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    枳椇子化學(xué)成分及質(zhì)量控制方法研究進(jìn)展*

    2022-09-21 09:15:38
    關(guān)鍵詞:枳椇酸棗仁槲皮素

    (亳州學(xué)院,安徽 亳州 236800)

    枳椇子為鼠李科植物北枳椇HoveniadulcisThunb.、枳椇HoveniaacerbaLindl.或毛果枳椇HoveniatrichocarpaChun et Tsiang的干燥成熟種子[1]。枳椇子始載于《唐·新修本草》[2],以“枳椇子”為名,10~11月果實(shí)成熟時(shí),連肉質(zhì)花序軸一并摘下,取出種子,干燥。具有清熱利尿,止渴除煩,解酒毒,利二便的功效。適用于煩熱,口渴,嘔吐,酒醉,二便不利等癥[1]。

    含有枳椇子的中藥方劑較少,但枳椇子近年來(lái)被開發(fā)成多種保健品(如保然片,艾爾口服液,天健膠囊等)則被廣泛應(yīng)用。目前,枳椇子的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)省中藥材標(biāo)準(zhǔn)或中藥炮制規(guī)范中對(duì)其質(zhì)量控制項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)限定存在差異[3-5]。為了系統(tǒng)的概述枳椇子質(zhì)量控制方法和研究進(jìn)展,本文就枳椇子的化學(xué)成分、分析方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀進(jìn)行概述和總結(jié),提出枳椇子質(zhì)量控制中存在的主要問(wèn)題,為完善枳椇子相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定基礎(chǔ)。

    1 枳椇子的化學(xué)成分

    枳椇子化學(xué)成分豐富,主要包括黃酮類、三萜皂苷類、生物堿類和其他類等。

    1.1黃酮類 張奇等[6]對(duì)枳椇子60%乙醇水提取物進(jìn)行萃取、分離純化、檢測(cè)后,初步推測(cè)枳椇子乙酸乙酯部位,具有抗腫瘤活性的物質(zhì)是二氫楊梅素(dihydromyricelin)。高美華等[7]對(duì)毛果枳椇子的醇提物進(jìn)行分離和鑒定,經(jīng)鑒定9種化合物分別為:槲皮素(quecetin)、牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷(vitexin 2″-O-β-D-glucopyrano side)、斯皮諾素(spinosin)、當(dāng)藥黃素(swertish)、(2R,3R)-二氫楊梅素[(2R,3R)-dihydromyricitin]、雙氫槲皮素(dihydroquercetin)、楊梅素(myricitin)、(-)-沒(méi)食子兒茶素[(-)-gallocatechin]和異牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷(isovitexin 2″-O-β-D-glucopyranoside)。謝蓉蓉等[8]對(duì)枳椇子進(jìn)行提取純化后得到3個(gè)新化合物hovenitins Ⅰ,laricetrin,Dihydromyricetin。彭玲[9]采用HPLC-ESI-MS/MS聯(lián)用分析技術(shù),從枳椇子總黃酮中分離鑒定出5個(gè)黃酮類成分:雙氫楊梅素,枳椇素Ⅲ,雙氫槲皮素,(+)-3,3′,5,5,7-5-OH-雙氫黃酮及棚皮素。晉海洋[10]以80%乙醇為溶劑對(duì)枳椇子進(jìn)行回流提取,經(jīng)色譜、結(jié)晶等手段分離后,對(duì)得到的單體化合物鑒定后得知其中包括雙氫楊梅素,楊梅素等黃酮類物質(zhì)。徐方方[11]從枳椇子醇提取物中分離純化鑒定出4種新的黃酮木脂素類化合物:hovenin A,hovenin B,hovenin C,hovenin D。

    1.2三萜皂苷類 徐方方[11]從枳椇子70%乙醇的提取物中分離并鑒定出2種新三萜皂苷類化合物:acerboside A、acerboside B。衣淑珍等[12]從枳椇子中分離出6個(gè)三萜皂苷類成分:3-O-豆甾醇-(6-棕櫚?;?-β-D-吡喃葡萄糖苷、hoduloside Ⅳ、β-胡蘿卜苷、saponins C2、hovenidulcioside A1、hoduloside I。張晶等[13]的研究表明枳椇子含有白樺酯醇,2α,3β-二羥基白樺酯酸,3β-羥基-18(19)-烯-齊墩果烷-28-甲酸。

