澇漬脅迫下辣椒葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性模型建立及應(yīng)用

宋 釗，梁櫨丹，黃文茵，陳 瀟，曹 健，何裕志，張白鴿

（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所/廣東省蔬菜新技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510640）

0 引言

葉綠素含量是衡量作物營養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)。測(cè)定葉綠素含量的常規(guī)方法是通過丙酮或者乙醇提取，然后使用分光光度計(jì)測(cè)定葉綠素含量。由于涉及到取樣、測(cè)定、分析，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，在應(yīng)用上受到一定的限制。隨著科技與工藝水平的不斷提高，葉綠素?zé)o損檢測(cè)技術(shù)得到長足發(fā)展，便攜式葉綠素儀(SPAD)是其中的佼佼者。日本MINOLTA公司推出的SPAD-502葉綠素手持光譜儀，可在田間無損測(cè)定植物葉片的葉綠素相對(duì)含量[1]，其原理是2個(gè)發(fā)光二極管向葉片的某個(gè)部位發(fā)射紅光和紅外光，利用2個(gè)波長下光密度差別測(cè)量葉綠素相對(duì)含量[2]。使用時(shí)不破壞植物組織，不受時(shí)間、氣候限制，方便輕巧，測(cè)定的SPAD值與葉片的葉綠素含量具有良好的一致性[2-3]，并可預(yù)估作物產(chǎn)量指標(biāo)[4]，近年來被科研工作者廣泛應(yīng)用[5-6]。目前，該葉綠素儀已經(jīng)成功應(yīng)用于水稻、棉花、玉米[3]、萵苣[1]、番茄[2]、馬鈴薯[4]及辣椒[6]等作物的葉綠素?zé)o損檢測(cè)研究中。SPAD值被用來評(píng)價(jià)辣椒苗期的耐寒性[7-9]、耐弱光性[10-11]和耐澇性[6]，研究不同施氮水平下[5,12-15]，不同生長調(diào)節(jié)劑[16-17]、基質(zhì)配比[18]對(duì)辣椒幼苗葉綠素含量變化的影響，但對(duì)辣椒葉綠素實(shí)測(cè)含量與SPAD值相關(guān)性及澇漬脅迫對(duì)這種相關(guān)性影響的研究仍未見報(bào)道。

此前，筆者團(tuán)隊(duì)建立了辣椒形態(tài)學(xué)澇漬脅迫評(píng)價(jià)體系，并應(yīng)用SPAD值評(píng)估辣椒在澇漬脅迫下葉片葉綠素含量變化[6,19]，發(fā)現(xiàn)20個(gè)辣椒品種脅迫6、9天后葉綠素SPAD值都低于脅迫3天與對(duì)照，并且澇漬脅迫3天后葉綠素含量最高。但是當(dāng)時(shí)并沒有使用化學(xué)方法測(cè)定葉綠素含量，常規(guī)管理及澇漬脅迫下SPAD值能否真實(shí)反映辣椒葉片葉綠素含量仍需進(jìn)一步研究。本研究使用葉綠素儀測(cè)定SPAD值之后利用分光光度計(jì)法測(cè)定葉綠素含量，對(duì)辣椒葉片受到短期（每2 h）及長期（每3天）澇漬脅迫后葉綠素含量變化進(jìn)行研究，以期為快速測(cè)定辣椒葉綠素含量提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試?yán)苯菲贩N為廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所選育的‘粵紅3號(hào)’美人椒、‘匯豐二號(hào)’牛角椒，及廣州市綠霸種苗有限公司選育的‘甜冠107’甜椒、‘綠霸星12號(hào)’線椒和‘經(jīng)典翠寶’泡椒，均為辣椒屬一年生種(Capsicum annuum)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 2020年9月9日在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所大豐基地種植5個(gè)試驗(yàn)材料，試驗(yàn)分脅迫組和對(duì)照組，每個(gè)品種每個(gè)處理3次重復(fù)。11月11日將脅迫組中四葉一心期長勢(shì)一致幼苗按照宋釗等[6]的方法進(jìn)行脅迫處理，對(duì)照組植株進(jìn)行正常水分管理。

