超聲彈性成像參數(shù)聯(lián)合血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ檢測對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值及其與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系*

賈 穎，王鶴鳴

菏澤市中醫(yī)醫(yī)院功能檢查科，山東菏澤 274035

宮頸癌為女性常見惡性腫瘤，發(fā)病率呈逐年增高及年輕化趨勢，且預(yù)后差，患者5年生存率僅3%～13%，嚴(yán)重威脅女性生命健康[1-2]。探尋疾病的早期診斷與病情判定的靈敏方法對(duì)改善患者預(yù)后具有積極意義。超聲彈性成像可通過對(duì)比加壓前后局部病變組織的彈性信息超聲圖像變化，推斷病變性質(zhì)，在甲狀腺、乳腺等疾病定性診斷中已獲得成功應(yīng)用[3]。腫瘤標(biāo)志物可靈敏反映腫瘤發(fā)生、進(jìn)展情況，為腫瘤診治重要參考。近年來，有研究報(bào)道，宮頸癌細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鐵蛋白(FER)、胰島素生長因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)均呈異常高表達(dá)，可能在疾病發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色[4-5]。本研究觀察超聲彈性成像參數(shù)聯(lián)合血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ表達(dá)測定對(duì)宮頸癌的診斷效果及其與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2021年2月于本院行切除術(shù)的86例宮頸癌患者作為惡性組，同期行切除術(shù)的86例宮頸良性病變患者為良性組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均首次確診，可配合有關(guān)檢查；惡性組經(jīng)病理組織檢查確診為宮頸癌，臨床分期Ⅰ～Ⅲ期，術(shù)前未采取放化療及免疫治療；良性組經(jīng)病理檢查確診為宮頸良性病變，術(shù)前未采取系統(tǒng)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他類型惡性腫瘤；合并肝、心、腎等臟器嚴(yán)重功能障礙；合并自身免疫性疾病或嚴(yán)重感染；合并精神疾病、凝血功能異常；入院前近半年有外科手術(shù)史；既往有宮頸手術(shù)史；妊娠、哺乳期女性。惡性組年齡35～74歲，平均(47.51±6.85)歲；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移57例；病理類型：腺癌21例，鱗狀細(xì)胞癌65例；臨床分期：Ⅲ期20例，Ⅰ～Ⅱ期66例；浸潤深度：>1/2肌層58例，≤1/2肌層28例。良性組年齡32～75歲，平均(46.29±7.32)歲；疾病類型：宮頸息肉59例，宮頸上皮內(nèi)瘤變27例。兩組患者基線資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批通過，患者均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1超聲檢查 患者入院后應(yīng)用日立彩色多普勒超聲儀進(jìn)行檢查，配置有超聲彈性成像軟件。調(diào)節(jié)顯示器至可清晰顯示出子宮長軸切面，輕輕擺動(dòng)探頭探查感興趣區(qū)域，先在二維模式下觀察子宮體、卵巢情況并掃查宮頸，而后啟動(dòng)Elasto彈性成像模式，感興趣區(qū)放于圖像中心位置，手動(dòng)加壓，觸動(dòng)宮頸(頻率2～3次/秒)，測量病灶局部彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)，并將獲得的圖像及數(shù)據(jù)記錄保存在軟件中。

1.2.2血清腫瘤標(biāo)志物檢測 入院后抽取患者4 mL清晨空腹外周靜脈血，應(yīng)用離心機(jī)離心(時(shí)間10 min，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，離心半徑為8 cm)，采集上層血清，以化學(xué)發(fā)光法檢測血清CYFRA21-1、FER水平，試劑盒購自北京科美生物技術(shù)有限公司，以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定血清IGF-Ⅱ水平，試劑盒購于上海裕平生物技術(shù)有限公司，操作嚴(yán)格按儀器與試劑盒說明書執(zhí)行。

1.2.3組織標(biāo)本中侵襲基因檢查 留取宮頸病灶組織標(biāo)本，凍存?zhèn)溆?，以?shí)時(shí)熒光定量PCR法測定宮頸病灶組織中侵襲基因(Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3)相對(duì)表達(dá)量。

1.3觀察指標(biāo) (1)兩組超聲彈性成像參數(shù)(彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù))、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平。(2)惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平。(3)超聲彈性成像參數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ單一、聯(lián)合診斷宮頸癌的效能。(4)兩組組織標(biāo)本中侵襲基因(Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3)相對(duì)表達(dá)量。(5)觀察宮頸癌超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)與組織標(biāo)本中侵襲基因相對(duì)表達(dá)量的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1兩組超聲彈性成像參數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平比較 惡性組彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平均高于良性組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組超聲彈性成像參數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平比較

2.2惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)水平 惡性組患者不同年齡、病理類型彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)，以及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平相比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅲ期、浸潤深度>1/2肌層患者彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平均高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、浸潤深度≤1/2肌層患者(P<0.05)。見表2。

表2 惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)水平比較

續(xù)表2 惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)水平比較

2.3超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值 ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ診斷宮頸癌的AUC依次為0.887、0.810、0.834、0.861、0.840；聯(lián)合診斷時(shí)采取Logistic二元回歸擬合，結(jié)果顯示，聯(lián)合診斷的AUC最大，為0.919。見表3、圖1。

圖1 超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合診斷宮頸癌的ROC曲線

表3 超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值

2.4兩組組織標(biāo)本中侵襲基因表達(dá)情況 惡性組組織標(biāo)本中，Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對(duì)表達(dá)量均高于良性組(P<0.05)。見表4。

