甲狀腺疾病動物模型的研究進展

夏宗霄,劉海鵬,張艷嬌,范 源

(1.云南中醫(yī)藥大學中藥學院,昆明 650500;2.云南中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院,昆明 650216)

目前全球范圍內(nèi)甲狀腺疾病患病率顯著增加,甲狀腺疾病在臨床上主要分為甲狀腺功能減退癥(甲減)、甲狀腺功能亢進癥(甲亢)、橋本甲狀腺炎(hashimoto’s thyroiditis,HT)、甲狀腺癌等,但其具體的發(fā)病機理仍尚未明確。甲狀腺疾病作為臨床上常見的內(nèi)分泌疾病,其疾病的發(fā)生、發(fā)展與諸多因素有關,目前公認的主要疾病影響包括年齡、性別、吸煙、碘缺乏或碘過量、應激、遺傳、自身免疫、環(huán)境等因素[1]。具調(diào)查統(tǒng)計甲減和亞臨床甲減的患病率分別約為0.1%～2%和4%～10%[2],其中甲減患者的甲狀腺激素分泌與合成不足,亞臨床甲減患者的甲狀腺激素在正常范圍,但促甲狀腺激素含量偏高,且會出現(xiàn)甲狀腺腫大等癥狀。在歐洲和美國,甲亢的患病率大致相似分別為0.7%和0.5%[3],亞甲亢的患病率為0.4%～11%不等[4],其中甲亢患者甲狀腺激素分泌與合成偏高,而亞甲亢患者甲狀腺激素在正常范圍,但促甲狀腺激素含量偏低。HT是一種常見的自身免疫性甲狀腺疾病(autoimmune thyroid disease,AITD),AITD是一種甲狀腺組織自身免疫紊亂的疾病,臨床上表現(xiàn)為濾泡細胞萎縮、淋巴細胞浸潤、甲狀腺腫和纖維化。據(jù)統(tǒng)計AITD女性發(fā)病率為每1千人3.5～5例,而男性發(fā)病率為每1千人0.6～1例[5]。過去30年里,全球甲狀腺癌的發(fā)病率顯著增加,由1975年每10萬人5例增加到2015年每10萬人15例,特別是乳頭狀甲狀腺癌,約占甲狀腺癌的85%[6]。目前關于甲狀腺疾病動物模型研究較少,對甲狀腺疾病的造模還處于一個逐步成熟的階段,關于甲狀腺疾病的病因、病理等尚未完全明確。因此建立重復性高、穩(wěn)定性好的甲狀腺疾病動物模型,對深入研究甲狀腺疾病的發(fā)病機制以及早期的干預有著十分重要的意義。本文在查閱大量文獻的同時結合團隊前期造模經(jīng)驗對甲狀腺疾病動物模型做一總結歸納,以期為相關實驗的開展提供理論依據(jù)。

1 甲狀腺功能減退(甲減)模型的建立

1.1 藥物誘導的甲減模型

通常使用丙硫氧嘧啶(PTU)或甲巰咪唑(MMI)等抗甲狀腺藥物,減少機體甲狀腺激素的合成建立甲減模型。Sun等[7]喂養(yǎng)雌性SD大鼠含PTU(2mg/(kg·d))的飲用水6周,觀測到大鼠行動遲緩且毛發(fā)變成棕黃色,用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測其血清水平,與正常組相比,甲減組血清T3、T4偏低,TSH偏高(P＜0.01)。Li等[8]喂養(yǎng)雄性Wistar大鼠甲減組含MMI的飲用水(60mg/(kg·d))12周,測得血清T3、T4顯著降低(P＜0.001),TSH升高(P＜0.01)。

藥物誘導甲減是最常用的造模方法,且造模難度較小,成功率高。但若想要持續(xù)維持甲減狀態(tài),需連續(xù)不間斷給予促甲狀腺素藥物維持高激素水平,否則藥物會在體內(nèi)逐漸消除使機體功能恢復正常。

