中草藥在魚類養(yǎng)殖中的應用

■ 王 凱 孫 榕（江門市澳保生物科技有限公司 廣東 江門 52900）

近年來，我國水產養(yǎng)殖業(yè)的得到快速發(fā)展，水產養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大、集約化程度的不斷增強。然而，隨著養(yǎng)殖強度的不斷加深，我國水產養(yǎng)殖問題日益突出，如養(yǎng)殖環(huán)境惡化、魚類病害問題頻發(fā)等。為降低病害給魚類養(yǎng)殖帶來的巨大經濟損失，養(yǎng)殖戶采用大量抗生素和化學藥劑進行治療，盡管在短期內有一定的治療效果，但長期使用不僅導致了病原體耐藥性的產生，魚體藥物殘留的超標，而且造成了水體環(huán)境的污染，嚴重制約了魚類養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。中草藥是一種純天然的藥材，具有低毒、低殘留、高效、環(huán)保等特點，在魚類養(yǎng)殖過程中，不僅能殺菌、殺蟲、抗病毒，而且具有提高魚體免疫力、促進生長等多種功效，目前已受到廣泛的關注，它在魚類養(yǎng)殖中的應用將為替抗和替化學劑藥物的研究提供思路，進而推動水產養(yǎng)殖業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。

1 中草藥在魚類養(yǎng)殖中的功能

1.1 殺蟲、抑菌殺菌、抗病毒

隨著水產養(yǎng)殖面積的不斷擴大，各種魚類爆發(fā)性疾病也在不斷發(fā)生，包括寄生蟲性、細菌性和病毒性疾病。中草藥作為一種天然的藥草，含有多種生物活性物質，在魚類的寄生蟲性、細菌性和病毒性疾病的防治過程中均具有良好的功效。

1.1.1 殺蟲

我國魚類寄生蟲的種類繁多且復雜，治療魚類寄生蟲病的中草藥同樣豐富多樣。目前報道的能有效防治寄生蟲病（魚類寄生原蟲病、蠕蟲病和魚類甲殼動物病）的中草藥有茶麩、苦參、川楝子、姜黃、苦棘皮、辣蓼草、大葉黃藥、生姜、百部、五加皮、雷丸、貫眾、石榴皮、大黃素、檳榔、烏梅、青蒿素、博羅回、狼毒大戟等至少50種。殺滅不同寄生蟲的有效中草藥有不同。茶麩、川楝子、苦參、百部+貫眾均能有效殺滅水蛭（Whitmania pigra whitman），其中茶麩殺滅水蛭效果最好，川楝子其次，苦參、百部+貫眾最后；貫眾和檳榔單方水提物均能100%殺死刺激隱核蟲（Cryptocaryon irritans brown）幼蟲和小瓜蟲（Ichthyophthirius multifiliis）幼蟲；博落回、狼毒大戟殺滅單殖吸蟲（Monogenea）的效果最好，與敵百蟲相當，婆羅子對于單殖吸蟲殺滅效果較差。

同一種草藥對同一寄生蟲的殺滅效果受寄生蟲的發(fā)育時期和中草藥的濃度影響。7.14mg/mL烏梅、石榴皮水提物處理刺激隱核蟲幼蟲5min，死亡率達100%，而28.57mg/mL烏梅、石榴皮水提物處理刺激隱核蟲包囊4h，死亡率達84.1%，表明同一種草藥對同一寄生蟲不同時期的殺滅效果有不同。大黃素、蘆薈大黃素、黃連素均顯著促進嗜熱四膜蟲（Tetrahymena thermophila）的凋亡，且呈現(xiàn)出一定的濃度-劑量效應；青蒿素在一定濃度下可抑制嗜熱四膜蟲的生長，但在低濃度時有促進其生長的作用，表明草藥對寄生蟲的殺滅效果與其濃度有關，因此使用中草藥殺蟲時，對其濃度的把控至關重要。

關于中草藥的殺蟲的機理，目前相關的研究仍然非常有限。焦愷強等使用復方中草藥殺滅刺激隱核蟲時發(fā)現(xiàn)，中草藥可抑制蟲體包囊形成，導致包囊不正常發(fā)育，包括包囊壁壞死，肉質壞死，包囊畸形等。劉松巖等的報道表明南瓜子氨酸可使蟲體過度興奮，活動顯著增加，引起蟲體痙攣性收縮；檳榔對蟲體有麻痹作用，導致蟲體完全癱瘓。不同的中草藥殺滅寄生蟲的機制不同，目前關于中草藥殺蟲機理的研究仍然較少且處于較為淺顯的層面，尚缺乏大量且深入的研究。