1.2.2SPAD值的測(cè)定 使用日本柯尼卡美能達(dá)公司(Konica Minolta)的SPAD-502 PLUS葉綠素?zé)晒鈨x對(duì)葉片葉綠素含量進(jìn)行測(cè)定，該儀器通過測(cè)量葉片對(duì)2個(gè)波長段里的吸收率來評(píng)估葉綠素相對(duì)含量，用SPAD值表示。在脅迫處理3、6、9天后測(cè)量SPAD值；在脅迫處理2、7天時(shí)，8:00—18:00每2 h測(cè)量1次SPAD值。測(cè)定SPAD值后取對(duì)應(yīng)葉片放入液氮盒中保存。

1.2.3 葉綠素的測(cè)定 參考張憲政[20]的方法測(cè)定葉綠素含量。稱取0.2～0.3 g葉片，去除粗大的中心葉脈后剪成碎片，放入離心管中，用10 mL提取液（丙酮:無水乙醇=1:1）避光浸泡1天，取上清液，用全波長酶標(biāo)儀測(cè)定663、645 nm下的吸光度，分別計(jì)算葉綠素a、葉綠素b含量及總?cè)~綠素含量，如式(1)～(3)。

式中，葉綠素含量單位為mg/g，D663、D645分別為相應(yīng)波長下的光密度值，V為提取液的體積，W為葉片鮮重。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2016軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、相關(guān)性分析及趨勢(shì)作圖。直線相關(guān)分析分別采用了指數(shù)、線性、對(duì)數(shù)、乘冪等函數(shù)。作圖類型為散點(diǎn)圖，橫坐標(biāo)SPAD值以35或40為起點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 澇漬脅迫對(duì)辣椒葉片葉綠素含量的影響

為了探明SPAD儀是否適用測(cè)量辣椒葉片葉綠素含量變化，對(duì)具有一定代表性的5個(gè)類型辣椒品種葉片葉綠素含量進(jìn)行了SPAD儀和化學(xué)方法測(cè)定，并對(duì)正常管理及澇漬脅迫3、6、9天后葉片葉綠素含量變化與SPAD值進(jìn)行相關(guān)性分析。5個(gè)品種的指數(shù)、線性、乘冪及對(duì)數(shù)模型方程、相應(yīng)的決定系數(shù)(R2)和相關(guān)系數(shù)(r)均列于表1。對(duì)相關(guān)性模型的擬合程度進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，并將對(duì)照組及脅迫組各品種的最優(yōu)相關(guān)模型及回歸趨勢(shì)作圖（圖1）。如圖1A所示，‘粵紅3號(hào)’和‘匯豐二號(hào)’的最優(yōu)模型是線性相關(guān)，‘經(jīng)典翠寶’是指數(shù)方程。從品種相關(guān)性看，這3個(gè)品種的相關(guān)系數(shù)排在前三，‘經(jīng)典翠寶’相關(guān)系數(shù)最高，而‘綠霸星12號(hào)’和‘甜冠107’最優(yōu)相關(guān)模型決定系數(shù)不到0.2，SPAD值與葉綠素含量相關(guān)性較差。在對(duì)照組中，5個(gè)品種的葉綠素含量與SPAD值呈正相關(guān)，趨勢(shì)一致。

表1 辣椒葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性分析（每3天）

圖1 5個(gè)辣椒品種每3天葉綠素含量變化趨勢(shì)圖

澇漬脅迫后相關(guān)性變化趨勢(shì)如圖1B所示?！浖t3號(hào)’和‘綠霸星12號(hào)’最優(yōu)相關(guān)模型為乘冪方程，僅‘粵紅3號(hào)’、‘匯豐二號(hào)’和‘綠霸星12號(hào)’的葉綠素含量與SPAD值呈正相關(guān)，但‘匯豐二號(hào)’相關(guān)性較差(R2=0.017)。而‘經(jīng)典翠寶’和‘甜冠107’的4個(gè)相關(guān)模型均為負(fù)相關(guān)。