1.2 甲狀腺切除術甲減模型

Lee等[9]將6周齡雄性SD大鼠分別進行甲狀腺切除手術和垂體切除手術,并設立相同數(shù)量的假手術組。經(jīng)過1周的手術適應期后,用ELISA法檢測其血清水平,發(fā)現(xiàn)甲狀腺切除組與其假手術相比血清T3、T4降低,TSH升高(P＜0.05);垂體切除組與其假手術相比血清T3、T4、TSH均有所降低(P＜0.05)。Li等[8]對雄性Wistar大鼠進行甲狀腺切除手術,測得血清T3、T4顯著降低(P＜0.01),TSH升高(P＜0.05)。

用手術切除甲狀腺造模比藥物誘導耗時更短,但難度較高,手術不當容易造成大鼠死亡,若甲狀腺切除不完全會對血清測定結果造成影響。

1.3 低碘誘導甲減模型

Alayoubi等[10]將SD大鼠隨機分為兩組,低碘組給予碘缺乏鼠糧(含20μg/kg碘化物),對照組給予碘正常鼠糧(含200μg/kg碘化物),喂養(yǎng)觀察17個月。1個月后測得碘缺乏組血清T3、T4水平顯著降低(P＜0.001),在10月時達到最低值,血清TSH則呈上升趨勢,在9～12個月時達到最大值(P＜0.001)。因SD大鼠處于生長期,其甲狀腺重量總是與年齡和體重呈正比,故采取超聲三維成像來測量甲狀腺體積占體重的比率,取平均值。經(jīng)計算發(fā)現(xiàn),在第8個月和第14個月時,該數(shù)值是對照組的兩倍(P＜0.05)。Hu等[11]將BALB/c小鼠隨機分為兩組:低碘組給予碘濃度為20～40mg/kg的低碘飼料,對照組給予碘濃度為300mg/kg的標準飼料,飼養(yǎng)觀察3個月。采用ELISA法測得低碘組血清T3、T4水平顯著降低,TSH升高(P＜0.001)。用HE染色法檢測缺碘小鼠的甲狀腺組織,發(fā)現(xiàn)濾泡細胞腫大并呈柱狀,免疫組織化學結果顯示甲狀腺激素轉運體8(monocarboxylate transporter8,MCT8)在甲狀腺濾泡細胞胞漿中有較高的表達。經(jīng)實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測,低碘組MTC8mRNA表達明顯增高,為對照組的1.36倍(P＜0.01)。

低碘建立甲減模型較為簡單,但用時較長。需要注意的是不能完全除碘,因為提供絕對不含碘的鼠糧會直接影響大鼠的正常發(fā)育以及器官功能,且大鼠可能無法在研究期間存活。

2 甲狀腺功能亢進(甲亢)模型的建立

通常使用左甲狀腺素等藥物提高機體甲狀腺激素的合成,誘導甲亢模型的產(chǎn)生。Jeddi等[12]將雄性Wistar大鼠隨機分為甲亢組和對照組。在甲亢組的飲用水中添加左甲狀腺素(12mg/L),對照組給予蒸餾水,連續(xù)喂養(yǎng)21d。結果表明,甲亢組血清T3、T4水平顯著升高,TSH顯著降低(P＜0.001)。Venediktova等[13]對甲亢組雄性Wistar大鼠進行腹腔注射左甲狀腺素(100μg/100g),共計5d;對照組注射同等體積的生理鹽水。發(fā)現(xiàn)甲亢組血清T3和T4分別比對照組增加了3倍和4倍(P＜0.05)。劉樹民等[14]分別對雌性SD大鼠灌胃左甲狀腺素以及尾靜脈注射小腸結腸炎耶爾森氏菌進行甲亢造模,發(fā)現(xiàn)左甲狀腺素組造模初期T3、T4、FT3、FT4顯著升高(P＜0.05),但1周后各激素水平隨即恢復正常,經(jīng)HE染色觀察到甲狀腺濾泡大小基本一致,濾泡膠質(zhì)染色均勻,濾泡間質(zhì)無水腫,與空白對照組無顯著性差異。分別于第7、14、25天檢測小腸結腸炎耶爾森氏菌模型組血清水平,發(fā)現(xiàn)在第7天時,血清T3、T4顯著升高(P＜0.05),TSH無明顯差異,直到第25天時TSH明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義,經(jīng)HE染色觀察到甲狀腺濾泡破壞,上皮細胞輕度增生且有少量的炎細胞存在。

