“黃芩-黃連”藥對研究進(jìn)展

★ 張紅杰 陳常蓮 華詩培 蘇丹 宋永貴 艾志福（.江西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院 南昌 0004；.江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 南昌 0006；.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 0004）

藥對，又稱對藥，是臨床上常用且相對固定的中藥配伍形式，同時也是方劑的最小配伍形式，為歷代醫(yī)家經(jīng)過實踐總結(jié)的經(jīng)驗升華［1］。中藥黃芩為唇形科植物黃芩的干燥根，其味苦、性寒，有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎的功效。中藥黃連為毛茛科植物黃連、三角葉黃連或云連的干燥根莖，味苦、性寒，具有清熱燥濕、瀉火解毒等功效。黃芩、黃連均為清熱燥濕藥，黃芩尤善清中、上二焦的濕熱，黃連的作用尤偏中焦，以清心、胃之實火見長。黃芩與黃連相須為伍，共筑清熱燥濕、瀉火解毒之功。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明黃芩、黃連中含有多種有效活性成分。為了進(jìn)一步探究“黃芩-黃連”藥對的藥用價值，本文在查閱了近10年文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對“黃芩-黃連”藥對的藥理作用及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了綜述。

1 黃芩的主要作用

黃芩首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［2］，被列為上品藥，“主諸熱黃疸，腸澼，泄痢，逐水，下血閉，惡瘡，疽蝕，火瘍”?！墩渲槟摇酚涊d：“涼心，治肺中濕熱，瀉肺火上逆……安胎?！薄兜崮媳静荨吩唬骸吧闲袨a肺火，下行瀉膀胱火，男子五淋，女子暴崩，調(diào)經(jīng)清熱，胎有火熱不安，清胎熱，除六經(jīng)實火實熱?！苯?jīng)過數(shù)千年的廣泛應(yīng)用，歷代醫(yī)家將黃芩作為臨床常用藥物，常用于胸悶、咳嗽、肺熱等病證的治療。

目前研究發(fā)現(xiàn)，黃芩藥材中含有多種有效成分，即黃酮及黃酮苷類化合物，多糖類，揮發(fā)油，鐵、銅、鋅等微量元素以及10余種氨基酸，淀粉等［3］。其中黃酮類包括黃芩素、漢黃芩素、黃芩苷、漢黃芩苷等，而且黃芩苷、黃芩素等成分在較大程度上決定了黃芩的清熱、解毒、止血、瀉火等功效［4］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，黃芩具有抗病原微生物，抗病毒，抗炎，抗過敏，抗氧化，抗腫瘤，保護(hù)肝臟、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等作用［5］。

2 黃連的主要作用

《神農(nóng)本草經(jīng)》云：“黃連主熱氣目痛，眥傷泣出，明目，腸澼，腹痛，下痢，婦人陰中腫痛?！薄墩渲槟摇分休d：“其用有六：瀉心火，一也；去中焦?jié)駸幔?；諸瘡必用，三也；去風(fēng)濕，四也；治赤眼暴發(fā)，五也；止中部見血，六也?！秉S連作為臨床常用藥物，常用于濕熱痞滿、嘔吐吞酸、瀉痢、黃疸、高熱神昏、心火亢盛、心煩不寐、血熱吐衄、目赤、牙痛、消渴、癰腫疔瘡等［6］。

隨著對黃連研究的深入，發(fā)現(xiàn)黃連含有的有效化學(xué)成分種類較多，除含有生物堿類外，還包括木脂素類、黃酮類以及酸性物質(zhì)等成分［7］。進(jìn)一步研究表明，從黃連中分離的提取物涵蓋了廣泛的藥理譜，包括抗菌、抗病毒、抗炎、抗真菌、降血糖、抗腫瘤和保護(hù)心腦血管等作用［8］。

