農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究進(jìn)展

林鷹 楊文莉 周玲艷 姜大剛

（1. 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院，廣州 510225；2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州 510642）

近年來，轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展迅猛，種植面積不斷擴(kuò)大。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物能滿足人類對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量不斷增長(zhǎng)的要求，為消費(fèi)者提供更多選擇［1］。我國(guó)已經(jīng)批準(zhǔn)轉(zhuǎn)基因棉花和轉(zhuǎn)基因番木瓜的商業(yè)化生產(chǎn)，創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益。轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生以來，國(guó)際食品法典委員會(huì)（Codex Alimentarius Commission，CAC）、聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（Food and Agriculture Organization of the United Nations，F(xiàn)AO）、世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）等針對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)品安全問題制定了一系列轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，我國(guó)也建立了比較完善的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全標(biāo)準(zhǔn)體系［2］。為保障轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品成分的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確一致，需要設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)照樣品［3］。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（reference material，RM）是一種已經(jīng)確定了具有高度均勻性、良好穩(wěn)定性和量值準(zhǔn)確性等特性值的物質(zhì)或材料。其均勻性和穩(wěn)定性的特性，有利于在特性檢測(cè)或測(cè)量中進(jìn)行使用評(píng)估［4］。因此，農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制和使用，可以保證農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的有效性和可比性，為農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品定性和定量檢測(cè)提供保障，也是解決轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品準(zhǔn)確檢測(cè)的基礎(chǔ)［5］。鑒于農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要性，本文對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究進(jìn)展進(jìn)行了總結(jié)，并對(duì)幾種主要類型的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較，同時(shí)，梳理了轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制中所存在的問題，并就研究現(xiàn)狀和存在問題提出建議與對(duì)策，以期為我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制和相關(guān)研究提供參考。

1 國(guó)內(nèi)外農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究概況

轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化應(yīng)用已經(jīng)25年，各國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制也在不斷增加，主要有美國(guó)油脂化學(xué)家學(xué)會(huì)（American Oil Chemists’ Society，AOCS）和歐盟聯(lián)合研究中心（Joint Research Center，JRC），除此之外，還包括日本國(guó)立食品綜合研究所（National Food Research Institute，NFRI）和 墨西哥國(guó)家計(jì)量院（The National Center of Metrology，CENAM）等［6］。美國(guó)AOCS的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在售的類型包括油菜、棉花、玉米、水稻和大豆這五類，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)共63個(gè)，包括60個(gè)轉(zhuǎn)化體。歐盟JRC在售的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括油菜、棉花、玉米、馬鈴薯、大豆和甜菜這六類，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有37個(gè)轉(zhuǎn)化體，包括146個(gè)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（圖1、2）。歐盟JRC有二十幾個(gè)轉(zhuǎn)化體具有一套不同含量的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，例如，“Bt-176 MAIZE”基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具有0、0.1%、0.5%、1%、2%、5%、100%含量的7個(gè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，“Bt11 MAIZE”基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具有0、0.1%、1%、10%、100%含量的5個(gè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

圖1 三大經(jīng)濟(jì)體轉(zhuǎn)基因作物有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)量及包含的轉(zhuǎn)化體個(gè)數(shù)Fig.1 Number of certified reference materials and involved transgenic crop events of three major economies

圖2 三大經(jīng)濟(jì)體主要轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)量Fig.2 Number of certified reference materials of genetically modified crops in three major economies

2008年起，我國(guó)開始進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制，并且成功研制出一批農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［7］，研制單位主要有中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院以及農(nóng)業(yè)農(nóng)村部科技發(fā)展中心等。目前，在我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)資源共享平臺(tái)（National Sharing Platform for Reference Materials，China）上，可以查詢到農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有27個(gè)轉(zhuǎn)化體（圖1）。在這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中，有7種轉(zhuǎn)化體具有不同含量的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如“轉(zhuǎn)基因BT63水稻種子粉末”和“轉(zhuǎn)基因克螟稻2號(hào)水稻種子粉末”都具有0.5%、1.0%、2.0%、5.0%含量的4個(gè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

