中藥九蒸九曬炮制技術(shù)研究進(jìn)展

吳思俊，王龍，趙銘威，鐘淑梅，吳衛(wèi)剛，李文龍*（.天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥制藥工程學(xué)院，天津 067；2.組分中藥國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 067；.九信（武漢）中藥研究院有限公司，武漢 40050）

蒸、曬是中藥傳統(tǒng)炮制中兩種常規(guī)技術(shù)。蒸一般指將凈選后的藥材裝入蒸制容器中用水蒸氣進(jìn)行加熱，一般以蒸透為度。曬可去除藥材中所含水分，減小體積，已便于保存和運(yùn)輸?！熬耪艟艜瘛庇址Q“九蒸九曝”，是古代本草中常見的一種藥材炮制方法，該法將蒸曬結(jié)合并反復(fù)運(yùn)用，使藥材最大限度發(fā)揮療效并減輕其毒副作用。歷代本草中記載的運(yùn)用“九蒸九曬”法進(jìn)行炮制的藥材有多種，多為植物根、根狀莖及果實(shí)種子，其目的除起到增效減毒作用外，少部分藥材為滿足便于食用的需求也常使用此法。然而在現(xiàn)代中藥制藥過程中，“九蒸九曬”炮制法因過程煩瑣，效率較低，不再為多數(shù)企業(yè)采用，只有少數(shù)廠家堅(jiān)持此法炮制。目前國內(nèi)關(guān)于“九蒸九曬”的研究較少，主要集中在部分藥材，其中最具代表性的為“四大九蒸貨”，即地黃、黃精、何首烏、大黃[1]。

1 古法九蒸九曬考證

1.1 九蒸九曬的最初記載

九蒸九曬炮制方法發(fā)展歷史悠久，其最早記載于南北朝時(shí)期，梁·陶弘景《本草經(jīng)集注》中就有關(guān)于胡麻九蒸九曬炮制法的記錄，即“服食家當(dāng)九蒸、九曝、熬、搗，餌之?dāng)喙?，長生，充饑”[2]。文獻(xiàn)中首次提出九蒸九曝，表明古人在那時(shí)就已開始探索九蒸九曬并且積累了一定的用藥經(jīng)驗(yàn)，才能得出胡麻經(jīng)此法炮制后可增強(qiáng)補(bǔ)益之功的結(jié)論。由于與“三”一樣，常作泛指，代指多次，因而古籍記載中“九蒸九曬”的“九”不能確指為蒸曬九次，可能大于九次，也有可能在兩次到九次之間，具體蒸曬次數(shù)需依據(jù)藥材的顏色、形態(tài)和光澤進(jìn)行判斷。并且古語中“九”具有多方面的含義，有表示準(zhǔn)確數(shù)，有表示行為多次反復(fù)，也有因音同“久”而指代長時(shí)間。

1.2 九蒸九曬的歷代發(fā)展

隨著中醫(yī)藥事業(yè)的迅速發(fā)展，唐宋時(shí)期，九蒸九曬炮制法得到了廣泛的應(yīng)用。在本草著作中記載的九蒸九曬品達(dá)十余種，其中，較為常用的中藥材有地黃、黃精、何首烏、大黃、豨薟等[3]。明清時(shí)期，九蒸九曬炮制法的發(fā)展達(dá)到鼎盛，針對藥材進(jìn)行的單純九蒸九曬逐漸衍生為加入輔料以改變藥性增強(qiáng)藥效，對于毒性藥物還可減輕其毒副作用，據(jù)古代醫(yī)書記載的常用輔料有黃酒、黑豆、砂仁等[4]。

2 代表性中藥材九蒸九曬歷史考證

2.1 地黃九蒸九曬考證

地黃是我國“四大懷藥”之一，也是應(yīng)用傳統(tǒng)九蒸九曬法進(jìn)行炮制的藥材之一。炮制前的干地黃清熱涼血、養(yǎng)陰生津，炮制后的熟地黃具有補(bǔ)血滋陰、益精填髓的功效，主要用于治療心悸怔忡、血虛萎黃、月經(jīng)不調(diào)、崩漏下血等[5]。地黃的九蒸九曬炮制方法始見于唐代孫思邈《千金翼方》，而后在數(shù)本本草著作中皆有記載（見表1）。從古籍記載中不難發(fā)現(xiàn)，地黃九蒸九曬不一定指嚴(yán)格意義上的九次蒸曬過程，也可能是長時(shí)間的反復(fù)蒸曬，直至“色黑如漆，味甘如飴”為止，其目的是為改變生地黃性寒涼血的特點(diǎn)，使其藥性溫和。

