藏藥烈香杜鵑化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展*

冀 旭，葛利吉，戎 浩，史瑞欣，孫芳云**

(1.西藏民族大學(xué)藏藥檢測技術(shù)教育部工程研究中心，陜西咸陽 712082；2.西藏藏醫(yī)藥研究中心藏藥活性成分及藥理機制研究聯(lián)合實驗室，陜西咸陽 712082；3.西藏民族大學(xué)附屬醫(yī)院，陜西咸陽 712082)

烈香杜鵑(RhododendronanthopogonoidesMaxim.)又稱小葉枇杷，為杜鵑花科(Ericaceae)杜鵑花屬(Rhododendron)植物，生長于海拔3 000-3 500 m的高山灌叢帶，主要分布于西藏、四川、青海等地。藏醫(yī)以常綠、小葉型、具鱗片烈香杜鵑的花、葉和嫩枝入藥，藏名都孜達(dá)里、尕爾，其葉稱巴魯，其花稱塔勒、巴如布[1]。烈香杜鵑在青藏地區(qū)有著悠久的使用歷史，《度母本草》中記載：“味甘、苦、澀，消化后味甘、辛，性溫，效柔、軟、輕。治‘隆’‘赤巴’‘培根’病引起的喉炎音啞、肺病等癥?！?《甘露本草明鏡》中記載：“其葉味甘、澀，消化后味苦，性溫，效銳。用于胃火衰退、食欲不振、皮膚病、四肢僵硬等癥?！盵1]近代研究表明，烈香杜鵑具有良好的祛痰、鎮(zhèn)咳、平喘作用[2,3]，在抗氧化、細(xì)胞保護(hù)、抗炎、殺蟲、平滑肌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心腦血管系統(tǒng)等方面也有著明顯的效果[1,4-6]。值得注意的是，由于對呼吸系統(tǒng)具有顯著作用，烈香杜鵑在1971年即被推廣至全國，用于治療慢性支氣管炎[7,8]，這使得烈香杜鵑在以新型冠狀病毒肺炎、嚴(yán)重急性呼吸綜合征、中東呼吸綜合征、甲型流感等呼吸系統(tǒng)傳染病頻發(fā)的大環(huán)境下，具有良好的開發(fā)價值，也吸引了越來越多研究者的關(guān)注。

在民族藥的研究中，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的闡述是民族藥物現(xiàn)代化研究的主要內(nèi)容之一，本文在查閱文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對藏藥烈香杜鵑中所含化學(xué)成分，尤其是近5年新發(fā)現(xiàn)的成分進(jìn)行總結(jié)整理，并討論了不同類型化學(xué)成分與其藥理作用對應(yīng)的關(guān)系，旨在為烈香杜鵑成分研究、藥理作用研究及藏藥的現(xiàn)代化綜合開發(fā)利用提供借鑒。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮

黃酮類化合物是目前在烈香杜鵑中發(fā)現(xiàn)數(shù)量較多的有效成分。針對黃酮類成分的研究始于20世紀(jì)70年代[3]。在近5年中，范民霞等[8]于2016年從烈香杜鵑的乙酸乙酯部位中分離出山柰酚、二氫槲皮素和去甲丁香色原酮3種黃酮類。肖遠(yuǎn)燦等[9]于2018年利用高效液相色譜法測定了藏藥烈香杜鵑不同部位的黃酮成分含量，發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑葉中黃酮類成分含量最高，之后依次是嫩枝、花、老枝及根。Gui等[10]于2020年從烈香杜鵑的莖、葉中提取出山柰酚、 槲皮苷、(2R,3R)-花旗松素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷、棉花皮素-3-O-β-D-半乳糖苷、異槲皮素、槲皮苷-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、楊梅素-3′-O-β-D-木糖苷和異槲皮苷-6′′-O-對羥基苯甲酸等9種黃酮類化合物。彭瑤等[11]于2021年利用烈香杜鵑中5種黃酮類成分建立一測多評法，可用于烈香杜鵑藥材的質(zhì)量控制。自1971年至今，已從烈香杜鵑的枝、葉、莖、根、花中分離鑒定黃酮類化合物32種(表1)。

表1 烈香杜鵑中的黃酮類成分Table 1 Component of flavonoids in Rhododendron anthopogonoides Maxim.

