15 mL 0.2 moL的醋酸鈉緩沖溶液(pH5.2),沸水浴處理30 min,然后向樣品中加入5 mL混合酶液(1 mL 15 U/mL淀粉葡萄糖苷酶和4 mL 290 U/mL豬胰腺α-淀粉酶)于37 ℃水浴下進(jìn)行酶解,測定吸光度值并計算葡萄糖含量,并帶入公式計算營養(yǎng)片段RDS、SDS和RS的含量。其中葡萄糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=0.9055x+0.0163(R2=0.9988)。具體計算公式如下:

    式中:G20:淀粉樣品酶水解20 min后產(chǎn)生的葡萄糖含量(mg);FG:酶水解前淀粉樣品中游離的葡萄糖含量(mg);G120:淀粉樣品酶水解120 min后產(chǎn)生的葡萄糖含量(mg);TS:總淀粉干基重(mg)。

    1.2.4.3 糯米粉GI值的測定 參照王東旭等[15]和ENGLYST等[17]的方法,分別在水解時間為10、20、40、60、90、120、180 min時取樣,取樣時間點的葡萄糖含量(Gt)可以由葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出,并根據(jù)以下公式計算水解率(%)并繪制出水解曲線。以白面包為參考標(biāo)準(zhǔn),定義白面包的水解率為100,按照GI與HI的關(guān)系式,計算出樣品的GI值。

    HI=樣品消化(水解)曲線下面積/參比標(biāo)準(zhǔn)樣品消化(水解)曲線下面積×100

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    2 結(jié)果與分析

    2.1 水分含量對糯米粉直鏈淀粉含量及消化特性的影響

    如圖1所示,直鏈淀粉含量隨水分含量的增大而增大。在一定范圍內(nèi),增大水分含量,因高溫狀態(tài)下水分使淀粉結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使直鏈淀粉含量增加[19]。隨著濕熱處理水分含量進(jìn)一步增加到20%后,直鏈淀粉含量增加緩慢。水分含量在濕熱處理過程中對糯米粉的消化性能有較大影響,可不同程度提高糯米粉的抗消化性能。在10%~25%水分含量范圍內(nèi),隨著水分含量增加,SDS+RS的含量上升,水分含量在25%時,RS含量達(dá)到峰值53.72%±0.86%,比普通糯米粉(WR)RS含量增加27.54%。這種現(xiàn)象產(chǎn)生的原因可能是隨著水分含量的增加,運(yùn)動到淀粉顆粒內(nèi)部的數(shù)量較多,在熱力作用下能更大程度地破壞氫鍵,使得分子鏈的束縛不如之前緊密而發(fā)生斷裂,導(dǎo)致淀粉酶的作用受阻[18]。綜合考慮,選取水分含量為15%~25%進(jìn)行響應(yīng)面法優(yōu)化試驗。

    2.2 濕熱處理時間對糯米粉直鏈淀粉含量及消化特性的影響

    從濕熱和酶解聯(lián)合處理(圖2)可見,直鏈淀粉含量隨處理時間的增大而增大。在1~3 h之間糯米粉直鏈淀粉含量增加最快,處理時間3 h時達(dá)到3.05%±0.08%,是處理1 h時含量的1.20倍,繼續(xù)增加時間,糯米粉直鏈淀粉含量趨于平緩。隨著處理時間的延長,SDS+RS含量增加,RS含量在處理3 h后變化平緩,且4 h后有降低趨勢。適當(dāng)延長濕熱處理時間有利于淀粉分子間重排形成新的有序化結(jié)構(gòu),這與HOOVER等[20]報道的結(jié)果一致。綜合考慮成本及生產(chǎn)的可控制性,選取處理時間1~3 h進(jìn)行響應(yīng)面法優(yōu)化試驗。

    圖 1 水分含量對糯米粉直鏈淀粉含量和消化特性的影響Fig.1 Effects of moisture content on amylose content and the digestibility of glutinous rice flour

