尿液分析儀在檢測(cè)男性外生殖器標(biāo)本真菌中的價(jià)值

劉小平

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，合肥 230031)

男性外生殖器包括陰莖和陰囊。陰莖又分為龜頭、陰莖體和陰莖根。臨床上常見(jiàn)男性外生殖器處潮紅、炎性丘疹、脫屑和滲出物等，常為念珠菌感染導(dǎo)致。實(shí)驗(yàn)室常采用鱗屑或分泌物直接鏡檢來(lái)輔助臨床診斷和鑒別診斷，但檢出率和準(zhǔn)確率卻受很多因素影響，如實(shí)驗(yàn)室方法、人員技術(shù)、取材方式及標(biāo)本質(zhì)量等。本研究收集161例皮膚科門(mén)診就診的男性患者外生殖器標(biāo)本，應(yīng)用尿液分析儀、熒光染色鏡檢及培養(yǎng)3種方法檢測(cè)真菌并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2021年2月至2021年6月來(lái)自本院皮膚科門(mén)診男性外生殖器皮膚病患者161例，包括陰莖部136例和陰囊部25例。

實(shí)驗(yàn)儀器 顯微鏡CX31(日本Olympus公司)；JD801真菌檢查圖文系統(tǒng)(南京大學(xué))；尿液沉渣分析儀(日本SysmexUF-1000i)。

實(shí)驗(yàn)試劑 真菌熒光染色液(批號(hào)20201010，有效期20211009)；安徽信靈檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)科技股份有限公司；沙堡弱平板(生產(chǎn)批號(hào)20210108、20210403，有效期3個(gè)月)鄭州安圖生物工程股份有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

用鈍刀刮取或透明膠布粘貼患者外生殖器部位皮屑或分泌物放至加有1滴熒光染色液的載玻片上鏡檢。

旋開(kāi)1支一次性男性拭子擦拭取材部位后再放回至試管中，以無(wú)菌操作方式分區(qū)劃線接種至沙堡弱培養(yǎng)基培養(yǎng)。再旋開(kāi)1支一次性男性無(wú)菌拭子，向試管中加1 mL無(wú)菌生理鹽水，用蘸有無(wú)菌生理鹽水的拭子擦拭取材部位后，再放回至試管中充分混勻，用尿液分析儀檢測(cè)。

檢測(cè)方法對(duì)真菌的檢出率用率(%)表示。檢測(cè)方法間比較分析采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 尿液分析儀散點(diǎn)圖

尿液分析儀采用紅色半導(dǎo)體激光技術(shù)、核酸染色技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定有形成分。產(chǎn)生3種類(lèi)型信號(hào)，即提供大小信息的前向散射光信號(hào)(Fsc)、提供表面和內(nèi)部復(fù)雜性信息的側(cè)向散射光信號(hào)(Ssc)及提供染色性信息的熒光信號(hào)(FI)形成脈沖信號(hào)波，形成不同的散點(diǎn)圖，如有酵母菌(YLC)存在的可能，分析儀上出現(xiàn)青色區(qū)域。根據(jù)散點(diǎn)圖提示來(lái)判斷有無(wú)真菌存在的可能,見(jiàn)圖1、2。

圖1 散點(diǎn)圖提示有真菌存在的可能圖2 散點(diǎn)圖提示無(wú)真菌存在的可能

2.2 161例男性外生殖器標(biāo)本中真菌檢驗(yàn)結(jié)果

161例男性外生殖器皮膚病患者標(biāo)本中熒光染色鏡檢，檢出孢子或和菌絲的陽(yáng)性33例，陽(yáng)性率為20.5%；拭子鹽水液用尿液分析儀進(jìn)行檢測(cè)，提示真菌陽(yáng)性39例，陽(yáng)性率為24.2%；拭子培養(yǎng)，念珠菌培養(yǎng)陽(yáng)性35例，陽(yáng)性率為21.7%。結(jié)果見(jiàn)表1，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，尿液分析儀檢測(cè)提示率高于熒光鏡檢和培養(yǎng)檢出率，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.11，P<0.05,χ2=15.71，P<0.05)。

33例熒光染色鏡檢真菌陽(yáng)性中，分析儀檢測(cè)拭子鹽水液提示陽(yáng)性33例，陽(yáng)性率為100%；拭子培養(yǎng)出念珠菌26例，陽(yáng)性率為78.8%。分析儀陽(yáng)性提示率與熒光染色鏡檢率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.9，P>0.05)。分析儀陽(yáng)性提示率顯著高于培養(yǎng)檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.33，P<0.05)；128例熒光染色鏡檢未檢出真菌中，分析儀檢測(cè)拭子鹽水液提示陽(yáng)性6例，陽(yáng)性率為0.05%(6/128)；念珠菌培養(yǎng)陽(yáng)性9例，陽(yáng)性率為0.07%(9/128)。尿液分析儀檢測(cè)提示率顯著低于培養(yǎng)檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.33，P<0.05)。尿液分析儀散點(diǎn)圖真菌提示假陽(yáng)性率為0%；假陰性率為0.02%(3/128)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 3種檢查方法真菌檢驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果

