陰道頻繁刺激對羊外周血液部分指標(biāo)的影響

文│胡曉惠（山東省陽谷縣畜牧獸醫(yī)事業(yè)發(fā)展中心）

在同期發(fā)情處理中，綿羊與山羊在行為上差異較大。相對于山羊在發(fā)情時哞叫，躁動不安，綿羊的發(fā)情狀態(tài)少有明顯的外部表現(xiàn)，在生產(chǎn)實(shí)踐中需要采用試情法進(jìn)行發(fā)情鑒定，在集約化養(yǎng)殖模式下限制了生產(chǎn)效率，且所形成的人工成本增高，羊的養(yǎng)殖效益受到影響。有研究顯示，綿羊體溫升降往往與不同生殖生理階段相關(guān)聯(lián)，通過綿羊陰道溫度的連續(xù)性測量可能確定發(fā)情。

在探索新型測定綿羊陰道溫度的器械時，從技術(shù)角度往往需要確定發(fā)情生理與陰道溫度之間的關(guān)聯(lián)度。因此，研究的起始階段不可避免頻繁將溫度計(jì)放置在綿羊陰道，進(jìn)而需要評價陰道的頻繁刺激可否帶來非生理狀態(tài)下的溫度測定值。其中陰道損傷和炎癥都需要客觀評估。資料顯示，炎癥的發(fā)生同樣會造成綿羊外周血液中的部分成分上升，如白細(xì)胞數(shù)目（WBC）、紅細(xì)胞數(shù)目（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）等。炎癥部位血液成分的變化可能會造成綿羊陰道溫度上升，影響陰道溫度測量的準(zhǔn)確性，進(jìn)而影響對綿羊發(fā)情狀態(tài)的判斷。筆者通過對陰道測溫綿羊的外周部分血液成分的分析，判斷炎癥狀態(tài)下綿羊血液成分變化和對體溫測量的影響。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)動物。阜陽市臨泉縣宋集鎮(zhèn)欣群牧業(yè)有限公司為本試驗(yàn)提供試驗(yàn)湖羊，并在此公司提供的試驗(yàn)基地進(jìn)行試驗(yàn)。舍飼，保持良好通風(fēng)，自由采食、飲水。每天6:00和16:00各飼喂1次，日常管理與免疫程序按常規(guī)飼養(yǎng)程序進(jìn)行飼養(yǎng)。

2.試驗(yàn)儀器和藥品。低速離心機(jī)，1000微升移液器，氯前列烯醇（簡稱PG,寧波三生，批號S200912）促黃體生成素釋放激素A3（簡稱促排A3，寧波三生，批號S200905），5毫升帶針頭抗凝管，醫(yī)用水銀溫度計(jì)（魚躍）0.5毫升離心管。獸用全自動血液細(xì)胞分析儀（ANIMAL，GRT—6008）

3.試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組。選擇2～3胎次、體況中等、健康空懷母羊40只，隨機(jī)分為Ⅰ組和Ⅱ組，共2組，每組20只羊。Ⅰ組母羊每天間隔4小時進(jìn)行人用溫度計(jì)導(dǎo)入母羊陰道，置入30分鐘，Ⅱ組不作處理，20天后，對兩組母羊進(jìn)行頸靜脈采血2毫升，移入預(yù)先標(biāo)記好的干凈離心管中，肝素鈉抗凝，在8℃環(huán)境下送檢，血樣采用獸用血細(xì)胞測定儀測定血液指標(biāo)。

4.指標(biāo)測定。白細(xì)胞數(shù)目（WBC）、紅細(xì)胞數(shù)目（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細(xì)胞比容（HCT）、血小板數(shù)目（PLT）。

5.數(shù)據(jù)分析。試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 20數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行方差分析，當(dāng)P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示無顯著差異。

