不同外源物質(zhì)對高溫脅迫下平邑甜茶幼苗的緩解效應(yīng)

何曉龍，劉懷特，尚雨薇，張紀(jì)冉，徐繼忠，梁博文

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，河北 保定 071001）

蘋果是世界四大果樹之一，也是我國栽培面積最大的果樹。良好的生態(tài)環(huán)境是果樹賴以生存的條件和基礎(chǔ)，對果樹生長發(fā)育具有極其重要的影響。20 世紀(jì)以來，由于“溫室效應(yīng)”的影響，全球溫度上升了1.5 ～5.8 ℃［1］。高溫脅迫作為植物在生存環(huán)境中的主要非生物脅迫因子，即使短暫的高溫脅迫也會引起植物形態(tài)、生化和生理的變化，對許多植物產(chǎn)生傷害，從而極大的影響植物體生長和發(fā)育的過程［2-3］。因此緩解高溫對蘋果的傷害是亟待解決的問題。

近年來，大量學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)水楊酸（Salicylic acid, SA）、 褪 黑 素（Melatonin, MT）、 多 巴 胺（Dopamine, DA）等外源物質(zhì)在提高植物抗逆性方面效果顯著，但針對蘋果植株耐熱性方面的研究還較少。SA 是植物體內(nèi)普遍存在的一種酚類化合物，是一種能夠激活植物過敏反應(yīng)和系統(tǒng)獲得抗性的重要內(nèi)源信號分子；在誘導(dǎo)植物抗熱性、抗病性、抗寒性、抗鹽性等抗性中發(fā)揮著重要的作用［4］。MT，化學(xué)名稱為N-乙?；?5-甲氧基色胺，是一種高度保守的吲哚類化合物［5］。大量研究表明，MT 具有較強的抗自由基作用，能夠清除植物體內(nèi)·OH、H2O2、NO 等活性氧自由基［6］，延緩葉綠素降解［7］，調(diào)節(jié)抗壞血酸和谷胱甘肽等抗氧化劑水平［8］，緩解非逆境脅迫對植物生長發(fā)育的不利影響。DA 是兒茶酚胺的一種，與植物抗逆有重要的關(guān)系，許多研究結(jié)果表明DA 能夠提高植物對脅迫的適應(yīng)能力，保護植物在逆境條件下正常生長發(fā)育。如外源DA 能夠調(diào)節(jié)鹽脅迫下平邑甜茶的光和能力、離子平衡及SOS 信號，并能夠通過調(diào)控抗氧化酶活性及抗氧化劑水平來緩解鹽脅迫對平邑甜茶造成的傷害［9］。此外，外源施加DA 能夠提高平邑甜茶的光合速率和葉綠素含量，增強參與氮代謝的酶活性，提高蘋果植株對低氮脅迫的耐受性［10-11］。

雖然目前針對上述3 種物質(zhì)參與植物響應(yīng)逆境脅迫的研究較多，但針對蘋果植株響應(yīng)高溫脅迫的研究鮮有報道。本試驗以蘋果生產(chǎn)中的常用砧木平邑甜茶為試材，通過葉面噴施不同外源物質(zhì)并結(jié)合人工模擬高溫環(huán)境的處理方法，探討其對高溫脅迫下平邑甜茶幼苗相關(guān)生理特性及關(guān)鍵基因表達變化的影響，以期為蘋果植株響應(yīng)高溫脅迫提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及處理

本試驗于2021 年7 月在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)創(chuàng)新試驗園進行，供試材料為2 年生平邑甜茶實生苗，采用為2 ∶1 ∶1（體積比）的泥炭土、珍珠巖和蛭石混合基質(zhì)進行培養(yǎng)，置于溫室進行統(tǒng)一常規(guī)管理，之后選取75 株長勢一致、生長健壯的平邑甜茶幼苗采用葉面噴施的方式進行處理。平邑甜茶幼苗被平均分為5 組，每天上午8:00—10:00 對其中3 組幼苗葉片正反面分別均勻噴施外源物質(zhì)，以葉片全部濕潤為宜，其余2 組噴施等量去離子水作為對照，連續(xù)噴施7 d 后將平邑甜茶幼苗轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)箱[光照強度為400 μmol/ (m2·s)，光/暗周期為12 h/12 h]進行高溫處理，24 h 后進行取樣測定。