3 橋本甲狀腺炎模型的建立

3.1 自發(fā)性甲狀腺炎模型

大部分自發(fā)性甲狀腺炎造模所選取的實驗動物是NOD.H-2h4小鼠。NOD.H-2h4小鼠在NOD遺傳背景下表達H-2K和I-Ak基因,此種主要組織相容性復合體(major histocompatibility complex,MHC)的單倍型(H-2K)是橋本甲狀腺炎的易感性單倍型,因此NOD小鼠發(fā)生HT概率很高[15]。Braley-Mullen等[16]喂養(yǎng)7～8周齡的NOD.H-2h4小鼠0.05%碘化鈉飲用水23周,在第6周時所有小鼠均發(fā)生了HT,第8周時炎癥達到最大程度,IgG1和IgG2b抗體水平明顯升高(P＜0.05)。He等[17]喂養(yǎng)5周齡NOD.H-2h4小鼠0.05%碘化鈉飲用水,分別于2、4、8周對其甲狀腺組織進行HE染色,發(fā)現(xiàn)甲狀腺細胞在第2周開始凋亡(P＜0.001),在第4周NOD.H-2h4小鼠表現(xiàn)出HT,喂養(yǎng)16周后炎癥評分、抗甲狀腺球蛋白抗體(anti-thyroglobulin antibody,TG-Ab)水平明顯高于對照組(P＜0.001)。

該種模型造模成功率極高,實驗操作十分簡單,但疾病周期較長,需在SPF清潔等級下IVC獨立通氣籠中喂養(yǎng),若是動物發(fā)生死亡會耗費大量的時間和金錢成本。

3.2 外源性甲狀腺抗原免疫法

甲狀腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)是HT患者中過度表達的主要抗原,該種蛋白分子在甲狀腺中含量特別豐富,占總蛋白的75%～80%[18]。研究表明不同鼠類H-2基因不同,對橋本甲狀腺炎的易感性也不盡相同。高應答的如CBA/J(H-2k)和SJL/J(H-2s)種系鼠;而低應答如BALB/c(H-2d)和C57BL/6(H-2b)種系鼠[19]。Wang等[20]將4周齡CBA/J雌性小鼠隨機分為兩組,模型組皮下注射200μg被 完 全 弗 氏 佐 劑(complete Freund’s adjuvant,CFA)乳化的鼠甲狀腺球蛋白(murine thyroglobulin,mTg)進行初次免疫,兩周后用相同劑量的m Tg在不完全弗氏佐劑(incomplete Freund’s adjuvant,IFA)乳化下進行加強免疫,而對照組組小鼠則用相同劑量的磷酸鹽緩沖鹽水代替mTg免疫小鼠。結果表明對照組小鼠甲狀腺濾泡均勻分布,無萎縮;而模型組小鼠甲狀腺濾泡無序排列且伴有淋巴細胞浸潤。具計算模型組小鼠HT的成膜率為85.70%,甲狀腺平均炎癥得分為2.29,經(jīng)ELISA法測得模型組TG-Ab顯著高于對照組(P＜0.01),但血清T4和TSH兩組之間無顯著性差異(P＞0.05)。李敘穎等[21]將雌性SD大鼠適應性喂養(yǎng)1周,隨機分為對照組和模型組。對照組給予蒸餾水,模型組給予0.64g/L的高濃度碘化鈉碘水。在第4周的第1天和第4天,于造模組大鼠后足皮下多點注射0.2mL初次免疫乳化劑(含100μg mTg);第5～8周后在大鼠四肢內(nèi)側及背部皮下多點注射0.2mL加強免疫乳化劑(含100μg mTg),每周1次;對照組每次注射同等劑量蒸餾水。結果顯示,與對照組相比模型組TG-Ab、抗甲狀腺過氧化物酶抗體(antithyroid peroxidase antibody,TPO-Ab)水平顯著升高(P＜0.01),血清T3、T4水平降低,TSH水平升高(P＜0.05)。Duan等[22]選取Wistar大鼠進行造模,大鼠在第1天腹腔注射豬甲狀腺免疫球蛋白(porcine thyroglobulin,pTg)進行初次免疫(150μg pTg溶于75μL生理鹽水中,并用等量的CFA進行乳化)。在第7天和第21天,大鼠進行注射pTg加強免疫(150μg pTg溶于75μL生理鹽水中,然后用等體積IFA乳化)。與生理鹽水組相比,模型組TG-Ab水平均顯著升高(P＜0.05)。