3 “黃芩-黃連”藥對

3.1 “黃芩-黃連”藥對的配伍意義及其主要有效成分

“黃芩-黃連”藥對出自東漢張仲景的《傷寒論》［9］。《醫(yī)宗金鑒》將配伍使用的黃芩、黃連稱為“二黃湯”，兩藥均入手陽明大腸經(jīng)，相須合用，瀉火解毒、清腸止痢之功更著，是目前臨床上較為常用的清熱燥濕解毒的藥對。黃芩與黃連配伍，不僅能增強(qiáng)清熱燥濕作用，還能增強(qiáng)止血作用，用于治療熱證出血。此外，黃芩還有涼血安胎的功效，而黃連的清熱止嘔效力更佳，兩藥為伍，也可用于婦女妊娠、胎熱不安之病證［10］。這說明了不同的中藥在配伍之后往往會具有不同于單品的藥效，其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)可能也會有所不同。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，該藥對在配伍后的藥效與其基礎(chǔ)物質(zhì)發(fā)生變化有關(guān)，通過毛細(xì)管電泳及液相色譜法研究“黃芩-黃連”藥對化學(xué)成分的變化，發(fā)現(xiàn)黃芩與黃連共煎后會產(chǎn)生沉淀，若去除沉淀則會使有效成分的含量降低［11］。為證明二者水提物中的主要活性成分，王鈺樂等［12］建立了“黃芩-黃連”藥對UPLC-MS/MS指紋圖譜分析法，指認(rèn)了黃芩、黃連水提物中的7個共有峰分別代表黃連堿、表小檗堿、鹽酸藥根堿、鹽酸小檗堿、黃芩苷、漢黃芩苷、鹽酸巴馬汀?！吨袊幍洹穼ⅫS連中的指標(biāo)性成分指定為小檗堿，將黃芩中的指標(biāo)性成分指定為黃芩苷。因此，在進(jìn)行物質(zhì)基礎(chǔ)的研究時，一般選用小檗堿和黃芩苷作為指標(biāo)性物質(zhì)。為了比較該藥對的水提物與其單品水提物的有效成分是否發(fā)生變化，趙曉娟等［13］研究表明，黃芩與黃連的水提物配伍后的色譜峰產(chǎn)生了加和的特性，并且具有了新的色譜峰，這表明藥對經(jīng)過配伍后的有效成分發(fā)生了變化。游麗娟等［14］利用HPLC技術(shù)進(jìn)一步對“黃芩-黃連”藥對水提物及單品的水提物進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示小檗堿與黃芩苷在藥對水提物中的含量比單味藥的水提物含量顯著提高，即通過共煎的方式，小檗堿和黃芩苷可以更有效地提取出來。通過以上的研究說明了黃芩與黃連的配伍不等同于簡單的兩味藥物的疊加，配伍后藥對的藥效同單品比較發(fā)生了變化，同時其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)也有了改變，這可能是藥對藥效發(fā)生變化的主要原因。

3.2 “黃芩-黃連”藥對的藥理作用及機(jī)制

傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，黃連偏瀉心胃之火；黃芩善于清肺、大腸火熱，相須為用則清熱燥濕解毒的功效更顯著。此藥對可用于治療一切熱病的高熱、煩躁及熱盛所致的目赤腫痛、齒齦腫痛、口舌生瘡、癰腫疔瘡諸癥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，“黃芩-黃連”藥對有降血糖、調(diào)節(jié)腸道菌群、抗炎、抗菌、抗氧化的作用，同時對神經(jīng)退行性疾病也有一定的防治作用。

3.2.1 降血糖作用中醫(yī)認(rèn)為2型糖尿病屬于“消渴”范疇，是由于體內(nèi)陰津虧損，燥熱偏盛所致，在治療上主要以清熱為原則?！包S芩-黃連”藥對是中醫(yī)臨床上常用的防治2型糖尿病的藥對，其中的有效活性成分均具有良好的降糖作用。宗陽等［15］根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法建立的化合物-靶點(diǎn)圖發(fā)現(xiàn)，“黃芩-黃連”藥對的42個活性化合物作用于213個糖尿病靶點(diǎn)，作用最強(qiáng)的前兩種化合物槲皮素與黃芩素均具有良好的降糖作用。黃芩中的黃芩素所表現(xiàn)的降糖作用機(jī)制可能是通過抑制NF-κB的活化，從而降低iNOS和TGF-β1的表達(dá)［16］。槲皮素為黃連中的黃酮類化合物，其可通過降低糖尿病機(jī)體的氧化應(yīng)激水平，抑制胰島細(xì)胞凋亡以及增強(qiáng)肝臟的丙酮酸激酶活性，從而降低2型糖尿病大鼠的血糖［17］?，F(xiàn)代動物實驗研究表明，“黃芩-黃連”藥對通過調(diào)控MAPK/PI3K/AKT信號通路改善2型糖尿病大鼠的葡萄糖水平和脂肪代謝，從而達(dá)到降低血糖水平的作用［18］。另有研究通過蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等分析得出，“黃芩-黃連”藥對可能通過TLR4/MyD88/PI3K/Akt/NF-κB信號通路改善2型糖尿?。?9］。由上可知，兩藥合用后可以作用于糖尿病的某些代謝類通路、炎癥相關(guān)信號通路等，以及在基因?qū)用嬲{(diào)節(jié)2型糖尿病，為該藥對降血糖作用的合理性提供了理論參考。

