• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    北京市PM2.5中類(lèi)腐殖質(zhì)的生物氧化應(yīng)激效應(yīng)初探

    2022-08-25 14:00:30張?jiān)獎(jiǎng)?/span>薛凱兵
    環(huán)境科學(xué)研究 2022年8期
    關(guān)鍵詞:內(nèi)源性市區(qū)顆粒物

    張 東,張?jiān)獎(jiǎng)?2,3*,尚 晶,薛凱兵,馬 健,陳 琦

    1. 中國(guó)科學(xué)院大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,北京 100049

    2. 北京燕山地球關(guān)鍵帶國(guó)家野外科學(xué)觀測(cè)研究站,北京 101408

    3. 山東大學(xué)生態(tài)環(huán)境損害鑒定研究院,山東 青島 266237

    4. 北京城市氣象研究院,北京 100089

    5. 北京大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,北京 100871

    大氣顆粒物是化學(xué)成分復(fù)雜的混合物,對(duì)人體健康的影響不僅取決于其粒徑和濃度,還與其組分密切相關(guān)[1]. 研究[2]表明,大氣顆粒物中的有機(jī)物和金屬是兩類(lèi)對(duì)健康影響最重要的組分. 類(lèi)腐殖質(zhì)(humic-like substances, HULIS)是大氣顆粒物中一類(lèi)大分子有機(jī)化合物,具有復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu),主要在生物質(zhì)燃燒過(guò)程中排放并通過(guò)大氣過(guò)程原位形成[3].HULIS的平均分子量在200~700 Da之間[4-6],是水溶性有機(jī)物(water soluble organic compounds, WSOCs)的重要組成部分[7],占WSOCs濃度的20%~70%,占PM2.5濃度的10%[8-9]. HULIS廣泛存在于大氣氣溶膠、云、霧中,對(duì)大氣環(huán)境具有重要的影響[10-11]. 與陸生和水生系統(tǒng)中常見(jiàn)的腐殖質(zhì)一樣,大氣顆粒物中的HULIS由疏水性脂肪族和芳香族化合物組成,包含不同的極性官能團(tuán),如羧基(?COOH)、羥基(?CH2OH)和羰基(?COCH3)等,其中羧基含量較高[12-14]. 由于這些含氧官能團(tuán)的存在,HULIS可以與金屬陽(yáng)離子絡(luò)合,導(dǎo)致生成過(guò)量的活性氧(reactive oxygen species, ROS),引起機(jī)體氧化應(yīng)激,進(jìn)而誘導(dǎo)各種炎癥效應(yīng),對(duì)人體健康造成損害[15-16]. 基于HULIS的環(huán)境效應(yīng)和健康危害,有必要對(duì)其進(jìn)行深入研究.

    ROS是指機(jī)體內(nèi)或自然環(huán)境中含氧并且性質(zhì)活潑的物質(zhì)的總稱(chēng),是一類(lèi)短壽命親電化學(xué)物質(zhì),由超氧化物通過(guò)不完全還原反應(yīng)產(chǎn)生,由于其具有重要的化學(xué)反應(yīng)性,因此被認(rèn)為對(duì)細(xì)胞和組織具有毒性作用[17]. ROS主要包括以下幾種類(lèi)型:激發(fā)態(tài)的氧分子,即單線(xiàn)態(tài)氧分子(1O2);含氧自由基,包括超氧陰離子自由基(O2?)、羥基自由基(·OH)和氫過(guò)氧自由基(HO2);過(guò)氧化物,包括過(guò)氧化氫(H2O2)、過(guò)氧化脂質(zhì)(ROOH)等[18-19]. ROS的過(guò)量生成可能會(huì)導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生與降解的失衡,從而使細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高,超過(guò)細(xì)胞耐受性,導(dǎo)致氧化應(yīng)激[20]. 氧化應(yīng)激在空氣污染引起的健康效應(yīng)中起至關(guān)重要的作用,能夠影響機(jī)體正常的生理功能,并誘發(fā)炎癥反應(yīng)[21]. HULIS是顆粒有機(jī)物中的主要氧化還原物質(zhì),可以作為顆粒物中ROS產(chǎn)生的媒介,起到催化ROS組分形成的作用,從而對(duì)ROS的形成產(chǎn)生間接貢獻(xiàn)[22].

    目前,大氣顆粒物化學(xué)組分對(duì)健康的影響仍是研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn),有關(guān)大氣顆粒物中HULIS誘導(dǎo)ROS生成的研究通常采用化學(xué)法,如二硫蘇糖醇(DTT)法等[9,13],該方法以DTT來(lái)代替細(xì)胞內(nèi)的輔酶或抗壞血酸,DTT的消耗速率與樣品中氧化還原活性物質(zhì)的濃度成正比,從而測(cè)定污染物本身攜帶的ROS,即外源性ROS. 體外細(xì)胞法測(cè)定的是污染物進(jìn)入機(jī)體后,與細(xì)胞發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的過(guò)量ROS,即內(nèi)源性ROS. 該研究分析了北京市區(qū)、郊區(qū)不同季節(jié)大氣PM2.5中碳質(zhì)組分的濃度特征,并以大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NR8383作為細(xì)胞模型,測(cè)定了PM2.5及HULIS誘導(dǎo)內(nèi)源性ROS的能力,以期對(duì)PM2.5以及HULIS的生物氧化應(yīng)激效應(yīng)做出定量評(píng)價(jià).

    1 材料與方法

    1.1 PM2.5樣品的采集

    該研究布設(shè)了2個(gè)采樣點(diǎn). 采樣點(diǎn)1位于北京大學(xué)城市大氣環(huán)境定位觀測(cè)站(116.31°E、39.99°N),采樣器架設(shè)在北京大學(xué)理科一號(hào)樓的樓頂,距離地面約20 m,周?chē)鸁o(wú)明顯的局地源排放,屬于典型的市區(qū)站點(diǎn);采樣點(diǎn)2位于中國(guó)科學(xué)院大學(xué)雁棲湖校區(qū)教一樓頂(116.69°E、40.40°N),距離地面約15 m,周?chē)酁樯絽^(qū),為典型郊區(qū)站點(diǎn).