在已經(jīng)商業(yè)化或具有商業(yè)化前景的轉(zhuǎn)基因作物中，抗蟲和耐除草劑性狀占據(jù)絕大部分比例。我國(guó)已經(jīng)獲批的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與美國(guó)AOCS和歐盟JRC的情況類似，主要是抗蟲和耐除草劑性狀（表1，2）。我國(guó)的研制對(duì)象主要是油菜、棉花、玉米、水稻和大豆這5種轉(zhuǎn)基因作物，例如轉(zhuǎn)基因棉花［8］、轉(zhuǎn)基因玉米NK603［9］、轉(zhuǎn)基因水稻［10］、轉(zhuǎn)基因大豆pMON87712［11］等。美國(guó)AOCS和歐盟JRC的研制對(duì)象也主要是水稻、玉米、大豆、棉花等農(nóng)作物。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究類型方面，我國(guó)與美國(guó)AOCS以及歐盟JRC有所區(qū)別，美國(guó)AOCS的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類主要有基體和基因組DNA轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其中基體類型達(dá)到了40種；歐盟JRC主要研制基因組DNA轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，數(shù)量達(dá)到了30種，也有少量的質(zhì)粒和基體轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主要以質(zhì)粒和基體轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)類型為主，也有部分基因組DNA轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（圖3）。

表1 美國(guó)與歐盟部分農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Table 1 Certified reference materials of agricultural genetically modified crops in United States and European Union

圖3 三大經(jīng)濟(jì)體農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的種類Fig.3 Certified reference materials types of agricultural genetically modified crops in three major economies

2 我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范

近年來，越來越多的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布執(zhí)行，其中多個(gè)檢測(cè)方法和技術(shù)規(guī)范與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)（表3）。2012年，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)方法及技術(shù)規(guī)范第1782號(hào)中有2項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制相關(guān)技術(shù)規(guī)范，分別為《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備技術(shù)規(guī)范》和《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)試用評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》。2015年，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第2259號(hào)中有3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)技術(shù)規(guī)范，包括《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值技術(shù)規(guī)范》《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)玉米標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物繁殖與鑒定技術(shù)規(guī)范》《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)棉花標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物繁殖與鑒定技術(shù)規(guī)范》。2018年，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第111號(hào)中有2項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)技術(shù)規(guī)范，包括《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備技術(shù)規(guī)范》和《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值技術(shù)規(guī)范》。2020年，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第323號(hào)中有4項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)技術(shù)規(guī)范，包括《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)油菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原材料繁殖與鑒定技術(shù)規(guī)范》《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)大豆標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原材料繁殖與鑒定技術(shù)規(guī)范》《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備技術(shù)規(guī)范》《轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分檢測(cè)水稻標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原材料繁殖與鑒定技術(shù)規(guī)范》。以上標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)涉及了標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的基本概念、候選物的繁殖、制備技術(shù)流程等。相關(guān)規(guī)范的不斷出臺(tái)，促進(jìn)和規(guī)范了我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的快速研制。

表3 我國(guó)部分農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范Table 3 Some technical specifications of agricultural genetically modified testing reference materials in China

3 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類與研制

目前，已經(jīng)獲批的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類主要有基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［12-13］、質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［14］、基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［15］三類。由于其原料選擇不同，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制的方法和過程也不同，具有不同的優(yōu)缺點(diǎn)（表4）。

表4 3種農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的區(qū)別Table 4 Comparison of three agricultural genetically modified testing reference materials