3.3 脾細胞體外活化移植免疫法

Fang等[23]用150μg mTg聯(lián)合15μg脂多糖(LPS)靜脈注射CBA/J小鼠(每10d1次,共2次),抽取其脾細胞并在含有25μg/mL mTg和5 ng/mL IL-12的培養(yǎng)基中培養(yǎng),供活化使用,72h后將3×107個脾細胞靜脈注射至經(jīng)500-rad輻射的同源小鼠中,第20天后經(jīng)HE染色甲狀腺組織,觀測到嗜中性粒細胞廣泛浸潤,嚴重等級為(4.8±0.2),血清T4水平較正常水平偏低(2.8±0.4μg/dl＜3.0 μg/dl)。

脾細胞體外活化移植免疫法通常用來誘導肉芽腫性自身免疫性甲狀腺炎(granulomatous experimental autoimmune thyroiditis,G-EAT),該方法與外源性甲狀腺抗原免疫法相比甲狀腺淋巴細胞浸潤程度更為嚴重,易發(fā)生肉芽腫病變,且該種炎癥通常在第60天消退或進展為纖維化,這取決于第20天甲狀腺損傷的程度[23]。

3.4 核酸免疫法(nucleic acid(cDNA)immunization,cDNA免疫法)

核酸免疫法指克隆出人甲狀腺球蛋白(human thyroglobulin,hTg)的全長cDNA,再與腺相關病毒載體整合,將該腺病毒(5.0×109個)溶于50μL的磷酸緩沖溶液(含10%甘油),注入小鼠的脛骨肌肉中。該種方法能使骨骼肌肉細胞大量攝取質(zhì)粒cDNA并將其蛋白產(chǎn)物表達在細胞表面[24]。Faustino等[25]選擇雌性CBA-J小鼠作為核酸免疫的實驗動物進行研究:模型組小鼠被表達hTg的腺病毒免疫(Ad-TG),陰性對照組被表達lac-Z的腺病毒免疫(Ad-LacZ),陽性對照組采取外源性甲狀腺抗原免疫法,分別于第1天初次免疫和第21天加強免疫。結果表明,所有模型組小鼠hTG抗體均為陽性,與陰性對照組相比,實驗組小鼠血清hTg、mTg、mTPO抗體水平顯著提高(P＜0.001),但較陽性組抗體水平低。Jacobson等[26]在cDNA免疫前將布比卡因注射到雌性C3H/Hen小鼠右側股四頭肌中,因肌毒劑被證實能夠提高靶基因的表達[27],分為2組進行實驗:對照組采用肌肉靜脈注射含hTg的cDNA,模型組采用電穿孔法注射含hTg的cDNA,用ELISA法檢測TG-Ab水平,發(fā)現(xiàn)與直接注射相比,電穿孔遞送cDNA顯著增加了再生肌肉中TG-Ab的水平(P＜0.05)。

cDNA免疫法是一種建立HT動物模型的嶄新途徑,在開始產(chǎn)生免疫反應之前,以正確的構象將hTg呈遞給了T細胞,且無需佐劑的參與,更接近地模擬出人類自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)生發(fā)展,除此外該種方法使得修改hTg cDNA的基因序列成為可能,這將為今后研究不同hTg序列變異對機體的影響提供重要實驗基礎。除肌肉直接遞送核酸外,最新的超聲遞送系統(tǒng)不僅具有更高的安全性和有效性,同時將實驗侵襲性降到了最低,對實驗動物的傷害大大減少[28]。

4 甲狀腺癌模型的建立

根據(jù)腫瘤起源及分化差異,甲狀腺癌按病理類型主要分為:乳頭狀甲狀腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)、濾泡樣甲狀腺癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)、甲狀腺髓樣癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)、低分化癌以及間未分化性甲狀腺癌(anaplastic thyroid cancer,ATC)等。大數(shù)據(jù)顯示,在這些亞型中PTC是最常見的,約占所有甲狀腺癌80%,FTC約占10%～15%,ATC約占5%,其余少數(shù)為MTC[29],其中ATC較分化良好的甲狀腺癌轉移程度更為嚴重,高達70%的ATC患者會發(fā)生全身轉移,肺是癌癥轉移中最常見的部位,占比高達80%[30]。

