沈丹怡,潘雪央
(慈溪市水產(chǎn)技術(shù)推廣中心,浙江 慈溪 315300)
慈溪市陳家路江漁業(yè)專業(yè)合作社位于慈溪市長河鎮(zhèn)大牌頭村,水面面積1 720畝,主養(yǎng)鰱、鳙,套養(yǎng)日本沼蝦。2014年5月起,該水庫連續(xù)發(fā)生大面積鰱、鳙錨頭鳋寄生蟲病,發(fā)病面積1 000余畝,發(fā)病魚達(dá)100多噸,規(guī)格為100克/尾至10千克/尾,經(jīng)濟(jì)損失達(dá)200多萬元。
鰱、鳙錨頭鳋病使魚的免疫力下降、抗病力變差,影響商品魚的品質(zhì)和價格。使用殺蟲劑治療錨頭鳋病時,若控制不好劑量,容易對養(yǎng)殖的水生動物產(chǎn)生毒性。本文就水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鰱、鳙、日本沼蝦的急性毒性及其對錨頭鳋的殺蟲效果開展研究,并測得制劑最佳殺滅濃度。該濃度下使用制劑安全性好、殺蟲活性高,可減少鰱、鳙錨頭鳋病的發(fā)生,提高養(yǎng)殖效益。
(1)試驗(yàn)動物。健康鰱、鳙、日本沼蝦和寄生有多態(tài)錨頭鳋鰱、鳙,由市陳家路江漁業(yè)專業(yè)合作社提供。健康鰱、鳙、日本沼蝦體重分別為(698.5±45.3)克、(768.6±52.1)克、(6.5±0.4)克,患病鰱、鳙體重分別為(656.2±36.9)克、(731.6±48.4)克。試驗(yàn)前暫養(yǎng)7天,不間斷充氧、定時換水喂食、及時排污,試驗(yàn)前24小時停止喂食。
(2)試劑。水產(chǎn)用阿維菌素(50微克/毫升)制劑為實(shí)驗(yàn)室自制,置于棕色瓶避光保存,試驗(yàn)時用蒸餾水配制成不同濃度的母液。
(3)試驗(yàn)用錨頭鳋幼蟲的獲得。從市陳家路江漁業(yè)專業(yè)合作社水體養(yǎng)殖的寄生有多態(tài)錨頭鳋鰱、鳙上收集帶綠色卵囊的錨頭鳋成蟲若干,摘取卵囊并置于結(jié)晶皿培養(yǎng)孵化,水溫26~28℃,pH 7.3~7.5,定時收集幼蟲用于室內(nèi)殺蟲試驗(yàn)。
(1)水產(chǎn)用阿維菌素制劑對日本沼蝦的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)。在進(jìn)行正式試驗(yàn)前先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),通過96小時全活濃度和全致死濃度確定試驗(yàn)制劑濃 度 范 圍。試 驗(yàn) 設(shè)0.020、0.029、0.042、0.062、0.090微克/毫升5個不同濃度組和1個空白對照組,每組設(shè)3個平行,每24小時更換1/2配置液,進(jìn)行96小時試驗(yàn)。各試驗(yàn)日本沼蝦均為20尾,試驗(yàn)期間連續(xù)增氧,觀察受試對象96小時活動情況,統(tǒng)計各組24、48、96小時日本沼蝦的死亡率,并及時取出死亡個體,計算24小時半數(shù)致死濃度(LC50)和48、96小時LC50及95%置信區(qū)間,并采用Tumbell公式計算水產(chǎn)用阿維菌素制劑安全濃度(SC),SC=48小時LC50×0.3/(24小時LC50/48小時LC50)2。
(2)水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鰱的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)。制劑濃度梯度設(shè)置0.020、0.031、0.047、0.072、0.110微克/毫升5個不同濃度組和1個空白對照組,試驗(yàn)方法同日本沼蝦。
(3)水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鳙的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)。制劑濃度梯度設(shè)置0.020、0.031、0.049、0.077、0.120微克/毫升5個不同濃度組和1個空白對照組,試驗(yàn)方法同日本沼蝦。
(4)水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋幼蟲的室內(nèi)殺蟲效果測定。試驗(yàn)設(shè)0.05、0.10、0.15、0.20、0.25微克/升5個不同濃度組和1個空白對照組,每組設(shè)3個平行。各試驗(yàn)以錨頭鳋無節(jié)幼體、橈足幼體各50只分別作為殺滅對象,于3、6、12、24、48小時觀察受試對象活動情況,并及時取出死亡個體。選擇48小時殺蟲率在90%以上的最低制劑濃度作為制劑最適濃度。
(5)水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋的室外殺蟲效果評價。選擇室內(nèi)最適制劑濃度作為室外殺蟲試驗(yàn)制劑濃度,對慈溪市陳家路江漁業(yè)專業(yè)合作社1、2、3號水體用0.25微克/升水產(chǎn)用阿維菌素制劑全水域潑灑的方法進(jìn)行室外殺蟲試驗(yàn),1、3號水體施用制劑1次,2號水體施用制劑2次,兩次間隔時間為7天,4、5、6號水體不施用制劑,于30天后檢查各組鰱、鳙魚體錨頭鳋的感染率和感染強(qiáng)度變化,判斷制劑對病情的控制效果。
水產(chǎn)用阿維菌素制劑對日本沼蝦的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。經(jīng)寇氏法計算制劑對日本 沼 蝦 的24、48、96小 時LC50分 別 為0.552、0.304、0.051微克/毫升,24、48、96小時LC5095%的置信區(qū)間分別為0.502~0.606、0.270~0.343、0.047~0.056微克/毫升,SC為0.028微克/毫升。