3.2.2 調(diào)節(jié)腸道菌群，維持腸道微生態(tài)平衡正常情況下，人體腸道的微生態(tài)系統(tǒng)是處于動態(tài)平衡的，當(dāng)受到外界的干預(yù)或刺激后，腸道菌群的穩(wěn)態(tài)會被打破，從而導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生。中藥多以湯劑口服進(jìn)入消化道，與腸道內(nèi)的細(xì)菌接觸，相互發(fā)生作用。徐君［20］通過酶標(biāo)儀比濁法測定“黃芩-黃連”藥對提取物對正常大鼠與2型糖尿病大鼠的4類具有代表性的腸道菌群生長的影響，最終得出結(jié)論：與正常大鼠相比，病理模型的腸道菌群生長受到藥對的抑制/促進(jìn)作用更為明顯，藥對提取物影響了病理模型腸道菌群的生物多樣性，從而改善腸道的微生態(tài)平衡。隨著對黃芩、黃連的深入研究，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，黃芩提取物可顯著回調(diào)具有差異的6個菌門與25個菌屬，同時還可改善熱證大鼠模型中擬桿菌門、厚壁菌門、放線菌門與變形菌門的數(shù)量，促進(jìn)紊亂的腸道微環(huán)境恢復(fù)正常的動態(tài)平衡與穩(wěn)態(tài)［21］。崔祥等［22］認(rèn)為黃連提取物中含量較高的小檗堿對于腸道菌群失調(diào)具有調(diào)節(jié)作用。以上研究表明，該藥對通過調(diào)節(jié)腸道菌群的比例及數(shù)量，進(jìn)而發(fā)揮調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用，并且取得了良好進(jìn)展。還有部分研究發(fā)現(xiàn)該藥對可以干預(yù)某些疾病的相關(guān)信號通路，從調(diào)節(jié)腸道微生物入手治療某些疾病，這為臨床上一些難治疾病的間接性治療提供了一種新的診療思路。

3.2.3 抗炎作用炎癥的反應(yīng)過程很復(fù)雜，其中涉及到多個靶點(diǎn)與多種信號通路參與。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，黃芩提取物具有的抗炎作用，主要是通過抑制脂質(zhì)過氧化物的形成及影響炎癥介質(zhì)的釋放從而發(fā)揮抗炎作用［23］。陳敬國等［24］在運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探究黃芩的抗炎機(jī)制中指出黃芩中的活性成分主要作用于MAPK14、EGFR、TNFRSF1A、SELE等靶點(diǎn)來發(fā)揮抗炎效應(yīng)。又根據(jù)陳宇［25］的體內(nèi)、外實驗研究證明黃連能夠下調(diào)STAT4、TNF-α、IL-12的mRNA水平，抑制E2F的轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制細(xì)胞的增殖和遷移，通過雙向調(diào)節(jié)STAT4信號通路從而發(fā)揮抗炎作用。另外，黃連素還可以通過改善線粒體的生物合成功能，從而減輕LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)［26］。因此，黃芩與黃連能夠從多靶點(diǎn)、多途徑出發(fā)，通過影響炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生和釋放、參與某些炎癥相關(guān)信號通路等方式協(xié)同發(fā)揮抗炎作用，從而改善炎癥反應(yīng)。

3.2.4 抗菌作用隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛應(yīng)用，耐藥菌已成為醫(yī)院感染以及社區(qū)感染主要存在的問題［27］。多重耐藥菌的產(chǎn)生不僅增加了感染性疾病治愈的難度，還造成了社會性的危害。在抗生素治療效果不佳的情況下，人們將目光投向了具有抑菌作用的中藥。目前國內(nèi)已報導(dǎo)了黃芩、黃連等中藥對各種細(xì)菌及耐藥菌有不同程度的抑菌作用［28］。根據(jù)研究表明黃芩、黃連共煎所產(chǎn)生的絡(luò)合物具有明顯的抗菌活性［29］。楊小紅等［30］也提出，“黃芩-黃連”藥對對幽門螺旋桿菌有抑制作用。另有研究認(rèn)為該藥對對致病性厭氧菌牙齦紫質(zhì)單胞菌、中間普氏菌、核梭桿菌都有抑制作用，而且對該類厭氧菌感染所導(dǎo)致的疾病有一定的治療作用［31］。同時，對金黃色葡萄球菌和痢疾桿菌也具有較強(qiáng)的抑制作用，可用于治療金黃色葡萄球菌感染引起的癰腫瘡毒及痢疾桿菌感染引起的痢疾等疾?。?2］。因為葡萄球菌對青霉素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素以及克林霉素通常表現(xiàn)為不敏感，欒耀芳等［33］用黃芩、黃連水提物作用于耐藥葡萄球菌組與非耐藥葡萄球菌組，經(jīng)實驗研究證實了中藥黃芩、黃連對兩組細(xì)菌均產(chǎn)生了不同程度的抑制作用。以上研究表明了“黃芩-黃連”藥對有抗菌作用，對臨床上治療感染性疾病、減少耐藥菌株的產(chǎn)生具有重要意義，同時也為特殊耐藥菌的中藥治療提供了科學(xué)依據(jù)，值得繼續(xù)探究。

