龍膽草醇提取物對肉種雞后期生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、免疫功能和繁殖性能的影響

■陽 剛 陳璟怡 張 偉 舒 剛 馮 靜 楊仕群*

（1.宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川宜賓 644000；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，四川成都 610030；3.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，西藏拉薩 850009）

龍膽草（Gentiana scabraBunge）為龍膽科龍膽屬粗糙龍膽、條葉龍膽、三花龍膽、堅龍膽等植物干燥的根和莖。始載《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，《藥鑒》、梁代陶弘景《名醫(yī)別錄》也都有記載[1]。龍膽草醇提取物主要活性成分為龍膽苦苷等環(huán)烯醚萜、裂環(huán)環(huán)烯醚萜的苷類、龍膽多糖及總黃酮等。已證實龍膽草醇提取物具有保肝、利膽、抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抗病毒、健胃、利尿等作用[2]。近年來許多研究者對龍膽草的化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行了研究，其抗菌及抑菌能力已被廣泛認(rèn)可[3]。龍膽草醇提取物多用于體外抗氧化及抑菌活性研究，健胃、利尿等作用尚未有突出表現(xiàn)，在畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用龍膽草醇提取物的報道也很少見。因此，試驗通過研究飼料中添加龍膽草醇提取物對肉種雞后期生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、免疫功能和繁殖性能的影響，旨在為龍膽草醇提取物在肉種雞生產(chǎn)中應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

龍膽草飲片購自溫江榮州大藥房；免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所有限公司。

1.2 試驗儀器

YP202N 電子天平（上海青海儀器有限公司）、DNM-9602G酶標(biāo)分析儀（北京普朗新技術(shù)有限公司）、TG16-WS離心機(jī)（湘儀儀器廠）、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、EA-01蛋品質(zhì)自動分析儀（瑞士SONOVA集團(tuán)）、聚泰8448枚大型孵化機(jī)（故城縣故城聚泰孵化設(shè)備廠）。

1.3 龍膽草醇提取物的制備

單次稱取50 kg 龍膽草飲片，剪碎后打成粉末放入提取罐，加入80%乙醇。冷浸72 h 后將提取液倒出，重復(fù)浸泡3次。將提取液合并后用減壓蒸發(fā)器將溶劑回收，得到龍膽草醇提取物5 kg。

1.4 試驗設(shè)計與分組

試驗設(shè)計采用完全隨機(jī)設(shè)計，采用單因子對照試驗，共42 d，其中預(yù)試期7 d，正試期35 d。選用360只50周齡健康黑羽烏骨雞肉種雞（由瀘州豐巖牧野農(nóng)業(yè)有限公司提供），隨機(jī)等分為4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15 只。具體分組情況及給藥情況見表1。肉種雞飼喂的基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表2。

表1 試驗動物分組與給藥情況

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.5 指標(biāo)測定與方法

1.5.1 生產(chǎn)性能測定

在相同管理條件下，以重復(fù)為單位，記錄每天產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、次損蛋數(shù)，每隔1 周測定飼糧消耗量，計算平均蛋重、產(chǎn)蛋率、平均日采食量、次損蛋率和料蛋比。

1.5.2 蛋品質(zhì)測定

于試驗第21 天和第42 天，每個重復(fù)隨機(jī)取4 枚蛋進(jìn)行蛋品質(zhì)測定。用游標(biāo)卡尺測量蛋形指數(shù)、蛋殼厚度，用蛋品質(zhì)自動分析儀測定蛋殼強(qiáng)度、蛋黃顏色、蛋白高度和哈夫單位。

1.5.3 血清免疫指標(biāo)測定

于試驗第42 天，每個重復(fù)隨機(jī)選取4 只肉種雞，翅靜脈采血5 mL，置于離心管中靜置2 h，使用離心機(jī)3 000 r/min 高速離心10 min，取上清液置于-20 ℃冰箱備用，制備的血清使用試劑盒測定血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）的含量（具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書執(zhí)行）。

