辣椒種質(zhì)資源抗蚜性鑒定技術(shù)規(guī)程

陳青 梁曉 劉迎 伍春玲 劉小強(qiáng) 稅軍

（1.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院三亞研究院/海南省南繁生物安全與分子育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 海南三亞 572000；2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/海南省熱帶作物病蟲害生物防治工程技術(shù)研究中心 海南?？?571101）

辣椒（Capsicum annuumL.）是全球種植面積第三大蔬菜、中國(guó)種植面積第二大蔬菜和海南省冬季瓜菜的第一大蔬菜，其產(chǎn)業(yè)是人民增收致富的主要產(chǎn)業(yè)之一[1-2]，辣椒產(chǎn)業(yè)及其種業(yè)發(fā)展一直受到國(guó)家和省部領(lǐng)導(dǎo)的高度重視和密切關(guān)注。蚜蟲是嚴(yán)重危害辣椒的世界危險(xiǎn)性刺吸類害蟲，其中桃蚜[Myzus persicae(Sulzer)]是國(guó)內(nèi)外辣椒生產(chǎn)中危害最嚴(yán)重的蚜蟲優(yōu)勢(shì)種，不僅能直接刺吸為害植物，更是 116種世界危險(xiǎn)性病毒的傳播媒介，其危害一般導(dǎo)致減產(chǎn)30%～70%，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致絕收[3-4]。目前，辣椒生產(chǎn)中對(duì)于桃蚜的防治仍依賴于藥劑防治，大量高頻率不合理用藥導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品安全、害蟲抗藥性、產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境安全等問題突出，嚴(yán)重制約了辣椒產(chǎn)業(yè)及其種業(yè)的健康發(fā)展[5-7]。因此，尋求安全高效綠色防控桃蚜措施已成為辣椒產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中亟需解決的重要課題。

2016—2022年連續(xù)7個(gè)中央一號(hào)文件明確指出：實(shí)施優(yōu)勢(shì)特色農(nóng)業(yè)提質(zhì)增效行動(dòng)計(jì)劃，增加優(yōu)質(zhì)綠色農(nóng)產(chǎn)品供給，促進(jìn)蔬菜瓜果產(chǎn)業(yè)提檔升級(jí)，突出優(yōu)質(zhì)、安全、綠色導(dǎo)向，促進(jìn)農(nóng)業(yè)節(jié)本增效，走產(chǎn)出高效、產(chǎn)品安全、資源節(jié)約、環(huán)境友好的農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化道路，保持農(nóng)業(yè)穩(wěn)定發(fā)展和農(nóng)民持續(xù)增收。中共中央、國(guó)務(wù)院頒布的《海南自由貿(mào)易港建設(shè)總體方案》指出：將海南建設(shè)成為全球熱帶農(nóng)業(yè)中心和全球動(dòng)植物種質(zhì)資源引進(jìn)中轉(zhuǎn)基地。由此可見，優(yōu)異的作物種質(zhì)資源及其選育評(píng)價(jià)技術(shù)是促進(jìn)產(chǎn)業(yè)節(jié)本提質(zhì)增效、穩(wěn)定優(yōu)質(zhì)綠色農(nóng)產(chǎn)品供給、搶占未來(lái)種業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展高地的關(guān)鍵因素，在辣椒產(chǎn)業(yè)及其種業(yè)中發(fā)揮著十分重要的作用。

作物抗蟲性是植物通過內(nèi)稟的抗蟲機(jī)制免于受害、利用內(nèi)因治蟲所特有的手段，是害蟲治理系統(tǒng)中的重要組成部分[8-11]。國(guó)內(nèi)外實(shí)踐證明，選育和種植抗蟲品種是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的從源頭防治作物害蟲發(fā)生與危害最經(jīng)濟(jì)、最有效、最簡(jiǎn)便的一項(xiàng)帶有方向性的蟲害防治途徑[12-14]。然而迄今為止，國(guó)內(nèi)外還沒有將辣椒抗蚜性鑒定評(píng)價(jià)方面的方法、手段加以系統(tǒng)化和形成標(biāo)準(zhǔn)加以貫徹，對(duì)辣椒現(xiàn)有種質(zhì)資源缺乏深入全面的了解，使抗蚜辣椒引種、選育種與品種推廣工作存在盲目性，嚴(yán)重影響了辣椒抗蚜種質(zhì)資源的挖掘與創(chuàng)新利用。因此，針對(duì)我國(guó)辣椒產(chǎn)業(yè)發(fā)展與實(shí)際，建立一套辣椒種質(zhì)資源抗蚜性鑒定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)規(guī)范抗蚜辣椒種質(zhì)資源鑒定、新種質(zhì)創(chuàng)制及新品種培育具有重要意義。

1 規(guī)程的適用范圍

本規(guī)程確立了辣椒（C.annuum）種質(zhì)資源對(duì)蚜蟲的室內(nèi)和田間抗性鑒定的技術(shù)方法和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，適用于育種、生產(chǎn)和植物保護(hù)等單位辣椒種質(zhì)資源對(duì)蚜蟲的抗性鑒定。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本規(guī)程必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本規(guī)程；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本規(guī)程。

GB/Z 26583—2011《辣椒生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范》

GB/T 8321—2000（所有部分）《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則》

NY/T 3114.5—2017《大豆抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第5部分：大豆抗大豆蚜鑒定技術(shù)規(guī)范》

YC/T 509—2014《煙草品種抗蟲性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程》

GB/T 22101.2—2009《棉花抗病蟲性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范第2部分：蚜蟲》