表4 兩組組織標(biāo)本中侵襲基因相對(duì)表達(dá)量比較

2.5宮頸癌患者超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)與組織標(biāo)本中侵襲基因相對(duì)表達(dá)量關(guān)系 Pearson相關(guān)分析顯示，宮頸癌患者彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與組織標(biāo)本中Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對(duì)表達(dá)量均呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 宮頸癌患者超聲彈性成像參數(shù)、血清各指標(biāo)與增殖、侵襲、自噬基因相對(duì)表達(dá)量的關(guān)系

3 討 論

目前，宮頸癌發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，可能與人乳頭瘤病毒感染、性傳播疾病史、性交年齡過早、多個(gè)性伴侶、使用避孕藥、長期免疫力低下、吸煙史等有關(guān)[6-7]。近年來，超聲彈性成像技術(shù)已取得長足發(fā)展，其可參照組織彈性系數(shù)差異顯示不同色彩，判定組織病變更為準(zhǔn)確、形象，克服傳統(tǒng)二維超聲顯像的局限性。超聲彈性成像技術(shù)可將組織受到外力壓迫時(shí)由于彈性不同產(chǎn)生的不同形變程度與回聲信號(hào)移動(dòng)幅度變化轉(zhuǎn)換成實(shí)時(shí)彩色圖像，彈性系數(shù)較小者在受壓后位移變化大，圖像顯示為紅色，較大者在受壓后位移變化小，圖像顯示為藍(lán)色，利于準(zhǔn)確定位病變[8]。

本研究結(jié)果顯示，惡性組彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)高于良性組，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅲ期、浸潤深度>1/2肌層宮頸癌患者高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、浸潤深度≤1/2肌層患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明超聲彈性成像參數(shù)與宮頸癌發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)。宮頸癌患者因癌細(xì)胞侵犯間質(zhì)，且與附近組織產(chǎn)生粘連，會(huì)導(dǎo)致宮頸硬度提高，彈性變小，而良性病灶組織內(nèi)部成分單一，硬度較低。彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)可客觀反映組織彈性系數(shù)大小，其值越大則組織惡性程度越高。馬珊[9]研究報(bào)道，宮頸癌組織彈性應(yīng)變比值顯著高于癌旁組織(P<0.05)。ZHANG等[10]研究證實(shí)，超聲彈性成像對(duì)宮頸癌患者的診斷靈敏度高達(dá)94.67%，特異度高達(dá)92.94%，且其彈性應(yīng)變比值對(duì)放療療效具有較高評(píng)估價(jià)值。DUDEA-SIMON等[11]研究報(bào)道，實(shí)時(shí)彈性成像測定彈性應(yīng)變比值對(duì)宮頸癌與宮頸上皮內(nèi)瘤變具有較高的鑒別診斷價(jià)值。

腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤早期診斷、病情監(jiān)測、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后判定等多方面起重要作用[12-13]。CYFRA21-1于良性病變患者與健康人群體內(nèi)處于低表達(dá)狀態(tài)，當(dāng)產(chǎn)生上皮細(xì)胞癌時(shí)，可促使特異性蛋白酶激活加速細(xì)胞降解，導(dǎo)致CYFRA21-1大量釋放，在血液中表達(dá)水平增高[14]。FER主要為鐵負(fù)荷過多、缺鐵性貧血診斷標(biāo)志物，近期研究指出，在一部分癌癥患者體內(nèi)FER表達(dá)也可異常增高，屬廣譜的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)惡性腫瘤診斷、預(yù)后評(píng)價(jià)等有一定參考價(jià)值[15-16]。IGF-Ⅱ異常高表達(dá)可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖，其可作為宮頸癌診斷的敏感標(biāo)志物[17]。本研究中，惡性組血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平高于良性組，且隨著宮頸癌患者臨床分期、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等升高，提示血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平可作為宮頸癌發(fā)生、進(jìn)展評(píng)價(jià)的參考依據(jù)。

隨著腫瘤病情不斷進(jìn)展，癌細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)，致使腫瘤發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤分期增高，這是導(dǎo)致患者預(yù)后不良的重要原因[18-19]。Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3是與宮頸癌發(fā)生密切相關(guān)的侵襲基因，Rab11基因表達(dá)升高可增加Rac1水平，并改變其定位，促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲；PRPS2、GRP94基因高表達(dá)可增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞侵襲、遷移能力；EZH2、GOLPH3基因可上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-2、基質(zhì)金屬蛋白酶-9等分子表達(dá)，提升宮頸癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力[20]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，宮頸惡性病變組織Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對(duì)表達(dá)量升高，且患者彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與組織標(biāo)本中上述侵襲基因表達(dá)量呈正相關(guān)。這也從癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移層面提示宮頸癌患者彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平可客觀反映腫瘤的惡性程度?；诖耍狙芯繃L試應(yīng)用彈性應(yīng)變比值、彈性圖像壓放指數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ聯(lián)合診斷宮頸癌，通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，5項(xiàng)聯(lián)合診斷宮頸癌的AUC最大(高于單一指標(biāo))，診斷靈敏度為79.07%，特異度為94.19%。上述結(jié)果提示，超聲彈性成像參數(shù)與上述血清指標(biāo)聯(lián)合檢測可為宮頸癌診斷提供更多參考信息，提升診斷效能，可為宮頸癌的臨床診治提供可靠依據(jù)。

綜上所述，超聲彈性成像參數(shù)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與宮頸癌臨床病理參數(shù)及腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)，聯(lián)合診斷可顯著提升對(duì)宮頸癌的診斷效能。