    采樣時(shí)間為2021年1月13日?2月6日(冬季)以及2021年7月31日?8月30日(夏季). 冬季使用大流量大氣顆粒物采樣器(TH-1000CⅡ型,武漢天虹儀表公司)采集石英膜樣品(8 cm×10 cm),采樣流量為1.05 m3/min,使用個(gè)體采樣器(SKG100-3000型,USA)采集Teflon膜樣品(直徑37 mm),采樣流量為10 L/min;夏季使用大流量大氣顆粒物采樣器(TH-1000CⅡ型,武漢天虹儀表公司)采集石英膜樣品(8 cm×10 cm),采樣流量為1.05 m3/min,使用小流量大氣顆粒物采樣器(2030D型,青島嶗應(yīng)環(huán)境科技公司)采集Teflon膜樣品(直徑47 mm),采樣流量為16.67 L/min.

    采樣前,將石英膜在550 ℃的馬弗爐中灼燒5 h,以去除碳本底. Teflon膜在采樣前后均在恒溫〔(23.0±0.6)℃〕、恒濕(40%±3.5%)的超凈室至少平衡48 h,使用自動(dòng)稱(chēng)膜機(jī)(CEWS-AUTO-BE型,中國(guó)科學(xué)院重慶綠色智能技術(shù)研究院)進(jìn)行稱(chēng)量,每張膜至少稱(chēng)量3次,取相差不超過(guò)0.06 mg的相鄰3次稱(chēng)量結(jié)果的平均值[23]. 冬季采樣時(shí)長(zhǎng)為23.5 h (09:00?翌日08:30),共采集石英膜53張(空白膜4張),Teflon膜51張(空白膜4張);夏季采樣時(shí)長(zhǎng)為47.5 h(09:00?第三日08:30),共采集石英膜31張(空白膜2張),Teflon膜32張(空白膜2張). 采集的樣品放入?20 ℃冰箱中保存待分析.

    1.2 大氣顆粒物中碳質(zhì)組分的提取與定量

    OC和EC的測(cè)定采用EC/OC分析儀(Forest Grove OR型,Sunset Lab,USA)和熱學(xué)/光學(xué)方法. 使用固相萃取法提取分離HULIS樣品,具體步驟為用銃子取3片直徑為47 mm的石英膜溶于超純水中,超聲提取20 min,重復(fù)兩次,將得到的提取液經(jīng)PTFE濾膜(0.22 μm)過(guò)濾得到WSOC溶液,定容至20 mL,其中,10 mL用于WSOC的定量,剩余10 mL WSOC溶液用1.2 mol/L的HCl酸化至pH=2. 用HLB小柱對(duì)酸化后的樣品進(jìn)行固相萃取,具體步驟為先用2 mL超純水和5 mL甲醇活化HLB小柱,然后把酸化后的樣品加入HLB小柱中萃取,用2 mL超純水沖洗萃取柱,之后用6 mL純甲醇溶液洗脫附著在萃取柱上的HULIS,使用高純氮?dú)獯蹈上疵撘?,加?0 mL超純水再次溶解HULIS,用于HULIS的定量測(cè)定[10]. 使用總有機(jī)碳分析儀(Multi N/C 3100,JENA,Germany)對(duì)WSOC與HULIS進(jìn)行定量測(cè)定[24-25].

    1.3 金屬元素測(cè)定

    取1/4的Teflon膜微波消解后,使用激光燒蝕電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICAP Qc型,Thermo Fisher,USA)對(duì)樣品中的Li、Na、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Rb、Sr、Mo、Cd、Cs、Ba、Ce、Tl、Pb元素進(jìn)行檢測(cè)[26].

    1.4 體外細(xì)胞試驗(yàn)測(cè)定內(nèi)源性ROS

    1.4.1 暴露液制備

    PM2.5暴露液:用銃子取1片直徑為2 cm的石英膜,加入1 mL超純水,漩渦混合儀振蕩30 s后超聲15 min;放入搖床15~18 h,取出后再次超聲15 min,振蕩30 s,用0.22 μm無(wú)菌PTFE過(guò)濾器過(guò)濾除菌后,置于?20 ℃的冰箱中冷凍保存.

    HULIS暴露液:用銃子取3片直徑為2 cm的石英膜,每次加入5 mL超純水,超聲提取20 min,重復(fù)2次,其余步驟同1.2節(jié);最后,將被氮?dú)獯蹈傻臐饪s液溶于1 mL超純水中,并用Na型前處理柱去除其中的金屬,經(jīng)0.22 μm無(wú)菌PTFE過(guò)濾器過(guò)濾除菌后,放置在?20 ℃冰箱中冷凍保存.

    1.4.2 細(xì)胞培養(yǎng)

    該研究使用的細(xì)胞為大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383),將其置于5% CO2、37 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到試驗(yàn)要求后,收集細(xì)胞以進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)源ROS的測(cè)定.

    1.4.3 PM2.5及HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS的測(cè)定

    將培養(yǎng)好的細(xì)胞集中于一個(gè)培養(yǎng)瓶中,用細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù),確保細(xì)胞密度達(dá)1 000細(xì)胞/μL后,將細(xì)胞分裝至離心管中,離心后去除上清液,加入10 mL 1×SGM培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至96孔板中,每孔100 μL,置于培養(yǎng)箱中2 h使細(xì)胞貼壁. 貼壁后的細(xì)胞去除細(xì)胞液并加入提取的暴露液,以2',7'-二氫二氯熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)作為熒光探針,放入培養(yǎng)箱中,避光暴露約2.5 h,用酶標(biāo)儀(SynergyTMH1,BioTek,美國(guó))(發(fā)射波長(zhǎng)為488 nm,激發(fā)波長(zhǎng)為530 nm)進(jìn)行檢測(cè)[27].

