肺癌CT圖像特征與高爾基磷酸化蛋白3、Ki-67的相關(guān)性分析

侯海文 李菊慧 唐孝武

近年來，肺癌的發(fā)生率逐年升高，CT檢查是臨床常用技術(shù)，是診斷肺癌的重要技術(shù)手段之一。Ki-67屬于核蛋白，對(duì)腫瘤的生物學(xué)行為起重要作用，且高表達(dá)與病人的預(yù)后相關(guān)[1]。高爾基磷酸化蛋白3(golgi phosphoprotein 3，GOLPH3)屬于高爾基體復(fù)合物相關(guān)蛋白，在多種惡性腫瘤組織中高表達(dá)，且與病人的預(yù)后密切相關(guān)[2]。本文觀察肺癌的CT影像學(xué)特征及Ki-67、GOLPH3的表達(dá)情況，評(píng)估兩者之間的關(guān)系。

對(duì)象與方法

一、對(duì)象

2019年1月 ～ 2021年4月在我院接受手術(shù)治療的肺癌病人120例，其中男性75例，女性45例，年齡40～78歲，平均(61.18±7.28)歲。病理分型：腺癌38例，鱗癌42例，小細(xì)胞肺癌31例，腺鱗癌9例。病理分期:Ⅰ～Ⅱ級(jí)69例，Ⅲ級(jí)51例。腫瘤直徑1.5～8.3 cm 。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)病理明確診斷；(2)均給予根治性手術(shù)治療；(3)不合并肺部其他疾??；(4)病人均知情同意，隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他部位腫瘤或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；合并肺部其他疾病；精神疾病。

二、方法

1.胸部CT檢查：使用Siemens 128排CT進(jìn)行檢查。掃描參數(shù):管電壓120 kV，管電流200 mAs，層厚8 mm，1 mm薄層重建，增強(qiáng)時(shí)經(jīng)肘靜脈以3.5～4.0 ml/s流速注射碘海醇(300 mg I/ml)75 ml，注入對(duì)比劑后30～35秒開始掃描。病人取仰臥位，一次屏氣先進(jìn)行全肺平掃，從肺尖到肺底。觀察CT圖像特征主要表現(xiàn)，包括腫瘤直徑、位置、毛刺征象、深分葉征象及壞死空洞。所有CT片均采用雙盲方法進(jìn)行讀片，由同一位副主任醫(yī)師職稱以上的放射科醫(yī)師閱片。

2.病理學(xué)分型及免疫組織化學(xué) ：所有標(biāo)本均術(shù)中組織檢查獲取，采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(streptavidin-perosidase，SP)法檢測(cè)肺癌組織中Ki-67、GOLPH3的表達(dá)。使用免疫組化試劑盒檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物。 Ki-67蛋白定位于細(xì)胞核，GOLPH3蛋白定位于細(xì)胞膜，隨機(jī)觀察1 000個(gè)細(xì)胞，記錄陽性細(xì)胞比例：< 10 %定義為陰性(-)；陽性細(xì)胞10%～49%定義為弱陽性(+)；50%～89%定義為中等陽性(++)；≥90%定義為強(qiáng)陽性(+++)。

3.分析指標(biāo)：檢測(cè)肺癌組織中 Ki-67、GOLPH3陽性表達(dá)率，分析病人CT特征與Ki-67、GOLPH3表達(dá)的相關(guān)性。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用例(%)表示，用χ2檢驗(yàn)。Spearman相關(guān)分析Ki-67和GOLPH3表達(dá)的相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1.CT圖像特征 ：120例肺癌病人中，病灶直徑>3 cm 76例(63.33%)，周圍型肺癌61例(50.83%)，無壞死空洞84例(70.00%)，無毛刺征象71例(59.17%)，有深分葉征象79例(65.83%)，見表1。肺癌典型CT圖像見圖1。

表1 120例肺癌病人CT圖像特征

鱗癌病人，軸位(1A)、冠狀位(1B)和矢狀位(1C)顯示右肺上葉囊腔，壁不均勻增厚，后壁形成軟組織腫塊，侵犯胸壁。腺癌病人，軸位(1D)、冠狀位(1E)和矢狀位(1F)顯示左肺下葉囊腔，壁不均勻增厚，可見分葉、毛刺及胸膜凹陷。腺癌病人，軸位(1G)、冠狀位(1H)顯示右肺下葉囊腔，壁不均勻增厚，囊內(nèi)有分隔，可見分葉、毛刺及囊腔周圍磨玻璃圖1 肺癌的典型CT征象

2.Ki-67和GOLPH3在肺癌組織中的表達(dá)：120例肺癌組織中，Ki-67陽性率為88.33%(106/120)；GOLPH3陽性率為79.17%(95/120)。Spearman相關(guān)性分析表明，Ki-67、GOLPH3在鱗癌型肺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.381，P=0.000)，在腺癌型肺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.271，P=0.018)。見圖2。

A、C、E：Ki-67在肺癌組織中強(qiáng)、弱及中等表達(dá)；B、D、F：GOLPH3在肺癌組織中強(qiáng)、弱及中等表達(dá)圖2 Ki-67和GOLPH3在肺癌組織中的表達(dá)(SP×400)

3.Ki-67和GOLPH3的表達(dá)與CT征象的關(guān)系：有毛刺征象病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無毛刺征象者，有深分葉征象病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無深分葉征象者，有壞死空洞病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無壞死空洞者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001，0.015，0.002)，(P=0.001，0.002，0.000)；腫瘤直徑>3 cm、肺癌類型為中央型病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于腫瘤直徑≤3 cm、肺癌類型為周圍型者，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示壞死空洞、毛刺征象、深分葉征象與Ki-67和GOLPH3表達(dá)有相關(guān)性，而腫瘤直徑、腫瘤位置與Ki-67和GOLPH3表達(dá)無關(guān)。見表2和表3。