表1 本草中關(guān)于地黃九蒸九曬方法記載Tab 1 Records of repeatedly steamed and sundried for Rehmanniae Radix

2.2 黃精九蒸九曬考證

黃精在我國已有幾千年的用藥歷史，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾潤肺、滋腎填精的功效，主要用于治療脾胃氣虛、肺虛燥咳、腰膝酸軟、精血不足等癥狀。黃精始載于《名醫(yī)別錄》，被譽(yù)為“氣血雙補(bǔ)之王”[11]。然而，黃精生品具有刺激咽喉的不良反應(yīng)，《食療本草》記載：“蒸之，若生則刺人咽喉，曝使干，不爾朽壞”。黃精生品服用時(shí)會產(chǎn)生口舌麻木、咽喉不適等癥狀，并且生黃精或黃精的汁液可使皮膚瘙癢，所以生黃精應(yīng)經(jīng)炮制消除其刺激咽喉等不良反應(yīng)后才可服用。關(guān)于黃精炮制方法的相關(guān)記載較為豐富，自南北朝至今，共記載了20 余種黃精炮制方法，較為經(jīng)典的有單蒸、重蒸、九蒸九曬、酒蒸、黑豆制等[12]。其中，九蒸九曬炮制法應(yīng)用最為廣泛（見表2）。生黃精益脾潤肺、去除風(fēng)濕，經(jīng)九蒸九曬后藥性發(fā)生改變，可滋腎陰、補(bǔ)氣血，不僅可有效去除生品服用時(shí)的麻感，還增強(qiáng)了其補(bǔ)益之功。

表2 本草中關(guān)于黃精九蒸九曬方法記載Tab 2 Records of repeatedly steamed and sundried for Polygonatum cyrtonema

2.3 何首烏九蒸九曬考證

何首烏用藥歷史悠久，滋補(bǔ)之功顯著，早在明朝《本草綱目》中記載“此物氣溫味苦澀，苦補(bǔ)腎，溫補(bǔ)肝，澀能收斂精氣，所以能養(yǎng)血益肝，固精益腎，健筋骨，烏發(fā)，為滋補(bǔ)良藥”[16]。然而，生品何首烏具有一定的毒副作用，服用不當(dāng)可能會對人體造成損傷。因此，在服用前對生首烏進(jìn)行適當(dāng)?shù)呐谥铺幚硎侵陵P(guān)重要的一環(huán)。縱觀古今，何首烏九蒸九曬炮制經(jīng)歷了一段漫長的歷史演變。在唐代以前，何首烏的炮制方法主要是凈制、切制。唐代開始使用黑豆制何首烏。黑豆味甘，性平，入腎經(jīng)，經(jīng)黑豆制后的何首烏滋補(bǔ)肝腎、烏須發(fā)的功效得到增強(qiáng)。通過查閱古代本草著作，自唐代《仙授理傷續(xù)斷秘方》中記載黑豆制何首烏后相繼出現(xiàn)了多種炮制方法，如酒制、泔制、九蒸九曬等[17]。其中，宋代開創(chuàng)了何首烏九蒸九曬的歷史先河，九蒸九曬炮制古法從此得到了廣泛重視。傳統(tǒng)認(rèn)為，生首烏經(jīng)反復(fù)蒸曬后味甘性溫，一方面可改善其藥性，增強(qiáng)滋補(bǔ)功能，另一方面還可減弱毒性。表3 記錄了古代本草著作中關(guān)于何首烏九蒸九曬的方法。明清之前，何首烏九蒸九曬只是單純使用清蒸法，強(qiáng)調(diào)反復(fù)蒸曬后方可服用，其目的為起到增效減毒的作用。隨著中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，明清時(shí)期，該法逐漸演變?yōu)槭褂煤诙苟啻握糁?，相較于唐代黑豆制何首烏，前者更加注重蒸曬的次數(shù)和程度，以達(dá)到充分消除生品毒副作用的目的，經(jīng)九蒸九曬炮制工藝后的何首烏具有補(bǔ)肝腎、益精血、強(qiáng)筋骨、烏須發(fā)等功效。

表3 本草中關(guān)于何首烏九蒸九曬方法記載Tab 3 Records of repeatedly steamed and sundried for Polygonum multiflorum