2.2 ‘粵紅3號(hào)’和‘匯豐二號(hào)’葉綠素含量日變化分析

在脅迫處理3、6、9天后，分別用葉綠素?zé)晒鈨x和化學(xué)方法測(cè)定葉綠素含量，結(jié)果顯示無論是在對(duì)照組還是在脅迫組，SPAD值均能反映‘粵紅3號(hào)’和‘匯豐二號(hào)’葉片中葉綠素含量變化趨勢(shì)。為調(diào)查脅迫后短期內(nèi)葉綠素含量變化，筆者在澇漬脅迫后第2、7天8:00—18:00，每2 h測(cè)量一次SPAD值并用化學(xué)方法測(cè)定相應(yīng)葉片的葉綠素含量，其相關(guān)分析結(jié)果列于表2及圖2中?！浖t3號(hào)’在對(duì)照組中最優(yōu)模型是指數(shù)方程，在脅迫組中為線性方程，相關(guān)系數(shù)均高于對(duì)照組（圖2A）。‘匯豐二號(hào)’在對(duì)照組中的最優(yōu)模型為線性方程(y=0.0966x-2.661)，線性相關(guān)趨勢(shì)非常明顯(r=0.945)，并且4個(gè)擬合方程的相關(guān)系數(shù)達(dá)極顯著水平，表明SPAD值對(duì)葉片葉綠素含量的模擬相關(guān)程度極高，但在脅迫組中決定系數(shù)不到0.3（圖2B）?！浖t3號(hào)’4個(gè)擬合方程決定系數(shù)在澇漬脅迫后明顯增加，而‘匯豐二號(hào)’澇漬脅迫之后全部急劇下降。

表2 辣椒葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性分析（每2 h）

圖2 ‘粵紅3號(hào)’和‘匯豐二號(hào)’每2 h葉綠素含量變化

‘粵紅3號(hào)’和‘匯豐二號(hào)’在脅迫2、7天后的單日葉綠素含量進(jìn)行了相關(guān)性比較分析，以探究澇漬脅迫時(shí)長是否對(duì)相關(guān)性的影響。從表3可見，脅迫7天后，‘粵紅3號(hào)’脅迫組和‘匯豐二號(hào)’對(duì)照組所有模擬方程的相關(guān)系數(shù)均達(dá)顯著水平。脅迫2天后，‘粵紅3號(hào)’對(duì)照組回歸趨勢(shì)線位于脅迫組上方，對(duì)照組中平均葉綠素含量(2.03 mg/g)高于脅迫組(1.79 mg/g)，但是對(duì)照組和脅迫組中大部分?jǐn)M合模型的相關(guān)系數(shù)均極低且為負(fù)（圖3）。而在脅迫7天后，脅迫組中葉綠素含量和SPAD值最優(yōu)擬合模型為線性方程(R2=0.7918)，且4個(gè)方程的相關(guān)系數(shù)均達(dá)顯著水平。

表3 脅迫2、7天時(shí)辣椒葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性分析（每2 h）

圖3 ‘粵紅3號(hào)’在脅迫2、7天后每2 h葉綠素含量變化

脅迫2天后，‘匯豐二號(hào)’脅迫組中葉綠素含量和SPAD值最優(yōu)擬合模型為指數(shù)函數(shù)(R2=0.4585)，而對(duì)照最優(yōu)模型則為線性方程(R2=0.2684)。脅迫7天后，脅迫組最優(yōu)模型的決定系數(shù)降為0.1279，而對(duì)照組則升為0.676。從圖4可見，脅迫2天后脅迫組回歸趨勢(shì)線位于對(duì)照組上方，短期脅迫造成‘匯豐二號(hào)’葉片葉綠素含量增加（圖4A）；而在脅迫7天后，趨勢(shì)線與對(duì)照組交換位置，脅迫組葉綠素平均含量從1.78 mg/g增加到2.23 mg/g，而對(duì)照組葉綠素含量則均從1.35 mg/g增加到2.54 mg/g，長期澇漬脅迫抑制了‘匯豐二號(hào)’葉片中葉綠素的合成（圖4B）。