二、結(jié)果與分析

由表1可知，試驗(yàn)組湖羊和對照組湖羊外周部分血液生理指標(biāo)基本相近，通過對湖羊白細(xì)胞數(shù)目（WBC）、紅細(xì)胞數(shù)目（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細(xì)胞比容（HCT）、血小板數(shù)目（PLT）進(jìn)行方差分析得出白細(xì)胞數(shù)目（WBC）、紅細(xì)胞數(shù)目（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細(xì)胞比容（HCT）均表現(xiàn)出差異不顯著（P＞0.05），在血小板數(shù)目（PLT）上，對照組和試驗(yàn)Ⅲ組與試驗(yàn)Ⅰ組之間具有顯著差異（P＜0.05）。因此，頻繁對綿羊陰道進(jìn)行操作會對綿羊外周血液中的血小板數(shù)目產(chǎn)生較大影響。

三、討論

1.白細(xì)胞數(shù)目（WBC）分析。白細(xì)胞（WBC）是一種橢圓形、無色、有核的血細(xì)胞。根據(jù)動物體內(nèi)白細(xì)胞的形態(tài)、功能和來源可以把白細(xì)胞分為3類，即粒細(xì)胞（中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞）、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞3種。動物體內(nèi)白細(xì)胞的正?？倲?shù)為（4～10）×109/升，白細(xì)胞的正常生理范圍區(qū)間大，白細(xì)胞數(shù)目的變化可因每日不同時間段和動物機(jī)體的不同狀態(tài)在正常范圍內(nèi)上下浮動，可能在檢測動物體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)目時發(fā)生顯著差異，造成檢測誤差。如果動物體內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)量高于正常值，可能是因?yàn)閯游矬w內(nèi)某些部位發(fā)生了炎癥。但白細(xì)胞數(shù)目的升高并不完全是動物機(jī)體發(fā)生炎癥的表現(xiàn)，白細(xì)胞數(shù)目的升高分為生理性和病理性之分，生理性白細(xì)胞數(shù)目的提高常見于動物劇烈運(yùn)動、高生產(chǎn)勞作、氣溫過高、氣溫過低、應(yīng)激、分娩、妊娠、饑餓等都是導(dǎo)致動物機(jī)體血液中白細(xì)胞增多的重要原因。由于試驗(yàn)選取的母羊均不會產(chǎn)生生理性白細(xì)胞數(shù)目升高，所以導(dǎo)致白細(xì)胞數(shù)目升高的原因只能是病理性的白細(xì)胞數(shù)目升高，當(dāng)試驗(yàn)動物體內(nèi)的白細(xì)胞升高只能是由于陰道頻繁操作導(dǎo)致的陰道黏膜發(fā)生損傷，導(dǎo)致陰道炎癥的發(fā)生，由表1可知，5組試驗(yàn)湖羊和對照組白細(xì)胞數(shù)目無顯著差異。因此，并不會導(dǎo)致綿羊陰道炎癥的發(fā)生。

2.紅細(xì)胞數(shù)目（RBC）分析。紅細(xì)胞（RBC）是動物體內(nèi)血液中最多的一種細(xì)胞，它在動物體內(nèi)的主要生理功能是通過細(xì)胞中的血紅蛋白進(jìn)行物質(zhì)交換。動物體內(nèi)紅細(xì)胞的平均壽命約為120天，紅細(xì)胞在動物體內(nèi)都會發(fā)生新老更替，使機(jī)體內(nèi)的紅細(xì)胞保持著相對的動態(tài)平衡。紅細(xì)胞的突然減少會打破這一平衡，紅細(xì)胞的減少可能是由于多種貧血所致，大量出血、白血病、母羊產(chǎn)后等對診斷貧血有重大意義。試驗(yàn)中所有湖羊的外周血液中紅細(xì)胞數(shù)目均無明顯變化，試驗(yàn)對外周血液中的紅細(xì)胞數(shù)目影響較小。