    1.3生物堿類 枳椇子中生物堿類研究較少。金寶淵等[14]通過(guò)對(duì)枳椇子生物堿成分的研究,分離純化得到β-carboline系生物堿化合物perlolyrine。

    1.4其他類 曹利雅等[15]利用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)分析了枳椇子油中總脂肪酸的組成,發(fā)現(xiàn)(Z)-9-十八烯酸和亞油酸這兩種成分所占比例較高,是其主要成分。申向榮[16]的研究表明枳椇子中含有β-谷甾醇(β-sitosterol),正二十八烷醇(l-octacosanol),△22-豆甾烯醇(stigmasterol)和二十烷酸(eicosane acid)等物質(zhì)。李克明等[17]采用峰面積歸一化法測(cè)出枳椇子中31種脂肪酸甲酯的含量。

    2 枳椇子的分析方法

    2.1枳椇子的鑒別

    2.1.1顯微鑒別 王雪等[18]以枳椇子及酸棗仁,理?xiàng)椚蕿檠芯繉?duì)象,發(fā)現(xiàn)三者性狀差異主要體現(xiàn)在種皮質(zhì)地、縱線紋有無(wú)及表面顏色等方面;顯微特征差異主要體現(xiàn)在種皮柵狀細(xì)胞大小、晶體有無(wú)及其種類等方面。昌水平等[19]對(duì)枳椇子和酸棗仁進(jìn)行了藥材性狀、顯微特征鑒定比較。發(fā)現(xiàn)枳椇子呈扁圓形、較小,中央無(wú)隆起的縱紋,味微澀;顯微特征方面,枳椇子?xùn)艩罴?xì)胞較大,種皮中有色素層,色素層近卵形,壁薄。韓軍營(yíng)等[20]利用性狀鑒別、顯微鑒別對(duì)枳椇子、酸棗仁和理?xiàng)椚蔬M(jìn)行鑒別,也得出類似的結(jié)論。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的性狀,得出前者表面呈紅褐色或棕黑色而后者則呈現(xiàn)紫褐色或紫紅色。張紅梅[22]比較了四川中藥材市場(chǎng)上枳椇子,酸棗仁和理?xiàng)椚实膩?lái)源,形狀,表面,質(zhì)地,胚乳,子葉,氣味方面的差異。觀察得到枳椇子具有如下特征:子葉淡黃色,肥厚,胚乳黃白色等。

    2.1.2薄層鑒別 劉以霞[23]以槲皮素作為對(duì)照品,對(duì)枳椇子藥材醇提物鑒別,結(jié)果供試品薄層色譜中,在與槲皮素色譜相對(duì)應(yīng)的位置處,顯示相同顏色的熒光斑點(diǎn)。彭玲[9]比較了不同展開系統(tǒng)對(duì)枳椇子中黃酮類成分展開效果的影響,在以甲酸-甲醇-氯仿-乙酸乙酯(0.1∶2∶5∶1)為展開劑時(shí),斑點(diǎn)多且清晰。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的薄層色譜鑒別,結(jié)果酸棗仁顯10個(gè)藍(lán)色斑點(diǎn),枳椇子有4個(gè)與其對(duì)應(yīng)的藍(lán)色斑點(diǎn)。昌水平等[19]曾對(duì)枳椇子和酸棗仁進(jìn)行了薄層層析及蛋白電泳鑒定比較。

    2.1.3光譜鑒別 李同芬[24]對(duì)枳椇子、酸棗仁和理?xiàng)椚实淖贤馕展庾V進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明在不同溶劑提取液中三者的紫外譜圖差異明顯,特別是無(wú)水乙醇提取液的紫外譜圖區(qū)別最大,據(jù)此可把三者區(qū)別。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的理化鑒別熒光反應(yīng),發(fā)現(xiàn)酸棗仁顯現(xiàn)天藍(lán)色熒光,枳椇子則顯深黃色熒光。

    2.2重金屬檢查 陳維等[25]采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法,對(duì)10批黔產(chǎn)枳椇子中銅(Cu)、砷(As)、鎘(Cd)、鉛(Pb)、汞(Hg)進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得含量依次為5.09~8.01 mg·kg-1,0.011~0.039 mg·kg-1,0.00216~0.0157 mg·kg-1,0.012~0.263 mg·kg-1,0.008~0.182 mg·kg-1,均在限量指標(biāo)范圍之內(nèi)。