圖4 ‘匯豐二號(hào)’在脅迫2、7天后每2 h葉綠素含量變化

2.3 SPAD值與葉綠素a、葉綠素b相關(guān)性分析

對(duì)照組中‘經(jīng)典翠寶’（表1）和‘匯豐二號(hào)’（表2）4個(gè)擬合模型相關(guān)系數(shù)均達(dá)極顯著水平，以這2個(gè)品種為對(duì)象，研究SPAD值與葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量的相關(guān)關(guān)系?！?jīng)典翠寶’中SPAD值與葉綠素a及總?cè)~綠素的最優(yōu)擬合模型為指數(shù)方程，相關(guān)系數(shù)均達(dá)極顯著水平，而與葉綠素b相關(guān)性較低（圖5A）?！畢R豐二號(hào)’中SPAD值與葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量最優(yōu)擬合模型為線性方程?？梢姡谙嚓P(guān)系數(shù)較高的回歸方程中，2個(gè)品種最優(yōu)模擬模型并不一致。

圖5 SPAD值與葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量變化

2.4 ‘匯豐二號(hào)’最優(yōu)擬合模型檢驗(yàn)

在辣椒葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性分析中，篩選到‘匯豐二號(hào)’最優(yōu)擬合模型為線性方程(y=0.0736x-1.7983)，相關(guān)系數(shù)達(dá)到極顯著水平，其中x代表SPAD值，y代表葉綠素含量。為了檢驗(yàn)該模型的可靠性，使用澇漬脅迫7天時(shí)‘匯豐二號(hào)’SPAD值與葉綠素實(shí)測(cè)值對(duì)模型進(jìn)行檢驗(yàn)，將SPAD值代入模型得到理論計(jì)算值，理論值和實(shí)測(cè)值擬合曲線如圖6所示。為了檢測(cè)葉綠素含量理論值與實(shí)測(cè)值的吻合程度，計(jì)算均方根誤差RMSE=0.36，均方根誤差小于1說明模型的理論值和實(shí)測(cè)值差異不顯著，該模型可靠。

圖6 ‘匯豐二號(hào)’葉綠素含量與SPAD擬合模型檢驗(yàn)

3 討論

SPAD儀通過測(cè)量葉片2個(gè)波長段里的吸收率并換算成SPAD值來評(píng)估葉綠素相對(duì)含量[1]。SPAD值與作物葉片中葉綠素含量呈正相關(guān)關(guān)系，SPAD值越大，葉綠素含量越高，在多個(gè)作物中[2-4,21]已經(jīng)驗(yàn)證能真實(shí)反映葉綠素含量變化并用來評(píng)價(jià)作物營養(yǎng)狀況，從而實(shí)現(xiàn)作物生長情況的快速診斷。不同作物，甚至相同作物不同品種間SPAD值與葉片葉綠素含量的擬合相關(guān)程度存在差異。辣椒類型豐富，品種多樣，僅Capsicum annuum一個(gè)栽培種從果實(shí)類型來分就存在扁燈籠形、方燈籠形、長燈籠形、短錐形、長錐形、短牛角形、長牛角形、短羊角形、長羊角形、短指形、長指形、線性、圓球形等10余個(gè)變種類型[22]，然而辣椒葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性關(guān)系研究鮮見報(bào)道。本研究選取具備一定代表性的5種類型辣椒品種，研究正常管理及澇漬脅迫下，辣椒葉綠素含量與SPAD值之間的相關(guān)性關(guān)系。

