逍遙散抗抑郁作用的代謝組學(xué)研究*

張 路，徐曉楠，王 妍

云南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 250355

抑郁癥是一種精神障礙或由器質(zhì)性因素引起的情感障礙性疾病，以明顯的不良情緒交替、消極的自我概念、退行性或自我懲罰的想法及植物性癥狀或活動(dòng)能力改變等為特征，表現(xiàn)為情緒低落、悲觀主義、自我批評(píng)、遲緩、焦慮等。抑郁癥發(fā)病率高，反復(fù)遷延，嚴(yán)重影響患者的健康和生活。目前，抑郁癥主要有軀體治療和心理治療兩種治療方法。軀體治療主要包括藥物治療、電休克療法、經(jīng)顱磁刺激和藥物基因組學(xué)療法。藥物治療主要藥物包括三環(huán)類藥物、單胺氧化酶抑制劑和選擇性5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）再攝取抑制劑等。然而藥物治療會(huì)產(chǎn)生胃腸道反應(yīng)、惡心、嗜睡等副作用，長(zhǎng)期服用會(huì)產(chǎn)生藥物依賴性和耐藥性。因此，從副作用少、藥物作用持久的中藥復(fù)方中尋求有效的抗抑郁藥成為抑郁癥研究領(lǐng)域的重要方向。

逍遙散是疏肝解郁、健脾和營的經(jīng)典方劑，諸多研究表明逍遙散有抗抑郁作用［1］。代謝組學(xué)作為系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分，主要通過定量分析生物體內(nèi)代謝物尋找其與病理生理變化的相對(duì)關(guān)系。代謝組學(xué)方法不僅能有效顯示動(dòng)物行為學(xué)和形態(tài)學(xué)有限生化指標(biāo)無法顯示的差異，還能找到分類相關(guān)的特征性標(biāo)志物。而抑郁癥的發(fā)生就與某些特征性生物標(biāo)志物有關(guān)［2］。

1 抑郁癥的表現(xiàn)及發(fā)病機(jī)制

1.1 抑郁癥的表現(xiàn)抑郁癥主要以持久性的情緒低落，悲觀的自我認(rèn)知和植物神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂等為臨床表現(xiàn)，具體表現(xiàn)在以下五個(gè)方面：1）情緒癥狀。抑郁癥患者常情緒沮喪，對(duì)自我抱有消極情感，情感依戀和欲望滿足感缺失，歡樂感缺失并且易哭泣。2）認(rèn)知表現(xiàn)：抑郁癥患者往往會(huì)自我貶低，自責(zé)和批評(píng)，扭曲自我形象，對(duì)自我抱有消極期望，總是以悲觀的態(tài)度看待事物，做事優(yōu)柔寡斷，搖擺不定。3）動(dòng)力性表現(xiàn)：抑郁癥患者動(dòng)力性表現(xiàn)的顯著特點(diǎn)就是積極動(dòng)力喪失，意志癱瘓，回避日常生活模式，期望接受幫助、指引和指導(dǎo)，嚴(yán)重者甚至產(chǎn)生自殺想法。4）植物軀體性癥狀：抑郁癥患者植物軀體性癥狀發(fā)生改變，容易出現(xiàn)食欲減退、睡眠紊亂、性欲減退及疲勞癥狀。5）出現(xiàn)妄想、幻覺等癥狀。

1.2 抑郁癥的發(fā)病機(jī)制目前抑郁癥發(fā)病的病理、生理機(jī)制尚不清楚，近年來對(duì)抑郁癥發(fā)病機(jī)制的探討主要包括以下幾個(gè)方面：1）抑郁癥的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞炎癥及細(xì)胞因子有關(guān)。當(dāng)炎癥維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)的保護(hù)性效應(yīng)過度時(shí)，就會(huì)誘發(fā)許多慢性疾病，抑郁癥是其中之一。炎癥反應(yīng)與抑郁癥的發(fā)病具有一定的聯(lián)系性，腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）及細(xì)胞白介素6（interleukin-6，IL-6）等促炎細(xì)胞因子與抑郁癥的發(fā)生都有關(guān)系［3］。TNF-α可調(diào)節(jié)膠質(zhì)細(xì)胞5-HT受體的活性，從而影響中樞色氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)穩(wěn)態(tài)［4］；IL-1β可調(diào)節(jié)突觸可控性，從而影響海馬區(qū)相關(guān)的學(xué)習(xí)記憶功能和行為學(xué)表現(xiàn)［5］；IL-6可增強(qiáng)下丘腦-垂體-腎上腺軸（The hypothalamic pituitaryadrenal axis，HPA）活性，使糖皮質(zhì)激素水平升高，活化色氨酸2，3-雙加氧酶，阻斷色氨酸向5-HT，5-乙酰-5-HT及褪黑素的轉(zhuǎn)化通路［6］。此外，核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（nucleotidebinding oligomerization domain-like receptor protein3，NLRP3）炎癥小體，嘌呤能受體及高遷移率族蛋白1等因子與抑郁癥的發(fā)生都有關(guān)系［3］。2）抑郁癥的發(fā)生與腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子和神經(jīng)可塑性有關(guān)，是腦內(nèi)與控制情緒相關(guān)的區(qū)域之間的神經(jīng)可塑性發(fā)生改變的結(jié)果，表現(xiàn)為大腦海馬區(qū)神經(jīng)的發(fā)生減少、海馬錐體神經(jīng)元的萎縮、神經(jīng)膠質(zhì)密度的降低及前額葉皮質(zhì)神經(jīng)元體積的減小等方面，抗抑郁藥物可能就是通過影響神經(jīng)可塑性發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)功能起作用［7-8］。3）有研究表明，抑郁癥的發(fā)生與腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）有明顯的相關(guān)性，抗抑郁藥在治療IBS中起重要作用［9］。4）單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，如去甲腎上腺素和5-HT等不足，也可能誘發(fā)抑郁癥［10］。

