某地區(qū)3～6周歲健康兒童干濕化學(xué)分析儀6個(gè)血清酶項(xiàng)目參考區(qū)間的建立與比較研究

曹 科，馬東禮，羅小娟，黃寶興，吳躍平，馬金香

（1.廣東省深圳市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 518026；2.廣州醫(yī)學(xué)院研究生課程進(jìn)修班，廣州510182；3.廣州醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生與全科醫(yī)學(xué)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系，廣州510182）

某地區(qū)3～6周歲健康兒童干濕化學(xué)分析儀6個(gè)血清酶項(xiàng)目參考區(qū)間的建立與比較研究

曹 科1，2，馬東禮1△，羅小娟1，黃寶興1，吳躍平1，馬金香3

（1.廣東省深圳市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 518026；2.廣州醫(yī)學(xué)院研究生課程進(jìn)修班，廣州510182；3.廣州醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生與全科醫(yī)學(xué)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系，廣州510182）

目的建立和比較深圳地區(qū)3～6周歲健康兒童干濕化學(xué)分析儀6個(gè)血清酶項(xiàng)目的參考區(qū)間，更好地為臨床診斷和治療服務(wù)。方法采用隨機(jī)分層抽樣篩選出391名健康兒童抽取靜脈血，用美國(guó)強(qiáng)生Vitros 350干式化學(xué)分析儀和美國(guó)Beckman Coulter LX20濕化學(xué)分析儀進(jìn)行血清天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、肌酸激酶（CK）檢測(cè)并分析結(jié)果。結(jié)果該地區(qū)3～6周歲健康兒童兩種方法內(nèi)不同性別血清AST、LDH、ALT、ALP、GGT結(jié)果比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；CK結(jié)果差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；6個(gè)血清酶項(xiàng)目?jī)煞N方法間結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論6個(gè)血清酶項(xiàng)目?jī)煞N方法間結(jié)果比較均有顯著性差異，應(yīng)該針對(duì)不同方法學(xué)分別建立該地區(qū)3～6周歲健康兒童干濕化學(xué)分析儀的參考區(qū)間。

血液化學(xué)分析；參考值，兒童； 深圳

檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、分析檢驗(yàn)信息的依據(jù)［1］。實(shí)驗(yàn)室給臨床提供可靠的參考區(qū)間，使臨床對(duì)患者的診斷治療有明確的指引，否則可能導(dǎo)致誤診或漏診。參考區(qū)間受人種、地域、遺傳、環(huán)境、飲食、檢測(cè)方法等眾多因素的影響，因此確定檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠的參考區(qū)間是實(shí)驗(yàn)室的重要任務(wù)［2］。本研究按照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）C28－A3文件程序和參考區(qū)間建立的方法學(xué)原理［4］，調(diào)查深圳地區(qū)3～6周歲健康兒童美國(guó)強(qiáng)生Vitros 350干式化學(xué)分析儀（簡(jiǎn)稱:干化學(xué)）和美國(guó)Beckman Coulter LX20濕化學(xué)分析儀（簡(jiǎn)稱:濕化學(xué)）血清天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、肌酸激酶（CK）的參考區(qū)間，更好地為臨床診斷和治療服務(wù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選擇2011年2～3月，深圳地區(qū)羅湖、福田、南山、寶安和龍崗的幼兒園各1所，按地區(qū)、年齡、性別進(jìn)行分層，按比例、隨機(jī)抽樣法調(diào)查學(xué)齡前期3～6周歲體檢兒童。選取體格檢查正常，近期無治療性服藥，無不良飲食習(xí)慣的健康兒童作為研究對(duì)象。本調(diào)查共檢測(cè)391例合格標(biāo)本。其中男208例，女183例；按地域分羅湖區(qū)72例、福田區(qū)68例、南山區(qū)103例、寶安區(qū)70例，龍崗區(qū)78例；按年齡分:3歲（113例），4歲（78例），5歲（115例），6歲（85例），平均年齡（4.6±1.1）歲。

1.2 儀器和試劑 采用美國(guó)強(qiáng)生Vitros 350干化學(xué)分析儀和美國(guó)Beckman Coulter LX20濕化學(xué)分析儀，各儀器6種血清酶項(xiàng)目的配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.3 標(biāo)本采集、運(yùn)送及檢測(cè) 受試者在采血前3d保持正常生活習(xí)慣，不做劇烈運(yùn)動(dòng)，正常飲食；空腹8～12h，于清晨安靜狀態(tài)采集靜脈血4mL于干燥管，1h內(nèi)避光送回檢驗(yàn)科，立即以3 000r／min離心10min，排除溶血、黃疸或脂血不合格標(biāo)本，其余標(biāo)本4h內(nèi)分別在干化學(xué)和濕化學(xué)分析儀上完成6個(gè)血清酶項(xiàng)目的檢測(cè)。