3 討 論

陰莖頭和陰莖交界處為冠狀溝，此處脫落的上皮細(xì)胞、腺體分泌物、塵埃和尿液殘余物積聚可形成皮垢，易引起念珠菌感染導(dǎo)致發(fā)炎[1-2]。念珠菌性龜頭炎是皮膚性病科常見(jiàn)病，主要發(fā)生在龜頭部位，典型病例取鱗屑或分泌物直接鏡檢可找到大量的孢子和或假菌絲，但相當(dāng)部分病例直接鏡檢為陰性。本研究應(yīng)用3種檢測(cè)方法對(duì)161例皮膚科門(mén)診男性患者的外生殖器皮屑或分泌物的真菌進(jìn)行了檢測(cè)，將尿液分析儀散點(diǎn)圖的提示結(jié)果與熒光染色鏡檢及培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行比較，觀察分析儀對(duì)男性皮膚病患者外生殖器標(biāo)本真菌的檢測(cè)情況，結(jié)果認(rèn)為可以通過(guò)分析儀散點(diǎn)圖提示有無(wú)真菌存在的可能，再確定是否需要進(jìn)行鏡檢和培養(yǎng)。文獻(xiàn)[3-4]分析了臨床尿培養(yǎng)標(biāo)本中酵母樣真菌檢測(cè)陽(yáng)性且同時(shí)檢測(cè)尿液常規(guī)分析的病例，以真菌鏡檢和培養(yǎng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)。尿液分析儀通常用于尿液分析，雖在一定程度上取代了鏡檢及尿液培養(yǎng)，能及早發(fā)報(bào)告，大大減少了人力和物力，但分析儀通過(guò)散點(diǎn)圖只能提示尿液中有無(wú)真菌存在的可能，還受尿液中其他成分的干擾，真菌孢子易被誤認(rèn)為紅細(xì)胞和白細(xì)胞[5-6]。本研究用的拭子鹽水液則沒(méi)有類(lèi)似尿液其他成分的干擾，可通過(guò)分析儀散點(diǎn)圖提示拭子鹽水液中有真菌存在的可能，33例熒光染色鏡檢陽(yáng)性中，分析儀散點(diǎn)圖提示陽(yáng)性率為100%(33/33)。有研究[6-7]將其檢測(cè)極限進(jìn)行了評(píng)估，用生理鹽水把酵母菌臨床分離株稀釋成11種McFarland濃度，調(diào)至McFarland 0.5的菌液，所含酵母菌數(shù)為1.5×104/μL,UF-1000i自動(dòng)尿液分析儀的檢測(cè)值為2 680 CFU/uL,相當(dāng)于McFarland 0.5的酵母菌菌液稀釋1 000倍時(shí),UF-1000i無(wú)法測(cè)出酵母菌的存在。指出UF-1000i與手工鏡檢結(jié)果的相關(guān)性極佳。33例熒光染色鏡檢真菌陽(yáng)性中，拭子標(biāo)本被培養(yǎng)出念珠菌僅26例，可能和患者就診前外用藥有關(guān)，特別是抗真菌藥[3]。128例鏡檢陰性者而培養(yǎng)陽(yáng)性9例中，分析儀散點(diǎn)圖提示陰性3例(24.7%)，這可能與標(biāo)本中菌含量少有關(guān)。有研究[6-7]發(fā)現(xiàn)鏡檢的高倍數(shù)視野(HPF)酵母菌平均少于1 CFU時(shí),儀器無(wú)法測(cè)出。本研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)分析儀檢測(cè)拭子鹽水液，散點(diǎn)圖真菌提示假陽(yáng)性率為0%；假陰性率為0.02%(3/128)，可認(rèn)為分析儀散點(diǎn)圖只要提示有真菌存在時(shí)，可不需要熒光染色鏡檢和或培養(yǎng)證實(shí)。只有在分析儀散點(diǎn)圖提示真菌陰性且熒光染色鏡檢陰性情況下需要進(jìn)行培養(yǎng)。換言之，分析儀檢測(cè)的散點(diǎn)圖陽(yáng)性時(shí)可提示男性患者外生殖器皮屑及分泌物中有真菌存在，分析儀檢測(cè)的散點(diǎn)圖陰性不能說(shuō)明男性患者外生殖器皮屑及分泌物中無(wú)真菌。分析儀檢測(cè)有操作簡(jiǎn)便、快速靈敏重復(fù)性好及易于自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和鑒別診斷[3-4]，其自動(dòng)化可用于多個(gè)樣本真菌檢測(cè)的篩查，還能選擇出需要進(jìn)行培養(yǎng)的標(biāo)本，能大大減少標(biāo)本需要鏡檢和培養(yǎng)的頻次。值得注意的是拭子鹽水液制備必須用拭子用力擦拭患處及其邊界，盡可能地提高菌的數(shù)量。日常實(shí)驗(yàn)室檢查順序應(yīng)該是先熒光染色鏡檢，陽(yáng)性可直接報(bào)告菌絲和或孢子；陰性者用分析儀檢測(cè)拭子鹽水液，分析儀散點(diǎn)圖提示陽(yáng)性時(shí)需結(jié)合臨床或進(jìn)一步培養(yǎng)。倡導(dǎo)所有臨床病例標(biāo)本做培養(yǎng)，培養(yǎng)不但能鑒定菌株還能提供藥敏，對(duì)防止濫用抗生素減少耐藥菌株的發(fā)生具有重要價(jià)值。