蛋雛雞致病性大腸桿菌病的診斷與防治

楊斌，張玲會(huì)

（1.行唐縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所余底分所，河北 石家莊 051600；2.行唐縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所玉亭分所，河北 石家莊 050600）

致病性大腸桿菌是引起蛋雛雞急性傳染病的主要病原， 其癥狀表現(xiàn)主要有敗血癥、 氣囊炎、輸卵管炎、心包炎、腸炎、腹膜炎等。 由于該病原常與多種病原混合感染， 而繼發(fā)于其他傳染病，導(dǎo)致治療十分困難。 目前本病已成為危害養(yǎng)禽業(yè)的重要傳染病， 給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失， 所以對(duì)蛋雛雞大腸桿菌病的防控刻不容緩。

1 流行病學(xué)

本病分布廣泛，在世界各地均有發(fā)生，呈散發(fā)性或者地方流行性， 且不同地區(qū)不同雞場(chǎng)之間感染的大腸桿菌血清型都有所差異。

1.1 傳染來源

患病雛雞和帶菌者是主要的傳染源。 可通過患病雛雞糞便、血液、內(nèi)臟等分離出致病性大腸桿菌。

1.2 發(fā)病年齡和發(fā)病季節(jié)

本病無季節(jié)性，一年四季均可發(fā)生，尤以氣溫驟變時(shí)發(fā)病率升高。 各個(gè)年齡段蛋雞均可感染，而30 日齡左右雛雞易感性最高。

1.3 傳染途徑

本病傳染性較高， 主要通過患病雛雞和帶菌雞糞便傳播、病原污染水源而傳播、通過種蛋垂直感染傳播。

1.4 發(fā)病率和病死率

本病潛伏期較短，發(fā)病率較高，雞群嚴(yán)重感染時(shí)死亡率極高。30 日齡內(nèi)的雛雞一旦感染，發(fā)病率可達(dá)30%。 由于蛋雛雞抵抗力低，治療不及時(shí)，病死率可高達(dá)80%～100%。

2 臨床癥狀

本病發(fā)病迅速，死亡率高。 根據(jù)蛋雞不同發(fā)育階段的癥狀類型可分為：卵黃性腹膜炎型、雛雞臍炎型、急性敗血癥型、呼吸道型。

2.1 卵黃性腹膜炎型

主要發(fā)生于產(chǎn)蛋中、后期，發(fā)病急，病程短，且死亡率高。 患病蛋雞的雞冠呈紅或者暗紅色；腹部膨脹、垂墜、腹瀉；感染嚴(yán)重時(shí)，引起卵泡變形、充血，呈紅褐色或灰褐色，甚至導(dǎo)致卵泡破裂，卵黃液滯留在腹腔中，帶有惡臭氣味；腹腔內(nèi)臟器官覆蓋有黃色或淺黃色纖維素膜； 隨著病程延長，會(huì)導(dǎo)致腸道和其他器官發(fā)生粘連。

2.2 臍炎型

主要發(fā)生于蛋雛雞。 由于受致病性大腸桿菌污染的種蛋在孵化時(shí)出現(xiàn)死胚， 或者出殼后陸續(xù)死亡。 患病雛雞臍孔紅腫、破潰，腹部腫大，糞便粘稠，黃白色，帶有腥臭味；患病雛雞多見發(fā)育不良，生長緩慢；由于卵黃囊吸收不良，卵黃液呈黃綠色；剖檢發(fā)現(xiàn)肝臟腫脹、質(zhì)脆，呈土黃色或暗紅色，有斑點(diǎn)狀出血；常見小腸臌脹，黏膜充血，或有點(diǎn)狀出血。

2.3 急性敗血癥型

主要發(fā)生于蛋雛雞及4 月齡以內(nèi)蛋雞。 患病雞的體溫增高，飲水增多，采食銳減，排黃白或綠白色稀糞，部分患病雞出現(xiàn)呼吸困難，伸頸張嘴，扭頭等癥狀。 致病性大腸桿菌引起的急性敗血癥病雞突然死亡，皮膚表面、各部分肌肉均可見瘀血，呈紫黑色；肝臟腫大，表面出現(xiàn)散布的白色小壞死灶； 腸黏膜出現(xiàn)彌漫性充血、出血，導(dǎo)致整個(gè)腸管呈現(xiàn)黑紫色；心臟腫大，心包腔內(nèi)充滿淡黃色液體；腎臟腫大；肺臟出血、水腫。

2.4 呼吸道型

主要發(fā)生于5～12 周齡的蛋雛雞，常伴發(fā)于傳染性支氣管炎、支原體病。 主要引起患病雞胸氣囊和腹氣囊炎癥， 囊腔內(nèi)常出現(xiàn)白色干酪樣滲出物，個(gè)別患病雛雞出現(xiàn)肺水腫。

3 診斷

可根據(jù)流行病學(xué)、 臨床癥狀及剖檢病理變化等做出該病的初步診斷， 確診本病還需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷病原及檢測(cè)特異性抗體。 采集病死雞新鮮小腸黏膜、肝臟、腸系膜淋巴結(jié)等做為檢測(cè)樣本。

3.1 分離培養(yǎng)