1.4 離群值的判斷 參照C28－A3文件方法判斷離群值:對(duì)干化學(xué)和濕化學(xué)6種血清酶項(xiàng)目男、女組檢測(cè)結(jié)果分別從小到大排列，將疑似離群值和其相鄰值的差值（D）和數(shù)據(jù)全距（R）相除，D／R應(yīng)≤1／3，若D／R＞1／3考慮為離群值。若有2個(gè)或以上疑似離群值，將最小的疑似離群值如上作處理，若D／R＞1／3，則剔除所有疑似離群值；若D／R≤1／3，則保留所有數(shù)據(jù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，正態(tài)性檢驗(yàn)采用矩法（偏度和峰度檢驗(yàn)），正態(tài)分布和近似正態(tài)分布的資料用x±s表示，兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Pearson分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 6項(xiàng)血清酶項(xiàng)目按性別分組干濕化學(xué)結(jié)果 結(jié)果表明，除干化學(xué)和濕化學(xué)CK男、女組間均值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），參考區(qū)間分開表示外，其他5個(gè)項(xiàng)目男女組間均值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），參考區(qū)間可合并，見表1。

表1 深圳地區(qū)391例3～6周歲健康兒童6項(xiàng)血清酶項(xiàng)目按性別分組干濕化學(xué)結(jié)果±s，U／L）

表1 深圳地區(qū)391例3～6周歲健康兒童6項(xiàng)血清酶項(xiàng)目按性別分組干濕化學(xué)結(jié)果±s，U／L）

a:n＝207；b:n＝182；c:n＝206。

項(xiàng)目干化學(xué)男（n＝208） 女（n＝183）t P濕化學(xué)男（n＝208） 女（n＝183）t P AST 32.1±4.7 31.6±4.7 1.15 0.25 31.2±4.1 30.9±4.7 0.49 0.62 LDH 622.3±68.1 614.0±75.7 1.14 0.25 211.5±24.8 210.6±30.4 0.30 0.77 ALT 24.0±5.4 24.0±5.1 0.05 0.96 15.2±3.5 14.8±3.4 1.24 0.21 ALP 214.0±46.5a 216.3±47.6b －0.48 0.63 222.6±51.3c 229.4±52.1 －1.29 0.20 GGT 8.6±3.1 8.1±2.7b 1.64 0.10 9.7±2.2 9.5±2.2b 1.02 0.31 CK 105.1±37.6 91.3±30.9 3.98 0.00 128.0±42.6113.4±34.8 3.73 0.00

2.2 建立的干濕化學(xué)參考區(qū)間與廠家和參考書以及文獻(xiàn)的參考區(qū)間比較 除CK男、女組數(shù)據(jù)分開外，其余各項(xiàng)目男女組數(shù)據(jù)合并后經(jīng)矩法正態(tài)性檢驗(yàn)，各組數(shù)據(jù)均呈近似正態(tài)分布，用百分位數(shù)2.5%和97.5%確定本地區(qū)最終的參考區(qū)間。干化學(xué)與濕化學(xué)各項(xiàng)目結(jié)果經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)，各項(xiàng)目干濕化學(xué)組間均值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。干化學(xué)與濕化學(xué)各項(xiàng)目結(jié)果經(jīng)Pearson相關(guān)分析，均呈顯著相關(guān)（P＜0.05）。本地區(qū)干化學(xué)與濕化學(xué)除AST和GGT的參考區(qū)間基本一致外，其余項(xiàng)目的參考區(qū)間均差異較明顯。本地區(qū)干化學(xué)、濕化學(xué)參考區(qū)間分別與廠家和參考書以及文獻(xiàn)的參考區(qū)間比較，均有不同程度的差異，見表2。