農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是由純合的非轉(zhuǎn)基因作物種子與純合的轉(zhuǎn)基因作物種子，按照一定的質(zhì)量比例混合制備而成。與待測(cè)樣品具有相同或者相似的特性，檢測(cè)結(jié)果不需要矯正，結(jié)果穩(wěn)定可靠。基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值范圍廣，在實(shí)際檢測(cè)中可在0-100%之間，其適用性也較廣，可以進(jìn)行核酸或蛋白質(zhì)檢測(cè)，但由于原料的特殊性，在制備基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)需要測(cè)定種子的顆粒大小、含水量和基體粉末質(zhì)量分?jǐn)?shù)等［16］。多個(gè)研究課題組報(bào)道了基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制，如轉(zhuǎn)基因玉米MIR604［17］和轉(zhuǎn)基因大豆MON89788［18］等?；w標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有其突出優(yōu)點(diǎn)，但也存在不足，比如成本較高，對(duì)原料要求與鑒別高于其他兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類，且一種基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)只能用于一種作物的檢驗(yàn)。

農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是通過構(gòu)建一個(gè)具有外源目的片段和內(nèi)源標(biāo)準(zhǔn)基因片段的重組質(zhì)粒DNA分子，以用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因DNA的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)的轉(zhuǎn)化體［19］，且比基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)更方便［20］；在制備質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，可以通過細(xì)菌的大量培養(yǎng)達(dá)到大量繁殖的效果，從而有效解決陽性標(biāo)準(zhǔn)品制備困難的問題，且成本低廉，操作簡(jiǎn)便［21］；另外，由于構(gòu)建的質(zhì)粒是含有目的片段的重組質(zhì)粒分子，因此轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度高，均勻性好，可以進(jìn)行高通量檢測(cè)，不依賴轉(zhuǎn)基因原材料限制。已有多個(gè)質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備的報(bào)道，如轉(zhuǎn)基因油菜［22］、轉(zhuǎn)基因棉花［23］、轉(zhuǎn)基因大豆質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［24］、轉(zhuǎn)基因水稻克螟稻2號(hào)［25］。在質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制過程中，需要對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行DNA抽提、純度鑒定、適應(yīng)性鑒定等，在定值時(shí)需測(cè)定外源與內(nèi)源參考基因的拷貝比值和拷貝數(shù)濃度。這與待測(cè)樣品的基因組DNA抽提過程和獲得的DNA結(jié)構(gòu)并不是完全一致的；同時(shí)，質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分子較小，在使用中容易造成實(shí)驗(yàn)室污染，質(zhì)粒分子的定值誤差也較大，對(duì)結(jié)果的影響較大［26］。

農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是以提取農(nóng)作物的基因組DNA而制備。已經(jīng)報(bào)道的轉(zhuǎn)基因基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有轉(zhuǎn)基因水稻科豐6號(hào)［27］、轉(zhuǎn)基因水稻KMD［28］、轉(zhuǎn)基因水稻G6H1、轉(zhuǎn)基因玉米雙抗12-5等（表2）。在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備時(shí)，需要進(jìn)行轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物基因組DNA抽提以及基因組DNA質(zhì)量評(píng)價(jià)。基因組DNA的制備過程決定了其具有質(zhì)量高、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的特點(diǎn)。但基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不能用于蛋白質(zhì)的檢測(cè)，且制備時(shí)需要抽提大量的DNA，同時(shí)對(duì)制備DNA的原料要求也比較高。

表2 我國(guó)的部分農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因作物有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Table 2 Some certified reference materials of agricultural genetically modified crops in China

以上3種類型的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制均包括原料提取純化、性質(zhì)的初步表征、分裝、適應(yīng)性驗(yàn)證、均勻性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)、不確定度測(cè)算［29］、定值以及申報(bào)等過程。其中，性質(zhì)的初步表征主要是對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的基因型、性質(zhì)、轉(zhuǎn)基因片段以及純度進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)需要對(duì)已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度進(jìn)行測(cè)算等［30］。在研制農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，定值方法非常重要，其不僅在定值過程中發(fā)揮重要作用，同時(shí)，在性質(zhì)的初步表征、均勻性和穩(wěn)定性檢驗(yàn)、不確定度評(píng)估中同樣發(fā)揮重要作用。因此，研發(fā)者需要對(duì)定值方法進(jìn)行優(yōu)化，也需要有方法學(xué)參數(shù)等校準(zhǔn)系統(tǒng)作為支撐，從而通過方法重復(fù)性、重現(xiàn)性、靈敏度等方面的數(shù)據(jù)驗(yàn)證，以保證定值方法的可靠性以及研制定值結(jié)果的說服力［31］。在評(píng)估不確定度時(shí)，應(yīng)考慮到各種檢測(cè)定值方法引起的不確定度，以保證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)確性和可追溯性［32-33］。