本試驗設(shè)置5 個處理，每個處理15 株幼苗：（1）常溫對照CK：常溫環(huán)境（25 ℃/17 ℃，晝/夜，12 h/12 h），葉片噴施去離子水；（2）高溫對照ST：高溫環(huán)境（42 ℃/40 ℃，晝/夜，12 h/12 h），葉面噴施去離子水；（3）SA 處理：高溫環(huán)境（42 ℃/40 ℃，晝/夜，12 h/12 h），葉面噴施100 μmol/L的外源水楊酸；（4）MT 處理：高溫環(huán)境（42 ℃/40 ℃，晝/夜，12 h/12 h），葉面噴施100 μmol/L 的外源褪黑素；（5）DA 處理：高溫環(huán)境（42 ℃/40 ℃，晝/夜，12 h/12 h），葉面噴施100 μmol/L 的外源多巴胺。

1.2 測定指標(biāo)及方法

1.2.1 葉綠素含量和葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測定 參照Arnon［12］方法測定各處理葉片葉綠素a、葉綠素b和總?cè)~綠素含量；采用Mini - Iamage -PAM 調(diào)制葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)（德國，WALZ 公司）測定葉綠素?zé)晒鈪?shù)［13］。

1.2.2 葉片相對電導(dǎo)率、MDA 含量、超氧陰離子產(chǎn)生速率以及H2O2含量的測定 相對電導(dǎo)率根據(jù)Dionisio-Sese［14］的方法采用雷磁 DDS-307 電導(dǎo)率儀測定；MDA 含量采用硫代巴比妥酸法測定［15］；超氧陰離子產(chǎn)生速率采用羥胺氧化法測定［16］；H2O2含量使用相應(yīng)檢測試劑盒（蘇州科銘生物）按照說明書的方法測定。

1.2.3 可溶性蛋白、可溶性糖和淀粉含量的測定 可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍染色法測定［17］；可溶性糖和淀粉含量采用蒽酮比色法測定［15］。

1.2.4 抗氧化酶含量的測定 超氧化物歧化酶（SOD）采用氮藍四哚光還原法測定［18］；過氧化物酶（POD）采用愈創(chuàng)木酚法測定［19］；過氧化氫酶（CAT）采用紫外吸收法測定［15］；抗壞血酸過氧化物酶（APX）、谷胱甘肽還原酶（GR）、脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）和單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）采用相對應(yīng)的檢測試劑盒（蘇州科銘生物）按照說明書的方法測定。

1.2.5 基因定量表達分析 根據(jù)制造商的說明，使用M5 Plant RNeasy Complex Mini Kit（多糖多酚植物樣本RNA 提取試劑盒）提取葉片總RNA。使用用于第1 鏈cDNA 合成系統(tǒng)的UEIrisIIRTPCR 系統(tǒng)進行反轉(zhuǎn)錄。通過實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）LightCycle 96 實時PCR 系統(tǒng)測定MhSOD、MhPOD、MhcAPX等抗氧化酶相關(guān)基因，MhHSP17.3、MhHSP90-5、MhHSP70等熱休克蛋白基因以及MhATG3a、MhATG5-1、MhATG18α等自噬相關(guān)基因的表達水平，以β-actin作為內(nèi)標(biāo)。每個樣本設(shè)立3 個獨立的生物重復(fù)。引物序列如表1。

表1 實時定量引物序列Table 1 Primer sequences for qRT-PCR

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)采用SPSS26.0 軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，采用 Tukey’s 檢驗進行多重比較（P＜0.05），Sigma Plot 14.0 軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶葉片表型的影響