將無菌采集的新鮮病料，接種于普通瓊脂、麥康凱、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，37℃恒溫箱培養(yǎng)24 小時(shí)。 致病性大腸桿菌在普通瓊脂培養(yǎng)基上可長出乳白色、表面光滑、橢圓形菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上可長出玫紅色、表面光滑、橢圓形菌落；在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上可長出金屬光澤、 橢圓形菌落。

3.2 涂片鏡檢

挑取培養(yǎng)基上單個(gè)菌落，涂于載玻片，經(jīng)革蘭氏染色、 晾干，1000 倍油鏡下可看到紅色、棒狀短桿菌。 電鏡下可看到大小約0.5×1.5～3 微米，周身鞭毛、能運(yùn)動(dòng)的兩端鈍圓短桿菌。

3.3 生化試驗(yàn)

挑取培養(yǎng)基上單菌落，接種在生化反應(yīng)管，37℃培養(yǎng)24 小時(shí)。 生化反應(yīng)結(jié)果能發(fā)酵乳糖、甘露醇、麥芽糖，且產(chǎn)酸產(chǎn)氣；吲哚、甲基紅試驗(yàn)判定為陰性，VP、 枸緣酸鹽試驗(yàn)判定為陽性，以上生化試驗(yàn)結(jié)果可確診為大腸桿菌。

3.4 血清學(xué)鑒定

將制備好的大腸桿菌抗原按照大腸桿菌O因子定型血清診斷說明書操作， 觀察記錄樣品的凝集情況，判斷大腸桿菌的血清型。

3.5 PCR 鑒定

從待檢樣品中提取菌株的全基因組作為模板， 根據(jù)NCBI 上發(fā)布的大腸桿菌16S rRNA 序列設(shè)計(jì)特異性引物，進(jìn)行PCR 反應(yīng)。PCR 產(chǎn)物可通過1%瓊脂糖凝膠電泳初步確定。

3.6 ELISA 抗體檢測(cè)

該方法可以通過采集患病動(dòng)物的糞便和血清等來檢測(cè)特異性抗體， 判斷是否感染大腸桿菌。 ELISA 抗體檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，適合于臨床中大批量樣本的檢測(cè)。

4 防治建議

4.1 改善飼養(yǎng)環(huán)境

致病性大腸桿菌是常在細(xì)菌， 育雛期間始終要保持空氣濕潤，地面干燥，同時(shí)合理通風(fēng)，這樣既可以減少慢性呼吸道疾病， 同時(shí)也能預(yù)防大腸桿菌病。 飼養(yǎng)時(shí)必須重視消毒效果，務(wù)必做到：全進(jìn)全出；空舍期徹底消毒；上雛雞后，對(duì)飼養(yǎng)管理人員、水槽、料盆定期消毒；定期帶雞噴霧消毒(防疫期間除外)。

4.2 疫苗免疫

蛋雛雞養(yǎng)殖過程中， 疫苗免疫是預(yù)防致病性大腸桿菌病的有效手段之一。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，雞致病性大腸桿菌疫苗研制上可分為：滅活苗、亞單位疫苗、弱毒疫苗、新型疫苗。 市售疫苗種類繁多，包含大腸桿菌不同血清型的單價(jià)或多價(jià)疫苗、不同佐劑類型的疫苗。 但是致病性大腸桿菌的抗原血清型種類多， 不同血清型之間交叉保護(hù)效果較差。 根據(jù)致病性大腸桿菌的抗原特性，選擇適宜當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)血清型的菌株制備疫苗 （俗稱“自家苗”），可降低蛋雛雞死亡率，提高保護(hù)效價(jià)，更加有效地預(yù)防大腸桿菌病。

4.3 合理選藥

目前，致病性大腸桿菌對(duì)抗生素、磺胺類、呋喃類藥物比較敏感，但也極易產(chǎn)生抗藥性。 因此， 首先對(duì)分離到的致病性大腸桿菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，再篩選出有效藥物進(jìn)行治療，才能達(dá)到預(yù)期的治療效果。 為了防止繼發(fā)感染和耐藥性的產(chǎn)生， 可選擇抗生素替代品來改善蛋雛雞的健康狀況，并減少禽產(chǎn)品污染問題。 復(fù)方中藥制劑治療致病性大腸桿菌可以起到顯著的效果，如使用復(fù)方黃連口服液，對(duì)蛋雛雞致病性大腸桿菌的治愈率可達(dá)90%；復(fù)方白頭翁散（白頭翁、秦皮、訶子、烏梅）配合化學(xué)藥物使用能有效控制蛋雛雞致病性大腸桿菌。 盡管復(fù)方中藥制劑在致病性大腸桿菌的治療中有顯著效果，但是復(fù)方中藥療效產(chǎn)生較慢， 不利于蛋雛雞快速恢復(fù)生長性能。 微生態(tài)制劑（乳酸菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌）對(duì)致病性大腸桿菌引起的腹瀉有很好的緩解作用， 已被越來越多的養(yǎng)殖戶所接受， 但是并不能作為治療藥物代替抗生素使用，可搭配化學(xué)藥物、復(fù)方中藥聯(lián)合使用，已達(dá)到更有效的治療效果，縮短病程。