2.4 大黃九蒸九曬考證

大黃屬中藥常用瀉下藥之一，性味苦寒，主要是以清瀉為功，蕩滌腸胃積滯，推陳出新，從而達(dá)到安和五臟的效果，此外，大黃還具有抗菌消炎、清熱瀉火、涼血解毒的功效。大黃在我國用藥歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，多產(chǎn)于甘肅、四川等地。然而，生大黃氣味重濁，走而不守，直達(dá)下焦，其瀉下作用竣烈，易傷胃氣，所以服用前需經(jīng)炮制，以糾正生品過偏之性，更好地滿足臨床用藥需求[21]。有相關(guān)著作記載的大黃炮制方法種類眾多，從漢代首次記載的去皮酒蒸法，再到唐代衍生出的米下蒸、醋煎、酒蒸、酒炒等炮制方法。發(fā)展至宋代時(shí)，大黃炮制方法得到了進(jìn)一步擴(kuò)充，九蒸九曬法、醋炒、酒洗蒸、灰色煨、皂莢水煮等炮制方法相繼出現(xiàn)，其中九蒸九曬大黃（俗稱九制大黃）在民間應(yīng)用頗為廣泛，歷代醫(yī)家對其倍加推崇和肯定（見表4）。宋明時(shí)期，大黃多用九蒸九曬法進(jìn)行處理，明代多以酒為輔料反復(fù)蒸制大黃，因酒性熱，主發(fā)散，大黃經(jīng)酒蒸之后可大幅減弱藥材本身的寒性并能緩解其竣下之力，適合老人、小孩等體質(zhì)虛弱的患者服用。

表4 本草中關(guān)于大黃九蒸九曬方法記載Tab 4 Records of repeatedly steamed and sundried for rhubarb

3 中藥材炮制中九蒸九曬的現(xiàn)代研究

3.1 九蒸九曬應(yīng)用概況

歷史上，關(guān)于運(yùn)用九蒸九曬炮制法進(jìn)行處理中藥材的相關(guān)記載眾多，這種傳統(tǒng)的炮制古法被不少醫(yī)家提倡和推廣。然而，在現(xiàn)代化生產(chǎn)中，九蒸九曬炮制法因太過煩瑣且生產(chǎn)效率很低，再加上患者用藥需求量大、制藥生產(chǎn)效率要求高、相關(guān)部門監(jiān)管嚴(yán)格、企業(yè)運(yùn)營壓力大等眾多因素，故在現(xiàn)代制藥生產(chǎn)過程中已經(jīng)很少用到這種傳統(tǒng)炮制方法。但是仍然有少數(shù)企業(yè)因一些藥材藥效的要求堅(jiān)持使用九蒸九曬工藝進(jìn)行炮制。如四川省川源藥業(yè)有限公司至今仍使用九蒸九曬炮制何首烏，其炮制工藝已于2011年被列入眉山市非物質(zhì)文化遺產(chǎn)名錄。山西廣譽(yù)遠(yuǎn)國藥有限公司仍采用九蒸九曬法炮制地黃。