目前，對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法主要包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR和數(shù)字PCR方法兩種，其中數(shù)字PCR由于其具有的絕對(duì)定量的優(yōu)越性，得到越來越多的應(yīng)用。數(shù)字PCR是將單個(gè)DNA樣品反應(yīng)液分別進(jìn)行數(shù)以萬計(jì)的反應(yīng)和擴(kuò)增檢測(cè)，是一種基于PCR的單分子絕對(duì)定量技術(shù)［34］。與實(shí)時(shí)熒光PCR不同，數(shù)字PCR在農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值中，不需要依賴對(duì)照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可直接對(duì)核酸拷貝數(shù)的絕對(duì)量值進(jìn)行檢測(cè)，具有靈敏度和準(zhǔn)確性更高的特點(diǎn)，成為目前主要的定值技術(shù)［35］。但是，數(shù)字PCR技術(shù)也存在著成本高、自動(dòng)化和集成度水平低、分析通量低、兼容性差等問題［36］，并且作為一種新型技術(shù)，標(biāo)準(zhǔn)體系還需要進(jìn)一步的完善。因此，完善數(shù)字PCR標(biāo)準(zhǔn)體系建設(shè)和積極推動(dòng)數(shù)字PCR標(biāo)準(zhǔn)的國(guó)際化，對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制具有重要意義。

4 我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制中存在的問題

我國(guó)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制起始時(shí)間滯后于歐美發(fā)達(dá)國(guó)家，近些年來奮起直追，取得了巨大的進(jìn)步。但我國(guó)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制尚存在以下幾個(gè)主要問題：

首先，獲得批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)量較少。至2019年，我國(guó)已經(jīng)批準(zhǔn)5種轉(zhuǎn)基因作物用于進(jìn)口加工原料，同時(shí)，還有批準(zhǔn)種植的農(nóng)作物如棉花等，但在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)資源共享平臺(tái)上可查詢到的、獲批的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)數(shù)量只有46個(gè)。因此，加快對(duì)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制和申報(bào)迫在眉睫。

其次，獲批的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)大部分以基體或者質(zhì)粒類型為主，如轉(zhuǎn)基因馬鈴薯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)［37］。同時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以水稻為主，而大量進(jìn)口的轉(zhuǎn)基因玉米和大豆轉(zhuǎn)化體則相對(duì)較少。因此，應(yīng)通過多種形式拓寬標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制種類和范圍，以滿足轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)需求，保證轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品安全使用。

最后，轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由于價(jià)格問題，在實(shí)際的檢測(cè)工作中應(yīng)用不夠廣泛，作用發(fā)揮不夠到位。因此，需要政府管理部門主導(dǎo)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制，并與國(guó)際接軌，通過國(guó)際比對(duì)和各國(guó)協(xié)同定值，進(jìn)一步發(fā)揮轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為分析檢測(cè)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量管理工具，保障貿(mào)易安全，保護(hù)經(jīng)濟(jì)利益［38］。

5 展望

農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制，是農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品定性與定量檢測(cè)中不可或缺的評(píng)量物質(zhì)，為轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物檢測(cè)提供保障，其制備技術(shù)和應(yīng)用程度能夠直接反應(yīng)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)體系的水平以及轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)準(zhǔn)確度的可靠性。隨著國(guó)家對(duì)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制的重視，以及轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在檢測(cè)工作中的推廣使用，轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的作用也將得到更好的發(fā)揮，更好的為我國(guó)生物育種發(fā)揮保障作用。因此，更準(zhǔn)確、方便實(shí)用的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，必將更加有利于促進(jìn)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)的更優(yōu)發(fā)展。