3.血紅蛋白濃度（HGB）分析。血紅蛋白濃度是指單位體積（升）內(nèi)動物血液中所含血紅蛋白的量，血紅蛋白是一種含有色素的結(jié)合蛋白質(zhì)，是構(gòu)成紅細(xì)胞的主要成分，它能與外界的氧氣結(jié)合，在動物體內(nèi)發(fā)生氣體交換。此外，血紅蛋白還能與氧氣結(jié)合生成氧合血紅蛋白，還能與動物體內(nèi)的某種特殊物質(zhì)形成多種血紅蛋白衍生物，在臨床診斷上可用于診斷某些血液系統(tǒng)疾病，此外，在診斷貧血上有重要意義。試驗(yàn)5組和對照組在血紅蛋白濃度上差異不顯著，說明陰道頻繁操作對外周血液中血紅蛋白濃度影響很小。

4.紅細(xì)胞比容（HCT）分析。紅細(xì)胞比容（HCT）是指紅細(xì)胞在動物外周血液容積的比例。它能顯示出紅細(xì)胞與血漿在血液成分中的比例，影響血液黏稠度。紅細(xì)胞比容失衡的原因有很多，如缺水、燒傷、出血、休克、營養(yǎng)不良等均可能導(dǎo)致數(shù)量失衡。在試驗(yàn)檢驗(yàn)分析中并沒有出現(xiàn)顯著差異，試驗(yàn)對紅細(xì)胞比容并無較大影響。血小板的正常數(shù)值在血?。?00～300）×109/升。

5.血小板數(shù)目（PLT）分析。血小板占動物血液成分比例較小，在動物體內(nèi)參與重要的止血功能，血小板在動物體內(nèi)止血一共分為兩個階段，第一階段在傷處形成松軟的血栓子；第二階段形成堅(jiān)硬的血栓子。雖然在血小板數(shù)目（PLT）上，對照組和試驗(yàn)Ⅲ組與試驗(yàn)Ⅰ組有顯著差異（P＜0.05），但試驗(yàn)Ⅲ組血小板數(shù)目濃度正常，血小板的數(shù)目并未減少，動物機(jī)體并沒有大量出血，血小板并沒有參與動物機(jī)體組織的凝血，血小板數(shù)目處在一個正常范圍內(nèi)。因此，血小板的顯著性差異并不能判斷出綿羊陰道出血，發(fā)生炎癥。

通過上述數(shù)據(jù)分析能確定5項(xiàng)血液指標(biāo)試驗(yàn)組和對照組的差異不顯著，測量綿羊的陰道溫度來判斷綿羊發(fā)情雖然具有一定真實(shí)性，但僅通過人工測量綿羊體溫來判斷綿羊的發(fā)情情況遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。人為測量綿羊體溫往往在生產(chǎn)實(shí)踐中存在諸多局限性，綿羊如果頻繁走動、自身患有疾病、相互打斗等行為都會導(dǎo)致體溫升高；綿羊不會同人一樣具有較高的自主調(diào)控性，其對外界環(huán)境要求較高，且這類恒溫動物的陰道溫度變化幅度不會超過0.5℃。當(dāng)綿羊體溫發(fā)生較大變化時，極有可能是由于自身疾病、外界突發(fā)因素引發(fā)的體溫變化。試驗(yàn)的進(jìn)一步延伸應(yīng)多采用光電等設(shè)備測量綿羊陰道溫度，提升試驗(yàn)設(shè)備，用更加現(xiàn)代化的設(shè)備來測量綿羊體溫，這樣可以大大減少外界環(huán)境和自身因素對試驗(yàn)數(shù)據(jù)的影響。光電設(shè)備可以大大減輕人工的勞動強(qiáng)度，解放人工，在一定程度上保證養(yǎng)殖綿羊的經(jīng)濟(jì)效益。

五、結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，通過綿羊體溫來鑒定綿羊是否發(fā)情是可行的，可以為綿羊提高繁殖率、配懷成功率提供重要的數(shù)據(jù)支撐，為鑒定綿羊發(fā)情提供重要的科學(xué)依據(jù)。但通過先進(jìn)的設(shè)備準(zhǔn)確測量綿羊體溫還需進(jìn)一步研究，對環(huán)境因素的把控需更進(jìn)一步提升。