3.2 地黃九蒸九曬現(xiàn)代研究

古代九蒸九曬法炮制地黃時(shí)要求蒸制過程忌鐵、鋁，只能用銅。每次蒸制前選優(yōu)質(zhì)個(gè)大者洗凈、潤透，用特殊工藝處理后裝入蒸籠。第一次蒸制兩日兩夜，然后取出晾干，拌入黃酒、砂仁兩種輔料，用手揉搓均勻，再曬一日晾一夜，以此類推至九蒸九曬，耗時(shí)二十余天才能制成。顯然，若嚴(yán)格按照古代傳統(tǒng)九蒸九曬法炮制地黃對大多數(shù)企業(yè)來說并不現(xiàn)實(shí)。根據(jù)2020年版《中國藥典》記載，地黃炮制方法有兩種[22]：① 取生地黃，照酒燉法燉至酒吸盡，取出，晾曬至外皮黏液稍干時(shí)，切厚片或塊，干燥，即得（每100 kg生地黃用黃酒30 ～50 kg）；② 取生地黃，照蒸法蒸至黑潤，取出，曬至約八成干時(shí)，切厚片或塊，干燥，即得。藥典中共收載鮮地黃及其炮制品生地黃、酒燉地黃、清蒸地黃。雖然關(guān)于九蒸九曬炮制地黃的生產(chǎn)應(yīng)用很少，但相關(guān)領(lǐng)域?qū)W者并未停止對這種炮制古法的研究探索。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)用九蒸九曬法炮制地黃會對其化學(xué)成分及含量變化產(chǎn)生巨大影響，于臨床上則體現(xiàn)在改善療效上。孟祥龍等[23]運(yùn)用HPLC法探究經(jīng)九蒸九曬炮制后熟地黃中化學(xué)成分的含量變化。隨著蒸曬次數(shù)的增加，熟地黃中梓醇、益母草苷、毛蕊花糖苷、蔗糖、水蘇糖及棉子糖含量均減少，地黃苷A 及地黃苷D 略有增加，5-羥甲基糠醛（5-HMF）、葡萄糖、果糖、甘露三糖含量均增加。并且研究發(fā)現(xiàn)地黃經(jīng)第3 次、第4 次及第6 次蒸曬后相關(guān)化合物含量波動較大。5-HMF 是一種由呋喃環(huán)組成的小分子化合物，通過毒理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)該化合物具有皮膚、黏膜和呼吸道刺激性，并且可以誘導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生[24-26]。5-HMF 含量的減少可有效緩解地黃對眼睛、皮膚和黏膜的刺激作用。炮制后熟地黃中的多糖成分含量明顯高于生地黃，地黃多糖的積累可增強(qiáng)藥物免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血糖作用[27-28]。為進(jìn)一步了解地黃九蒸九曬后其中環(huán)烯醚萜苷類化學(xué)成分的變化規(guī)律，劉明等[29]采用HPLC 法測定熟地黃蒸曬不同次數(shù)后益母草苷和梓醇兩種成分的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著蒸曬次數(shù)的增加，益母草苷和梓醇含量均減少。通過學(xué)者們的研究探索，可以證實(shí)使用九蒸九曬炮制地黃能起到增效減毒的作用。但是，中藥是一個(gè)極其復(fù)雜的多組分體系，若僅根據(jù)幾種化學(xué)成分含量變化就對藥效改變下定論并不嚴(yán)謹(jǐn)，關(guān)于九蒸九曬的具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究探索。此外，古代本草中多次記載，地黃需反復(fù)蒸曬至“黑如漆，甘如飴”，雖然目前大多數(shù)企業(yè)沒有采用九蒸九曬古法炮制，但是在制藥過程中，將地黃炮制至“黑如漆，甘如飴”這個(gè)程度是有必要的。但是，如何將炮制品顏色控制為漆黑色，并讓其甜度達(dá)到飴糖程度，最終實(shí)現(xiàn)將藥材外觀性狀、味覺信息與藥物內(nèi)部關(guān)鍵成分含量相關(guān)聯(lián)，通過控制藥材外觀性狀和氣味信息從而控制炮制程度是一個(gè)需要解決的問題。為解決該問題，先進(jìn)的分析儀器和數(shù)據(jù)分析算法的引入是很有必要的，這將有利于相關(guān)研究的探索與推進(jìn)。

3.3 黃精九蒸九曬現(xiàn)代研究

從古至今，黃精炮制方法眾多，其中以九蒸九曬為主，該法系將鮮黃精洗去泥土，除去須根蒸一日，取出晾干，曬一日再蒸，如此重復(fù)9 次，直到內(nèi)心現(xiàn)黑色，濁潤時(shí)為止，最后取出曬干或用微火烘干。近現(xiàn)代，在古法炮制基礎(chǔ)上衍生出許多新的黃精炮制方法，例如酒蒸法、熟地汁蒸法等。普通的黃精加工是將黃精曬至須根干脆易折，根莖內(nèi)部由白變微黃稍軟時(shí)，反復(fù)揉搓至須根脫落，根莖呈半透明、無硬心時(shí)，再曬干即可。酒黃精是取凈黃精，照酒燉法或酒蒸法燉透或蒸透，稍晾，切厚片干燥后即得，每100 kg 黃精用黃酒20 kg[22]。

由于生黃精中黏液質(zhì)含量較高，在服用時(shí)對喉嚨有明顯的刺激作用。因此，最大限度地減輕其不良反應(yīng)是古今黃精炮制方法發(fā)展的初衷之一[30]。有研究表明，黃精在反復(fù)蒸曬的過程中刺激性氣味會減弱并且黏液質(zhì)會發(fā)生分解，進(jìn)而消除服用時(shí)的不良反應(yīng)[31]。王進(jìn)等[32]運(yùn)用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)探究黃精炮制前后揮發(fā)性成分的含量變化。研究發(fā)現(xiàn)黃精經(jīng)蒸曬后正己醛、莰烯等成分含量明顯減少。除起到減毒作用外，反復(fù)蒸曬黃精還能積累有效成分，增強(qiáng)藥效。在黃精的藥效物質(zhì)中，多糖占據(jù)著重要地位。黃精多糖可以提高人體免疫功能，降血糖，并且具有良好的抗菌、抗病毒活性[33-34]。胡葉青等[35]采用紫外可見分光光度法測定九華黃精九蒸九曬炮制過程中總多糖含量并探究其變化規(guī)律。結(jié)果顯示，隨著蒸曬次數(shù)的增加，栽培和野生九華黃精中總多糖含量呈現(xiàn)先增加后減少趨勢，其中野生黃精總多糖含量由一蒸一曬的22.18%降至九蒸九曬的12.67%，當(dāng)蒸曬5 次時(shí)含量最高，達(dá)到32.81%。