4.1 誘發(fā)性腫瘤模型

誘發(fā)性腫瘤模型指采用化學、生物、物理等致癌手段,如用化學致癌劑、放射線、生物毒素等方法誘發(fā)實驗動物產(chǎn)生致癌物,造成動物組織、器官或全身性的損傷,產(chǎn)生功能及代謝改變等異常狀況。Zheng等[31]將50只雄性SD大鼠隨機分為3組,對第2、3組的動物分別給予致癌物,對照組(第1組)則在飲用水中添加賦形劑。第2組SD大鼠于腹膜內(nèi)注射二乙基亞硝胺(DEN)(按重量計100mg/kg,溶解于生理鹽水溶液中),第3組SD大鼠分別在在第5、8、11和14天腹膜內(nèi)注射4次甲基亞硝脲(MNU)(按重量計20mg/kg,溶解于檸檬酸鹽緩沖液中,溶液pH6.0),實驗結果顯示,所有模型組血清TG-Ab水平明顯高于對照組(P＜0.05),所有模型組的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平明顯高于對照組(P＜0.05)。Dalke等[32]將F1小鼠暴露于I131中,發(fā)現(xiàn)受輻射照射的小鼠甲狀腺癌變的概率明顯高于未受輻射的對照組,大部分輻射小鼠的甲狀腺存在單純增生和復雜增生,較少部分發(fā)展為FTC。

誘發(fā)性腫瘤模型能在短時間內(nèi)復制出數(shù)量較多的腫瘤模型,因而經(jīng)常被研究者們采納使用,其具有操作簡單,成本低廉等特點。但由于該種模型通常是采用致癌藥物迅速造模,難以觀測腫瘤的動態(tài)發(fā)生、發(fā)展,只能用于簡單的藥效考察,不利于對甲狀腺癌進行細胞及分子水平的研究。

4.2 基因工程小鼠模型

醫(yī)學者們利用分子生物學對甲狀腺癌進行不斷探究發(fā)現(xiàn),大多數(shù)甲狀腺癌都伴隨基因突變,包含原癌基因的激活性突變、融合性表達和抑癌基因的失活性突變或缺失。Pozdeyev等[33]對779例甲狀腺癌患者進行了基因分析,發(fā)現(xiàn)74%的PTC患者BRAF基因發(fā)生了突變(特別是V600E和BRAF融合表達),42例(9%)發(fā)生了RAS基因突變,34例(7%)發(fā)生了RET基因突變,10%的患者發(fā)生了抑癌基因TP53缺失,而大多數(shù)FTC患者則是發(fā)生了RAS基因突變(43/65例,66%),其中14%發(fā)生了PTEN基因缺失,12%發(fā)生了TP53和RBM10基因缺失,未分化甲狀腺癌兩個最常見的突變基因是TP53和TERT(均為65%)。

Knauf等[34]將Tg-BRAFV600E系(Tg-BRAF2和Tg-BRAF3)表達于轉基因FVB/N小鼠,讓攜帶該基因的片段注入受精的FVB/N小鼠卵中,使之假孕,通過qRT-PCR法和Southern blot印跡雜交法確認胚胎小鼠已整合該轉基因,最后將該胚胎小鼠與野生型FVB/N小鼠雜交,從中穩(wěn)定產(chǎn)生BRAFV600E突變株系。實驗結果表明Tg-BRAF2和Tg-BRAF3小鼠的甲狀腺組織中均存在BRAFV600EmRNA,尤其是在Tg-BRAF2小鼠中最為明顯。5周后,Tg-BRAF2小鼠的TSH水平顯著升高,雄性小鼠平均比對照組高出80倍,而Tg-BRAF3小鼠TSH水平較正常組增加2倍,血清T3水平有所下降但無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。對Tg-BRAF2小鼠的甲狀腺進行組織學檢測,發(fā)現(xiàn)腫瘤累積甲狀腺腺體兩葉呈多灶性,腫瘤細胞顯示出人類乳頭狀癌的核特征,其中Tg-BRAF2、Tg-BRAF3發(fā)展成PTC的概率分別為93%和35%。McFadden等[35]將TPOCreER小鼠與含有Cre誘導的等位基因BRAFV600E、BRAFCA的同源小鼠雜交,后給予他莫昔芬數(shù)周(簡稱TB組),組織學檢測表明其甲狀腺腫瘤具有TPC相似的乳頭狀形態(tài)和核特征,免疫組織化學顯示細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶磷酸化表達增加。將Trp53等位基因與TB組雜交形成TBP三轉基因小鼠后,表現(xiàn)出更為嚴重的TPC(癌細胞體積變大,局灶性壞死增多),另有50%轉變?yōu)锳TC,其中5/26只動物發(fā)生了肺轉移(19%),說明TP53基因的缺失會增加PTC到ATC轉變的概率。