表1 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對日本沼蝦的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果
水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鰱的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。經(jīng)寇氏法計算制劑對鰱的24、48、96小 時LC50分別 為0.667、0.370、0.062微克/毫升,24、48、96小時LC5095%的置信區(qū)間分別 為0.610~0.729、0.323~0.422、0.055~0.070微克/毫升,SC為0.034微克/毫升。
表2 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鰱的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果
水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鳙的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。經(jīng)寇氏法計算制劑對鳙的24、48、96小 時LC50分別 為0.688、0.423、0.064微克/毫升,24、48、96小時LC5095%的置信區(qū)間分別 為0.635~0.746、0.370~0.484、0.057~0.073微克/毫升,SC為0.048微克/毫升。
表3 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鳙的室內(nèi)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果
水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋幼蟲的室內(nèi)殺滅試驗(yàn)結(jié)果如表4、表5所示。當(dāng)濃度為0.25微克/升時,48小時錨頭鳋無節(jié)幼體、橈足幼體死亡率分別達(dá)100%、94%,校正后48小時錨頭鳋無節(jié)幼體、橈足幼體死亡率分別為92%、90%。選擇48小時錨頭鳋幼蟲殺蟲率在90%以上的最低制劑濃度為最適濃度,因此水產(chǎn)用阿維菌素制劑殺滅錨頭鳋幼蟲的最適濃度為0.25微克/升。
表4 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋無節(jié)幼體的殺滅試驗(yàn)結(jié)果
表5 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋橈足幼體的殺滅試驗(yàn)結(jié)果
空白對照組錨頭鳋無節(jié)幼體、橈足幼體48小時死亡率分別為8%、4%,這是因?yàn)闊o節(jié)幼體、橈足幼體在發(fā)育過程中受自身個體和環(huán)境因素影響,存在一定的死亡率,且無節(jié)幼體的死亡率高于橈足幼體。
水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋的室外殺蟲試驗(yàn)結(jié)果如表6所示。由表6可知,1、2、4號水體的魚體寄生錨頭鳋成蟲多為童蟲,1號水體施用制劑1次,30天后錨頭鳋感染率從70%以上降至8%,感染強(qiáng)度從20~55只/尾降至3~6只/尾;2號水體施用制劑2次,30天后魚體表成蟲全部脫落;4號水體未施用制劑,30天后錨頭鳋感染率從75%以上升至85%以上,感染強(qiáng)度從20~65只/尾升至30~75只/尾。由此可知,當(dāng)魚體寄生成蟲大多為童蟲時,施用制劑2次殺蟲效果優(yōu)于1次,不施用制劑水體的魚體錨頭鳋感染率和感染強(qiáng)度上升。
表6 水產(chǎn)用阿維菌素制劑對錨頭鳋的室外殺蟲試驗(yàn)結(jié)果
3、5號水體的魚體寄生錨頭鳋成蟲多為壯蟲,3號水體施用制劑1次,30天后錨頭鳋感染率從60%以上降至2%,感染強(qiáng)度從25~50只/尾降至2~3只/尾;5號水體不施用制劑,錨頭鳋感染率從70%以上升至80%以上,感染強(qiáng)度從25~45只/尾升至30~45只/尾。由此可知,當(dāng)魚體寄生成蟲大多為壯蟲時,施用制劑1次殺蟲效果較好,不施用制劑則魚體錨頭鳋的感染率和感染強(qiáng)度上升。
6號水體的魚體寄生錨頭鳋成蟲多為老蟲,不施用制劑,錨頭鳋的感染率從65%以上降至35%左右,感染強(qiáng)度從25~50只/尾降至25~30只/尾。由此可知,當(dāng)魚體寄生成蟲大多為老蟲時,由于高溫季節(jié)壽命短,老蟲不久便自然脫落。
本實(shí)驗(yàn)室研制的水產(chǎn)用阿維菌素制劑對鰱、鳙錨頭鳋幼蟲殺蟲率較高,當(dāng)制劑濃度為0.25微克/升時,錨頭鳋幼蟲殺蟲率可達(dá)90%以上,此濃度低于對日本沼蝦、鰱、鳙的安全濃度,為最適殺蟲濃度。經(jīng)0.25微克/升水產(chǎn)用阿維菌素制劑潑灑水體后,鰱、鳙錨頭鳋的發(fā)病率及感染強(qiáng)度大幅度下降,而未潑灑的水體除6號因大多寄生的老蟲自行脫落、發(fā)病率和感染強(qiáng)度有所下降外,其他未潑灑水體仍發(fā)生嚴(yán)重感染。
本文從安全性和殺蟲效果兩方面對水產(chǎn)用阿維菌素制劑進(jìn)行了評價,認(rèn)為該制劑應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中治療鰱、鳙錨頭鳋病可行、有效。