表2 深圳地區(qū)檢測(cè)結(jié)果與廠家說明書提供以及參考文獻(xiàn)的參考區(qū)間比較（U／L）

3 討 論

隨著生化檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，干化學(xué)和傳統(tǒng)濕化學(xué)分析儀已廣泛應(yīng)用于國(guó)內(nèi)各級(jí)醫(yī)療單位，目前絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室均直接引用教科書、文獻(xiàn)或廠家提供的參考區(qū)間用于兒童疾病的診斷和治療，而這些參考區(qū)間主要基于二三十年前歐美成年白人的研究，較少涉及兒童的系統(tǒng)研究，由于年齡的不同、人群的改變、方法學(xué)的變遷和生活水平的提高等影響因素變化，這些參考區(qū)間顯然不適合現(xiàn)階段中國(guó)兒童使用。因此，盡快建立適合中國(guó)健康兒童檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間是亟待解決的重要課題。近年來，國(guó)內(nèi)一些學(xué)者［6，8－10］已對(duì)健康兒童的部分生化項(xiàng)目參考區(qū)間進(jìn)行了研究，并在當(dāng)?shù)貎和膊≡\斷和治療、評(píng)估健康狀況等方面發(fā)揮了重要作用。血清酶AST、LDH、ALT、ALP、GGT、CK廣泛存在于肝臟、心臟、骨骼肌、腎臟等器官中，是診斷和鑒別診斷心臟、肝膽和骨骼肌等疾病不可或缺的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。由于兒童生長(zhǎng)發(fā)育的特殊性，血清酶項(xiàng)目參考區(qū)間存在年齡、性別差異，建立準(zhǔn)確適用的兒童血清酶類參考區(qū)間具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

本研究通過對(duì)深圳地區(qū)3～6周歲健康兒童干化學(xué)和濕化學(xué)6項(xiàng)血清酶項(xiàng)目的參考區(qū)間調(diào)查顯示，除兩種方法內(nèi)男性CK高于女性，其余項(xiàng)目男性組與女性組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），可建立共同的參考區(qū)間。本研究結(jié)果顯示，6項(xiàng)血清酶項(xiàng)目干化學(xué)與濕化學(xué)結(jié)果均有顯著性差異（P＜0.05），但相關(guān)性除ALT和GGT較差外，其余4項(xiàng)相關(guān)性均較好，說明兩種方法是具有可比性。由于方法學(xué)的差異，本地區(qū)兩種方法間除AST和GGT的參考區(qū)間差異較小外，其他4項(xiàng)的參考區(qū)間差異均較明顯，因此，方法的不同很可能導(dǎo)致參考區(qū)間的不一致，所以應(yīng)對(duì)主流儀器和試劑分別建立參考區(qū)間［11］。由于美國(guó)強(qiáng)生和貝克曼公司均未提供血清酶項(xiàng)目的兒童參考區(qū)間（僅提供成人的參考區(qū)間），本調(diào)查結(jié)果分別與廠家及參考書提供的成人參考區(qū)間比較，差異均較大［5］。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)［6－7］報(bào)道的年齡相近兒童參考區(qū)間比較，仍然有不同程度的差異。

因此，盲目引用成人或其他地區(qū)兒童的參考區(qū)間并不恰當(dāng)，容易導(dǎo)致本地區(qū)臨床相關(guān)兒童疾病的誤診和漏診。這也證明了建立本地區(qū)健康兒童干化學(xué)和濕化學(xué)血清酶項(xiàng)目參考區(qū)間的重要性和必要性。

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Establish and compare the reference intervals of 6 serum enzyme items on the dry and wet chemistry analyzer among healthy children aged from3 to 6 years in a region

Cao Ke1，2，Ma Dongli1△，Luo Xiaojuan1，Huang Baoxing1，Wu Yueping1，Ma Jinxiang3
（1.Department of Clinical Laboratory，Shenzhen children＇s hospital，Shenzhen，Guangdong518026，China；2.Postgraduate training course，Guangzhou Medical College，Guangzhou，Guangdong510182，China；3.Department of Preventive Medicine，Guangzhou Medical College，Guangzhou，Guangdong510182，China）

ObjectiveTo establish and compare the reference intervals of 6serum enzyme items on the dry and wet chemistry analyzer among healthy children aged from 3to 6years in Shenzhen，provide better references for clinical diagnosis and treatment.MethodsThe stratified randomized cluster sampling method was used to select 391healthy children aged from 3to 6years，AST、LDH、ALT、ALP、GGT、CK in venous blood were detected by the VITROS 350and Beckman Coulter LX20，and data were analyzed by statistical methods.ResultsThe reference intervals showed no significant difference between boys and girls except CK on the dry and Wet chemistry analyzer respectively（P＞0.05）.But the results of 6serum enzyme items showed significant difference between the VITROS 350and Beckman Coulter LX20（P＜0.05）.ConclusionThe results showed significant difference between the VITROS 350and Beckman Coulter LX20，the reference intervals of 6serum enzyme items on the dry and wet chemistry analyzer among healthy children aged from 3to 6years in Shenzhen should be established according to different methods.

blood chemical analysis；reference values；child；Shenzhen

10.3969／j.issn.1671－8348.2012.34.022

A

1671－8348（2012）34－3629－03

△

，Tel:13509636880；E－mail:madl1234＠126.com。

2012－06－09

2012－08－22）