茶葉中噠螨靈農藥殘留測定的不確定度評定

茶葉在生長過程中深受螨蟲危害，因此噠螨靈在茶葉生長過程中被大量使用，導致茶葉中噠螨靈殘留較為嚴重。氣相色譜-質譜法是國家標準中指定的茶葉中噠螨靈測定方法，該方法檢測靈敏度高，操作簡便、快速。同時，對該檢測方法出具的檢測數據進行不確定度評定是評價測量結果分散性的一個重要指標，它也是判斷茶葉中噠螨靈是否超過最大限量值的重要依據[1-5]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

島津氣相色譜-質譜儀（GCMS-QP2020）配有電子轟擊源（EI），帶自動進樣器（島津，Aoc-20i）；SH-Rxi-5MS色譜柱（島津）；旋轉蒸發(fā)儀；臺式離心機（湘儀）；分析天平（湘儀）；A級移液管；A級容量瓶；0.22 μm微孔濾膜。

噠螨靈標準品：99.86%，德國Dr；乙腈為色譜純；試驗室所有用水均為超純水

1.2 儀器工作條件

（1）色譜條件。載氣：氦氣（純度≥99.999%）；載氣流量：1.2 mL·min-1；色譜柱溫度：40 ℃保持1 min，然后以30 ℃·min-1程序升溫至130 ℃，再以5 ℃·min-1程序升溫至250 ℃，再以10 ℃·min-1程序升溫至300 ℃，保持5 min。

（2）質譜條件。電子轟擊源：70 eV；進樣口溫度：290 ℃；GC-MS接口溫度：280 ℃；離子源溫度：230 ℃；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1 μL；定量離子：m/z147；定性離子：m/z117和m/z364。

1.3 測定步驟

稱取2.00 g茶葉試樣于50 mL塑料離心管中，加10 mL水渦旋混勻，靜置30 min，加入15 mL乙腈-醋酸（99+1）、提取鹽包（6 g無水硫酸鎂+1.5 g醋酸鈉）、1顆陶瓷均質子，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1 min后4 200 r·min-1離心5 min，吸取8 mL上清液于15 mL塑料離心管中，加入凈化鹽包（1 200 mg硫酸鎂+400 mg乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠+400 mg C18+200 mg石墨化炭黑）渦旋混勻1 min，4 200 r·min-1離心5 min，準確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴中氮氣吹至近干。加入1 mL乙酸乙酯，過0.22 μm濾膜，上機檢測。

2 數學模型

噠螨靈含量的計算公式為

式中：ω為樣品中噠螨靈的含量，mg·kg-1；c為定溶液中噠螨靈的濃度，μg·L-1；v為定容體積，mL；m為樣品質量，g。

3 不確定度來源分析

根據測量方法和計算公式，影響茶葉中噠螨靈農藥殘留測定的不確定因素主要是以下幾個方面：噠螨靈標準物質；工作曲線溶液配制；稱量標物及茶葉樣品時天平帶入；玻璃儀器（包括移液管和容量瓶等）帶入；儀器重復性測定帶入；樣品前處理過程中帶入。

4 合成測量不確定度的各分量評定及組合

4.1 制備噠螨靈標準工作溶液引入的不確定度urel(m1)

4.1.1 噠螨靈標準物質引入的不確定度

本試驗中所用噠螨靈標準物質由德國Dr公司購買，隨標準物質附帶的證書中標明：噠螨靈質量百分含量為99.86 g·g-1，擴展不確定度U=0.003 5 g·g-1。本試驗中稱取噠螨靈標準品0.58 mg，計算噠螨靈標準品不確定度為

4.1.2 天平稱量引進的不確定度

本試驗中用萬分之一天平稱量噠螨靈標準物質，天平的量程為0～210 g，查看天平校準證書，在天平的量程范圍內，示值誤差為±0.000 1 g，根據測量不確定度評定規(guī)則，按照均勻分布（矩形分布）考慮：