1.2 三萜及甾體

烈香杜鵑中三萜類及甾體類成分的研究起步較晚，馬雪梅[15]于2004年從烈香杜鵑乙醇提取物的氯仿萃取部分中首次分離得到3-甲氧基-30-乙基-羽扇豆-5(6)-烯-羽扇豆醇、齊墩果酸、羽扇豆-20(29)-烯-3β-醇、烈香杜鵑素Ⅵ、烈香杜鵑Ⅶ、豆甾醇、烈香杜鵑素Ⅲ、β-谷甾醇以及3β-甲氧基-5α-麥角甾-7-烯等三萜及甾體類成分。在近5年中，范民霞等[8]于2016年從烈香杜鵑乙酸乙酯部位中分離出熊果酸。目前已從烈香杜鵑莖、葉中分離鑒定三萜類化合物16種(表2)，甾體類化合物5種(表3)。

表2 烈香杜鵑中的三萜類成分Table 2 Component of triterpenoids in R.anthopogonoides Maxim.

表3 烈香杜鵑中的甾體類成分

1.3 揮發(fā)油

烈香杜鵑中含有大量的揮發(fā)油成分，是其有特殊香氣的原因。揮發(fā)油成分是烈香杜鵑中重要的活性成分，可用于治療呼吸系統(tǒng)疾病，并有殺蟲、抗菌的作用[2,20,21]。烈香杜鵑中揮發(fā)油化學(xué)成分的研究開展較早，20世紀(jì)80年代中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院及蘭州醫(yī)學(xué)院便對烈香杜鵑揮發(fā)油中的4-苯基-2-丁酮(即芐基丙酮)及其衍生物進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究[22,23]。在近5年中，李明珠等[24]于2016年在烈香杜鵑葉和花的揮發(fā)油中分別鑒定出44種和58種化合物，其中葉的主要成分為芐基丙酮，其次是吉馬酮和2-甲基-3-苯基-1-丙烯；花的主要成分為桉葉油二烯，另外莪術(shù)烯、吉馬酮和(+)-γ-古蕓烯含量也較高。祝清燦[25]于2020年利用烈香杜鵑中的芐基丙酮采用薄層色譜法建立了烈香杜鵑精油的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。表4為從烈香杜鵑分離鑒定的揮發(fā)油類成分，由于揮發(fā)油成分種類較多，故表4中主要列舉不同研究所得到的主要揮發(fā)油類成分物質(zhì)及含量。如表4所示，揮發(fā)油類成分主要存在于烈香杜鵑的枝、葉、莖等地上部分，其中含量較高的揮發(fā)油類成分包括芐基丙酮(Benzylacetone)、γ-芹子烯(γ-selinene)、杜鵑烯(Neofuranodiene)和棕櫚酸甲酯(Methyl palmitate)等。

表4 烈香杜鵑中含有的主要揮發(fā)油類成分Table 4 Component of volatile oil in R.anthopogonoides Maxim.

1.4 其他

除黃酮類、三萜類、甾體類和揮發(fā)油類物質(zhì)外，目前從烈香杜鵑中還分離鑒定出包括雜萜、苯丙素、酰胺等類型在內(nèi)的其他化學(xué)成分。近5年中，范民霞等[8]從烈香杜鵑醋酸乙酯部位分離出咖啡酸、反式阿魏酸、3,4-二羥基苯甲酸乙酯、4-(3,4-二羥基苯基)-2-丁酮、3,5-二羥基甲苯和原莪術(shù)醇等成分。Shi等[5]于2020年從烈香杜鵑中分離出8對雜萜異構(gòu)體和4個非手性雜萜；通過光譜技術(shù)、X光晶體學(xué)分析及電子捕獲檢測器計算等技術(shù)表征這些成分的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)(+)-/(-)-anthoponoid A-(+)-/(-)-anthoponoid G、(+)-daurrichromene D、Anthoponoids H和Anthoponoids I均未見前人描述，且(+)-/(-)-anthoponoid A和Anthoponoid I是首次發(fā)現(xiàn)的、分別具有六氫雜蒽結(jié)構(gòu)和二萜單元的杜鵑屬雜萜化合物；同時，部分成分被鑒定為NF-κB通路抑制劑，且(+)-anthoponoid E、(-)-anthoponoid G和Anthoponoid H對脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)具有抑制作用。目前已從烈香杜鵑中分離鑒定出倍半萜、二萜、雜萜、苯丙素、酰胺類等其他類化合物共36種(表5)。