    1.4.4 統(tǒng)計(jì)分析

    使用SPSS 25.0軟件對(duì)PM2.5及其化學(xué)組分與ROS進(jìn)行相關(guān)性分析,當(dāng)皮爾遜相關(guān)系數(shù)大于0.5時(shí),認(rèn)為兩變量之間具有相關(guān)性.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 PM2.5中含碳組分濃度及來(lái)源

    2.1.1 PM2.5中含碳組分濃度特征

    冬季北京市采樣點(diǎn)1(市區(qū)采樣點(diǎn))、采樣點(diǎn)2(郊區(qū)采樣點(diǎn))的PM2.5濃度分別為(93.94±34.22) (65.45±34.83)μg/m3,夏季分別為(30.45±13.24) (22.55±9.22) μg/m3,冬季市區(qū)采樣點(diǎn)PM2.5濃度超過(guò)《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3095?2012)中的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)限值(75 μg/m3)[28],郊區(qū)采樣點(diǎn)PM2.5濃度未超過(guò)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)限值. 由表1可見(jiàn),對(duì)于同一季節(jié),與郊區(qū)采樣點(diǎn)相比,市區(qū)采樣點(diǎn)PM2.5中OC、WSOC和HULIS-C (HULIS中的碳)的濃度略高,與PM2.5濃度結(jié)果相同,說(shuō)明市區(qū)污染較嚴(yán)重,這可能是由于市區(qū)的移動(dòng)源以及人為源等排放量更高所致. 對(duì)于同一采樣點(diǎn),OC、WSOC及HULIS的濃度均呈冬季高、夏季低的特點(diǎn),這主要是由于冬季供暖導(dǎo)致PM2.5中碳質(zhì)氣溶膠含量增加,并且冬季氣溫較低,促進(jìn)了碳?xì)浠衔锬Y(jié)在顆粒物表面;另外,低溫也會(huì)導(dǎo)致機(jī)動(dòng)車(chē)燃料的燃燒率降低,使污染物排放量(尤其是碳質(zhì)組分排放量)升高;此外,冬季邊界層高度相對(duì)較低,逆溫天氣頻發(fā),不利于污染物擴(kuò)散,導(dǎo)致冬季污染較為嚴(yán)重[32].

    表1 不同地區(qū)大氣PM2.5中碳質(zhì)組分特征Table 1 Characteristics of carbon compounds in PM2. 5 from different regions

    由表1可見(jiàn),該研究中碳質(zhì)組分濃度與廣州市[29]、西安市[30]等城市較為接近,WSOC濃度高于納木錯(cuò)地區(qū)[24]. 北京市區(qū)和郊區(qū)WSOC/OC (二者濃度之比,下同)在冬季分別為0.56±0.25和0.49±0.20,在夏季分別為0.41±0.06和0.45±0.05. WSOC/OC與氣溶膠的老化程度成正比[33],因此冬季北京市區(qū)氣溶膠的老化程度高于郊區(qū),而夏季郊區(qū)氣溶膠的老化程度則高于市區(qū). 北京市區(qū),HULIS/OC在冬季和夏季均為0.14,HULIS-C/WSOC在冬季和夏季分別為0.24±0.21和0.34±0.03;北京郊區(qū),HULIS/OC在冬季和夏季分別為0.19±0.17和0.15±0.02,HULIS-C/WSOC分別為0.37±0.20和0.34±0.03. 因此,北京郊區(qū)HULIS對(duì)OC的貢獻(xiàn)要高于市區(qū),但HULIS對(duì)WSOC的貢獻(xiàn)在市區(qū)與郊區(qū)相當(dāng). 相較于表1中其他地區(qū)的研究結(jié)果,筆者結(jié)果相對(duì)偏低,可能與近年來(lái)北京市空氣質(zhì)量明顯改善,嚴(yán)重污染天氣減少有關(guān)[24,30-32].

    2.1.2 OC/EC

    OC/EC (二者濃度之比,下同)常被用來(lái)評(píng)價(jià)顆粒物的來(lái)源及排放特征[34],其值越高,表明大氣二次污染越嚴(yán)重. 北京市區(qū)采樣點(diǎn)冬季和夏季的OC/EC范圍分別為8.94~19.29和3.24~10.37,平均值分別為11.06±2.30和5.84±2.29;郊區(qū)采樣點(diǎn)冬季和夏季的OC/EC范圍分別為5.47~22.48和3.50~12.41,平均值分別為8.14±3.32和6.75±2.66. 兩個(gè)采樣點(diǎn)的OC/EC均呈冬季高于夏季的特征,與董貴明等[32]在北京南部城區(qū)觀測(cè)的結(jié)果一致,表明碳質(zhì)組分的來(lái)源具有明顯的季節(jié)性差異,冬季OC/EC較高可能與生物質(zhì)燃燒源和燃煤源的貢獻(xiàn)有關(guān),其中生物質(zhì)燃燒是主要原因[35],而夏季OC/EC則主要受機(jī)動(dòng)車(chē)排放源和燃煤源的影響[36].

