方 毅,林澤鎮(zhèn),梁華麗,黃錦炎,劉玉莉
(1.汕頭海關(guān)技術(shù)中心,廣東 汕頭 515000;2.汕頭海關(guān),廣東 汕頭 515000)
蛆癥異蚤蠅(Megaseliascalaris)屬雙翅目(Diptera)、環(huán)裂亞目(Cyclorrhapha)、蚤蠅總科(Phoroidea)、蚤蠅科(Phoridae)、異蚤蠅屬(Megaselia),是一種分布廣泛的世界性昆蟲(chóng)[1]。蛆癥異蚤蠅主要生活在熱帶和亞熱帶地區(qū),在高緯度溫暖氣候地區(qū)也有分布,甚至在偏遠(yuǎn)的島嶼上如水手長(zhǎng)鳥(niǎo)島、加那利群島和加拉帕戈斯群島也有報(bào)道[2-4]。該蟲(chóng)具有腐食性、糞食性、尸食性和寄生性,且繁殖能力極強(qiáng),常存活于下水道、垃圾堆、腐敗變質(zhì)食物以及動(dòng)物尸體上,以腐殖質(zhì)為食物,常常污染人類食物、水源,時(shí)刻威脅著人類健康[5-7]。該蟲(chóng)也是一種重要的法醫(yī)昆蟲(chóng),由于其體型微小容易進(jìn)入相對(duì)密閉的空間取食尸體,從而成為案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)主要的昆蟲(chóng)證據(jù),因此在法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)中也可利用該蟲(chóng)不同生長(zhǎng)期的形態(tài)來(lái)估算死后間隔時(shí)間[8]。
近年來(lái),我國(guó)許多口岸時(shí)有截獲蛆癥異蚤蠅幼蟲(chóng)、蛹或成蟲(chóng)的報(bào)道,如在進(jìn)口廢紙、原木和郵件等貨物中均有截獲[9-11]。因此,如何進(jìn)行外來(lái)有害物種的快速檢疫鑒定,在口岸通關(guān)環(huán)節(jié)非常重要。本文主要通過(guò)蛆癥異蚤蠅不同生長(zhǎng)期的顯微觀察,拍攝記錄主要形態(tài)特征并介紹制作標(biāo)本的方法,旨在為該蟲(chóng)的鑒定提供參考。
供試?yán)ハx(chóng)為蛆癥異蚤蠅,利用鮮羊奶腐敗誘捕獲得,并在相對(duì)濕度75%和室溫環(huán)境下進(jìn)行飼養(yǎng),取不同生長(zhǎng)期的蟲(chóng)樣研究。
實(shí)驗(yàn)儀器及材料包括奧林巴斯(OlympusSZX7)體式顯微鏡、基恩士(VXH6000)三維顯微成像系統(tǒng)、鑷子、解剖針、解剖刀、養(yǎng)蟲(chóng)箱、載玻片、蓋玻片、75%酒精、貝氏(Berlese)封片劑、Barber還軟液[12]。
1.2.1 蟲(chóng)樣處理
幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)置于冰箱冷凍殺死后,于75%乙醇中保存待用;蛹置于4℃冰箱中保存待用。
1.2.2 形態(tài)觀察
在基恩士(VXH6000)三維顯微成像系統(tǒng)下觀察不同生長(zhǎng)期標(biāo)本的形態(tài)特征并拍照記錄。
由于蛆癥異蚤蠅體型小,在分類鑒定或標(biāo)本保存中需要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行還軟、解剖、制片等處理。
1.3.1 標(biāo)本還軟
因干制蟲(chóng)體質(zhì)地較脆弱,容易斷裂脫落,筆者使用Barber還軟液對(duì)蟲(chóng)體還軟3 d,待蟲(chóng)體各關(guān)節(jié)能夠撥動(dòng)時(shí)即可進(jìn)行下一步的解剖、制片等操作,還軟后的標(biāo)本放入75%酒精中暫存。
Barber還軟液組成為95%乙醇33 mL、純水30 mL、乙醚12 mL、乙酸乙酯15 mL、冰醋酸0.1 mL。
1.3.2 標(biāo)本解剖
根據(jù)需觀察和拍照的部位,將蟲(chóng)體頭部、翅膀、足、尾器等重要部位,使用解剖刀等工具在OlympusSZX7體式顯微鏡下解剖剝離下來(lái)。
1.3.3 制片
在玻片上滴1滴貝氏封片劑,將解剖好的部位調(diào)整至膠滴中央,用蓋玻片緩慢蓋在標(biāo)本上,應(yīng)防止移動(dòng)擠壓標(biāo)本,以免產(chǎn)生氣泡。
貝氏封片劑制作方法:稱取6 g阿拉伯膠,于15 mL純水中浸泡48 h;稱取葡萄糖2.5 g,溶于5 mL純水中,制成50%葡萄糖漿;除去阿拉伯膠渣,在阿拉伯膠溶液中加入10 g水合氯醛和2.5 mL乙酸,充分混合溶解,最后加入4 mL 50%葡萄糖漿混合均勻。