表5 烈香杜鵑中的其他類成分Table 5 Other components of R.anthopogonoides Maxim.

2 藥理作用

2.1 止咳平喘祛痰

烈香杜鵑在1971年即被推廣至全國，用于慢性支氣管炎的治療[8]。蘭州醫(yī)學(xué)院研究發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑可減輕黏膜腫脹，松弛氣管、支氣管，并加速氣管纖毛黏液運行速度，從而具有良好的祛痰平喘作用。同時烈香杜鵑可使氣管黏膜柱狀上皮損傷減輕，纖毛脫落有所恢復(fù)，氣管、支氣管內(nèi)滲出物減少或消失。李淑玉等[20]通過小鼠氨霧法、電刺激引咳法，證明烈香杜鵑揮發(fā)油中4-苯基丁酮-2具有明顯止咳、祛痰、平喘作用，屬于中樞性鎮(zhèn)咳藥，其止咳強度較1/6劑量可待因稍弱。

2.2 抗炎

蘭州醫(yī)學(xué)院藥物學(xué)教研組等[3]曾報道烈香杜鵑中總黃酮苷小葉枇杷素能降低大鼠因注射蛋清而引起的毛細(xì)血管通透性升高，進(jìn)而使炎癥減輕；另外利用棉球肉芽腫法發(fā)現(xiàn)，大鼠腹腔注射小葉枇杷素可抑制增生結(jié)締組織干質(zhì)量。戴勝軍[17]對烈香杜鵑提取物進(jìn)行抗炎活性篩選，結(jié)果顯示烈香杜鵑中的黃酮及三萜類化合物均具有抗炎活性，在烈香杜鵑中黃酮及三萜類化合物單體物質(zhì)濃度為1×10-5mol/L時，其對β-葡萄糖酸苷酶釋放的抑制率分別為16.8%-44.1%和41.0%-43.6%。Shi等[5]發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑中部分雜萜類化合物為NF-κB通路抑制劑，并對脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)有明顯的抑制作用。

2.3 松弛平滑肌

蘭州醫(yī)學(xué)院藥物學(xué)教研組等[3]利用蟾蜍下肢血管灌流標(biāo)本及家兔耳殼血管灌流標(biāo)本研究烈香杜鵑對血管平滑肌的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑中小葉枇杷素對血管平滑肌有興奮作用；利用離體氣管實驗法發(fā)現(xiàn)小葉枇杷素可導(dǎo)致豚鼠氣管平滑肌松弛，并延緩和減弱組織胺所致氣管平滑肌痙攣。黨月蘭等[39]發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑中4-苯基丁酮-2對豚鼠離體氣管平滑肌有明顯的松弛作用，并能對抗乙酰膽堿、組胺、氯化鋇所致腸痙攣，同時對抗垂體后葉素所致的大鼠立體子宮平滑肌收縮，且對家兔末梢血管平滑肌展現(xiàn)出相應(yīng)作用。

2.4 中樞系統(tǒng)作用

李淑玉等[20]發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑中4-苯基丁酮-2可明顯減弱小鼠的自由活動；其本身不引起小鼠睡眠，但能顯著延長戊巴比妥鈉所致小鼠的睡眠時間。另外，其不抑制呼吸，也不對抗尼可剎米所致呼吸中樞的興奮，無止痛作用。