    2.1.3 一次有機(jī)碳(POC)和二次有機(jī)碳(SOC)的估算

    Chow等[37]發(fā)現(xiàn),當(dāng)OC/EC大于2時(shí),可能存在SOC污染,目前還沒(méi)有直接測(cè)定顆粒物中SOC含量的方法,常采用OC/EC示蹤比值法來(lái)評(píng)估SOC水平,計(jì)算公式[23]:

    式中:CSOC為SOC的濃度,μg/m3;COC為OC的濃度,μg/m3;CEC為EC的濃度,μg/m3;(COC/CEC)min為OC/EC的最小值;CPOC為POC的濃度,μg/m3. 因不同季節(jié)的污染物來(lái)源存在差異[36],因此該研究選取每個(gè)季節(jié)OC/EC的最小值,根據(jù)式(1)(2)計(jì)算SOC及POC的濃度.

    由圖1可見(jiàn),不同季節(jié)、不同采樣點(diǎn)EC濃度差異不明顯. 兩個(gè)采樣點(diǎn)冬季POC濃度較為接近,夏季北京市區(qū)采樣點(diǎn)略高于郊區(qū)采樣點(diǎn). 采樣期間,SOC/OC均在30%以上,與Zhang等[38-39]研究結(jié)果一致,表明SOC是北京市PM2.5中OC的重要組成部分. 在北京郊區(qū),SOC濃度的季節(jié)性差異不明顯,SOC/OC呈夏季高于冬季的特征;在市區(qū),SOC濃度及SOC/OC均呈冬季明顯高于夏季的特征. 與萬(wàn)州城區(qū)同類(lèi)污染物的季節(jié)性變化特征[35]相似,這可能是由于冬季市區(qū)經(jīng)常出現(xiàn)逆溫天氣,逆溫天氣有利于污染物的積累,且冬季低溫加速了揮發(fā)性有機(jī)物在顆粒物上的冷凝,導(dǎo)致冬季SOC/OC較高[40].

    圖1 北京市不同采樣點(diǎn)EC、POC、SOC濃度及SOC/OC的季節(jié)性變化情況Fig.1 Seasonal variations of EC, POC, SOC concentration and SOC/OC in different sampling sites in Beijing

    2.2 PM2.5誘導(dǎo)內(nèi)源性ROS生成

    2.2.1 PM2.5誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平

    該研究測(cè)定內(nèi)源性ROS時(shí)以酵母聚糖(zymosan)作為陽(yáng)性對(duì)照,ROS濃度以μg zymosan/m3和μg zymosan/mg PM來(lái)表示,前者反映了單位體積空氣中顆粒物的氧化能力,即內(nèi)源性ROS在大氣中的暴露濃度,后者則反映了單位質(zhì)量顆粒物的氧化能力. 由圖2可見(jiàn):觀測(cè)期間PM2.5誘導(dǎo)產(chǎn)生的總內(nèi)源性ROS濃度水平有較大差異. 從暴露角度〔見(jiàn)圖2(a)〕來(lái)看,在相同季節(jié),北京市區(qū)的內(nèi)源性ROS濃度水平高于郊區(qū);在相同采樣點(diǎn),內(nèi)源性ROS濃度變化特征均呈冬季高于夏季的特征. 內(nèi)源性ROS濃度與PM2.5濃度變化特征具有一致性,表明顆粒物濃度越高,其對(duì)健康的影響就越大. 從顆粒物的生物氧化潛力〔見(jiàn)圖2(b)〕來(lái)看,在相同季節(jié),北京市區(qū)內(nèi)源性ROS濃度水平高于郊區(qū);在相同采樣點(diǎn),夏季內(nèi)源性ROS濃度高于冬季,表明夏季郊區(qū)的PM2.5具有更高的生物氧化潛力.

    圖2 PM2.5誘導(dǎo)生成的總內(nèi)源性ROS濃度水平Fig.2 Endogenous ROS concentration level of PM2.5 water extract

    已有研究使用酵母聚糖作為陽(yáng)性對(duì)照,測(cè)定了不同地區(qū)大氣PM2.5體外誘導(dǎo)產(chǎn)生內(nèi)源性ROS的濃度水平,筆者研究中PM2.5誘導(dǎo)產(chǎn)生的內(nèi)源性ROS濃度水平高于巴格達(dá)[41],但低于米蘭[34]和首爾[42],這可能是由于不同地區(qū)PM2.5樣品的濃度以及化學(xué)組分差異較大,因此誘導(dǎo)產(chǎn)生內(nèi)源性ROS的水平具有較大差異[26,34,41-43]. 已有研究[9,16,25,44]表明,PM2.5中過(guò)渡金屬(如Fe、Cu等)以及有機(jī)組分對(duì)內(nèi)源性ROS的生成具有重要貢獻(xiàn),它們不僅能單獨(dú)促進(jìn)內(nèi)源性ROS的生成,還能夠相互作用,進(jìn)而影響內(nèi)源性ROS的生成. 此外,通過(guò)光化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的二次氣溶膠比一次污染物更有可能引起氧化應(yīng)激,從而生成過(guò)量?jī)?nèi)源性ROS并導(dǎo)致細(xì)胞損傷[26]. 因此,該研究中夏季PM2.5的生物氧化潛力更高,可能與PM2.5組分差異以及夏季光化學(xué)反應(yīng)劇烈導(dǎo)致二次氣溶膠生成等因素有關(guān).

    2.2.2 PM2.5及其化學(xué)組分與內(nèi)源性ROS的相關(guān)性分析

    為確定PM2.5中對(duì)內(nèi)源性ROS濃度水平貢獻(xiàn)較大的組分,對(duì)PM2.5及不同化學(xué)組分濃度與內(nèi)源性ROS濃度的相關(guān)性進(jìn)行分析,結(jié)果如表2所示. 由表2可見(jiàn),北京市兩個(gè)采樣點(diǎn)的內(nèi)源性ROS濃度與碳質(zhì)組分濃度之間均有較高的相關(guān)性,與Park等[42]在韓國(guó)首爾的研究結(jié)果一致,表明一次源和二次源的碳組分在內(nèi)源性ROS的生成中都起重要作用. 金屬元素如K、Fe、Mn、Cu、Zn、As、Se、Cd、Tl和Pb等同樣與內(nèi)源性ROS的生成有關(guān),其原理主要是金屬能夠通過(guò)Fenton反應(yīng)促進(jìn)ROS的生成,表明PM2.5中的金屬元素也在生物氧化應(yīng)激中具有重要作用.