3.1 不同辣椒品種間葉片葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性差異較大

從對(duì)照組中5個(gè)品種相關(guān)性分析結(jié)果看，各類型辣椒品種的葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性均為正相關(guān)，且各品種回歸趨勢(shì)線一致性較好，表明SPAD值能夠代表辣椒葉片中葉綠素含量的變化，即SPAD值越大，葉綠素含量越高。但是各品種間SPAD值與葉綠素含量的相關(guān)性存在較大差異，最高的‘經(jīng)典翠寶’相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.832，而‘綠霸星12號(hào)’僅為0.244。從最優(yōu)擬合模型來看，線性方程能更好模擬SPAD值與葉綠素含量的相關(guān)性關(guān)系，‘粵紅3號(hào)’、‘匯豐二號(hào)’和‘綠霸星12號(hào)’最優(yōu)擬合模型均為線性方程。從品種看，‘粵紅3號(hào)’、‘匯豐二號(hào)’和‘經(jīng)典翠寶’最優(yōu)擬合模型的相關(guān)系數(shù)較高，SPAD值能準(zhǔn)確反映葉片中葉綠素含量，而‘綠霸星12號(hào)’和‘甜冠107’中最優(yōu)模型的決定系數(shù)均不到0.2，相關(guān)性較差。而從擬合優(yōu)度指數(shù)看，‘經(jīng)典翠寶’的模型擬合最佳，各模型的相關(guān)系數(shù)均達(dá)極顯著水平；次之為‘匯豐二號(hào)’，全部達(dá)到顯著水平；之后為‘粵紅3號(hào)’，其線性模型和對(duì)數(shù)模型的相關(guān)系數(shù)達(dá)到顯著水平；而‘綠霸星12號(hào)’和‘甜冠107’4個(gè)模型方程的擬合程度均未達(dá)顯著水平。可見，SPAD值雖能反映辣椒葉片中葉綠素含量變化趨勢(shì)，但是品種間差異較大，在本研究中SPAD評(píng)價(jià)葉綠素含量準(zhǔn)確性從高到低依次排序?yàn)椤?jīng)典翠寶’、‘匯豐二號(hào)’、‘粵紅3號(hào)’、‘甜冠107’及‘綠霸星12號(hào)’。

3.2 澇漬脅迫嚴(yán)重干擾了葉綠素?zé)晒鈨x對(duì)辣椒葉片葉綠素含量的測(cè)量

澇漬脅迫后，‘甜冠107’和‘經(jīng)典翠寶’中SPAD值與葉綠素含量相關(guān)系數(shù)大幅減小，且反轉(zhuǎn)呈負(fù)相關(guān)（圖1B），即SPAD值越大，葉綠素含量反而越低?！畢R豐二號(hào)’脅迫處理后4個(gè)擬合模型的決定系數(shù)均大幅下降，但是這種變化趨勢(shì)的方向未變，仍為正相關(guān)，但澇漬脅迫對(duì)SPAD測(cè)量‘匯豐二號(hào)’葉綠素含量的準(zhǔn)確度影響明顯。而‘粵紅3號(hào)’對(duì)照組和脅迫組最優(yōu)擬合模型的相關(guān)系數(shù)均接近0.7，澇漬脅迫前后擬合程度變化幅度較小，對(duì)SPAD準(zhǔn)確度影響較小。值得注意的是，‘綠霸星12號(hào)’脅迫處理后最優(yōu)模型的相關(guān)系數(shù)(r=0.668)達(dá)顯著水平，而對(duì)照組最優(yōu)模型僅為0.312，并且4個(gè)擬合方程的相關(guān)系數(shù)均比對(duì)照組增加近1倍，即SPAD值更能代表脅迫后葉片葉綠素含量，而非正常管理?xiàng)l件下葉片葉綠素含量。綜上所述，澇漬脅迫情況下，SPAD不適宜用來測(cè)量‘匯豐二號(hào)’、‘甜冠107’和‘經(jīng)典翠寶’的葉綠素含量，而能較為準(zhǔn)確地?cái)M合‘粵紅3號(hào)’和‘綠霸星12號(hào)’中葉綠素含量，品種間差異明顯。