1.1.2 抑菌殺菌

隨著科學技術的發(fā)展和細菌分離培養(yǎng)技術日益成熟，大量的中草藥被應用于抑菌和殺菌效果的研究。目前發(fā)現(xiàn)的具有良好抑菌殺菌效果的中草藥有五倍子、蘇木、女貞、夏枯草、青皮、大黃、穿心蓮、石榴皮、白頭翁、黃芩、白芍、丁香、茯苓、黃芪、小茴香、昆布等至少50種。一種中草藥可對多種病原菌產生抑制或殺滅作用。丁香對類志賀鄰單胞菌（Plesiomonas shigelloides）、副溶血弧菌（Vibriosis parahaemolyticus）、海豚鏈球菌（Streptococcus irriae）均有較好的防治作用，其抑菌濃度分別是31.25、3.13、15.62mg/mL。美人魚發(fā)光桿菌（Photobacterium damsela）、嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）、哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）、創(chuàng)傷弧菌（V.vulnificus）均對蘇木極度敏感。黃連對金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、海豚鏈球菌具有較強的殺菌作用。而抑制或殺滅同一種病原菌的中草藥亦不止一種?；苯恰⒇g薟草、槐角、黃連抑殺海豚鏈球菌的效果良好；訶子、烏梅、連翹、五倍子對柱狀黃桿菌（Flavobacterium columnare）均有較好的抑菌效果；大黃、五倍子、山蒼子、黃芩、苦參均能有效抑制和殺滅水霉（Saprolegnia）；茯苓、五倍子、大黃、烏梅、黃芩、黃連對嗜水氣單胞菌的抑菌作用明顯，且抑菌濃度低。因此，在研究魚類病原菌的時，除了建立病原菌庫，建立對應的中草藥庫將對中草藥在水產病原菌防治上的應用具有重要意義。

據(jù)報道，病原菌通過自身基因變異、降低胞漿膜通透性、產生破壞抗菌藥物抗菌活性成分的滅活酶和主動外排抗菌藥物來對抗抗菌藥物帶來的侵害。中草藥可以破壞菌體細胞壁結構或阻礙細胞壁合成，增加胞漿膜通透性，使藥物更容易進入菌體內部從而達到殺菌的效果；此外，中草藥還能通過抑制菌體中滅活酶活性和菌體藥物外排來達到殺菌的目的。

1.1.3 抗病毒

近年來關于魚類抗病毒中草藥的報道較少，大多是關于人類或其他哺乳動物抗病毒中草藥的研究。杭小英等的研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對大口黑鱸彈狀病毒（Micropterus salmoides rhabdovirus）具有顯著的阻斷、抑制和中和效果。Wang等表明綠茶的有效成分沒食子兒茶素沒食子酸酯能以劑量依賴的形式抑制草魚呼腸孤病毒（Ctenopharyngodon idellus respiratory enteric orphan virus）對細胞表面的黏附能力，以此抑制病毒的復制，從而抵抗病毒的感染。

1.2 中草藥對魚體的保護作用

有關中草藥治療魚類疾病的報道主要包含兩個部分，除了上述的中草藥對病原體的殺滅作用，主要表現(xiàn)為殺蟲、抑菌和抗病毒；還有中草藥對魚體的保護作用，包括對魚體非特異性免疫系統(tǒng)的調節(jié)作用和對疾病進程的干預作用，進而降低或修復組織細胞損傷。

1.2.1 免疫調節(jié)作用

腎臟、肝臟、腸道是魚類重要的免疫器官，血液是物質運輸?shù)闹匾d體，它們的功能指標常被用于評價魚類的免疫力狀況。中草藥可能通過兩種方式對魚體的免疫系統(tǒng)進行調節(jié)，一是激活機體內的補體、白細胞及其細胞因子，二是活化機體內具有抗氧化功能的酶。