    表2 PM2.5及化學(xué)組分濃度與內(nèi)源性ROS濃度的相關(guān)性Table 2 Correlation coefficient between PM2.5 and chemical components and ROS

    2.3 HULIS誘導(dǎo)內(nèi)源性ROS 生成

    相關(guān)性分析表明,北京市兩個(gè)采樣點(diǎn)的HULIS濃度與內(nèi)源性ROS濃度具有較好的相關(guān)性(市區(qū)和郊區(qū)R值分別為0.644和0.628,P均小于0.01). 作為水溶性有機(jī)碳中的重要組分,許多研究[16,22,25,45-48]表明,HULIS中含有可逆的氧化還原位點(diǎn),可作為電子載體催化ROS的形成,且HULIS中的大量酸性官能團(tuán)還可與金屬陽(yáng)離子絡(luò)合,進(jìn)而促進(jìn)ROS的產(chǎn)生和釋放,因此該研究進(jìn)一步探究了PM2.5中HULIS誘導(dǎo)的內(nèi)源性ROS生成情況.

    2.3.1 HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平

    由圖3可見(jiàn),采用不同的計(jì)量單位表征HULIS誘導(dǎo)的內(nèi)源性ROS濃度水平時(shí),其結(jié)果有所不同. 從暴露的角度〔見(jiàn)圖3(a)〕來(lái)看,HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平表現(xiàn)為冬季市區(qū)>冬季郊區(qū)>夏季市區(qū)>夏季郊區(qū),與2.2.1節(jié)中PM2.5誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS水平結(jié)果一致,表明冬季HULIS的健康風(fēng)險(xiǎn)更高. 從HULIS的生物氧化潛力〔見(jiàn)圖3(b)〕來(lái)看,HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平表現(xiàn)為冬季郊區(qū)>冬季市區(qū)>夏季市區(qū)>夏季郊區(qū). 研究[48]表明,HULIS是誘導(dǎo)生物氧化應(yīng)激的重要組分之一,能夠促進(jìn)內(nèi)源性ROS的生成. 其機(jī)理是HULIS中可逆的氧化還原位點(diǎn)能夠作為電子載體,將電子從細(xì)胞中的還原物質(zhì)(如NADPH或抗壞血酸)轉(zhuǎn)移到O2中,并導(dǎo)致ROS隨著細(xì)胞的有氧呼吸持續(xù)產(chǎn)生. 核磁共振結(jié)果[49]表明,不同來(lái)源的HULIS所含官能團(tuán)差異較大,通過(guò)二次反應(yīng)生成的HULIS化學(xué)成分更為復(fù)雜,其中芳香性物質(zhì)(如醌等)含量也更高. 已有研究[22]表明,醌基是HULIS中的重要氧化還原活性位點(diǎn). 因此,冬季HULIS的氧化還原活性更強(qiáng),可能與其成分中醌基較多有關(guān),因此具有更高的生物氧化潛力.

    圖3 HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平Fig.3 Endogenous ROS concentration level of HULIS

    2.3.2 HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度的日變化情況

    HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平的日變化情況如圖4所示. 由圖4可見(jiàn),HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度與HULIS濃度變化趨勢(shì)基本一致,二者相關(guān)性(北京市區(qū)和郊區(qū)R值分別為0.775和0.660,P均小于0.01)較高. HULIS濃度升高或降低時(shí),單位體積空氣中HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度也隨之升高或降低. 在相同季節(jié),北京市區(qū)的內(nèi)源性ROS濃度與HULIS濃度均高于郊區(qū),從暴露的角度來(lái)看,HULIS濃度越高,其對(duì)健康的影響越大. 但在北京郊區(qū),2月2?6日HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度變化與HULIS濃度變化趨勢(shì)相反,可能是由于HULIS樣品中存在過(guò)渡金屬的干擾導(dǎo)致測(cè)定誤差增大. 2月2?6日,過(guò)渡金屬V、Cr、Mn和Fe的濃度平均值分別為(3.76±1.47) (4.94±2.04) (70.68±27.51)(2 044.00±879.95) ng/m3,遠(yuǎn)高于采樣期間的平均值〔V、Cr、Mn和Fe的濃度平均值分別為(3.15±1.73)(3.92±1.92) (53.24±27.28) (1 535.85±863.79) ng/m3〕.盡管在提取HULIS過(guò)程中,已經(jīng)使用Na型前處理小柱對(duì)可能存在的過(guò)渡金屬進(jìn)行處理,但過(guò)渡金屬與HULIS還可以絡(luò)合態(tài)的形式存在,而前處理小柱對(duì)絡(luò)合態(tài)的過(guò)渡金屬的去除率相對(duì)較低,因此可能會(huì)導(dǎo)致實(shí)際測(cè)定中內(nèi)源性ROS濃度水平過(guò)高.

    圖4 HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度水平的時(shí)間序列Fig.4 Time series of endogenous ROS concentration level induced by HULIS

    2.1.1節(jié)中OC/EC結(jié)果表明,冬季OC主要來(lái)自生物質(zhì)燃燒源和燃煤源,夏季主要來(lái)自機(jī)動(dòng)車(chē)排放源和燃煤源. Ma等[50]分析了HULIS不同來(lái)源對(duì)其氧化還原活性的貢獻(xiàn),結(jié)果表明,生物質(zhì)燃燒源產(chǎn)生的HULIS具有較高的氧化潛勢(shì)(62.9%),而通過(guò)二次有機(jī)氣溶膠生成的HULIS氧化潛勢(shì)(12.6%)相對(duì)較低,進(jìn)一步解釋了冬季HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS水平高于夏季的原因. 因此,控制生物質(zhì)燃燒源及二次有機(jī)氣溶膠生成對(duì)于降低HULIS的氧化還原活性,以及由此導(dǎo)致的生物氧化應(yīng)激效應(yīng)具有重要意義.