如圖1 所示，常溫對照CK 的蘋果幼苗葉片鮮綠，無熱害癥狀。高溫脅迫處理24 h 后，所有植株的葉片都受到不同程度的傷害，高溫對照ST 葉片受害癥狀最重，葉面呈卷曲變褐，出現(xiàn)大面積水漬狀燙傷斑點；而經(jīng)外源物質(zhì)處理的植株葉片萎蔫程度較輕，其中以噴施水楊酸的葉片受害癥狀最輕。

圖1 高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶葉片表型Fig. 1 Leaf phenotype ofMalus hupehensisleaves after 24 hours of high temperature stress treatment

2.2 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶葉綠素含量及葉綠素?zé)晒獾挠绊?/h3>

如圖2 所示，高溫脅迫24 h 后，高溫對照ST的葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素含量最低，分別比CK 降低了48.06%、56.54%和51.08%，且差異顯著（P＜0.05）。而施加SA、MT 和DA 處理葉片總?cè)~綠素含量均維持較高水平，與ST 葉片相比，分別升高了38.14%、24.31%和26.40%。高溫脅迫顯著降低了平邑甜茶葉片的Fv/Fm，其中以高溫對照ST 的幼苗葉片F(xiàn)v/Fm值最低，較CK 下降了39.38%，而外源物質(zhì)處理明顯提高了高溫脅迫下Fv/Fm，SA、MT和DA 處理分別比高溫對照ST 明顯提高26.27%、23.12% 和7.62%（圖2D）。SA、MT 和DA 處 理均能維持高溫脅迫下蘋果葉片葉綠素和Fv/Fm在較高水平，并且以SA 處理效果最好。

圖2 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫24 h 后平邑甜茶葉綠素a（A）、葉綠素b（B）、總?cè)~綠素（C）和Fv/Fm（D）的影響Fig. 2 Effects of different exogenous substances on chlorophyll a (A), chlorophyll b (B), total chlorophyll (C) andFv/Fm(D)ofMalus hupehensisplants under high temperature stress for 24 hours

2.3 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶葉片膜脂過氧化程度的影響。

如圖3A 所示，高溫脅迫后，平邑甜茶幼苗葉片相對電導(dǎo)率顯著升高，其中以高溫對照ST 處理的相對電導(dǎo)率值最大，較CK 相比升高了157.6%，而SA、MT 和DA 處理顯著降低了葉片相對電導(dǎo)率，分別較ST 處理下降了43.5%、29.7% 和27.4%。從圖3B 上可以看出，高溫脅迫顯著升高了葉片中MDA 含量的積累，但施加外源物質(zhì)均能顯著降低MDA 含量的積累，分別較ST 處理降低了22.17%、10.17% 和16.8%。由圖3C 和3D 可知，高溫脅迫下平邑甜茶幼苗葉片內(nèi)ROS 大量積累，過氧化氫含量和超氧陰離子產(chǎn)生速率的變化相一致，較ST 相比，3 種外源物質(zhì)處理均顯著降低了葉片中ROS 的含量，其中SA 處理的幼苗葉片的超氧陰離子產(chǎn)生速率和過氧化氫含量最低，為13.53 μmol/(g·min)和28.76 μmol /g，分別是高溫對照ST 的0.64和 0.78 倍。

圖3 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶相對電導(dǎo)率（A）、MDA 含量（B）、超氧陰離子產(chǎn)生速率（C）和過氧化氫含量（D）的影響Fig. 3 Effects of different exogenous substances on the relative electrolyte leakage (REL, A), malondialdehyde (MDA, B),production rate of superoxide anion (C) and H2O2concentration (D) ofMalus hupehensisplants under high temperature stress treatment for 24 hours

2.4 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶葉片可溶性糖、淀粉及可溶性蛋白含量的影響

如圖4 所示，與CK 相比，高溫脅迫顯著升高了平邑甜茶葉片可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量，而噴施外源SA、MT 和DA 均顯著提高了高溫脅迫下平邑甜茶葉片上述物質(zhì)的含量。高溫處理24 h 后，葉片中可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量均是SA處理最高，分別是ST 處理的1.15、1.59 和1.49 倍。