補體具有清除病原微生物，活化炎性細胞殺滅靶細胞的作用；白細胞在消化病原微生物和激發(fā)魚體特異性免疫等方面起著重要作用；溶菌酶（LZM）屬于巨噬細胞分泌的一種非特異性防御因子，具有溶解細菌和殺滅病毒的作用；堿性磷酸酶（ALP）和酸性磷酸酶（ACP）是機體巨噬細胞和溶酶體的標志酶。補體C3和補體C4是補體系統(tǒng)的固有成分，研究表明在鯉魚（Cynodon dactylon）添加高劑量的中草藥可顯著提高血液中補體C3、C4的含量；在羅非魚（Oreochromis niloticus）日糧中添加復方中草藥后發(fā)現(xiàn)血清中補體C3、溶菌酶水平均顯著升高；向虹鱒魚（Oncorhynchus mykiss）幼魚投喂含有由紅棗、山藥、黃芪按1∶1∶1配制的復方中草藥飼料56d后用副溶血弧菌攻毒后發(fā)現(xiàn)肝臟的溶菌酶水平極顯著升高，補體C3轉錄水平顯著升高。程敏等和唐黎等分別探究了中草藥對尼羅羅非魚和雜交鱘魚（Acipenser schrenckii）外周血白細胞的影響，結果表明白細胞氧呼吸爆發(fā)活性和吞噬百分比均大大提高。邢玉娟等表明復方中草藥可提高白細胞的吞噬能力、溶菌酶的活性。徐安樂等研究發(fā)現(xiàn)當復方中草藥的添加劑量低于1.6%時，石斑魚（Epinephelus lanceolatus）血清中的ALP和ACP均顯著提高。對虹鱒魚的熱應激的研究發(fā)現(xiàn)，投喂含有藿香的藥餌的虹鱒魚肝臟ACP顯著升高。

氧化應激是指體內氧化和抗氧化作用失衡且傾向于氧化的狀態(tài)。超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）是重要的抗氧化酶；MDA是氧化應激過程產生的代表性毒性中間產物；總抗氧化能力（T-AOC）也是常用于評價機體抗氧化能力的一個重要指標。孫學亮等研究表明攝食含大黃、黃芪、連翹、黃苓、丹皮的復方中草藥飼料的亞東鮭（Salmo trutta fario）血液中T-AOC和SOD活力顯著提高，白點鮭（Salvelinus pluvius）血液中T-AOC和CAT活力顯著上升。鯉魚攝食含2%和3%復方中草藥的飼料后血清中CAT和GSHPx含量顯著提高。肖穎等對不同水平中草藥添加劑對鯉魚抗氧化性能的影響進行了研究，結果表明含有8g/kg和10g/kg中草藥添加劑組血清T-AOC、GSH-Px 和總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性明顯高于對照組，MDA含量明顯低于對照組。劉海芳等對虹鱒的研究結果表明，在副溶血弧菌感染后，0.6%中草藥組肝臟中T-AOC顯著升高、MDA顯著降低，但SOD沒有顯著差異。蔡冰等發(fā)現(xiàn)虹鱒感染副溶血弧菌后，0.3%中草藥組腸道中GPxl基因、CAT基因均顯著上調，而SOD基因顯著下調。

1.2.2 組織修復作用

有研究發(fā)現(xiàn)中草藥可通過修復組織來增強機體的防御機能，目前相關的研究仍比較有限。虹鱒為典型的冷水魚類，適宜的水溫為12～18℃，對于高溫的耐受性低。馮淇元等的研究表明20℃高溫時，虹鱒肝臟開始病變，肝組織結構受到嚴重破壞，而藿香能有效降低熱應激造成的肝臟損傷程度。李家模等在投喂中草藥后對草魚的肝臟組織進行切片觀察，結果表明中草藥組肝細胞細胞核更清晰，肝索排列緊密，肝血竇枯否氏細胞增多。

1.3 促進生長

中草藥含有多種營養(yǎng)物質，大量的研究表明中草藥在提高增重率、降低餌料系數(shù)、促進魚類生長方面具有良好的作用。路晶晶等發(fā)現(xiàn)由白術、甘草、當歸、山楂等16種中草配置的4種復方中草藥在不同程度上促進了大菱鲆（Scophthalmus maximus）的生長，其中2種復方中草藥顯著提高大菱鲆的增重率，顯著降低其餌料系數(shù)。齊國山等使用0.5%～1.5%發(fā)酵中草藥飼養(yǎng)羅非魚，其末重、增重率及特定增長率均有一定的提高。肖穎等將魚腥草、蒲公英、枸杞、當歸和茯苓等制成復方中草藥，按不同水平添加至鯉魚飼料中，發(fā)現(xiàn)不同水平的中草藥對鯉魚的生長有顯著的影響，8g/kg和10g/kg添加組生長量明顯高于對照組和5g/kg添加組，對照組和5g/kg添加組的生長量變化不明顯。