    2.3.3 HULIS對(duì)PM2.5誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS的貢獻(xiàn)率

    HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度與PM2.5誘導(dǎo)生成的總內(nèi)源性ROS濃度的相關(guān)性分析如圖5所示. 由圖5可見(jiàn),在北京市區(qū)和郊區(qū)二者的相關(guān)系數(shù)分別為0.771(P<0.01)和0.679(P<0.01),相關(guān)性均較好. 此外,在北京市區(qū)和郊區(qū),HULIS對(duì)PM2.5誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS的貢獻(xiàn)率分別為42%和37%,表明HULIS在誘導(dǎo)內(nèi)源性ROS生成中起重要作用. 鑒于HULIS在生物氧化應(yīng)激中起的關(guān)鍵作用,有必要對(duì)其進(jìn)行針對(duì)性控制.

    圖5 HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度與PM2.5誘導(dǎo)生成的總內(nèi)源性ROS濃度的相關(guān)性Fig.5 Correlation between endogenous ROS concentration induced by HULIS and total ROS concentration in PM2.5

    3 結(jié)論

    a)北京市PM2.5中碳質(zhì)組分濃度呈冬季高于夏季、市區(qū)高于郊區(qū)的特征. 冬季生物質(zhì)燃燒源和燃煤源對(duì)OC具有較大貢獻(xiàn),夏季OC則主要來(lái)自機(jī)動(dòng)車(chē)排放源及燃煤源.

    b)觀測(cè)期間,PM2.5誘導(dǎo)生成的總內(nèi)源性ROS濃度(μg zymosan/m3)呈冬季高于夏季的特征,但夏季PM2.5具有更高的生物氧化潛力(μg zymosan/mg PM).相關(guān)性分析表明,PM2.5中的碳質(zhì)組分和一些金屬在內(nèi)源性ROS生成中起重要作用.

    c) HULIS誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS濃度同樣呈冬季〔市區(qū)和郊區(qū)分別為(55.46±22.69) (43.27±23.89)μg zymosan/m3〕高于夏季〔市區(qū)和郊區(qū)分別為(18.73±11.94) (7.88±3.63) μg zymosan/m3〕的特征,在市區(qū)和郊區(qū)HULIS對(duì)PM2.5誘導(dǎo)生成的內(nèi)源性ROS的貢獻(xiàn)率分別為42%和37%,表明HULIS在誘導(dǎo)內(nèi)源性ROS生成、促進(jìn)生物氧化應(yīng)激中起重要作用,針對(duì)性控制HULIS能夠有效降低大氣PM2.5的生物氧化應(yīng)激效應(yīng).