3.2.5 防治神經(jīng)退行性病變老年癡呆屬于神經(jīng)退行性疾病范疇，章常華等［34］通過研究“黃芩-黃連”藥對對D-半乳糖癡呆小鼠模型學(xué)習(xí)記憶能力產(chǎn)生的作用，發(fā)現(xiàn)該藥對可顯著縮短D-半乳糖癡呆小鼠的定向航行和空間探索潛伏期，提高模型小鼠的學(xué)習(xí)能力，說明了該藥對對于阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性病變有一定的防治作用。在此之前有文獻(xiàn)報道，黃芩提取物可以提高小鼠的學(xué)習(xí)與記憶能力［35］。李紅玉等［36］將黃芩的水煎液作用于構(gòu)建的HSP70啟動子細(xì)胞篩選模型，發(fā)現(xiàn)黃芩水煎液能激活HSP70啟動子，對阿爾茨海默病有潛在的治療作用。朱宇雯等［37］研究發(fā)現(xiàn)黃連堿可能是通過抑制IDO的表達(dá)，進(jìn)而降低犬尿氨酸途徑的代謝效率，來抑制神經(jīng)元的凋亡，具有治療神經(jīng)退行性疾病的潛能。后來又有研究表明，小檗堿能防治認(rèn)知障礙疾病，有神經(jīng)保護(hù)作用［38］。從以上研究來看，黃芩與黃連對于神經(jīng)退行性疾病均有一定的治療作用，二者配伍后治療神經(jīng)性疾病有很大的潛力，因此在治療神經(jīng)退行性病變等方面還可以做進(jìn)一步的挖掘。

3.2.6 抗氧化作用當(dāng)體內(nèi)的氧化與抗氧化作用處于失衡的狀態(tài)時被稱為氧化應(yīng)激，這種狀態(tài)會對機(jī)體的細(xì)胞基因組造成損傷，還會使細(xì)胞膜的通透性及流動性發(fā)生改變［39］。大多數(shù)黃酮類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)中2,3雙鍵和4位羰基以及3或5位羥基都有抗氧化作用。黃芩中己知的黃酮類化合物多數(shù)都具有酚羥基結(jié)構(gòu)，而黃芩素是其中最有效的抗氧化物，可預(yù)防過氧化物酶、超氧化物陰離子等氧自由基引起的成纖維細(xì)胞的損傷［40］。徐穎等［41］通過整體動物實驗與電生化實驗評價了黃連對小鼠體內(nèi)紅細(xì)胞的抗氧化功能造成的影響，表明黃連具有保護(hù)活性氧對正常紅細(xì)胞損傷的作用，具有抗氧化（還原）的屬性。黃芩與黃連均具有抗氧化的作用，能夠提高機(jī)體的抗氧化能力，但二者合用以后的抗氧化強(qiáng)度是否會提高，文獻(xiàn)研究中鮮少有報導(dǎo)，因此還需深入研究。

4 結(jié)語

“黃芩-黃連”藥對作為清熱燥濕的經(jīng)典藥對，兩藥相配，在功效上協(xié)同發(fā)揮作用。隨著對該藥對不斷深入地研究，發(fā)現(xiàn)其有效成分眾多，且具有廣泛的藥理作用，在2型糖尿病、炎癥、腸道菌群紊亂、神經(jīng)退行性疾病等的研究中都展現(xiàn)出了極大的藥用價值。筆者通過對近10年相關(guān)文獻(xiàn)的梳理發(fā)現(xiàn)，目前大部分學(xué)者將“黃芩-黃連”藥對的焦點(diǎn)投向抗炎和降糖兩個方面，而且對于這兩種作用機(jī)制的研究相對較多，但在抗菌、抗氧化和防治神經(jīng)退行性病變等作用上還缺少機(jī)制的探究。同時根據(jù)現(xiàn)有的研究得知，該藥對調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡主要是通過調(diào)節(jié)腸道中微生物的比例來實現(xiàn)的，而腸道微生物群又與許多疾病相關(guān)聯(lián)。因此，在該藥對通過介導(dǎo)腸道細(xì)胞的信號通路從而防治某些疾病等方面還需進(jìn)一步的探究，為發(fā)掘“黃芩-黃連”藥對更多的應(yīng)用價值提供充分的依據(jù)。