中草藥可能通過增進魚類食欲，促進腸道吸收和腸道消化酶的合成來促進魚體的生長。研究表明，160g/kg和320g/kg復方中草藥顯著性增加誘食活性，鯽魚（Carassius auratus）增重率明顯高于對照組；許詩亮等提出中草藥是具有開發(fā)潛力的誘食劑。腸道是魚類的吸收營養(yǎng)物質的主要器官，對于其生長至關重要。陳福艷等在飼料中添加0.2%酵母多糖-中草藥復合制劑后，羅非魚腸道絨毛高度和肌層厚度均增加。消化酶的活性是反應腸道消化能力的重要內容。黃景軍等利用車前草、藿香、刺五加、厚樸配置成不同比例的復方中草藥添加到飼料中，發(fā)現(xiàn)2g/kg組鞍帶石斑魚平均質量、增重率、特定增長率顯著提高，腸道中淀粉酶和胰蛋白酶活性顯著高于對照組。徐安樂等應用黃芪、黨參、大黃等12種中草藥制成復方中草藥，報道了復方中草藥添加劑量低于1.2%時，龍膽石斑魚腸道中脂肪酶活性、胰蛋白酶活性和腸道總蛋白含量均顯著性增強。葉建勇等的研究結果表明飼料中添加0.5%的復方中草藥（黨參、黃芪、陳皮、板藍根、黃芩、五加皮）后，大鱗鲃（Barbus capito）的相對增長率比對照組高10.5%，胃蛋白酶比對照組顯著性升高245.93%，而1%和2%組增長率無顯著影響且2%組消化酶活性顯著降低。

1.4 其他作用

中草藥除了殺蟲、殺菌、抗病毒、提高免疫力、促進生長外，還在提升魚類肉質和降低魚類血脂方面發(fā)揮著重要的作用。肌肉滴水損失和蒸煮損失是衡量肌肉蛋白質保持水分的能力的重要指標。魚肉水分含量越低，蛋白質、脂肪含量就越高，魚肉越肥嫩可口，品質越好。研究表明，飼喂黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）含中草藥（黃芪：黨參：野菊花為5∶3∶2）添加量4%的飼料20d后，黃顙魚蒸煮損失率和滴水損失率顯著下降46.03%和38.62%；此外，尚書鳳等發(fā)現(xiàn)中草藥可提高草魚肌肉中粗蛋白的含量，促進肌肉蛋白的積累。魚類肌肉風味和鮮味是衡量魚肉品質的另一重要指標，而肌肉氨基酸相對含量是決定肌肉風味和鮮味的重要因素。據(jù)報道，姜黃素、復方中草藥（辣蓼、青蒿、蒼耳草、赤小豆、苦杏仁、麥麩、面粉）顯著提高大口黑鱸肌肉氨基酸、必需氨基酸、半必需氨基酸和非必須氨基酸的總量；馬國紅等探究了復方中草藥對鯉魚體成分的影響，結果表明飼料中添加適宜的復方中草藥提可提高肌肉鮮味氨基酸的含量、改進氨基酸的組成比例。

魚體攝入高脂飼料時通常導致機體出現(xiàn)血脂水平偏高，免疫力降低，出現(xiàn)營養(yǎng)性疾病問題。路晶晶等研究表明由炒白術、炒白芍、陳皮、防風、黃芪制成的復方中草藥具有顯著的調節(jié)血脂作用，可顯著降低大菱鲆血漿中甘油三酯和膽固醇的含量。肖穎等在鯉魚的飼料中添加8 g/kg的中草藥添加劑后發(fā)現(xiàn)血清中的膽固醇含量顯著降低。