NY/T 1443.7—2007《小麥抗病蟲性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范第7部分：大豆抗蚜蟲評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》

3 術(shù)語(yǔ)和定義

3.1 植物抗蚜性plant resistance to aphids

同種植物在蚜蟲危害較嚴(yán)重的情況下，某些植株能耐害、避免受害、或雖受害而有補(bǔ)償能力的特性。

3.2 抗蚜性鑒定 identification of plant resistance to aphids

通過一定技術(shù)方法鑒定植物對(duì)特定蚜蟲的抗性水平。

3.3 抗蚜性評(píng)價(jià) evaluation of resistance to aphids

根據(jù)采用的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)判別寄主對(duì)特定蚜害反應(yīng)程度和抵抗水平的描述。

3.4 蚜情級(jí)別aphid rating scale

植物個(gè)體或群體蚜害程度的數(shù)值化描述。

3.5 單株蚜量number of aphids per plant

單個(gè)植株存活的桃蚜數(shù)量。

3.6 平均單株蚜量比值 Average ratio of aphids per plant

某個(gè)參鑒種質(zhì)平均單株蚜量與所有參鑒種質(zhì)平均單株蚜量的比值。

3.7 接種體inoculum

用于接種以引起蚜害的特定生長(zhǎng)階段的蟲體。本標(biāo)準(zhǔn)中用于人工接種鑒定的蚜蟲一般選用優(yōu)勢(shì)種桃蚜。

4 鑒定方法

4.1 室內(nèi)人工接蚜鑒定

4.1.1 接種體準(zhǔn)備從田間采集桃蚜自然種群，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定確認(rèn)后于室內(nèi)離體辣椒/煙草飼養(yǎng)繁殖，溫度為（25±1）℃，相對(duì)濕度為（75±5）%，每天連續(xù)光照時(shí)間≥14 h，選擇大小、發(fā)育一致的雌成蚜用于辣椒種質(zhì)抗蚜性鑒定。

4.1.2 室內(nèi)抗蚜性鑒定鑒定時(shí)設(shè)大羊角椒為感蚜對(duì)照品種，豬大腸為抗蚜對(duì)照品種。將供試?yán)苯贩N質(zhì)播種于育苗用營(yíng)養(yǎng)缽中，隨機(jī)排列，每行10株，行距、株距均為6 cm。在辣椒苗4～6葉期將布滿蚜蟲的辣椒/煙草葉片均勻設(shè)3點(diǎn)置于待測(cè)苗的行間，令其自然轉(zhuǎn)移。接蚜第8天采用計(jì)數(shù)法查蚜，以平均單株蚜量定級(jí)，共分5級(jí)。每品種設(shè)3次重復(fù)，每重復(fù)10株，鑒定結(jié)果經(jīng)大田驗(yàn)證。溫室苗期鑒定評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 辣椒抗蚜性溫室苗期鑒定評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

4.2 田間鑒定

4.2.1 鑒定圃應(yīng)具備良好的桃蚜自然發(fā)生條件，面積0.2 hm2以上。

4.2.2 辣椒種植種植時(shí)按照 GB/Z 26583—2011《辣椒生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范》要求進(jìn)行辣椒生產(chǎn)與管理。鑒定時(shí)設(shè)大羊角椒為感蚜對(duì)照品種，豬大腸為抗蚜對(duì)照品種，將供試種質(zhì)隨機(jī)排列，每種質(zhì)種 2行，行距和株距均為40 cm，每行15株，每種質(zhì)設(shè)3次重復(fù)。

4.2.3 保護(hù)行以相同株行距在待鑒定種質(zhì)資源四周種植大羊角椒作為保護(hù)行。

4.2.4 鑒定圃管理全生育期內(nèi)鑒定圃不使用殺蟲劑，殺菌劑按照GB/T 8321—2000（所有部分）《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則》要求使用。

4.2.5 蚜情調(diào)查每年蚜害高峰期（第二坐果以后）調(diào)查植株上部蚜害最重的4張葉片，每份種質(zhì)資源調(diào)查30～50株，每年1～2次，連續(xù)調(diào)查3年，記錄蚜害葉片數(shù)與調(diào)查總?cè)~片數(shù)。

4.2.6 田間抗蚜性鑒定

4.2.6.1 桃蚜為害分級(jí)根據(jù)辣椒葉片蚜害程度將桃蚜為害分為0、1、2、3、4共5級(jí)，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：

0級(jí)：全株無(wú)蚜蟲；

1級(jí)：植株上有零星蚜蟲；

2級(jí)：心葉及嫩莖有較多蚜蟲，但未卷葉；

3級(jí)：心葉及嫩莖布滿蚜蟲，心葉卷曲；

4級(jí)：全株蚜蟲極多，較多葉片卷曲，植株矮小。

4.2.6.2 田間抗蚜性鑒定評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)按照公式（1）計(jì)算蚜害指數(shù)（I1），然后求出所有參試種質(zhì)蚜害指數(shù)的平均值（I*），根據(jù)每品種3次重復(fù)中蚜害指數(shù)最高值I與I*的比值（離中率）將辣椒的抗蚜性分為免疫、高抗、抗、中抗、感和高感共6級(jí)（表2）。

表2 辣椒抗蚜性田間鑒定評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

式中：I1為蚜害指數(shù)；S1為葉片受害級(jí)別；N1s為該受害級(jí)別葉片數(shù)；N1為調(diào)查總?cè)~片數(shù)。