3.3 不同辣椒品種對(duì)短期和長期澇漬脅迫的耐受性迥異

在葉綠素日變化研究中，‘粵紅3號(hào)’對(duì)照組回歸趨勢(shì)線位于脅迫組上方，且對(duì)照組的SPAD值和葉綠素含量平均值均高于脅迫組，表明‘粵紅3號(hào)’在受到澇漬脅迫后葉綠素含量受到明顯影響。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，脅迫2天后，雖然SPAD值在增加，但實(shí)際葉綠素含量并無明顯變化（圖3A），相關(guān)系數(shù)(0.04)遠(yuǎn)低于對(duì)照(0.178)，說明澇漬脅迫2天后即嚴(yán)重影響SPAD值與葉綠素含量的相關(guān)性，類似于干旱脅迫后葉片蠟質(zhì)層增厚[23]，作物受到澇漬脅迫后迅速啟動(dòng)應(yīng)激機(jī)制通過調(diào)整呼吸速率[24]、葉片結(jié)構(gòu)來適應(yīng)澇漬脅迫環(huán)境[6]，從而影響了SPAD值的測(cè)量準(zhǔn)確度。而在脅迫7天之后，植物體內(nèi)各種反應(yīng)趨于穩(wěn)定，葉綠素含量與SPAD值一致性增加，最優(yōu)模型的相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.89，并且所有4個(gè)擬合方程的r值達(dá)極顯著水平。從圖2B可見，‘匯豐二號(hào)’對(duì)照組和脅迫組的回歸趨勢(shì)線幾乎完全重疊，說明澇漬脅迫并沒有對(duì)SPAD值與葉綠素含量相關(guān)性造成嚴(yán)重干擾，呈明顯線性相關(guān)關(guān)系。在脅迫2天后，脅迫組最優(yōu)擬合模型相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.677，遠(yuǎn)高于對(duì)照組的0.518，而在脅迫7天后，脅迫組的最優(yōu)模型相關(guān)系數(shù)降為0.358，此時(shí)對(duì)照組所有相關(guān)系數(shù)均達(dá)顯著水平（表3）。綜上所述，短期澇漬脅迫對(duì)‘粵紅3號(hào)’葉綠素含量與SPAD值的相關(guān)性產(chǎn)生嚴(yán)重影響，而對(duì)‘匯豐二號(hào)’辣椒影響很小。SPAD值能真實(shí)反映‘匯豐二號(hào)’辣椒葉片中葉綠素含量變化，但長期澇漬脅迫仍然對(duì)相關(guān)性造成較大負(fù)面影響。

4 結(jié)論與展望

本研究對(duì)美人椒、牛角椒、甜椒、線椒和泡椒5種類型辣椒SPAD值與葉綠素含量相關(guān)性進(jìn)行了研究，在正常管理?xiàng)l件下，SPAD值與各種類型辣椒葉片葉綠素含量呈正相關(guān)關(guān)系，能真實(shí)評(píng)價(jià)辣椒葉片葉綠素含量，與在玉米[3]、萵苣[1]、番茄[2]及馬鈴薯[4]等作物中取得的結(jié)果一致。進(jìn)一步研究表明，‘經(jīng)典翠寶’和‘匯豐二號(hào)’中SPAD值與葉綠素a及總?cè)~綠素含量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系，而與葉綠素b相關(guān)性較低，這與SPAD-502葉綠素儀測(cè)定葉綠素含量的固定波長660 nm與葉綠素a的吸收峰663 nm非常接近有關(guān)。證實(shí)澇漬脅迫嚴(yán)重干擾了SPAD儀準(zhǔn)確評(píng)價(jià)辣椒葉片葉綠素含量，短期脅迫與長期脅迫對(duì)不同品種的干擾程度不同。本研究建立了正常管理及澇漬脅迫條件下辣椒SPAD值與葉綠素含量最優(yōu)相關(guān)性數(shù)學(xué)函數(shù)，經(jīng)檢驗(yàn)相關(guān)系數(shù)達(dá)顯著水平的擬合模型可直接應(yīng)用到相關(guān)研究中，測(cè)量SPAD值代入方程即可快速獲取葉綠素含量，實(shí)現(xiàn)了對(duì)辣椒葉綠素含量的快速無損檢測(cè)，避免了傳統(tǒng)化學(xué)方法測(cè)定中取樣、碎樣、浸提、上機(jī)等繁雜工作，為以后研究中辣椒葉綠素的快速測(cè)量提供了參考。

葉綠素含量無損檢測(cè)至關(guān)重要，后續(xù)研究將對(duì)初步建立的模型進(jìn)一步進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證。結(jié)合澇漬脅迫下株高、根長、植株鮮重、干重等形態(tài)特征指標(biāo)，和超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、過氧化物酶及丙二醛等生理生化指標(biāo)對(duì)辣椒品種耐澇性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。利用辣椒澇漬脅迫評(píng)價(jià)體系[19]和本研究建立的葉綠素含量與SPAD值相關(guān)性模型篩選高耐澇漬和澇漬敏感的自交系材料，構(gòu)建遺傳群體對(duì)相關(guān)控制基因進(jìn)行遺傳定位，為培育耐澇性較強(qiáng)的辣椒新品種夯實(shí)基礎(chǔ)。