圖4 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶可溶性糖（A）、淀粉（B）和可溶性蛋白（C）含量的影響Fig. 4 Effects of different exogenous substances on the contents of soluble sugar (A)，starch (B)and soluble protein (C) ofMalus hupehensisplants under high temperature stress treatment for 24 hours

2.5 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶抗氧化酶活性的影響

與CK 植株相比，高溫脅迫處理后，除GR 酶外，不同預(yù)處理植株葉片中APX 酶、MDHAR 酶、DHAR 酶、SOD 酶、POD 酶和CAT 酶活性均呈不同程度的升高（圖5）。此外，SA、MT 和DA 預(yù)處理下的葉片抗氧化酶活性相對于ST 處理來說均顯著升高，外源SA、MT 和DA 預(yù)處理的幼苗葉片APX 酶、GR 酶、MDHAR 酶、DHAR 酶、SOD 酶、POD 酶和CAT 酶活性分別升高了43.14%、31.37%和23.53%，57.50%、30.00%和25.00%，100.0%、36.36% 和27.27%，95.28%、60.38% 和43.40%，34.51%、27.52% 和13.23%，26.51%、15.67% 和14.46%，68.84%、44.93% 和39.13%。 其 中， 以SA 處理的酶活性最高。

圖5 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶抗氧化酶活性的影響Fig. 5 Effects of different exogenous substances on antioxidant enzymes activities ofMalus hupehensisplants under high temperature stress treatment for 24 hours

2.6 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶抗氧化相關(guān)基因表達的影響

為了進一步檢測外源物質(zhì)預(yù)處理對抗氧化酶活性的影響，對其合成途徑相關(guān)基因進行了定量分析（圖6）。高溫脅迫下，與CK 相比，ST 處理顯著上調(diào)了MhSOD、MhPOD、MhCAT、MhMDHAR、MhDHAR1、MhDHAR2、MhcAPX、MhcAPX基因的表達，同時外源物質(zhì)預(yù)處理的植株中其表達量均顯著高于ST 處理，且以SA 處理表達量最高。以MhCAT為例，SA、MT、DA 處理的表達量分別為ST 處理的2.74、1.95 和2.13 倍（圖6C），結(jié)果表明外源物質(zhì)預(yù)處理提高了抗氧化酶相關(guān)基因的表達，有利于提高植株相關(guān)抗氧化酶活性。

圖6 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶抗氧化相關(guān)基因表達的影響Fig. 6 Effects of different exogenous substances on the expression of antioxidant- related genes inMalus hupehensisplants under high temperature stress for 24 hours

2.7 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶熱休克蛋白相關(guān)基因表達的影響

對不同處理植株葉片的6 個熱應(yīng)激響應(yīng)基因（MhHSP17.3、MhHSP101、MhHSP90-5、MhHSP90-6、MhHSP70、MhHSP70-2） 進 行 了 表達分析，結(jié)果表明高溫脅迫顯著上調(diào)了這6 個基因的表達（圖7），其中MhHSP17.3上調(diào)倍數(shù)最大，為CK 處理的1 000 多倍。此外，外源物質(zhì)預(yù)處理的植株葉片熱激響應(yīng)基因上調(diào)幅度均顯著高于ST 處理植 株。以MhHSP90-5和MhHSP70-2為 例，SA、MT、DA 3 種處理的表達量分別是ST 處理的2.27、2.16、1.51 倍（圖7C）和2.67、1.88、1.16 倍（圖7F）。

圖7 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶熱休克蛋白相關(guān)基因表達的影響Fig. 7 Effects of different exogenous substances on the expression of heat shock protein-related genes inMalus hupehensisplants under high temperature stress for 24 hours