2.5 心腦血管系統(tǒng)作用

大劑量注射烈香杜鵑中棉子皮亭(Gossypetin)會導(dǎo)致家兔及犬的血壓、呼吸及心搏產(chǎn)生相應(yīng)變化[3]。烈香杜鵑中揮發(fā)油對離體大鼠心臟有減慢心率和降低心臟收縮力的作用，且可使大鼠心電圖呈現(xiàn)心房開始除極到心室開始除極的時間(P-R)、心室除極和復(fù)極的全過程所需的時間(Q-T) 間期延長且心室除極過程(QRS) 增寬的現(xiàn)象。另外，烈香杜鵑揮發(fā)油可阻斷由垂體后葉素引起的兔與大鼠心肌細(xì)胞復(fù)極異常；明顯提高實驗鼠因急速性減壓導(dǎo)致的缺氧耐受力；加強麻醉犬類頸內(nèi)動脈血流量；對麻醉兔有明顯的一過性降壓作用[40,41]。李淑玉等[20]利用頸動脈血壓測定法及柯氏心動描記法發(fā)現(xiàn)，烈香杜鵑中4-苯基丁酮-2會引起家兔血壓在3 h內(nèi)持續(xù)下降，同時心搏略有增強，呼吸次數(shù)略減但幅度加大；若3 h內(nèi)連續(xù)給藥2-3次，血壓會明顯下降，呼吸抑制，心搏減弱。

2.6 其他

蘭州醫(yī)學(xué)院防治慢性氣管炎研究組[2]發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑乙醇提取物中的黃酮類成分對肺炎球菌(Streptococcuspneumoniae)、甲型鏈球菌(α-hemolyticstreptococcus)、卡他球菌(Neisseriacatarrhal)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)及白色葡萄球菌(Staphylococcusalbicans)均有抑制生長的作用。劉彬[32]研究發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑揮發(fā)油對枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌(Escherichiacoli)、普通變形菌(Proteusvulgaris)及巨大芽孢桿菌(B.megaterium)的抑菌效果均比苯甲酸類強。Iwata等[35]研究發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑葉及嫩枝60%乙醇提取物抑制了化合物48/80誘導(dǎo)的大鼠肥大細(xì)胞組胺的釋放，表明烈香杜鵑有成為抗過敏藥物的可能。嚴(yán)林等[42]采用浸葉法和點滴法研究發(fā)現(xiàn)，烈香杜鵑揮發(fā)油對門源草原毛蟲(Gynaephoramenyuanensis)幼蟲具有很強的胃毒、觸殺活性和拒食作用，并對其產(chǎn)生生長抑制。Yang等[33]研究發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑地上部分揮發(fā)油對玉米象(Sitophiluszeamais)具有顯著的毒力，其中 4-苯基-2-丁酮對玉米象有明顯的接觸毒性 (LD50=6.98 μg)，其毒性較1,4-桉樹腦和橙花醇更強。另外 4-苯基-2-丁酮(LC50=3.80 mg/L)和1,4-桉樹腦(LC50=21.43 mg/L)對玉米象成蟲也有較強的熏蒸毒性。Jing等[4]研究了烈香杜鵑粗提物及不同組分提取物的抗氧化活性、還原能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、超氧自由基清除能力、羥基自由基清除能力和一氧化氮自由基清除能力的影響，以及烈香杜鵑提取物對缺氧損傷PC12細(xì)胞的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)烈香杜鵑正丁醇部位抗氧化活性最強，正己烷部位抗氧化活性最低，乙酸乙酯和正丁醇部位在缺氧條件下對PC12細(xì)胞具有保護(hù)作用，可顯著提高缺氧狀態(tài)下PC12細(xì)胞存活率，表明乙酸乙酯和正丁醇部位能夠通過直接清除自由基和調(diào)節(jié)內(nèi)源抗氧化酶來保護(hù)PC12細(xì)胞免受缺氧所致的損傷。