稱量噠螨靈標準物質時天平引入的不確定度為

4.1.3 移液管和容量瓶等帶入的不確定度

（1）移液管引入的不確定度。本試驗中，使用1 mL的A級移液管，根據常用玻璃量器檢定規(guī)程（JJG 196—2006），容量誤差為±0.007 mL，按照均勻分布考慮（包含因子k=），1 mL的A級移液管引入的不確定度為

（2）溫度變化影響溶劑（乙腈）帶入的不確定度。本試驗中，噠螨靈標準物質用乙腈稀釋，實驗室內溫度在±2 ℃以內，查看相關證書可得乙腈的膨脹系數為1.37×10-3℃-1，按照均勻分布考慮，溫度變化影響乙腈帶入的不確定度為

（3）容量瓶引進的不確定度。工作溶液最后均用10 mL的A級容量瓶定容，根據JJG 196—2006，容量誤差為±0.020 mL，按照均勻分布考慮（包含因子k=），10 mL的A級容量瓶引入的不確定度為

工作溶液制備過程中，4次用到1 mL的移液管，5次用到10 mL的容量瓶，工作溶液稀釋與定容帶入的不確定度為

因此，噠螨靈工作曲線溶液配制引入的相對不確定度為

4.2 茶葉樣品稱量引入的不確定度urel(m2)

用百分之一的天平準確稱取茶葉樣品2.00 g，天平最大允許誤差為±0.01 g，按照均勻分布考慮（包含因子k=），樣品稱量引入的不確定度為

4.3 茶葉樣品溶液制備過程引入的不確定度urel(m3)

茶葉樣品處理過程中使用了5 mL和1 mL的A級移液管，根據JJG 196—2006，查得5 mL移液管示值誤差為±0.015 mL，按照均勻分布考慮（包含因子k=），試樣制備過程中引進的不確定度為

4.4 儀器重復性測定帶入的不確定度urel(m4)

因為本次試驗中所選用的茶葉樣品中均未檢出噠螨靈農藥，所以用工作曲線中的一個濃度點進行了6次重復性測試，對6次測量的結果進行分析，計算儀器重復性測定引入的不確定度。結果如表1所示。

表1 重復性測定不確定度的結果表

4.5 茶葉樣品前處理過程引進的不確定度urel(m5)

茶葉樣品因為色素含量比較高，因此前處理過程比較復雜，從茶葉中提取農殘，到提取液凈化，再到濃縮，最后到定容，每一個步驟都會引入不確定度，分析每個步驟然后進行不確定度評定是很難的，本試驗通過加標回收率對樣品的整個前處理過程引入的不確定度進行評定。本試驗中稱取未檢測出噠螨靈的茶葉樣品2.0 g，添加620 μg·L-1的標準工作溶液0.5 mL，制成噠螨靈含量為0.155 mg·kg-1的樣品。按樣品前處理流程走，最后定容到1 mL，上機檢測。結果如表2所示。

4.6 計算茶葉中噠螨靈的不確定度

通過對影響茶葉中噠螨靈測定的各個因素引入的不確定度進行評定，將影響噠螨靈不確定度的分量合成，計算噠螨靈的相對合成不確定度為

表2 樣品前處理不確定度結果表

其中取包含因子k=2，置信區(qū)間約為95%，添加含量為0.155 mg·kg-1的噠螨靈的茶葉其擴展不確定度為u(ω噠螨靈)=2×urel(ω噠螨靈)×0.155=2×0.034 5×0.155=0.011 mg·kg-1。

5 結論

用該方法測量茶葉中噠螨靈含量為（0.155±0.011）mg·kg-1，k=2。本試驗分析了5個影響茶葉中噠螨靈殘留量測定不確定度的因素，結果表明，標準物質制備過程影響最大，茶葉樣品溶液制備次之，然后是儀器的穩(wěn)定性。