2.8 外源物質(zhì)預(yù)處理對高溫脅迫下平邑甜茶自噬相關(guān)基因表達的影響

高溫脅迫下葉片中自噬相關(guān)基因MhATG3a、MhATG3b、MhATG7a、MhATG5-1、MhATG5、MhATG10、MhATG8c、MhATG8i、MhATG18α的表達均有所變化，與常溫對照（CK）相比，高溫脅迫下所有處理植株葉片自噬相關(guān)基因表達量均顯著上調(diào)（圖8）。此外，外源物質(zhì)預(yù)處理的葉片中基因表達量均顯著高于清水對照預(yù)處理（ST）的植株，結(jié)果表明高溫脅迫下這3 種外源物質(zhì)預(yù)處理能夠上調(diào)植株葉片中自噬相關(guān)基因的表達量。其中以SA 處理上調(diào)幅度最大，MhATG3a、MhATG3b、MhATG7a、MhATG5-1、MhATG5、MhATG10、MhATG8c、MhATG8i、MhATG18α等表達量分別是ST 處理的1.99、3.58、1.62、2.02、1.98、1.79、1.15、2.22、2.36 倍（圖8）。

圖8 不同外源物質(zhì)對高溫脅迫處理24 h 后平邑甜茶自噬相關(guān)基因表達的影響Fig. 8 Effects of different exogenous substances on the expression of autophagy-related genes inMalus hupehensisplants under high temperature stress for 24 hours

3 討論與結(jié)論

葉綠素是植物進行光合作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，環(huán)境因子的改變會使植物體內(nèi)葉綠素的合成速率降低，加速葉綠素降解，進而導(dǎo)致植株的光合性能改變［20-21］。本試驗結(jié)果表明，高溫脅迫下平邑甜茶植株葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素含量均顯著下降，這可能是由于高溫脅迫抑制了參與葉綠素生物合成的酶或加速了葉綠素的降解［22-23］；但是噴施外源物質(zhì)的各處理葉綠素含量均顯著高于ST，其中噴施外源水楊酸的處理葉綠素含量最高，說明噴施適宜濃度的外源物質(zhì)能夠減緩高溫脅迫下蘋果植株葉片中葉綠素的降解，這與Wassie［24］在紫花苜蓿植株上得出的結(jié)論一致。高溫脅迫還會對植株葉片光系統(tǒng)Ⅱ造成傷害，Wu 等［25］發(fā)現(xiàn)在熱脅迫條件下三葉期玉米幼苗葉片中的最大光化學(xué)量子產(chǎn)量（Fv/Fm）較對照組顯著降低，F(xiàn)v/Fm的降低說明熱脅迫降低了光能向光系統(tǒng)Ⅱ反應(yīng)中心傳遞的效率，這導(dǎo)致電子傳遞量子效率降低，光合作用受到抑制。本試驗中，高溫脅迫下添加外源水楊酸、褪黑素和多巴胺后葉綠素含量和Fv/Fm值均顯著升高，說明施加外源物質(zhì)能夠有效緩解高溫脅迫對蘋果葉片葉綠素的破壞作用，提高葉綠素含量，促進并保護其光合系統(tǒng)，緩解了高溫對植株葉片造成的傷害。