1.5.4 繁殖性能

飼養(yǎng)試驗42 d后，對肉種雞的繁殖力和孵化性能進(jìn)行評估。采集公雞精液對各組種雞進(jìn)行人工授精。人工授精后5～7 d 收集各組雞蛋，轉(zhuǎn)移到孵化場的孵化器中，評估受精率、孵化率、健雛率和胚胎死亡率。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 27.0進(jìn)行單因素方差分析和LSD多重比較，P＜0.05為差異顯著，計算結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 龍膽草醇提取物對肉種雞后期生產(chǎn)性能的影響（見表3）

表3 龍膽草醇提取物對肉種雞后期生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，與對照組相比，各試驗組平均蛋重、平均日采食量和次損蛋率差異不顯著（P＞0.05）。與對照組相比，低劑量組產(chǎn)蛋率顯著提升了4.06%（P＜0.05）；中劑量組產(chǎn)蛋率顯著提升了5.73%（P＜0.05），料蛋比顯著下降了5.20%（P＜0.05）；高劑量組產(chǎn)蛋率顯著提升了8.08%（P＜0.05），料蛋比顯著下降了6.00%（P＜0.05）。

2.2 龍膽草醇提取物對肉種雞后期蛋品質(zhì)的影響（見表4）

由表4 可知，與對照組相比，低、中、高劑量組蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度及哈夫單位差異不顯著（P＞0.05）。低劑量組蛋黃顏色較對照組顯著提升了27.68%（P＜0.05）；中劑量組蛋黃顏色較對照組顯著提升了34.10%（P＜0.05）；高劑量組蛋黃顏色較對照組顯著提升了37.92%（P＜0.05）。

表4 龍膽草醇提取物對肉種雞后期蛋品質(zhì)的影響

2.3 龍膽草醇提取物對肉種雞后期免疫功能的影響（見表5）

表5 龍膽草醇提取物對肉種雞后期血清免疫球蛋白含量的影響(μg/mL)

由表5可知，與對照組相比，低劑量組IgA含量顯著提高了8.29%（P＜0.05）；中劑量組IgA、IgG、IgM 含量分別顯著提高了9.11%、22.85%、38.26%（P＜0.05）；高劑量組IgA、IgG、IgM 含量分別顯著提高了9.20%、22.27%、46.53%（P＜0.05）。

2.4 龍膽草醇提取物對肉種雞后期繁殖性能的影響（見表6）

由表6 可知，與對照組相比，低劑量組受精率、孵化率、健雛率分別提高了3.71%、1.94%、2.16%（P＞0.05），胚 胎 死 亡 率 顯 著 降 低 了40.91%（P＜0.05）。中劑量組受精率、孵化率、健雛率分別顯著提高了4.08%、2.83%、2.59%（P＜0.05），胚胎死亡率顯著降低了44.90%（P＜0.05）。高劑量組受精率、孵化率、健雛率分別顯著提高了5.05%、4.09%、2.83%（P＜0.05），胚胎死亡率顯著降低了55.43%（P＜0.05）。

表6 龍膽草醇提取物對肉種雞后期繁殖性能的影響（%）

3 討論

3.1 龍膽草醇提取物對肉種雞后期生產(chǎn)性能的影響

龍膽苦苷是龍膽草的主要活性成分之一，已在用作健胃劑、治療胃腸道疾病方面有悠久歷史[4]。龍膽苦苷具有刺激胃液和胃酸分泌的作用[5]，還具有提高胃排空活動、促進(jìn)小腸推進(jìn)活動、促進(jìn)胃液分泌、提高胃蛋白酶活性及增加胃蛋白酶排出量的作用[6]，可以促進(jìn)小鼠和大鼠中被阿托品抑制的胃腸動力，并有研究證明其促動力作用的機(jī)制與調(diào)節(jié)血漿中生長抑素、胃泌素水平以及增加胃竇、十二指腸、回腸和空腸血漿胃動素受體的表達(dá)，降低十二指腸血管活性腸肽受體2 的表達(dá)有關(guān)[7]。同時，龍膽瀉肝顆粒十二指腸給藥可明顯增加大鼠的膽汁分泌量，對大鼠具有顯著的利膽作用，促進(jìn)消化吸收[8]。

