血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平與阿爾茨海默病患者病情程度的相關(guān)性及臨床意義

王偉 鄭麗平 常立國 郭富山

聊城市第三人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，聊城 252000

阿爾茨海默病（AD）為神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為進(jìn)行性認(rèn)知功能損傷，近年AD發(fā)病率隨人口老齡化呈逐漸升高趨勢，影響患者生存質(zhì)量［1-3］。研究表明，AD的發(fā)生、進(jìn)展與神經(jīng)損傷聯(lián)系密切，其中血清同型半胱氨酸（Hcy）具有神經(jīng)毒性作用，為神經(jīng)損傷評估常用指標(biāo)，同時參與AD疾病進(jìn)展［4-6］。因此，血清微小核苷酸-26b（miRNA-26b）、β淀粉樣前體蛋白（β-APP）等腦損傷相關(guān)指標(biāo)水平可能與AD病情程度存在一定聯(lián)系［7-9］。本研究選取聊城市第三人民醫(yī)院收治的65例AD患者，旨在觀察AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平變化，分析其與病情程度的關(guān)系，為AD診斷、防治提供新思路，現(xiàn)報道如下。

資料與方法

1、一般資料

選取2019年8月至2022年3月聊城市第三人民醫(yī)院收治的65例AD患者為觀察組，根據(jù)總體衰退量表（GDS）分為輕度AD組（27例）、中度AD組（21例）、重度AD組（17例），另選取同期60例健康體檢者為對照組，其中觀察組男28例，女37例，年齡64～86（75.61±5.13）歲；文化程度：24例小學(xué)，29例初中，12例中學(xué)及以上。對照組男31例，女29例，年齡63～86（74.82±5.27）歲；文化程度：10例小學(xué)，12例初中，6例中學(xué)及以上。兩組基線資料均衡可比（均P＞0.05）。

本研究經(jīng)聊城市第三人民醫(yī)院倫理委員會審批通過，患者及家屬均了解本研究并當(dāng)面簽訂知情同意書

2、納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合阿爾茨海默病學(xué)會AD診斷標(biāo)準(zhǔn)［10］；（2）簡易智能精神狀態(tài)量表（MMSE）評分：小學(xué)≤20分，初中及以上≤24分；（3）病史記錄完整；（4）Hachinski缺血指數(shù)量表（HIS）評分≤4分；（5）日常生活能力量表（ADL）評分＜26分。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴有心腦血管疾病；（2）依從性較差，無法配合取樣；（3）伴有惡性腫瘤疾?。唬?）近期存在感染史；（5）存在肝腎等器質(zhì)性疾病；（6）存在視聽力嚴(yán)重障礙或其他干擾影響神經(jīng)系統(tǒng)評估準(zhǔn)確性。

3、方法

3.1、血清相關(guān)指標(biāo)檢測AD患者均于入院后抽取5 ml空腹靜脈血，離心（4000 r/min，10 min，半徑為19 cm）處理，采用全自動生化分析儀（廠家：日本日立公司，型號：7600-110型）檢測血清Hcy水平；采用放射免疫法測定血清β-APP水平；采用熒光定量PCR儀（廠家：北京同洲維普科技有限公司，型號：C7型）檢測血清miRNA-26b水平。

3.2、病情評估相關(guān)量表 采用總體衰退量表（GDS）評分評估AD患者癡呆程度，計分0～7分，GDS評分≤3分為輕度，4～5分為中度，6～7分為重度［11］。采用MMSE評定AD患者認(rèn)知功能缺損程度，計分0～30分，＜27分為認(rèn)知功能障礙，≥27分為認(rèn)知功能正常；其中認(rèn)知功能障礙分為輕度（21～26分）、中度（10～20分）、重度（0～9分）。采用ADL評估AD患者日常生活能力，計0～100分，＜20分為完全依賴；20～49分為重度依賴；50～74分為中度依賴；75～95分為輕度依賴；96～100分為生活自理。