2 中草藥的提取和使用方式

2.1 提取方式

傳統(tǒng)的漁用中草藥的提取方式主要分為如下三步：首先將中草藥粉碎，加水浸泡一段時間，然后進行煎煮、過濾，最后將過濾的藥汁進行進行濃縮，滅菌后備用。近年來，隨著科學技術的飛速發(fā)展，中草藥的提取方式也在不斷革新，超微粉碎技術、有機溶液提取、發(fā)酵工藝和泡騰片工藝等的應用進一步提高了中草藥的有效率。超微粉碎技術可將3mm的物料顆粒粉碎至10～25μm，尚書鳳等將甘草、板藍根、金銀花、陳皮、肉桂和杜仲按比例配置成傳統(tǒng)中草藥添加劑和超微粉中草藥添加劑飼喂草魚，結果發(fā)現(xiàn)超微粉中草藥添加劑組增重率和粗蛋白高于傳統(tǒng)提取方法組，超微粉碎組增重率和粗蛋白分別提高18.59%、12.97%；傳統(tǒng)方法組分別提高13.26%、5.16%。宋銳等使用乙酸乙酯提取博落回和狼毒大戟并將該提取物作用于指環(huán)蟲（Dactylogyrus spp），結果表明該提取物在一定濃度下對指環(huán)蟲有較好的殺滅效果，而其水溶液提取物無明顯效果。發(fā)酵是利用微生物的對植物細胞進行破壁和酶解等作用，從而使植物中有效物質盡可能釋放到發(fā)酵液中。陳建軍等利用益生菌對艾草桉樹葉中草藥進行發(fā)酵，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵艾草桉樹葉中草藥和傳統(tǒng)艾草桉樹葉中草藥均能顯著提高鯉魚的免疫性能，且發(fā)酵后的中草藥效果更優(yōu)，這與戴旭平等的研究一致。此外，為使中草藥更快發(fā)揮功效，李虹穎等對大黃芩的泡騰片工藝進行了研究，報道了其最優(yōu)制備工藝為：60%崩解劑、酸堿比0.5∶1、4.5%PEG-6000、1%甘露醇。

2.2 使用方式

不同的中草藥對不同疾病的治療效果不同，而魚類的疾病的發(fā)生通常是是多種致病因素共同導致的結果，因此單方中草藥治療效果往往比較有限。為充分發(fā)揮中草藥的優(yōu)勢，將具有協(xié)同作用的單方中草藥聯(lián)用（復方中草藥）或復方中草藥與西藥聯(lián)用防治魚病已成為研究者們研究的熱點。馬澤寧等使用單方貫眾和檳榔1h內殺滅小瓜蟲的有效濃度分別為100、40mg/L，而使用貫眾和檳榔的復方制劑1h內殺滅小瓜蟲有效濃度為30mg/L，遠低于單方的有效濃度。徐曉津等和周曄平將復方中草藥與恩諾沙星聯(lián)用檢測其對弧菌病的治療效果，均表明復方中草藥與恩諾沙星聯(lián)用可較好治療弧菌病，且聯(lián)用的治療效果優(yōu)于復方中草藥的治療效果。陳福艷等在飼料中添加酵母多糖-中草藥復合制劑有效提高了羅非魚的生長性能和免疫功能，改善了羅非魚的腸道結構。

3 總結與展望

綜上所述，中草藥在殺蟲、抑菌殺菌、抗病毒、提高免疫力、修復組織細胞、促進生長、提升魚類肉質、降低血脂方面表現(xiàn)出良好的效果；其主要有效效成分的提取方式仍在不斷發(fā)展中；多種單方中草藥聯(lián)用和復方中草藥與西藥聯(lián)用被廣泛應用于魚病的防治過程中。近年來，有關中草藥的研究多集中于功能效果的研究，而關于中草藥的有效成分、作用機制、提取方式和使用方式等的研究較少，且關于歸納總結多種漁用中草藥功效的報道缺乏。展開漁用中草藥的多維研究和建立漁用中草藥庫將對漁用中草藥理論的形成，漁用中草藥系統(tǒng)化、專業(yè)化的發(fā)展具有重要意義。

我國中草藥種類豐富，大多具有低殘留、低耐藥性、低成本、低污染等特點，且在魚病的防治方面具有良好的作用，已成為漁用抗生素和化學藥劑的重要替代品之一。然而中草藥也存有不足，如藥效慢、不穩(wěn)定、用量大等，需要更多的研究來解決這些實際使用中的問題。相較于西藥，中草藥盡管在在魚病治療方面具有藥效慢的缺點，但往往藥效持續(xù)時間更長，由此中草藥未來可能在預防魚類疾病和提高魚類免疫力方面能表現(xiàn)出更大的優(yōu)勢。隨著人們生活水品的不斷上升，食品安全和環(huán)保的意識漸入人心，可持續(xù)發(fā)展的水產養(yǎng)殖業(yè)將是行業(yè)未來發(fā)展的必然趨勢，中草藥作為一種天然綠色的添加劑，將在推進我國水產養(yǎng)殖業(yè)健康、可持續(xù)發(fā)展方面具有廣闊的應用前景。（參考文獻略）