2 逍遙散的抗抑郁作用及作用途徑

2.1 逍遙散的抗抑郁作用逍遙散出自宋代《太平惠民和劑局方》，由柴胡、白芍、白術(shù)、當(dāng)歸、茯苓、生姜、甘草、薄荷等藥物組成，是疏肝解郁、健脾和營、調(diào)暢情志的經(jīng)典方劑，也是中醫(yī)發(fā)揮調(diào)和肝脾作用、治療情志活動(dòng)異常的代表方劑。逍遙散具有很好的抗抑郁作用，在臨床治療中應(yīng)用廣泛，治療范圍涉及隱匿性抑郁癥、癔癥、精神分裂癥等十三類精神疾病，能使患者的精神狀況得到顯著改善［11］。給予抑郁模型大鼠禁食、強(qiáng)迫游泳、噪音、異物、懸尾等復(fù)合刺激因子建立大鼠抑郁模型，以糖水偏好量及爬行格子數(shù)、站立次數(shù)等行為學(xué)表現(xiàn)作為模型成功的評(píng)價(jià)指標(biāo)，在給模型大鼠服用逍遙散后，能夠明顯提高抑郁模型大鼠糖水偏好的百分比，能夠明顯改善抑郁大鼠懶動(dòng)、焦慮等癥狀［12］?，F(xiàn)代藥理研究表明，逍遙散具有保肝、抗氧化功效，能夠調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫、機(jī)體激素水平及血液微循環(huán)，有明顯的神經(jīng)藥理學(xué)活性，抗抑郁作用明確，能有效提高抑郁癥患者血漿環(huán)核苷酸的含量［11］。逍遙散能夠影響慢性應(yīng)激大鼠α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體的mRNA表達(dá)，調(diào)整海馬CA1區(qū)以及杏仁核各項(xiàng)指標(biāo)的mRNA的改變［13］，改善腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)異常導(dǎo)致的體質(zhì)量下降、活動(dòng)減少、糖水消耗減少現(xiàn)象［14］。另有研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散可以顯著改善抑郁癥動(dòng)物模型小鼠認(rèn)知功能減退、學(xué)習(xí)記憶功能減退及自主活動(dòng)減少等行為學(xué)改變、獎(jiǎng)賞系統(tǒng)反應(yīng)性遲鈍的癥狀［15］，具有很好的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、抗焦慮作用［16］。