4、觀察指標(biāo)

（1）對比兩組血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平。（2）對比不同病情程度AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平。（3）對比不同病情程度AD患者GDS、MMSE、ADL評分。（4）分析血清miRNA-26b、HCY、β-APP水平與AD患者GDS、MMSE、ADL評分相關(guān)性。

5、統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 23.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，多組間比較以單因素方差進(jìn)行分析，兩兩比較以LSD-t檢驗，以Pearson相關(guān)性分析探究血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平與AD患者GDS、MMSE、ADL評分的關(guān)聯(lián)性，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

1、兩組血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比

觀察組血清miRNA-26b水平低于對照組，血清Hcy、β-APP水平均高于對照組（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對象的血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比（±s）

表1 兩組研究對象的血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比（±s）

注：觀察組為阿爾茨海默病患者，對照組為健康體檢者；miRNA-26b為微小核苷酸-26b，Hcy為同型半胱氨酸，β-APP為β淀粉樣前體蛋白

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)6560 miRNA-26b 0.51±0.161.07±0.2813.861＜0.001 Hcy（μmol/L）21.45±6.2915.07±4.386.529＜0.001 β-APP（ng/L）92.57±28.6051.54±9.2710.607＜0.001

2、不 同 病 情 程 度AD患 者 血 清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比

重度AD組血清miRNA-26b水平較輕度AD組、中度AD組低，血清Hcy、β-APP水平較輕度AD組、中度AD組高（均P＜0.05），見表2。

表2 不同病情程度的AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比（±s）

表2 不同病情程度的AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平對比（±s）

注：AD為阿爾茨海默病，miRNA-26b為微小核苷酸-26b，Hcy為同型半胱氨酸，β-APP為β淀粉樣前體蛋白；與輕度AD組對比，aP＜0.05；與中度AD組對比，bP＜0.05

組別輕度AD組中度AD組重度AD組F值P值例數(shù)2721 17 miRNA-26b 0.58±0.140.54±0.15a 0.36±0.15ab 12.537＜0.001 Hcy（μmol/L）17.83±4.3922.20±4.54a 26.27±5.62ab 16.620＜0.001 β-APP（ng/L）81.21±22.6898.96±25.89a 102.72±26.47ab 4.9720.010

3、不同病情程度AD患者GDS、MMSE、ADL評分對比

重度AD組GDS評分較輕度AD組、中度AD組高，MMSE、ADL評分較輕度AD組、中度AD組低（均P＜0.05），見表3。

表3 不同病情程度的AD患者GDS、MMSE、ADL評分對比（分，±s)

表3 不同病情程度的AD患者GDS、MMSE、ADL評分對比（分，±s)

注：AD為阿爾茨海默病，GDS為總體衰退量表，MMSE為簡易智能精神狀態(tài)量表，ADL為日常生活能力量表；與輕度AD組對比，aP＜0.05；與中度AD組對比，bP＜0.05

組別輕度AD組中度AD組重度AD組F值P值例數(shù)2721 17 GDS評分2.51±0.394.36±0.38a 6.22±0.43ab 461.953＜0.001 MMSE評分23.47±3.1916.24±2.55a 6.76±1.31ab 214.556＜0.001 ADL評分24.10±1.3718.93±1.59a 13.58±1.68ab 251.369＜0.001

4、相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，血清miRNA-26b與GDS評分呈負(fù)相關(guān)，與MMSE、ADL評分呈正相關(guān)（均P＜0.05）；血清Hcy與GDS評分呈正相關(guān)，與MMSE、ADL評分呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）；血清β-APP與GDS評分呈正相關(guān)，與MMSE、ADL評分呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）。見表4。

表4 AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平與GDS、MMSE、ADL評分的相關(guān)性分析（65例）