    猜你喜歡
    內(nèi)源性市區(qū)顆粒物
    內(nèi)源性NO介導(dǎo)的Stargazin亞硝基化修飾在腦缺血再灌注后突觸可塑性中的作用及機(jī)制
    病毒如何與人類(lèi)共進(jìn)化——內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒的秘密
    科學(xué)(2020年3期)2020-11-26 08:18:34
    本月主題 在市區(qū) Downtown
    南平市細(xì)顆粒物潛在來(lái)源分析
    2016年1-3月各省市區(qū)玩具進(jìn)出口統(tǒng)計(jì)
    錯(cuò)流旋轉(zhuǎn)填料床脫除細(xì)顆粒物研究
    內(nèi)源性12—HETE參與缺氧對(duì)Kv通道抑制作用機(jī)制的研究
    多層介質(zhì)阻擋放電處理柴油機(jī)尾氣顆粒物
    內(nèi)源性雌激素及雌激素受體α水平與中老年男性冠心病的相關(guān)性
    2013年一季度全國(guó)各省市區(qū)玩具進(jìn)出口統(tǒng)計(jì)
    精品免费久久久久久久清纯 | 免费观看人在逋| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲欧美激情综合另类| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 丝袜人妻中文字幕| 青草久久国产| 青草久久国产| 操出白浆在线播放| 在线观看日韩欧美| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲精品自拍成人| 丝袜人妻中文字幕| 视频区图区小说| 久久这里只有精品19| 亚洲精华国产精华精| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产av精品麻豆| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产成人精品在线电影| 亚洲av成人av| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲第一av免费看| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 成年人午夜在线观看视频| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲视频免费观看视频| 99riav亚洲国产免费| 一级片'在线观看视频| 又黄又粗又硬又大视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 中文字幕色久视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 悠悠久久av| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲成人手机| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲久久久国产精品| 嫁个100分男人电影在线观看| 成人18禁在线播放| 老司机在亚洲福利影院| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 99riav亚洲国产免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 夫妻午夜视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产一区在线观看成人免费| 视频在线观看一区二区三区| 怎么达到女性高潮| 三上悠亚av全集在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 欧美日韩视频精品一区| 丁香六月欧美| 久久久国产欧美日韩av| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲精品乱久久久久久| 成年版毛片免费区| 久久中文看片网| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲avbb在线观看| 国产视频一区二区在线看| 亚洲视频免费观看视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 黑人操中国人逼视频| 亚洲伊人色综图| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 黄色毛片三级朝国网站| 精品电影一区二区在线| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 久久国产精品影院| 一进一出好大好爽视频| 一区二区三区精品91| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲五月色婷婷综合| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 午夜福利在线免费观看网站| av网站在线播放免费| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 在线观看免费视频网站a站| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 久久久国产成人精品二区 | av中文乱码字幕在线| 极品教师在线免费播放| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产免费av片在线观看野外av| 99riav亚洲国产免费| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 美女视频免费永久观看网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美成人免费av一区二区三区 | 黄色视频,在线免费观看| 亚洲欧美激情综合另类| 国产精品国产高清国产av | 怎么达到女性高潮| 免费看a级黄色片| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 一级a爱视频在线免费观看| 国产在线观看jvid| 一级,二级,三级黄色视频| 国产高清国产精品国产三级| 12—13女人毛片做爰片一| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲色图av天堂| 热99久久久久精品小说推荐| 午夜精品在线福利| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 午夜免费成人在线视频| 久久精品国产清高在天天线| 露出奶头的视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲成a人片在线一区二区| 免费av中文字幕在线| 亚洲午夜理论影院| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产淫语在线视频| 成在线人永久免费视频| 亚洲精华国产精华精| 夜夜爽天天搞| 久久这里只有精品19| 最新美女视频免费是黄的| 欧美不卡视频在线免费观看 | 很黄的视频免费| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲午夜理论影院| 999精品在线视频| 亚洲美女黄片视频| 国产91精品成人一区二区三区| 国产av精品麻豆| 欧美乱妇无乱码| av网站在线播放免费| 欧美最黄视频在线播放免费 | 啦啦啦视频在线资源免费观看| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品亚洲成国产av| 国产三级黄色录像| 欧美成狂野欧美在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲av成人av| 又大又爽又粗| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 国产极品粉嫩免费观看在线| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 在线免费观看的www视频| 99香蕉大伊视频| netflix在线观看网站| 一a级毛片在线观看| 成人手机av| 91在线观看av| 国产淫语在线视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 看片在线看免费视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 一二三四社区在线视频社区8| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲一区高清亚洲精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久国产精品大桥未久av| 成熟少妇高潮喷水视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 99re6热这里在线精品视频| 国产区一区二久久| 一级黄色大片毛片| 黄色视频,在线免费观看| 成人18禁在线播放| 亚洲全国av大片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产亚洲av高清不卡| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲熟女毛片儿| 老司机影院毛片| 午夜久久久在线观看| 婷婷成人精品国产| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 午夜福利免费观看在线| 人妻久久中文字幕网| 婷婷成人精品国产| 老鸭窝网址在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 久久精品国产清高在天天线| 欧美丝袜亚洲另类 | 看片在线看免费视频| 精品视频人人做人人爽| 精品国产一区二区久久| 中文亚洲av片在线观看爽 | 九色亚洲精品在线播放| 女性生殖器流出的白浆| av天堂久久9| 老熟女久久久| 亚洲五月天丁香| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 久久久国产成人免费| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产午夜精品久久久久久| 校园春色视频在线观看| 韩国精品一区二区三区| 久久精品亚洲av国产电影网| www日本在线高清视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 在线观看www视频免费| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品视频人人做人人爽| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产视频一区二区在线看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 黑人猛操日本美女一级片| 999精品在线视频| 国产成人精品无人区| 精品国内亚洲2022精品成人 | 99热网站在线观看| 免费在线观看影片大全网站| 麻豆av在线久日| 美女福利国产在线| 18禁国产床啪视频网站| 一级片'在线观看视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 精品人妻在线不人妻| 极品人妻少妇av视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久99一区二区三区| 国产精品电影一区二区三区 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 免费少妇av软件| 操出白浆在线播放| 999久久久精品免费观看国产| а√天堂www在线а√下载 | 久久精品91无色码中文字幕| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 日本五十路高清| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一级作爱视频免费观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产片内射在线| 一二三四在线观看免费中文在| 久久亚洲精品不卡| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲av片天天在线观看| 好男人电影高清在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久国产精品影院| 天堂中文最新版在线下载| 国精品久久久久久国模美| 久热这里只有精品99| 久久这里只有精品19| 久久久精品区二区三区| 午夜福利在线观看吧| 欧美乱码精品一区二区三区| 日韩三级视频一区二区三区| 女人被狂操c到高潮| 亚洲精品在线美女| 超色免费av| www日本在线高清视频| 五月开心婷婷网| www.