    2.3含量測(cè)定 張凰等[26]采用超聲波輔助對(duì)枳椇子中總黃酮進(jìn)行提取,經(jīng)AB-8型大孔樹脂純化后,總黃酮粉中二氫楊梅素含量達(dá)到17.02%。田智勇等[27]優(yōu)化了枳椇子總黃酮的超聲最佳工藝條件,在最佳提取條件下測(cè)得總黃酮含量為1.17 mg·g-1,平均回收率96.92%。孫學(xué)惠等[28]研究得出當(dāng)采用12倍量50%乙醇溶液,提取1.5 h時(shí),經(jīng)測(cè)定枳椇子中槲皮素含量約為0.39%,平均加樣回收率、RSD依次為101.1%、1.7%。曾嶸等[29]用甲醇為溶劑超聲提取枳椇子中槲皮素,經(jīng)HPLC測(cè)定三批樣品中槲皮素的含量依次為0.888,0.889,0.874 mg·g-1,RSD為1.08%,回收率為98.78%。楊航等[30]以蘆丁作為對(duì)照品,經(jīng)過(guò)三氯化鋁顯色,采用分光光度法對(duì)枳椇各部位(種子、葉子、果梗、種殼、果渣、枝干)總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果枳椇子中總黃酮的含量為5.081 mg·g-1。宋粉云等[31]對(duì)枳椇子樣品提取方法和水解條件進(jìn)行優(yōu)化后,采用反相HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地枳椇子中槲皮素含量,結(jié)果廣東、山西、廣西的枳椇子中槲皮素平均含量分別為0.64%、0.64%、0.01%。時(shí)濤等[32]采用超臨界CO2流體萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)得枳椇子脂肪油含量為8.3%,其中不飽和脂肪酸約占37.6%。

    2.4指紋圖譜 建立中藥指紋圖譜有利于保持原料和成品的一致性、完善中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及減小不同批之間的差異性[33]。劉聰?shù)萚34]采集了12個(gè)省(市)的24份枳椇子藥材,建立了該藥材的HPLC指紋圖譜體系。經(jīng)分析,不同地區(qū)枳椇子HPLC指紋圖譜能在一定程度上反映其所含化學(xué)成分的類型及其組成的產(chǎn)地差異。楊雪艷等[35]對(duì)不同產(chǎn)地17批枳椇子藥材建立了HPLC指紋圖譜,確定14個(gè)共有峰。

    3 枳椇子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀

    對(duì)國(guó)內(nèi)現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢索,梳理比較了不同標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)枳椇子的名稱、來(lái)源、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測(cè)等檢測(cè)項(xiàng)目,見表1(部分列舉)。

    表1 枳椇子國(guó)家及地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

    續(xù)表1 枳椇子國(guó)家及地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

    4 枳椇子質(zhì)量控制存在的問(wèn)題

    從表1可以看出大多數(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)枳椇子來(lái)源描述一致,均表述為鼠李科植物枳椇的干燥成熟種子,但還有一些例外,如臺(tái)灣中藥典中則表述為鼠李科植物枳椇、北枳椇或毛果枳椇的干燥成熟種子,這表明不同地區(qū)有關(guān)枳椇子原植物種質(zhì)的界定存在差異。另外,有些地方標(biāo)準(zhǔn)鑒別項(xiàng)包括了顯微和薄層,有些標(biāo)準(zhǔn)僅包括一種鑒別方式甚至尚未對(duì)枳椇子鑒別項(xiàng)提出要求,由此可以看出枳椇子的鑒別項(xiàng)較為單薄。再者,除香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)外,其他質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)缺少安全性檢查項(xiàng)目(如霉菌毒素、重金屬及有害元素、農(nóng)藥殘留等)、浸出物和含量測(cè)定等,不利于枳椇子的質(zhì)量控制。

    5 結(jié)語(yǔ)

    有關(guān)枳椇子中化學(xué)成分和主要成分含量測(cè)定方面的研究頗多,但是衛(wèi)生部藥材標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)中檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)限定差異大。枳椇子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系相對(duì)簡(jiǎn)單,如何提高和完善枳椇子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),從而更大發(fā)揮其藥用價(jià)值是值得深思的問(wèn)題。

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