4 何首烏九蒸九曬現(xiàn)代研究

4.1 生首烏與制首烏

中藥何首烏為蓼科植物何首烏（Fallopia multiflora或者Polygonum multiflorumThunb.）的干燥塊根，主產(chǎn)于河南、湖北、貴州等地，其主要活性成分有大黃素、大黃素甲醚、二苯乙烯苷等[36]。何首烏有生首烏與制首烏之分。生首烏多直接切片入藥，味甘、苦、澀，性平，具有解毒、消癰、潤腸通便等功效，常用于治療瘰疬瘡癰、風(fēng)疹瘙癢、腸燥便秘等。制首烏性微溫，味甘、澀，具有補(bǔ)肝腎、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨等功效，用于血虛萎黃、須發(fā)早白、腰膝酸軟等癥狀。古方中何首烏入藥多為炮制品，很少有毒副作用的相關(guān)報(bào)道，近年來，大量的臨床報(bào)道顯示患者服用未經(jīng)炮制或炮制不當(dāng)?shù)暮问诪鹾笥懈螕p傷的風(fēng)險(xiǎn)，主要為肝毒性[37-38]。這有可能與近代以來炮制工藝的不斷簡化有關(guān)。因此在挖掘和繼承傳統(tǒng)炮制的基礎(chǔ)上進(jìn)行炮制方法的研究顯得尤為重要。

4.2 何首烏炮制方法

4.2.1 何首烏傳統(tǒng)炮制方法 《本草綱目》中關(guān)于九蒸九曬何首烏的記載最為詳細(xì)，即取生首烏與赤白芍各一斤，先用竹刀削去粗皮，淘米水浸泡一夜后切片，取三斗黑豆，用水浸泡，于砂鍋中將何首烏和黑豆交替鋪展直至鋪盡，蒸至黑豆熟透后，取出黑豆后將何首烏曬干，然后取新鮮黑豆復(fù)蒸之，如此重復(fù)九次即得。傳統(tǒng)認(rèn)為何首烏經(jīng)九蒸九曬炮制后，一方面可改變藥性增強(qiáng)滋補(bǔ)之功，另一方面還能降低自身毒性，最終起到增效減毒的目的。何首烏也被譽(yù)為最具代表性的“四大九蒸中藥”之一[39]。

4.2.2 何首烏現(xiàn)代炮制方法 隨著制藥生產(chǎn)工藝的發(fā)展，何首烏傳統(tǒng)炮制工藝逐漸簡化，傳統(tǒng)九蒸九曬炮制法多不采用而是用一蒸一曬代之。據(jù)2020年版《中國藥典》記載，制首烏是由兩種方法制得：① 清蒸或?qū)⒑问诪跗c黑豆汁拌勻后蒸，蒸制外表皮呈棕褐色，曬干既得；② 將生首烏片與黑豆汁拌勻，置于非鐵質(zhì)容器內(nèi)燉至汁液吸盡[22]。每100 kg 何首烏用黑豆10 kg。與傳統(tǒng)何首烏九蒸九曬法相比，現(xiàn)代炮制法可謂獲得了極大的簡化。

4.2.3 何烏首古今炮制法異同點(diǎn) 古今何首烏炮制方法雖存在差異，但卻有異曲同工之妙[40]。兩種炮制方法的相同點(diǎn)在于：① 兩種方法都以黑豆作為輔料，黑豆性溫，能起到活血、滋補(bǔ)肝腎的作用，可有效緩解何首烏致瀉的不良反應(yīng)，并能增強(qiáng)其滋潤補(bǔ)腎、烏須發(fā)的功效；② 在炮制過程中都忌用鐵器，有研究表明，何首烏中的鞣質(zhì)能與鐵產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，忌用鐵器，能有效防止在炮制過程中產(chǎn)生某些化學(xué)成分從而對何首烏的藥性藥效產(chǎn)生不良影響。黑豆輔之和忌用鐵器是何首烏炮制過程中最為關(guān)鍵的因素，現(xiàn)代炮制方法在開拓創(chuàng)新的基礎(chǔ)上很好地繼承了這兩點(diǎn)。關(guān)于兩種炮制方法的區(qū)別也存在兩點(diǎn)：① 傳統(tǒng)炮制工藝要求黑豆與何首烏隔層鋪展，而現(xiàn)代炮制方法并沒有強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)；② 炮制時(shí)間上的懸殊。與傳統(tǒng)九蒸九曬法相比，現(xiàn)代炮制方法雖然節(jié)省了大量工序和時(shí)間，但是兩種方法制得的炮制品在質(zhì)量上的具體差異還需做更加深入的探究。

