過程污染對食品中氯霉素檢測的 影響及預(yù)防措施

◎ 繆 璐，黎德勇，陀雄信，蒙韋玲，呂仕軍，黃 海

（廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，廣西 南寧 530200）

食品安全不僅關(guān)系著人們的身體健康和生命安全，還關(guān)系著民族的未來[1]。在“十三五”時期，農(nóng)產(chǎn)品和食品抽檢量實(shí)現(xiàn)每年4批次/千人的目標(biāo)，在“十四五”時期，穩(wěn)步實(shí)現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品和食品抽檢量每年5批次/千人目標(biāo)，其中種養(yǎng)殖環(huán)節(jié)抽檢量每年2批次/千人[2]。其中，食品檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)為日常監(jiān)督抽檢、風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐，而每個環(huán)節(jié)都存在影響結(jié)果準(zhǔn)確性的因素，如果影響因素得不到控制，則不能保證檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性，會使食品安全失去保障，威脅消費(fèi)者的身體健康，也會影響檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的聲譽(yù)。

我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號公告中將氯霉素列為禁止使用的藥物，要求在動物性食品中不得檢出。但近年來動物性食品中檢出氯霉素殘留問題卻時有發(fā)生[3]。根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中氯霉素殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB 31658.2—2021）， 氯霉素殘留量的檢出限為0.1 μg kg-1，因此對實(shí)驗(yàn)環(huán)境提出了更嚴(yán)格的要求。一旦過程污染，實(shí)驗(yàn)室容易出現(xiàn)氯霉素假陽性現(xiàn)象。如果檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)將合格樣品錯判為不合格，不僅會給食品生產(chǎn)經(jīng)營者造成一定的經(jīng)濟(jì)和聲譽(yù)損失，還可能會引起消費(fèi)者不必要的恐慌，影響人們對食品安全的信心[4]。因此，本文通過模擬實(shí)驗(yàn)研究氯霉素污染因素，提出預(yù)防措施，以期降低氯霉素假陽性的風(fēng)險(xiǎn)，提高檢驗(yàn)工作的準(zhǔn)確性。同時，為食品檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

UPLC-QTRAP5500超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國AB Sciex公司）；RKTS-23050-SNN快速溶劑蒸發(fā)儀（英國GeneVac公司）；TDL-40B離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；WM-MT多管渦旋振蕩器（廣東省科寅實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）；HS501 digital圓周振蕩搖床（德國IKA公司）；GM200刀式研磨儀（德國Retsch GmbH公司）。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)品

氯霉素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純度≥99.8%，德國Dr. Ehrenstorfer GmbH公司）；氯霉素氘代內(nèi)標(biāo)（氯霉素-D5）（純度≥94.89%，德國Dr. Ehrenstorfer GmbH公司）。

1.2 制樣器具中污染物的提取

制樣器具分別有食品級砧板（簡稱砧板）、刀和刀式研磨儀。分別用兩張無塵紙蘸取無水乙醇擦拭砧板、刀、刀式研磨儀進(jìn)行污染物收集，將擦拭后的無塵紙置于25 mL潔凈離心管中，用20 mL乙腈進(jìn)行浸泡溶解，超聲10 min，轉(zhuǎn)移出乙腈溶解液于40 ℃氮吹至近干，用2.0 mL 5%乙腈水溶液定容，渦旋混勻，過0.22 μm濾膜，上機(jī)待測。

1.3 環(huán)境中污染物的提取

樣品流轉(zhuǎn)過程中可能污染到制樣間（樣品流轉(zhuǎn)車、樣品框、丁腈手套、樣品袋、制樣員的手、制樣間操作臺面、水池和抹布）和實(shí)驗(yàn)室（前處理室操作臺面、移液槍、移液器、檢驗(yàn)員的手和抹布）。

分別用無塵紙蘸取無水乙醇擦拭污染物表面進(jìn)行污染物收集，將擦拭后的無塵紙置于25 mL潔凈比色管中，用20 mL乙腈進(jìn)行浸泡，超聲10 min，轉(zhuǎn)移出乙腈溶解液于40 ℃氮吹至近干，用2.0 mL 5%乙腈水溶液定容，渦旋混勻，過0.22 μm濾膜，上機(jī)待測。

1.4 模擬實(shí)驗(yàn)