3 展望

藏醫(yī)藥是在吸收融合中醫(yī)藥、印度醫(yī)藥和大食醫(yī)藥等理論的基礎(chǔ)上，通過長期實踐形成的獨特醫(yī)藥體系，是我國傳統(tǒng)民族醫(yī)藥學(xué)寶庫中的瑰寶，2006年被國務(wù)院列入第一批國家級非物質(zhì)文化遺產(chǎn)名錄。藏藥作為我國較為完整、較有影響的民族藥之一，目前對其研究存在著明顯的問題，如缺乏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及物質(zhì)基礎(chǔ)研究，導(dǎo)致藏醫(yī)藥與中醫(yī)藥、現(xiàn)代醫(yī)藥之間差距不斷拉大，使得藏藥應(yīng)有的經(jīng)濟價值和社會價值不能有效發(fā)揮，特色優(yōu)勢尚未充分體現(xiàn)。

近些年，伴隨著國家對民族醫(yī)藥發(fā)展的大力扶持，民族醫(yī)藥發(fā)展逐漸呈現(xiàn)出良好的態(tài)勢。烈香杜鵑作為常用藏藥，對其現(xiàn)代化研究已涵蓋藥理藥效、毒性分析、化學(xué)成分、質(zhì)量控制等多個方面[41-45]。目前從烈香杜鵑中已分離鑒定出黃酮類、三萜類、甾體類、揮發(fā)油類，以及雜萜、苯丙素、酰胺等諸多成分，同時也已明確烈香杜鵑在治療呼吸系統(tǒng)疾病、抗炎、殺蟲、治療心腦血管系統(tǒng)疾病等方面有著明顯的效果。此外，烈香杜鵑中還含有部分已在其他杜鵑花屬植物中發(fā)現(xiàn)的有效成分，有著諸如抗HIV病毒[46]、抑制組胺及一氧化氮釋放[47]、抑制酪氨酸酶活性[48]、免疫調(diào)節(jié)[49]、潛在抗癌[50]、抑制淀粉樣β蛋白聚集[51]等作用，這都說明烈香杜鵑有著極大的藥用價值及開發(fā)潛力，為基于藏藥的新藥開發(fā)提供了選擇。

通過比對可以發(fā)現(xiàn)，烈香杜鵑中黃酮類成分水溶性良好，是烈香杜鵑傳統(tǒng)水提使用時的重要有效成分，如棉花皮素、金絲桃苷、槲皮素及山柰酚等具有顯著的祛痰、鎮(zhèn)咳作用，是烈香杜鵑治療慢性氣管炎的主要有效成分[2,3,15]，部分黃酮類成分還具有抗炎[3,17]、抗氧化、保護(hù)細(xì)胞免受缺氧損傷[4]以及松弛血管平滑肌、支氣管平滑肌的作用[3]；揮發(fā)油類成分是烈香杜鵑中另一類重要的活性成分，具有鎮(zhèn)咳平喘[2,3,20]、心血管抑制及提高缺氧耐受力[29,41]、降壓及中樞抑制[20]、松弛平滑肌[39]以及抑菌殺蟲[21,32,33]等作用；三萜及甾體類具有良好的抗炎作用[15,17]，四環(huán)二萜型植物毒素及部分雜萜具有較好的殺蟲、興奮肌梭、激活細(xì)胞膜[17]以及抗過敏[35]的作用；酚類成分則具有良好的抗氧化作用[4]。以上對比為后續(xù)藏藥烈香杜鵑的現(xiàn)代化研究帶來了新的思考，例如，針對具有不同藥理作用的有效成分類型，或針對某些有效成分類型(如揮發(fā)油類)在不同部位分布亦不同的具體情況，建立新的質(zhì)量評價體系，對烈香杜鵑進(jìn)行科學(xué)的質(zhì)量評價，以解決缺乏質(zhì)量評價體系這一制約傳統(tǒng)藏藥發(fā)展的瓶頸問題。本文對烈香杜鵑中已見報道的化學(xué)成分，尤其是近5年新發(fā)現(xiàn)的成分以及主要藥理作用進(jìn)行歸納總結(jié)，旨在為烈香杜鵑的進(jìn)一步研究提供參考。