4.3 關(guān)于何首烏九蒸九曬實(shí)現(xiàn)增效減毒的現(xiàn)代研究進(jìn)展

4.3.1 概述 炮制何首烏的核心目的是“增效減毒”[41-43]。炮制“減毒與增效”的雙重效果主要通過幾個(gè)途徑實(shí)現(xiàn)，即“減有毒成分以減毒，增有效成分以增效”“高毒低效物質(zhì)轉(zhuǎn)化為低毒高效物質(zhì)”和“借助外源炮制輔料以增效減毒”等。古代對于中藥炮制的質(zhì)量控制，主要以制品外觀性狀為主。而現(xiàn)代在外觀性狀的基礎(chǔ)上加上化學(xué)物質(zhì)的含量作為質(zhì)量控制手段，不僅在外觀上有保證，還能保證關(guān)鍵藥效物質(zhì)的含量符合臨床治療的要求。但由于中藥不同于西藥，是一種成分極為復(fù)雜的混合物質(zhì)，成分及含量都有很大的不確定性，大部分作用機(jī)制還不明確，種種原因?qū)е玛P(guān)于九蒸九曬作用機(jī)制的研究在一定程度上缺乏科學(xué)性，只能夠根據(jù)各種實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行合理猜測。從而使得相關(guān)研究報(bào)道較少，且始終難有實(shí)質(zhì)性進(jìn)展。

4.3.2 研究方法存在的問題

① 取樣：現(xiàn)代研究在取材時(shí)只取一個(gè)地區(qū)的樣品，且都采用了同一批樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，盡管在該特定批次的藥材中具有較好的重復(fù)性，但沒有考慮到產(chǎn)地、季節(jié)、土壤、氣候等因素對何首烏中成分的影響，使得單個(gè)實(shí)驗(yàn)代表性不強(qiáng)。

② 有效成分：中藥是成分復(fù)雜的混合物質(zhì)，藥效也表現(xiàn)在很多方面。且中藥藥材的臨床使用多為諸多藥材組合而成的藥方，藥物之間也存在有藥效的相互影響。這些因素導(dǎo)致九蒸九曬增效減毒作用的實(shí)現(xiàn)難以確定衡量標(biāo)準(zhǔn)，即便確定，單一成分的變化也不足以說明整體藥效的改變。

③ 炮制方法：不同研究中對于何首烏九蒸九曬的炮制方法不盡相同，是否用黑豆汁浸泡炮制，濃度如何，是否“忌鐵”，是否將炮制中產(chǎn)生的汁水回加到何首烏中，炮制時(shí)間長短等。由于中藥本身的復(fù)雜性，在九蒸九曬炮制過程中采用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)是不合理的。但是需要對炮制過程工藝進(jìn)行詳盡研究，探究炮制工藝與產(chǎn)品質(zhì)量間的內(nèi)在關(guān)聯(lián)，從而挖掘炮制方法的影響機(jī)制。然而，目前九蒸九曬機(jī)制研究尚不深入，也存在對炮制次數(shù)產(chǎn)生的質(zhì)疑。由于九蒸九曬本身并不一定指九次蒸曬，很可能只是泛指多次或長時(shí)間，實(shí)際上九蒸九曬何時(shí)結(jié)束應(yīng)當(dāng)有其他的認(rèn)定方式。因而從研究的出發(fā)點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的總結(jié)等角度而言，不少現(xiàn)代研究得出的結(jié)果并不科學(xué)，無法指導(dǎo)九蒸九曬炮制方法的應(yīng)用。

④ 結(jié)果認(rèn)定：一些實(shí)驗(yàn)中測得的成分含量變化實(shí)際上并無清晰明顯的規(guī)律，不能說明該物質(zhì)的含量變化是由九蒸九曬的炮制方法導(dǎo)致的，該結(jié)果的得出實(shí)際上可能存在一定的主觀性。