大量研究表明高溫脅迫會使植物體電解質(zhì)外泄，細(xì)胞膜通透性改變，活性氧（ROS）大量積累，引起膜脂過氧化，MDA 含量升高，最終導(dǎo)致細(xì)胞膜發(fā)生損傷［26-27］。本試驗中，高溫脅迫下蘋果葉片的相對電導(dǎo)率和MDA 含量較對照組顯著升高，ROS大量積累，而噴施3 種外源物質(zhì)均顯著降低了相對電導(dǎo)率和MDA 含量，減緩ROS 的積累，這說明噴施適宜濃度的外源物質(zhì)能夠有效地清除植株體內(nèi)多余的ROS，保護細(xì)胞膜的完整性，緩解了高溫逆境對植物造成的危害。外源物質(zhì)在植物體最主要功能就是作為第一道防線來抵御環(huán)境變化而造成的氧化脅迫［5,28］。其主要表現(xiàn)就是通過清除活性氧自由基和上調(diào)抗氧化酶基因來行使這一功能?；钚匝醯那宄饕复俜烙到y(tǒng)和非酶促防御系統(tǒng)［29］。酶促防御系統(tǒng)主要包括SOD、POD、CAT 以及抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)中的一些抗氧化酶構(gòu)成，可溶性蛋白、淀粉等物質(zhì)為非酶促防御系統(tǒng)中的主要成分，它們在清除活性氧自由基的過程中起著重要作用，一方面可以直接與活性氧反應(yīng)，將其還原：另一方面通過提高有機或無機物質(zhì)來提高細(xì)胞液濃度，降低滲透勢，減輕活性氧對植物造成的傷害［30］。在本研究中發(fā)現(xiàn)外源物質(zhì)預(yù)處理均能夠顯著上調(diào)抗氧化酶相關(guān)基因，提高了SOD、APX、GR 等抗氧化酶的活性，此外噴施外源物質(zhì)還提高了可溶性蛋白、淀粉等物質(zhì)的含量。說明噴施外源物質(zhì)能夠提高植株葉片可溶性蛋白等物質(zhì)含量，降低細(xì)胞滲透勢，提高抗氧化酶的活性，能夠更有效地清除高溫脅迫下植物體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧，進而減少活性氧的積累，最終提高蘋果植株對高溫脅迫的耐受性。

熱休克蛋白（Hsps）是高溫脅迫誘導(dǎo)的主要功能蛋白，基于蛋白分子大小，熱休克蛋白共分為7類：分別為Hsp40、Hsp60、Hsp70、Hsp90、Hsp00、Hsp110 以及小分子熱休克蛋白（sHsps）［31］。大量研究表明熱休克蛋白能夠調(diào)節(jié)熱脅迫下植物細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的折疊和積累，阻止細(xì)胞內(nèi)變性蛋白的積累，保護植物細(xì)胞免受脅迫傷害，還能夠促進脅迫后受損細(xì)胞的恢復(fù)［32］。霍柳青［33］的研究發(fā)現(xiàn)高溫脅迫會誘導(dǎo)熱激蛋白Hsp 的表達，Hsp 能夠使在高溫脅迫下變性的蛋白復(fù)性，從而減輕植物細(xì)胞在高溫下的損傷。在本研究中我們通過對5 個處理的6 個熱休克蛋白響應(yīng)基因檢測，高溫處理顯著上調(diào)了這些基因的表達，其中以外源激素預(yù)處理的植株葉片上調(diào)幅度更大。熱休克蛋白基因的上調(diào)表達，在一定程度上增強了植株抵抗高溫脅迫的能力。

自噬是真核細(xì)胞中一種進化高度保守的、用于降解老化受損或細(xì)胞器并重復(fù)循環(huán)利用降解產(chǎn)物的過程，與植物體的多種生理和病理過程密切相關(guān)［34］。因此推測高溫脅迫下，噴施外源物質(zhì)后自噬相關(guān)基因的表達量的提高可能會增強植株的自噬活性，增強清除膜上受損細(xì)胞和蛋白的效率，從而緩解植株在高溫環(huán)境下所受到的傷害。此外有證據(jù)還表明自噬能夠通過清除植株體內(nèi)受損的葉綠體來保護植物細(xì)胞，還增強了抗氧化酶的活性，減緩活性氧的積累，維持其在高溫逆境環(huán)境下的活性［33］。但是不同自噬基因在逆境環(huán)境下具體發(fā)揮哪些功能仍需進一步的探究。

綜上，高溫脅迫下外源噴施水楊酸、褪黑素和多巴胺等外源物質(zhì)均能夠維持平邑甜茶植株較高葉綠素水平；同時能夠通過提高抗氧化相關(guān)酶活性和可溶性蛋白等物質(zhì)含量降低植株體內(nèi)活性氧和丙二醛等的積累，維持膜穩(wěn)定性；此外，還通過上調(diào)抗氧化酶相關(guān)基因、熱脅迫蛋白相關(guān)基因和自噬相關(guān)基因的表達等提高蘋果植株對高溫脅迫的耐受性。