精华液| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日韩欧美三级三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 黄色成人免费大全| 国产欧美亚洲国产| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲综合色网址| 精品一区二区三区av网在线观看| 无限看片的www在线观看| 免费少妇av软件| 桃红色精品国产亚洲av| 成人精品一区二区免费| 亚洲精品国产区一区二| 国产国语露脸激情在线看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产成人影院久久av| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 午夜福利影视在线免费观看| 1024香蕉在线观看| av片东京热男人的天堂| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 一二三四在线观看免费中文在| 黄色视频不卡| 亚洲avbb在线观看| 久久久久久久国产电影| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 免费不卡黄色视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲成人免费电影在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美性长视频在线观看| 免费在线观看完整版高清| 桃红色精品国产亚洲av| 国产99久久九九免费精品| av中文乱码字幕在线| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品 欧美亚洲| 欧美日韩精品网址| 宅男免费午夜| 女警被强在线播放| 免费在线观看日本一区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 色94色欧美一区二区| 亚洲成国产人片在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 久热这里只有精品99| 欧美成狂野欧美在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 免费看a级黄色片| 在线看a的网站| 久久ye,这里只有精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美乱码精品一区二区三区| 日韩视频一区二区在线观看| 国产亚洲精品一区二区www | 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久久久久久久久久久大奶| 一二三四在线观看免费中文在| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲国产精品合色在线| 精品福利永久在线观看| 老司机亚洲免费影院| 国产有黄有色有爽视频| 欧美性长视频在线观看| 69av精品久久久久久| www日本在线高清视频| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 一级黄色大片毛片| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久婷婷成人综合色麻豆| 欧美乱妇无乱码| 精品国产亚洲在线| tocl精华| 一进一出抽搐gif免费好疼 | netflix在线观看网站| 90打野战视频偷拍视频| 咕卡用的链子| 欧美激情高清一区二区三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 中文字幕人妻丝袜制服| 成年人午夜在线观看视频| 男女下面插进去视频免费观看| 不卡av一区二区三区| 黄频高清免费视频| 9热在线视频观看99| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲情色 制服丝袜| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久青草综合色| 久久久久精品人妻al黑| 男男h啪啪无遮挡| 女性生殖器流出的白浆| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 一本大道久久a久久精品| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产成人精品无人区| 下体分泌物呈黄色| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 中文亚洲av片在线观看爽 | 新久久久久国产一级毛片| 两人在一起打扑克的视频| 午夜福利视频在线观看免费| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 丝袜美腿诱惑在线| 女性被躁到高潮视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 岛国在线观看网站| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产亚洲一区二区精品| 久9热在线精品视频| 欧美日韩亚洲高清精品| x7x7x7水蜜桃| 免费少妇av软件| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久中文看片网| 高潮久久久久久久久久久不卡| 成年人免费黄色播放视频| 在线观看免费高清a一片| 免费高清在线观看日韩| 中文字幕精品免费在线观看视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 激情视频va一区二区三区| tocl精华| 亚洲精品在线观看二区| 精品欧美一区二区三区在线| 精品国产美女av久久久久小说| √禁漫天堂资源中文www| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产免费现黄频在线看| 欧美性长视频在线观看| 久久精品成人免费网站| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲精品久久午夜乱码| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 大陆偷拍与自拍| 又黄又粗又硬又大视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 女同久久另类99精品国产91| 精品福利永久在线观看| 一本综合久久免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| 好男人电影高清在线观看| 夜夜爽天天搞| 黄片播放在线免费| tube8黄色片| 国产欧美日韩一区二区精品| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 老司机影院毛片| 人人澡人人妻人| 午夜福利一区二区在线看| 大码成人一级视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产色视频综合| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美日韩乱码在线| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久久久精品国产欧美久久久| 日本欧美视频一区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 欧美在线一区亚洲| 一本综合久久免费| 91成年电影在线观看| 久久青草综合色| 99热只有精品国产| 久久ye,这里只有精品| 国产又色又爽无遮挡免费看| bbb黄色大片| 悠悠久久av| 欧美色视频一区免费| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 成人三级做爰电影| 亚洲,欧美精品.| 中文字幕av电影在线播放| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 激情在线观看视频在线高清 | 色尼玛亚洲综合影院| 久久精品国产a三级三级三级| a级毛片在线看网站| 成人永久免费在线观看视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| av天堂久久9| 美女午夜性视频免费| 国产亚洲欧美98| 99国产极品粉嫩在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 9热在线视频观看99| 国产成人精品久久二区二区91| 不卡av一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲欧美一区二区三区久久| 久久久国产精品麻豆| 中文字幕av电影在线播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 黄色怎么调成土黄色| 天堂动漫精品| 久久热在线av| 国产精品免费一区二区三区在线 | 身体一侧抽搐| 久久午夜亚洲精品久久| 妹子高潮喷水视频| 久久久国产成人免费| 欧美 日韩 精品 国产| 久久午夜亚洲精品久久| 中文亚洲av片在线观看爽 | 女同久久另类99精品国产91| 麻豆av在线久日| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 男女下面插进去视频免费观看| 岛国在线观看网站| 亚洲一码二码三码区别大吗| 中文字幕精品免费在线观看视频| 91av网站免费观看| 超碰成人久久| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲专区字幕在线| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 一本综合久久免费| 欧美日韩乱码在线| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美精品啪啪一区二区三区| 免费人成视频x8x8入口观看| 手机成人av网站| a级毛片在线看网站| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品偷伦视频观看了| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久午夜亚洲精品久久| 婷婷成人精品国产| 久久九九热精品免费| 午夜两性在线视频| 久久性视频一级片| 一边摸一边做爽爽视频免费| 丝袜人妻中文字幕| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲全国av大片| 老司机午夜十八禁免费视频| av天堂在线播放| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲美女黄片视频| av网站在线播放免费| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品久久电影中文字幕 | 免费看十八禁软件| 亚洲欧美激情在线| 国产av又大| 18禁观看日本| 免费不卡黄色视频| 国产精品久久久av美女十八| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| av一本久久久久| 99国产精品免费福利视频| 99精品在免费线老司机午夜| 色94色欧美一区二区| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 精品福利观看| 一区二区三区精品91| 12—13女人毛片做爰片一| 精品久久久久久电影网| 久久国产乱子伦精品免费另类| 高清av免费在线| 18禁国产床啪视频网站| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲av片天天在线观看| 日韩欧美免费精品| 757午夜福利合集在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲熟女毛片儿| 久久香蕉激情| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲综合色网址| 国产欧美日韩一区二区三| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 女人久久www免费人成看片| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 黄色成人免费大全| 男人操女人黄网站| 99久久人妻综合| 99久久综合精品五月天人人| 午夜福利一区二区在线看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚洲专区字幕在线| 亚洲精品自拍成人| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲欧美激情综合另类| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美久久黑人一区二区| videosex国产| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 大香蕉久久成人网| 精品国产亚洲在线| 久久草成人影院| 啦啦啦 在线观看视频| 久久国产精品影院| 久久草成人影院| 成人免费观看视频高清| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 777米奇影视久久| 午夜福利免费观看在线| 精品国产亚洲在线| 国产男女内射视频| 国产精品av久久久久免费| 丝袜在线中文字幕| 成人18禁在线播放| 90打野战视频偷拍视频| a级毛片黄视频| 青草久久国产| 国产一区在线观看成人免费| 午夜日韩欧美国产| 男人的好看免费观看在线视频 |