2.2 逍遙散抗抑郁的作用途徑1）逍遙散可能通過調(diào)節(jié)中樞去甲腎上腺素、5-HT、多巴胺等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)及人垂體泌乳素、β-內(nèi)啡肽等神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)影響神經(jīng)可塑性和神經(jīng)營養(yǎng)，影響細(xì)胞分子的作用機(jī)制和細(xì)胞因子水平，產(chǎn)生抗氧化應(yīng)激反應(yīng)來發(fā)揮抗抑郁作用［16］。2）逍遙散可能通過干預(yù)BDNF/CREB信號(hào)途徑激活下游級(jí)聯(lián)信號(hào)通路細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracel lular regulated protein kinases，ERK）、環(huán)磷腺苷反應(yīng)原件結(jié)合蛋白（cAMP-response element binding protein，CREB）等重要通路蛋白分子的表達(dá)和功能，促進(jìn)應(yīng)激損傷神經(jīng)元的恢復(fù)，發(fā)揮抗抑郁作用［17］。3）逍遙散可能通過調(diào)節(jié)心理社會(huì)因素產(chǎn)生的應(yīng)激性機(jī)體功能失調(diào)和代謝產(chǎn)物來改善慢性應(yīng)激大鼠的行為學(xué)變化［18］。4）研究表明，抑郁癥機(jī)體免疫應(yīng)答的激活可以活化HPA，使5-HT和谷氨酸分泌紊亂［19］。逍遙散可能通過調(diào)節(jié)模型大鼠5-HT信號(hào)系統(tǒng)，減弱脊髓背角神經(jīng)元興奮性，進(jìn)而提高內(nèi)臟痛閾，消除腸道的過敏反應(yīng)來發(fā)揮抗抑郁作用［20］。5）逍遙散可能通過調(diào)節(jié)體內(nèi)炎癥因子包括IL-1、IL-6及TNF-α表達(dá)的水平，降低血漿中皮質(zhì)醇、促腎上腺皮質(zhì)激素的濃度及下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素的基因表達(dá)水平，改善單胺類神經(jīng)遞質(zhì)功能的失調(diào)，調(diào)節(jié)HPA軸功能，使之恢復(fù)正常，從而發(fā)揮抗抑郁作用［21-24］。

3 逍遙散抗抑郁作用的代謝組學(xué)研究

3.1 代謝組學(xué)代謝組學(xué)是運(yùn)用核磁共振和質(zhì)譜等現(xiàn)代技術(shù)對(duì)生物體內(nèi)代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析研究的學(xué)科，能夠無創(chuàng)傷、動(dòng)態(tài)地研究機(jī)體生理病理?xiàng)l件下的功能狀態(tài)。研究過程維持了機(jī)體結(jié)構(gòu)的完整性，與中醫(yī)的整體觀相契合，是中藥藥效學(xué)研究的重要工具。主要通過包括氫譜、碳譜和磷譜在內(nèi)的核磁共振譜技術(shù)和包括氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用在內(nèi)的質(zhì)譜及其聯(lián)用等技術(shù)對(duì)生物體液中的內(nèi)源性代謝物進(jìn)行檢測(cè)分析。在生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)、疾病的早期診斷及中藥藥效的作用機(jī)制、中藥復(fù)方配伍規(guī)律、中藥的安全性、中藥的藥理效應(yīng)評(píng)價(jià)等研究中具有重要作用，能夠直觀分析中藥對(duì)機(jī)體多成分、多靶點(diǎn)的調(diào)節(jié)作用［25］。代謝組學(xué)從整體出發(fā)，主要包括生物樣品的收集、預(yù)處理、分析、鑒定、數(shù)據(jù)分析和標(biāo)記物解讀等過程，通過研究代謝網(wǎng)絡(luò)中不同代謝物譜的差異，認(rèn)識(shí)中藥復(fù)方的作用靶點(diǎn)和機(jī)制，克服了單一藥理模型無法全面闡釋藥物間，藥物和多靶點(diǎn)、受體間相互作用的局限，能夠多成分、多靶點(diǎn)研究藥效，在中醫(yī)藥研究中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)［26-27］。

3.2 逍遙散抗抑郁作用的代謝組學(xué)研究

3.2.1 逍遙散抗抑郁作用的血漿代謝組學(xué)研究對(duì)抑郁癥模型大鼠血漿代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散發(fā)揮抗抑郁作用的物質(zhì)基礎(chǔ)為低極性成分。逍遙散可能通過調(diào)節(jié)糖代謝、膽堿代謝、氨基酸代謝等內(nèi)源性代謝產(chǎn)物，及下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸、下丘腦-垂體-甲狀腺軸、下丘腦-垂體-性腺軸發(fā)揮抗抑郁作用，能有效調(diào)節(jié)乳酸、亮氨酸、膽堿等抑郁癥相關(guān)特征標(biāo)志物使之趨于正常［28］。逍遙散可調(diào)節(jié)酮體代謝過程，降低抑郁癥患者血漿中乳酸和N-乙酰糖蛋白水平，升高亮氨酸、丙酮酸、異亮氨酸、氧化三甲胺、纈氨酸、β-羥基丁酸、丙氨酸、檸檬酸、谷氨酸、肌酐的水平，使之趨于正常［29］。逍遙散能通過調(diào)節(jié)能量代謝、神經(jīng)遞質(zhì)合成、腸道菌群代謝過程的相關(guān)代謝物發(fā)揮抗抑郁作用，能夠調(diào)節(jié)異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸的合成通路，二羧酸鹽、乙醛酸的代謝通路，脯氨酸、精氨酸的代謝通路，脂肪酸的合成通路，甘油磷脂代謝通路，鞘脂代謝通路，半胱氨酸、蛋氨酸代謝通路及?；撬?、亞?；撬岽x通路，有30種差異代謝物與逍遙散的抗抑郁作用有關(guān)［30］。逍遙散可調(diào)節(jié)cAMP-PKA-CREB-BDNF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路因子，如升高環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）含 量 及CREB磷酸化水平，增強(qiáng)蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）活性及酪氨酸受體B（tyrosine kinase receptor B，TrkB）的mRNA表達(dá)，降低IL-1、IL-6、環(huán)氧酶-2、前列腺素E2等炎性細(xì)胞因子的水平［31］。