4.3.3 致毒性的機(jī)制認(rèn)識 近年來，大量的臨床報(bào)道顯示服用未經(jīng)炮制或炮制不當(dāng)?shù)暮问诪醮嬖诟螕p傷的風(fēng)險(xiǎn)[44-45]。何首烏的毒性主要為肝毒性[46-48]。目前對何首烏致毒性的機(jī)制認(rèn)識主要有以下幾種觀點(diǎn)：① 何首烏中含有的主要成分如蒽醌類、鞣質(zhì)類物質(zhì)，對肝臟有一定毒性作用，其中以結(jié)合蒽醌在肝毒性中占據(jù)主導(dǎo)地位；② 何首烏可能誘導(dǎo)或抑制肝臟中肝藥酶的表達(dá)，從而增加其他藥物毒性，亦或與遺傳性肝臟代謝酶缺陷有關(guān)；③ 在機(jī)體代謝過程中，產(chǎn)生某種肝毒性物質(zhì)，引起肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化致肝細(xì)胞壞死；④ 何首烏導(dǎo)致肝損傷的生物學(xué)機(jī)制可能是由炎癥應(yīng)激和代謝通路發(fā)生紊亂共同作用的結(jié)果。

4.3.4 增效減毒作用的原理猜想 藥典中對于含量測定部分，何首烏主要測定二苯乙烯苷與結(jié)合蒽醌的含量，制首烏主要測定二苯乙烯苷與游離蒽醌的含量。近年來，一些學(xué)者圍繞九蒸九曬炮制法對何首烏增效減毒的作用原理進(jìn)行了探究，研究重點(diǎn)主要是圍繞何首烏炮制前后化學(xué)成分含量的變化規(guī)律。葛朝亮等[49]對何首烏九蒸九曬后主要成分的含量進(jìn)行分析，結(jié)果顯示炮制后二苯乙烯苷含量呈梯度下降，游離蒽醌含量上升。楊文宇等[50]采用傳統(tǒng)的黑豆共蒸法進(jìn)行何首烏九蒸九曬炮制，研究發(fā)現(xiàn)，制首烏中二苯乙烯苷含量從炮制前的3.56%下降至1.42%，游離蒽醌含量從炮制前的0.067%上升至炮制后的0.11%，而水分及醇溶性浸出物的含量無顯著變化。張曼華[51]發(fā)現(xiàn)制首烏中二苯乙烯苷、鞣質(zhì)、兒茶素含量低于生品，游離蒽醌含量高于生品，另外研究還發(fā)現(xiàn)，何首烏經(jīng)炮制后產(chǎn)生了新的化學(xué)成分，包括5-羥基麥芽酚、5-HMF、2，3-二氫-3，5-二羥基-6-甲基-4-氫-吡喃-4-酮（DDMP）、3，5-二羥基-2-甲基-4-氫-吡喃-4-酮、琥珀酸。然而，目前沒有明確的證據(jù)顯示何首烏在炮制后是如何實(shí)現(xiàn)增效減毒作用的。

就減毒而言，依據(jù)學(xué)界對于何首烏肝毒性機(jī)制的認(rèn)識，提出以下幾種可能[52-53]。蒽醌成分可能是造成肝損傷的主要成分，其中蒽酚衍生物在結(jié)腸部分能夠形成高活性的蒽酮，吸收后可引起肝損傷。而九蒸九曬通過反復(fù)長時(shí)間的蒸曬，將有毒物質(zhì)分解，或是改變其結(jié)構(gòu)而使其變?yōu)闊o毒物質(zhì)，或抑制藥材中某些酶的活性。二苯乙烯苷作為何首烏中的主要成分，也是主要活性成分，常作為何首烏藥效成分研究，但近期也有人提出[54]，二苯乙烯苷也可能是造成肝損傷的原因之一。

對于增效作用，具體到何首烏中二苯乙烯苷及蒽醌類物質(zhì)的含量變化上，結(jié)合文獻(xiàn)資料，推測與以下幾個(gè)因素有關(guān)：① 現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明5-HMF 具有抗氧化、改善學(xué)習(xí)記憶、抗過敏、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、抗炎等藥理作用，而二苯乙烯苷具有降血脂、抗衰老、抑制腫瘤等功能，因此，可能與制何首烏補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、烏須發(fā)的功用有關(guān)；② 何首烏生品及制品中二苯乙烯苷存在順反異構(gòu)，也可能是其他某種未知物質(zhì)存在立體異構(gòu)，且兩種異構(gòu)體的效果差異較大，在炮制過程中生品中活性分子不穩(wěn)定，受加熱時(shí)間和溫度等的影響，發(fā)生構(gòu)型的變化；③ 藥材中存在大量結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)，反復(fù)蒸曬使得這些物質(zhì)之間相互轉(zhuǎn)化，并由于條件的限定，出現(xiàn)某一種特定成分含量的逐漸上升，從而導(dǎo)致藥效的增強(qiáng)；④ 二苯乙烯苷及蒽醌類物質(zhì)在何首烏中都存在分解、合成兩個(gè)互逆的過程，反復(fù)的蒸曬過程通過改變外界溫濕度等條件導(dǎo)致其含量的變化；⑤ 何首烏的作用機(jī)制很可能是多種物質(zhì)以一定含量比例共同作用的結(jié)果，藥效與各種物質(zhì)含量的比例相關(guān)性較強(qiáng)，而使用九蒸九曬炮制方法能較大程度地增強(qiáng)這種作用；⑥ 藥材生品中存在的毒性成分在其含量降低時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌行С煞帧?/p>