表2 肺癌組織中Ki-67表達(dá)與CT圖像特征的關(guān)系

表3 肺癌組織中GOLPH3表達(dá)與CT圖像特征的關(guān)系

4.Ki-67和GOLPH3的表達(dá)與病理分級(jí)的關(guān)系：Ki-67、GOLPH3表達(dá)在腺癌、鱗癌、腺鱗癌及小細(xì)胞肺癌4種病理類型間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。病理分級(jí)Ⅲ～Ⅳ的表達(dá)高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4、5。

表4 病理類型、病理分級(jí)與Ki-67表達(dá)的關(guān)系

表5 病理類型、病理分級(jí)與GOLPH3表達(dá)的關(guān)系

討論

肺癌是人類常見惡性腫瘤。CT作為肺癌早期診斷的手段之一，操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短、分辨率高。CT圖像特征主要有腫瘤直徑、腫瘤位置、壞死空洞、毛刺征及深分葉等[3]。短毛刺征的病理基礎(chǔ)為腫瘤向周圍浸潤生長，侵犯周圍組織，導(dǎo)致邊緣毛糙，呈毛刺狀[4]。

空泡征的病理基礎(chǔ)為腫瘤生長速度過快，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部血供不足，引起腫瘤壞死[5]。分葉征的病理基礎(chǔ)為腫瘤在不同肺葉中的生長速度、方向不一致導(dǎo)致，雖然部分良性病變也會(huì)出現(xiàn)分葉征，但它的出現(xiàn)是惡性病變的可靠征象[6]。我們將腫瘤直徑3 cm作為臨界值[7]。結(jié)果表明，120例肺癌中，病灶直徑>3 cm，無壞死空洞，無毛刺征象，有深分葉征象病人居多，提示CT典型圖像特征對(duì)肺癌診斷價(jià)值高。江海濤等[8]研究表明，肺癌病人的CT特征表現(xiàn)為壞死空洞，毛刺征象，深分葉，與本研究結(jié)果基本一致。

GOLPH3屬于高爾基體復(fù)合物相關(guān)蛋白，是近年來發(fā)現(xiàn)的首個(gè)定位于反面高爾基網(wǎng)的癌基因，在促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。多中心研究表明，GOLPH3可以促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移[9-10]。有研究表明，GOLPH3在結(jié)直腸癌組織中存在高表達(dá)，與腫瘤的臨床病理因素有關(guān)[11]。另外研究表明，早期非小細(xì)胞肺癌組織中高表達(dá)，且GOLPH3表達(dá)與腫瘤組織中的血管密度、預(yù)后差密切相關(guān)[12]。Ki-67屬于核蛋白，在細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及增殖中起作用，在多種惡性腫瘤組織中高表達(dá)，與預(yù)后相關(guān)[13]。大量研究表明，Ki-67在多種惡性腫瘤組織中高表達(dá)，且與病人的預(yù)后密切相關(guān)[14]。我們研究結(jié)果表明，Ki-67和GOLPH3在肺癌組織中高表達(dá)，兩者呈正相關(guān)。

盡管對(duì)Ki-67、GOLPH3在肺癌中表達(dá)研究較多，但其與肺癌組織學(xué)類型是否相關(guān)目前意見尚不統(tǒng)一。本研究發(fā)現(xiàn)Ki-67在腺癌、鱗癌的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但也有研究表明，腺癌的Ki-67的表達(dá)明顯高于鱗癌。本組病例中Ki-67、GOLPH3在腺癌、鱗癌、腺鱗癌及小細(xì)胞肺癌四種病理類型間差異有意義，Ⅲ～Ⅳ中的表達(dá)顯著高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)，與以往研究一致[15],表明惡性程度高的腫瘤細(xì)胞生長旺盛需要更多的營養(yǎng)物質(zhì)，從而刺激Ki-67、GOLPH3的高表達(dá)。

肺癌的Ki-67表達(dá)與CT圖像征象的關(guān)聯(lián)性已有報(bào)道[16]。研究表明，肺浸潤性腺癌的CT增強(qiáng)值、增強(qiáng)方式與Ki-67表達(dá)呈正相關(guān)[17]。也有研究提示，周圍型肺癌CT征象，如深分葉征、瘤體直徑、增強(qiáng)CT值、胸膜凹陷征及支氣管氣相與Ki-67表達(dá)相關(guān)[18-19]。我們分析了CT征象(腫瘤直徑、位置、毛刺征象、深分葉征象及壞死空洞)與肺癌Ki-67、GOLPH3表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果表明，有毛刺征象病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無毛刺征象者，有深分葉征象病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無深分葉征象者，有壞死空洞病人肺癌組織Ki-67和GOLPH3表達(dá)陽性率高于無壞死空洞者。提示Ki-67和GOLPH3陽性者腫瘤細(xì)胞分化差，惡性度高，具有更高的侵襲力?？赡苁且?yàn)镚OLPH3、Ki-67促進(jìn)腫瘤內(nèi)組織血管生長，促進(jìn)腫瘤的增殖、浸潤能力，使腫瘤組織向四周淋巴管和血管浸潤。

本研究尚存在一定的局限性，未對(duì)更多CT特征與免疫指標(biāo)進(jìn)行分析，未能進(jìn)行隨訪。

肺癌的CT圖像特征與Ki-67和GOLPH3表達(dá)存在一定的相關(guān)性，綜合考慮影像表現(xiàn)、臨床資料與免疫組化指標(biāo)有助于提高診斷率。