本試驗中，肉種雞低、中、高3個劑量組平均蛋重較對照組都有一定增加（P＞0.05），且以高劑量組平均蛋重最高，各劑量組與對照組比較，產(chǎn)蛋率顯著提高和料蛋比（除低劑量組外）顯著降低（P＜0.05），說明飼料中添加龍膽草醇提取物可以有效促進(jìn)肉種雞胃腸道對營養(yǎng)的吸收作用。

3.2 龍膽草醇提取物對肉種雞后期蛋品質(zhì)的影響

雞蛋品質(zhì)最重要的是蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、哈夫單位等。其中，蛋黃的顏色能給消費者增加好感，以前是采取人工添加色素的方法。而蛋黃的顏色取決于蛋黃中類胡蘿卜素含量的多少，雞的機(jī)體本身不能合成該物質(zhì)，只能從食物中獲取，食物中的色素被機(jī)體吸收后，在卵黃和雞體表沉積，色素含量越多，蛋黃色澤越深[9]。本試驗中，肉種雞低、中、高劑量組蛋黃顏色較對照組均顯著增強(qiáng)（P＜0.05）。說明飼料中添加龍膽草醇提取物可以有效幫助肉種雞從飼料中獲取更多的類胡蘿卜素，增強(qiáng)蛋品質(zhì)。同時，蛋殼強(qiáng)度也有隨添加量的增加而有所增加（P＞0.05）。

3.3 龍膽草醇提取物對肉種雞后期免疫功能的影響

龍膽多糖、龍膽總黃酮都是龍膽草醇提取物的有效成分，可作為潛在的天然免疫調(diào)節(jié)劑[10]，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗炎、抗過敏和抵抗病原微生物感染的作用。孟博等[11]研究表明龍膽多糖在一定的劑量范圍內(nèi)能夠增強(qiáng)禽類的免疫功能, 可以用作禽類的免疫增強(qiáng)劑。王金宏[12]研究發(fā)現(xiàn)龍膽多糖可不同程度地升高正常小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，顯著提高正常小鼠的廓清指數(shù)，提高單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能，同時也能顯著升高小鼠血清的半數(shù)溶血值，表明龍膽多糖可增強(qiáng)小鼠的非特異性免疫功能和特異性體液免疫功能。Satnam 等[13]的試驗表明龍膽提取物在小鼠免疫試驗?zāi)Ｐ椭型ㄟ^細(xì)胞免疫和體液免疫對小鼠產(chǎn)生免疫刺激作用。本試驗中，中、高劑量組肉種雞IgA、IgG、IgM 含量顯著提升，表明飼料中添加龍膽草醇提取物對肉種雞后期免疫功能具有增強(qiáng)作用，與前人的研究一致。

3.4 龍膽草醇提取物對肉種雞后期繁殖性能的影響

汪曙暉等[14]研究報道，天然抗氧化劑（如硒、維生素A 和維生素E）及植物提取物可以在家禽繁殖功能中發(fā)揮重要作用，因為它們可以維持精子和胚胎組織的抗氧化功能。龍膽草醇提取物具有優(yōu)異的抗氧化性能，總黃酮含量高的提取物具有更強(qiáng)的抗氧化能力[15]，試驗證明，龍膽草粗提物可以防止高劑量酮康唑（一種具有生殖毒性的抗真菌藥物）對大鼠睪丸的生殖毒性和氧化損傷[16]。本試驗中，與對照組比較，中、高劑量組的肉種雞受精率、孵化率、健雛率均顯著升高（P＜0.05）；低、中、高劑量組胚胎死亡率顯著降低（P＜0.05）。表明飼料中添加龍膽草醇提取物對肉種雞后期繁殖性能具有增強(qiáng)作用。

4 結(jié)論

龍膽草醇提取物可以顯著降低肉種雞料蛋比，改善蛋黃顏色，提升血清IgA、IgG、IgM 含量，提高受精率、孵化率、健雛率，降低胚胎死亡率，其作用機(jī)制需要進(jìn)一步研究。