    2.3 濕熱處理溫度對糯米粉直鏈淀粉含量及消化特性的影響

    從圖3可見,糯米粉中直鏈淀粉的含量隨著溫度的升高呈增加趨勢。在110 ℃的溫度下進(jìn)行HMT處理后的糯米粉直鏈淀粉含量達(dá)到3.18%±0.19%,比90℃處理組糯米粉直鏈淀粉含量(2.42%±0.13%)升高了31.40%。再升高處理溫度,直鏈淀粉含量變化緩慢,且在溫度達(dá)到120和130 °C時,糯米粉色澤發(fā)黃并發(fā)生結(jié)塊現(xiàn)象,這可能是因為溫度過高會導(dǎo)致淀粉在處理過程中產(chǎn)生局部糊化。對消化特性而言,相比于普通糯米粉(WR),不同濕熱處理溫度對糯米粉的RS含量有較大影響,RS含量在溫度為110 ℃時達(dá)到最大值55.38%±0.67%,表明在濕熱處理過程中糯米粉中的RDS逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)镽S。溫度高于110 ℃后,RS含量變化平緩且有降低趨勢。有研究表明熱處理破壞了淀粉的顆粒、片層、分子秩序,從而經(jīng)分子重排得到更加有序的結(jié)構(gòu)增強(qiáng)了熱穩(wěn)定性[21]。綜合考慮,選取處理溫度100~120 ℃進(jìn)行響應(yīng)面法優(yōu)化試驗。

    圖 2 濕熱處理時間對糯米粉直鏈淀粉含量和消化特性的影響Fig.2 Effects of treatment time on amylose content and the digestibility of glutinous rice flour

    圖 3 濕熱處理溫度對糯米粉直鏈淀粉含量和消化特性的影響Fig.3 Effects of treatment temperature on amylose content and the digestibility of glutinous rice flour

    圖 4 濕熱處理時間與濕熱處理溫度相互作用的等高線圖與響應(yīng)面圖Fig.4 Contour map and response surface map of the interaction between time and temperature of heat-moisture treatment

    圖 5 濕熱處理時間和水分含量相互作用的等高線圖與響應(yīng)面圖Fig.5 Contour map and response surface map of the interaction between time and moisture content of heat-moisture treatment

    2.4 響應(yīng)面分析濕熱處理工藝試驗結(jié)果

    2.4.1 響應(yīng)面法優(yōu)化試驗設(shè)計及結(jié)果 應(yīng)用Design Expert 8.0.6軟件進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計。經(jīng)回歸分析得擬合方程為:y=3.66+0.23A+0.28B+0.26C+0.020AB-0.12AC-0.22BC-0.41A2-0.22B2-0.56C2。結(jié)果及擬合方程預(yù)測值如表2所示。

    表 2 響應(yīng)面試驗方案與結(jié)果Table 2 Response surface test scheme and results

    2.4.2 方差分析結(jié)果 如表3所示,回歸模型極顯著(P<0.0001),失擬項不顯著(P=0.0873>0.05),說明該回歸模型合理,方程能夠反映糯米粉濕熱處理后的直鏈淀粉含量與各因素之間的關(guān)系;R2=0.9932,R2Adj=0.9844,即該模型能解釋98.44%,該模型預(yù)測值和實際值擬合度高。A、B、C、A2、B2、C2、AC、BC對應(yīng)的P值小于0.01,影響極其顯著,對糯米粉濕熱處理后的直鏈淀粉含量的影響大;由F值的大小可知,3個因素對濕熱處理后的糯米粉的直鏈淀粉含量影響從高到低依次為:濕熱處理溫度、水分含量、濕熱處理時間。

    表 3 響應(yīng)面方差分析Table 3 Response surface test variance analysis

    2.4.3 因素交互作用 經(jīng)回歸方程生成等高線和響應(yīng)面圖見圖4~圖6。在響應(yīng)面圖中,曲線變化越陡峭,說明交互影響越顯著。濕熱處理溫度不變時,濕熱處理時間與水分含量等高線的形狀呈橢圓形,等高線排列較為密集,其交互作用極顯著(P=0.0073<0.01)。濕熱處理時間一定時,濕熱處理溫度與水分含量的等高線形狀為橢圓形,等高線扁平,其交互作用極顯著(P=0.0003<0.01)。因此AC、BC交互作用極顯著(P<0.01),這與F值結(jié)果一致。

    圖 6 水分含量與濕熱處理溫度相互作用的等高線圖與響應(yīng)面圖Fig.6 Contour map and response surface map of the interaction between moisture content and temperature of heat-moisture treatment