3.2.2 逍遙散抗抑郁作用的盲腸和尿液代謝組學(xué)研究對(duì)抑郁癥模型大鼠的盲腸代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散能夠降低盲腸組織中丙氨酸、谷氨酸、絲氨酸含量［32］。尿液代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散可能通過調(diào)節(jié)有機(jī)酸類、胺類及氨基酸類等抗抑郁療效的關(guān)聯(lián)性標(biāo)志物途徑和能量代謝過程，調(diào)節(jié)異常的神經(jīng)遞質(zhì)水平和紊亂的腸道菌群活動(dòng)，從而發(fā)揮抗抑郁作用，并有效調(diào)節(jié)酪氨酸、檸檬酸、馬尿酸、丙氨酸等抑郁癥相關(guān)特征標(biāo)志物使之趨于正常［33］。逍遙散能夠升高尿中肌酐、牛磺酸、黃尿酸、α-酮戊二酸含量，降低檸檬酸、乳酸、二甲胺、丙氨酸含量，調(diào)節(jié)腸道微生物、能量、色氨酸、?；撬岬拇x過程［28］。蘆林林等［34］對(duì)抑郁模型大鼠血漿和尿液代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，石油醚組分是逍遙散抗抑郁作用的主要有效組分，能夠明顯回升亮氨酸、纈氨酸、3-羥基丁酸的含量。呂夢(mèng)等［35］研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散能夠顯著升高小鼠糞便中苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平，顯著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平［35］。

3.2.3 逍遙散抗抑郁作用的細(xì)胞代謝組學(xué)、腦組織代謝組學(xué)研究對(duì)抑郁癥模型大鼠細(xì)胞代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與死亡、神經(jīng)物質(zhì)代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞通訊及應(yīng)激反應(yīng)等相關(guān)途徑發(fā)揮抗抑郁作用，能有效增強(qiáng)低分化PC12細(xì)胞活性，降低細(xì)胞凋亡率、乳酸脫氫酶的釋放率、線粒體膜電位水平及細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平，增加細(xì)胞內(nèi)左旋多巴、多巴胺、二羥基苯乙酸及5-HT的含量，降低細(xì)胞內(nèi)酪氨酸和色氨酸含量，調(diào)節(jié)抑郁癥相關(guān)特征標(biāo)志物使之趨于正常［36］。對(duì)抑郁癥模型大鼠腦組織代謝組學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，逍遙散可能通過提高腦組織神經(jīng)元活性以增強(qiáng)神經(jīng)元功能，調(diào)節(jié)腦組織的能量代謝，改善腦組織對(duì)機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)，從而發(fā)揮抗抑郁作用，能有效調(diào)節(jié)甘油、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸等抑郁癥相關(guān)特征標(biāo)志物，使之趨于正常［37］。

4 小結(jié)

抑郁癥是嚴(yán)重影響人類健康的精神疾病，尋找有效的抗抑郁藥在抑郁癥的現(xiàn)代臨床診療中意義重大。西醫(yī)療法在抑郁癥的治療中起一定作用，但是往往不能根治，且副作用大，易產(chǎn)生藥物依賴和耐藥性。逍遙散具有很好的抗抑郁作用，然而組分眾多，單一致病因素造模后對(duì)藥物機(jī)制進(jìn)行研究具有局限性。代謝組學(xué)是定性、定量分析生物或細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物的新學(xué)科，能夠直觀分析中藥對(duì)機(jī)體多成分、多靶點(diǎn)的調(diào)節(jié)作用。目前基于代謝組學(xué)的逍遙散抗抑郁作用的研究主要從血漿代謝組學(xué)、尿液代謝組學(xué)、細(xì)胞代謝組學(xué)、腦組織代謝組學(xué)等方面進(jìn)行，通過特征標(biāo)志物的變化研究逍遙散抗抑郁作用的部分通路和靶點(diǎn)，為逍遙散的抗抑郁作用提供了現(xiàn)代科學(xué)數(shù)據(jù)支撐，同時(shí)也為抑郁癥的臨床診療和抗抑郁藥的新藥研發(fā)提供了更多可能。目前逍遙散抗抑郁作用機(jī)制的研究尚不完善，仍然存在許多未知，有待我們進(jìn)一步探索、發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證。