將3組制樣所需用具、操作桌面、案板等用水清洗3次后，均用無水乙醇進(jìn)行沖洗、擦拭、晾干。第1組將大頭魚樣品制樣，正常清洗制樣工具后，制備未檢出氯霉素的豬肉；第2組將花甲樣品進(jìn)行制樣，清洗后，制備豬肉；第3組將芝麻螺樣品制樣，清洗后，制備豬肉。將6個樣品進(jìn)行檢測分析。同時，將第1次制樣清洗后的制樣器具同時按照1.2進(jìn)行采樣。

2 結(jié)果與分析

通過模擬實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果表明，第1、2組樣品在常規(guī)清洗后再制樣，并未污染到下一個樣品。雖然清洗后的制樣器具可能含有微量氯霉素，但不會導(dǎo)致樣品中氯霉素含量達(dá)到方法檢出限0.1 μg kg-1。第3組樣品污染了下一個樣品，含量為0.58 μg kg-1，高出檢出限近6倍，說明氯霉素含量高的樣品存在污染后續(xù)樣品的可能性，檢測結(jié)果見表1。同時將第1、2、 3組的第一個樣品制完，用實(shí)驗(yàn)室用水清洗3次后的制樣器具進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)第2、3組檢出了氯霉素，說明實(shí)驗(yàn)用水清洗方法未能徹底去除氯霉素，檢測結(jié)果 見表2。

表1 模擬樣品及清洗后制樣器具檢測結(jié)果表

表2 清洗后制樣器具的檢測結(jié)果表

由表3可知，制樣操作臺面、樣品框內(nèi)壁、裝含氯霉素樣品的樣品袋表面、水池和抹布等均檢出不同含量的氯霉素，說明氯霉素具有累加性，一旦污染后采用一般清潔方式不易去除。其中，制樣間操作臺面及抹布的檢測結(jié)果偏高，也可能是做模擬實(shí)驗(yàn)時用到氯霉素滴眼液，稀釋后，氯霉素含量仍有2 mg/L，導(dǎo)致制樣間受到不同程度的污染。同時說明高含量的樣品存在污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境的可能性，從而影響痕量分析的準(zhǔn)確性。

表3 環(huán)境中污染物的氯霉素提取檢測結(jié)果表

3 結(jié)論與討論

對常量分析而言，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)器具的輕微污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大。但對于微量、痕量分析來說，則會造成很大影響。食品中氯霉素的殘留檢測屬于痕量分析，方法檢出限為0.1 μg kg-1，因此對實(shí)驗(yàn)環(huán)境提出了更嚴(yán)格的要求。鑒于痕量分析對實(shí)驗(yàn)環(huán)境的要求較高，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，高含量的樣品對實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的污染可對其痕量分析產(chǎn)生干擾[5]。因此，建議食品痕量分析使用一次性實(shí)驗(yàn)器具；如果要重復(fù)使用，則應(yīng)將常量分析與痕量分析的實(shí)驗(yàn)器具嚴(yán)格分開，一旦檢出高含量的樣品，應(yīng)對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和器具進(jìn)行采樣分析，若器具和環(huán)境存在污染，除進(jìn)行針對性地清潔外，還應(yīng)對近期檢測該項(xiàng)目的樣品，重新制樣檢測，以免造成假陽性。

以氯霉素為例，通過研究過程污染影響實(shí)驗(yàn)室中痕量分析的關(guān)鍵指標(biāo)，提出預(yù)防措施，以期降低痕量分析的風(fēng)險(xiǎn)，提高檢驗(yàn)工作的準(zhǔn)確性。人員防范意識、器具清潔程度具有隨機(jī)性、隱蔽性，不容易被發(fā)現(xiàn)，對痕量分析影響較大，容易造成假陽性，將合格樣品判定為不合格，因此是影響實(shí)驗(yàn)室中痕量分析的關(guān)鍵指標(biāo)，其預(yù)防措施如下。①應(yīng)對人員進(jìn)行專項(xiàng)培訓(xùn)，加強(qiáng)防范意識，掌握制樣的基本要求和技能。②制樣器具的清洗應(yīng)做到一樣一清洗，通過研究痕量分析的特殊性，根據(jù)其性質(zhì)制定不同的清洗方案，規(guī)范制樣操作流程，以免污染其他樣品。③加強(qiáng)監(jiān)督檢查，不斷規(guī)范制樣人員的操作。

食品檢驗(yàn)是食品安全監(jiān)管鏈條中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其結(jié)果直接體現(xiàn)食品安全狀況，是監(jiān)管部門的重要執(zhí)法依據(jù)。檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)應(yīng)高度重視檢驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論的準(zhǔn)確性和科學(xué)性，在日常工作中須充分掌握影響結(jié)果判定的各個關(guān)鍵要素，增強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)意識，避免錯判誤判。