此外，我們認(rèn)為炮制過程中加入的輔料對于增效減毒具有較大影響，如輔料能提供合成有效成分必要的物質(zhì)，或能吸收毒性成分等。探討輔料本身在炮制中所起的作用，也需要進(jìn)一步的研究。

5 總結(jié)與展望

本文通過對九蒸九曬這一傳統(tǒng)藥材炮制方式的探究，考查了該法的概念及古今應(yīng)用，并就其增效減毒的具體作用機(jī)制進(jìn)行了文獻(xiàn)的查閱與思考。九蒸九曬本指對于藥材進(jìn)行反復(fù)多次長時(shí)間的蒸曬，以實(shí)現(xiàn)減少有毒成分、增強(qiáng)藥效、便于保存等目的。

縱觀近年關(guān)于何首烏炮制工藝簡化的文獻(xiàn)，其研究基礎(chǔ)大多停留在炮制前后各類成分含量變化與工藝參數(shù)的關(guān)系分析上，這種單純化學(xué)成分的變化并不能全面揭示整個(gè)單味中藥飲片功效或毒性的改變。同時(shí)，由于何首烏成分復(fù)雜，二苯乙烯苷、磷脂類、蒽醌苷類等各成分及其含量比例差異都有可能產(chǎn)生一定的毒性作用，目前其毒性物質(zhì)基礎(chǔ)尚難以揭示。因此中藥炮制生為熟引起的藥效或毒性的改變與其內(nèi)在物質(zhì)基礎(chǔ)的變化有關(guān)，但是對其炮制機(jī)制的研究不應(yīng)局限在化學(xué)成分的復(fù)雜性，如何將炮制工藝關(guān)聯(lián)生物學(xué)指標(biāo)與中醫(yī)臨床療效是根本。何首烏等藥材炮制機(jī)制的闡釋應(yīng)在化學(xué)成分改變的基礎(chǔ)上，重視增效減毒相關(guān)指標(biāo)評價(jià)，綜合運(yùn)用適宜的技術(shù)方法，形成基于急性及長期試驗(yàn)的毒理學(xué)研究與關(guān)聯(lián)生物學(xué)指標(biāo)的藥效學(xué)評價(jià)體系，為炮制機(jī)制闡釋提供參考依據(jù)。現(xiàn)代對九蒸九曬增效減毒改變藥性作用的機(jī)制研究尚有較大欠缺，存在研究方法不嚴(yán)謹(jǐn)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果主觀性較強(qiáng)等諸多問題。筆者認(rèn)為可以從以下幾個(gè)方面著手研究：① 加強(qiáng)對中藥九蒸九曬前后吸收代謝的相關(guān)研究，根據(jù)藥效成分在胃腸道內(nèi)的吸收與代謝情況對炮制機(jī)制進(jìn)行深入探索；② 加深炮制方法的理解與工藝研究，例如探究生品是否去皮、炮制器皿、炮制溫度和時(shí)間對炮制品質(zhì)量的影響；③ 關(guān)于中藥炮制過程中所用輔料的相關(guān)研究需要引起重視；④ 借助較為先進(jìn)的分析技術(shù)（電子舌、電子鼻、電子眼、近紅外光譜技術(shù)等），獲取并充分挖掘炮制過程產(chǎn)生的信息，從而提升炮制過程控制水平和豐富炮制品質(zhì)量評價(jià)方法；⑤ 蒸曬時(shí)間是一個(gè)非常重要的炮制過程參數(shù)，在實(shí)際炮制過程中，不同藥材的蒸曬時(shí)間往往不同，但目前還是多依賴工人經(jīng)驗(yàn)來確定具體的蒸曬用時(shí)，并沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。近年來，已有學(xué)者就蒸曬用時(shí)和蒸曬次數(shù)進(jìn)行了探究，采取的評價(jià)指標(biāo)主要是根據(jù)藥材炮制前后的藥效學(xué)指標(biāo)和有效成分含量變化。筆者認(rèn)為，炮制成本同樣是一個(gè)重要的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)炮制品質(zhì)量達(dá)到預(yù)期時(shí)，需要準(zhǔn)確及時(shí)地進(jìn)行炮制終點(diǎn)以降低生產(chǎn)成本。