    2.4.4 驗證實驗 經(jīng)軟件分析,該模型得到的最優(yōu)條件為:水分含量為20.40%、濕熱處理時間為2.29 h、濕熱處理溫度為116.16 ℃,且糯米粉直鏈淀粉含量理論值為3.62%??紤]到實際操作的可能性,將實驗條件修正為:水分含量為20%、濕熱處理時間為2.3 h、濕熱處理溫度為116 ℃。在該修正條件下進(jìn)行3次提取實驗,平均直鏈淀粉含量為3.62%±0.01%,接近理論值,表明該數(shù)學(xué)模型可用于優(yōu)化糯米粉濕熱處理過程。

    2.5 濕熱處理優(yōu)化條件下糯米粉的體外消化特性

    通過最佳濕熱處理工藝條件得到的糯米粉樣品,進(jìn)行體外消化實驗,結(jié)果見圖7,濕熱和酶解聯(lián)合處理糯米粉(HMT-R)中的RS含量明顯高于普通糯米粉(WR)和酶解糯米粉(ER),其含量比普通糯米粉高出30.46%,而RSD含量卻是比普通糯米粉減少了31.23%。這可能是由于淀粉在熱處理過程中被糊化,發(fā)生了晶體結(jié)構(gòu)的破壞和分子有序結(jié)構(gòu)的破壞,這使得淀粉更容易被淀粉酶消化[22-23]。因此,濕熱處理促使了支鏈淀粉向直鏈淀粉的轉(zhuǎn)變,增加了糯米粉中直鏈淀粉的含量,同時也提高了糯米粉的抗消化性。

    圖 7 不同處理下糯米粉的體外消化特性比較Fig.7 Comparison of in vitro digestion characteristics of glutinous rice flour under different treatments

    2.6 濕熱處理優(yōu)化條件下糯米粉的HI值及GI值

    分別將普通糯米粉(WR)、酶解糯米粉(ER)和濕熱和酶解聯(lián)合處理糯米粉(HMT-R)進(jìn)行水解并進(jìn)行HI指數(shù)及GI值的測定,結(jié)果見圖8。實驗表明,HMT-R樣品的HI指數(shù)及GI值最低,二者的變化趨勢一致。相比于WR樣品,GI值從102.3降低至71.5,降低了30.1%。這說明糯米粉經(jīng)酶解后再進(jìn)行濕熱處理,糯米粉中的RS含量增加,使得糯米粉的抗消化性增加,降低了糯米粉的GI值。糯米粉在經(jīng)過酶解后能夠降低糯米粉的水解率,使其不易被消化,而再進(jìn)一步濕熱處理后水解率更低,糯米粉的抗消化能力增強(qiáng),使其水解更慢,更不易被淀粉酶所水解[24-25]。

    圖 8 不同處理糯米粉的HI指數(shù)和GI值比較Fig.8 Comparison of HI index and GI value of glutinous rice flour with different treatments

    3 結(jié)論

    本研究利用單因素結(jié)合響應(yīng)面試驗優(yōu)化糯米粉濕熱處理工藝。研究表明,經(jīng)Box-Behnken設(shè)計試驗得到的回歸方程極顯著(P<0.0001),失擬項不顯著(P>0.05),回歸方程擬合度好。在水分含量為20%、濕熱處理時間為2.3 h、濕熱處理溫度為116 ℃條件下,糯米粉直鏈淀粉含量最高(3.62%±0.01%),實測值與理論值較為接近,表明該模型可用于優(yōu)化糯米粉濕熱處理工藝。將優(yōu)化后的糯米粉與其它處理的體外消化特性、HI值及GI值進(jìn)行了比較,得出最優(yōu)條件下制備的糯米粉RDS含量下降,SDS和RS含量上升;水解指數(shù)(HI)明顯降低,同時GI值降低了30.1%,本研究為低GI糯米粉的進(jìn)一步研發(fā)提供了實驗思路,為其進(jìn)一步研究提供了一定的理論基礎(chǔ)。糯米粉為高血糖食物,GI值一般在98以上。濕熱處理可以改變糯米淀粉的結(jié)構(gòu)及消化特性,對降低糯米粉的GI值有顯著作用,但對其影響糯米粉GI值的作用機(jī)理尚不完全清楚,對其進(jìn)行工業(yè)化應(yīng)用還需要生產(chǎn)實踐的檢驗。

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