甲狀腺癌基因工程小鼠模型使人類對甲狀腺疾病的研究已深入到細胞及分子水平,可以直接按照研究目的設計和培育所需的小鼠,這無疑是構建了人類對甲狀腺癌原癌基因、抑癌基因、機制靶點等研究的橋梁,為發(fā)病機制、藥物篩選和臨床醫(yī)藥研究提供了寶貴的實驗基礎。但基因調(diào)控機制往往十分復雜,目前基因工程小鼠模型提供的信息還很局限,轉基因小鼠的出現(xiàn)是否會導致新的癌基因產(chǎn)生,有待進一步研究。

4.3 異種移植甲狀腺癌模型

異種移植甲狀腺癌模型是指將人甲狀腺瘤細胞皮下注射(異位移植)或甲狀腺內(nèi)注射(原位移植)到免疫缺陷小鼠中。張樂樂[36]對雌性BALB/c裸鼠右后肢腹側皮下注射TPC-1和SW579細胞懸液,發(fā)現(xiàn)接種SW579細胞的小鼠均未成瘤,接種TPC-1細胞裸鼠瘤體體積在第5天后達到了500 mm2,經(jīng)HE染色并在高倍鏡觀察腫瘤細胞,可以看到細胞核形狀不規(guī)則且染色加深,并可見紊亂的核分裂象。Kim等[37]靜脈注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)麻醉小鼠,將5μL未分化甲狀腺癌細胞株(ARO、DRO、和C643細胞系)懸浮液注射到8～12周大的雄性athymic裸鼠的甲狀腺或者側腹中,適應性喂養(yǎng)兩周后,用CO2吸入處死老鼠,并解剖檢查腫瘤。發(fā)現(xiàn)所有裸鼠甲狀腺中有明顯的腫瘤細胞浸潤,3種細胞系均有100%的致瘤性,其中注射DRO細胞系的裸鼠肺轉移率很高,當癌細胞接種數(shù)量為2.5×104個/只時,肺轉移率最高,為80%。另測得原位甲狀腺腫瘤微血管密度明顯高于異位甲狀腺腫瘤(P＜0.05),原位腫瘤中促血管生成因子VEGF和IL-8的表達水平高于異位甲狀腺腫瘤(P＜0.05)。

異種移植甲狀腺癌腫瘤模型造模迅速,移植瘤模型個體差異較小、接種成活率高、重復性良好;其中原位腫瘤模型的建立較為復雜,需要的手術技術較高,但能使癌細胞直接在起源器官中生長,有較高的外顯率和再現(xiàn)轉移性。

5 小結

甲狀腺疾病動物模型的建立是研究甲狀腺疾病發(fā)病機制的關鍵方法,一個成功的動物模型不但要簡便可行、重復性高,更需要準確地模擬疾病的發(fā)生、發(fā)展。在上述模型中,甲亢、甲減模型單純停留在給藥造模,提高或減少甲狀腺激素合成,雖然快速高效,但它忽略了疾病復雜的發(fā)病過程如亞甲減到甲減這一過程,而cDNA免疫造模橋本甲狀腺炎使修改hTg cDNA的基因序列成為可能,但該種方案技術不夠成熟仍需進一步開發(fā),甲狀腺癌轉基因模型的建立也為研發(fā)治療甲狀腺癌靶點藥物研究提供了新思路。所以研究出一系列與疾病發(fā)展更貼切,操作更為便捷、經(jīng)濟,并且兼顧環(huán)境、遺傳、腸道微生態(tài)、免疫等方面使其更能全面反映人類甲狀腺疾病進展的動物模型是今后研究甲狀腺疾病的重點之一。