討論

AD為認(rèn)知功能障礙綜合病癥，相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，預(yù)計到2050年全世界癡呆患者將達(dá)1.15億，其中AD占比50%～70%，為世界公共問題［12-14］。AD發(fā)病原因可能涉及年齡、遺傳、炎性反應(yīng)、神經(jīng)傳遞障礙、細(xì)胞骨架改變等多種因素，病因復(fù)雜，個體病情程度差異較大；為明確AD患者病情程度，及時進(jìn)行針對性診治，近年臨床將AD研究關(guān)注點逐漸轉(zhuǎn)向血清相關(guān)指標(biāo)水平［15-17］。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清miRNA-26b水平低于對照組，且不同病情程度AD患者血清miRNA-26b水平對比差異有統(tǒng)計意義（P＜0.05），可見血清miRNA-26b與AD病情程度聯(lián)系密切。梁昌權(quán)等［18］探究AD患者血清表達(dá)中指出，血清miRNA-26b是AD發(fā)生的獨立危險因素，可能通過調(diào)節(jié)Hcy、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、心房鈉尿肽（ANP）水平，促使血脂代謝改變，參與AD病情進(jìn)展，與本研究結(jié)果相似。本研究進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，血清miRNA-26b與GDS評分呈負(fù)相關(guān)，與MMSE、ADL評分呈正相關(guān)（均P＜0.05）；進(jìn)一步證實，血清miRNA-26b水平改變與AD病情密切相關(guān)，臨床檢測血清miRNA-26b水平，對及時診治、延緩AD病情進(jìn)展具有積極作用。

腦血管病變可造成血管性認(rèn)知功能障礙，還可導(dǎo)致AD的發(fā)生、進(jìn)展［19-21］。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清Hcy、β-APP水平較對照組高，不同病情程度AD患者血清Hcy、β-APP水平對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且Pearson相關(guān)性分析顯示，血清Hcy、β-APP與GDS評分呈正相關(guān)，與MMSE、ADL評分呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05）；提示血清Hcy、β-APP水平可一定程度反映AD病情進(jìn)展。血清Hcy水平越高，AD患者癡呆程度越深，認(rèn)知功能障礙、生活依賴程度越嚴(yán)重；β-APP水平升高反應(yīng)機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)損傷嚴(yán)重，其代償性高水平表達(dá)以營養(yǎng)、保護(hù)神經(jīng)［22-24］。Hcy產(chǎn)生于含硫氨基酸代謝，作為氨基酸半胱氨酸的異種可激活血小板，介導(dǎo)血管平滑肌增生，促使血液高凝，加劇氧化應(yīng)激反應(yīng)［25-27］。Hcy高水平表達(dá)可促進(jìn)膠原形成，造成血管彈力纖維受損，可多途徑產(chǎn)生毒性作用，損傷神經(jīng)細(xì)胞，干擾海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞DNA修復(fù)，造成神經(jīng)元損傷和丟失，損傷認(rèn)知能力［28-30］。此外相關(guān)報道指出，β-APP作為單跨膜蛋白，廣泛存在于各組織細(xì)胞，經(jīng)軸突快速轉(zhuǎn)運機(jī)制運輸，正常神經(jīng)元中β-APP處于較低水平，若機(jī)體發(fā)生缺氧、興奮性毒素等損傷，β-APP水平迅速升高；AD發(fā)生、進(jìn)展過程中，β-APP可調(diào)節(jié)腦中載脂蛋白E代謝，與其建立生物聯(lián)系，參與神經(jīng)系統(tǒng)損傷反應(yīng)，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，可維持神經(jīng)元穩(wěn)定狀態(tài)，控制神經(jīng)元興奮性［31-32］。

綜上所述，AD患者血清miRNA-26b、Hcy、β-APP參與AD病情進(jìn)展，其水平變化與病情嚴(yán)重程度具有一定相關(guān)性，可作為AD診斷、治療參考指標(biāo)。

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