1齡幼蟲(chóng)和2齡幼蟲(chóng)長(zhǎng)0.75~2.00 mm,3齡幼蟲(chóng)超過(guò)2.00 mm,幼蟲(chóng)體白色,12節(jié),節(jié)間具小突起(圖1-A);口器黑褐色至黑色,背橋(dorsal bridge)明顯,側(cè)板(lateral plate)發(fā)達(dá);觸角具有6個(gè)感覺(jué)器[13]。蛹為黃色至黃褐色(圖1-B),腹面扁平;背部前端具1對(duì)深色呼吸角 (respiratory horn,rh),呼吸角細(xì)長(zhǎng),先端稍向外彎曲,呼吸角基部至端部表面有螺旋狀排列橢圓形、圓頂狀的乳突,乳突表面有一條縱裂;蛹背部節(jié)間具有棘狀突起(spinose setae,sp);背部末端有一對(duì)后氣門(posterior spiracles,ps)[14]。
圖1 幼蟲(chóng)和蛹的形態(tài)特征
成蟲(chóng)(圖2-A)體長(zhǎng)2~4 mm,典型駝背外觀,體色黃褐色,舐吸式口器,頭小,形如半球形。頭部(圖2-B)額區(qū)密被細(xì)毛,中縱溝明顯;觸角上鬃(supra antennal bristles,sb)2對(duì),近等長(zhǎng),上對(duì)觸角上鬃間距大于單眼前鬃(pre-ocdllar bristles,po b)間距,前額鬃(antial bristles,ab)幾乎在前側(cè)額鬃(antero-lateral bristles,al b)正下方,并與上對(duì)觸角上鬃等高,單眼前鬃略高于中側(cè)額鬃(medio-lateral bristles,ml b),4根鬃等距排列;觸角第3節(jié)鞭節(jié)(flagellum)膨大,淺黃褐色,觸角芒(arista,ar)長(zhǎng)于額寬且具微毛。下顎須(palpus)黃色,半月形,端部鬃發(fā)達(dá),喙黃色,短小。胸部黃色或黃褐色,側(cè)板色淺,中側(cè)片(anepisternum)光裸;背側(cè)鬃(notopleural bristles)2根,無(wú)背側(cè)裂(notopleural cleft)。
雄蟲(chóng)小盾鬃(scutellar bristles)1對(duì),雌蟲(chóng)小盾鬃2對(duì)。翅面(圖2-C)略帶黃色,脈褐色;翅前緣纖毛(cilia,cil)短,Sc 伸達(dá)Rl;Rs 脈基部無(wú)毛。平衡棒黃色,僅端部具1小型暗斑。足黃色;前足跗節(jié)細(xì)長(zhǎng),第1跗節(jié)與第2、3跗節(jié)之和近等長(zhǎng);后足(圖2-D)發(fā)達(dá),后足腿節(jié)端部具暗斑,且基部腹緣毛顯著短于端部的腹緣毛,脛節(jié)無(wú)前背纖毛,后背纖毛強(qiáng)壯。
雄蟲(chóng)腹部背板(tergite)黑色或黑褐色(圖2-E),6節(jié),前緣中部具黃斑,尤其以T4和T5的黃斑最大;背板長(zhǎng)有稀疏細(xì)毛,僅T2兩側(cè)和T6后緣毛較長(zhǎng);雌蟲(chóng)腹部背板T2~T5向后漸窄,T5顯著長(zhǎng)于T6,T6呈馬鞍形并伸達(dá)兩側(cè),前緣具3個(gè)淺色斑,后緣具1排長(zhǎng)毛。腹板(sternite)黃色,st3-st6腹面具細(xì)毛。尾器 (terminalia)黑褐色或黑色(圖2-F),生殖背板(epandrium)每側(cè)稀被短毛及長(zhǎng)鬃毛1根;生殖腹板(hypandrium)不對(duì)稱,左葉大呈舌狀,右葉短小呈圓形;肛管(anual tube,at)黃色,尾狀下彎,端毛強(qiáng)大呈羽狀[15]。
圖2 成蟲(chóng)的形態(tài)特征
蛆癥異蚤蠅是一種世界廣泛分布的昆蟲(chóng),在我國(guó)口岸一線入境貨物查驗(yàn)中時(shí)有截獲該蟲(chóng)的幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng);在出口貿(mào)易中,有的國(guó)家將該蟲(chóng)列為檢疫對(duì)象,加強(qiáng)了對(duì)進(jìn)口果蔬中蛆癥異蚤蠅的檢疫檢疫工作,直接影響了我國(guó)對(duì)外貿(mào)易。
本文簡(jiǎn)要介紹的蟲(chóng)體標(biāo)本制作方法也適合于一些其它昆蟲(chóng)標(biāo)本的制作。在制作過(guò)程中尤其要注意還軟效果和整姿關(guān)鍵,充足的還軟時(shí)間才能防止關(guān)鍵部位的一些關(guān)鍵特征不被破壞,制片時(shí)要盡量減少氣泡的產(chǎn)生,讓蓋玻片一側(cè)先接觸膠體,然后輕輕緩慢將蓋玻片放下。本文描述的該蟲(chóng)幼蟲(chóng)節(jié)間小突起、口器背橋的形狀、觸角感覺(jué)器數(shù)量,蛹呼吸角的形狀、呼吸角上的乳突、蛹節(jié)間的棘狀突起,成蟲(chóng)額區(qū)鬃毛的位置、距離、數(shù)量,胸區(qū)鬃毛的位置、數(shù)量、中側(cè)片的特征,翅膀各脈的位置、分支,后足特征,腹部背板和腹板的斑紋、形狀、被毛情況,肛管形狀、端毛等這些特征均是該蟲(chóng)的重要分類特征,在鑒定時(shí)應(yīng)細(xì)心觀察,利用本文的形態(tài)特征描述進(jìn)行分類鑒定,可以鑒定出該蟲(chóng)。