不同居群黑骨藤種子特性研究

龍金蘭， 黎前利， 楊武海， 吳 媛， 張 娜， 吳之坤

(貴州中醫(yī)藥大學(xué)， 貴陽 550025)

種子的萌發(fā)特性對后期幼苗的存活能力以及個體間的適合度都會產(chǎn)生影響，還會影響植物生活史的表達[1-5]。種子萌發(fā)率是植物種群繁殖能力的體現(xiàn)，種子萌發(fā)對物種的繁衍與生存起決定作用[6]。然而，種子萌發(fā)是一個復(fù)雜的過程，容易受內(nèi)外因素的影響，內(nèi)因包括種子自身的萌發(fā)以及解除休眠的能力，如種子大小、種子活力、成熟度等[7]，外因主要為環(huán)境條件，如光照、溫度和水分等[8-11]。

黑骨藤(PeriplocaforrestiiSchltr.)為蘿藦科(Asclepiadaceae)杠柳屬(Periploca)植物，俗稱西南杠柳，《中國植物志》稱黑龍骨[12]。黑骨藤多生長于海拔2 000 m以下的陰濕雜木林、山地灌叢中，主要分布于貴州、四川、云南、廣西等省區(qū)[12]。一般纏繞在周邊喬木、灌木或者高大的草本植物上，具有白色的乳汁，有一定的毒性。近年來，有關(guān)黑骨藤的研究主要集中在化學(xué)及藥理等方面，尤其是化學(xué)方面的研究，在種子生物學(xué)，特別是不同居群種子生物學(xué)比較方面未見詳細(xì)的研究。因此，本研究選擇不同居群黑骨藤種子作為研究對象，比較不同居群黑骨藤種子的生物學(xué)特性差異，并建立黑骨藤種子活力最佳測定方法。

1 材料與方法

1.1 材 料

野外采集9個居群(詳見表1)的黑骨藤種子，進行種子特性和萌發(fā)特性比較。在蓇葖果完全成熟剛開始開裂時采集，及時置于自然通風(fēng)處晾干后，人工剝出種子，去除種毛及雜質(zhì)，選取顆粒飽滿的種子，放4 ℃的短期種子庫中保存，為后續(xù)實驗做好準(zhǔn)備。實驗所用種子經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)鑒定教研室主任吳之坤副教授鑒定為黑骨藤種子，其憑證標(biāo)本存放于貴州中醫(yī)藥大學(xué)中藥材種植(養(yǎng)殖)及加工研究所。

表1 樣品采集信息Table 1 Collection information of samples

1.2 方 法

1.2.1種子形態(tài)觀察與測定

隨機選取不同居群的黑骨藤種子100粒，置于體式顯微鏡下觀察種子形態(tài)特征，并分別用游標(biāo)卡尺測定各居群黑骨藤種子的長徑和寬徑，拍照記錄并整理數(shù)據(jù)。

1.2.2種子百粒重測定

按《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》進行測定[13]，采用“百粒重”法，將全部已除雜的種子充分混合后，分別隨機數(shù)取不同居群的黑骨藤種子100粒，用萬分之一的分析天平稱其百粒重，3次重復(fù)，記錄數(shù)據(jù)。

1.2.3種子吸水率測定

稱取不同居群的黑骨藤種子1.0 g，分別置于裝有蒸餾水的燒杯中，室溫下浸泡吸水，每間隔2 h取出種子，用吸水紙吸干種子表面的水分后稱量，重復(fù)如上操作，直至連續(xù)兩次稱量的差異不超過0.03 g為止，平行操作3次。

1.2.4種子活力測定

1) 磷酸緩沖溶液的配制：按2∶3的比例將溶液甲與溶液乙進行混合(溶液甲：9.078 g KH2PO4溶于1 000 mL的純化水所得；溶液乙：9.472 g Na2HPO4溶于1 000 mL純化水中所得)即可。

2) TTC溶液的配制[14]：稱取0.1 g C19H15ClN4溶于100 mL磷酸緩沖液中，配制成0.1% TTC溶液，按此法分別配制0.2%、0.3%、0.5%、0.7%、1.0%、1.5%、2.0% TTC溶液，置于棕色瓶中，于冰箱4 ℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

3) 種子染色與觀察：將黑骨藤種子置于培養(yǎng)皿中，加入無菌水于25 ℃的恒溫箱內(nèi)浸泡24 h；取出浸泡后的種子，用濾紙吸干表面的水分，用解剖刀將種子沿種毛脫落處縱切，挑出胚，以不損傷胚為佳，選取胚保留好的一半種胚，放在裝有TTC溶液的培養(yǎng)皿內(nèi)，用錫箔紙包裹培養(yǎng)皿，將培養(yǎng)皿置于恒溫箱內(nèi)避光染色。染色結(jié)束，取出培養(yǎng)皿，傾倒出TTC染色液，并用無菌水沖洗3次種胚，再用濾紙吸干種胚表面的水分，觀察種胚的染色情況及染色效果，記錄數(shù)據(jù)并拍照(具有活力的種子胚和胚乳會被染成紅色[15])。

1.2.5種子活力測定單因素考察

隨機選取香紙溝黑骨藤種子，分別設(shè)置不同TTC溶液濃度(0.2%、0.3%、0.5%、0.7%、1.0%、1.5%、2.0%)、不同染色時間(1、2、4、8、12、16 h)、不同染色溫度(20、25、30、35、40、50 ℃)按1.2.4方法進行染色實驗，每個處理3組重復(fù)，每組30粒種子。統(tǒng)計并分析種子的染色情況，篩選種子活力測定條件。

1.2.6不同居群黑骨藤種子活力測定

隨機選取不同居群的飽滿黑骨藤種子各90粒，以最佳的種子活力測定條件進行染色實驗，統(tǒng)計并分析種子的染色情況。

1.2.7不同居群黑骨藤種子萌發(fā)實驗

將不同居群的黑骨藤種子以5.0%次氯酸鈉浸泡消毒8 min后，分別置于鋪有濕潤脫脂棉，光照16 h/黑暗8 h，25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)，觀察種子的萌發(fā)情況。萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)以胚根突破種皮1 mm以上視為萌發(fā)，以連續(xù)3 d萌發(fā)數(shù)不再增加即停止實驗，記錄數(shù)據(jù)并計算發(fā)芽勢和萌發(fā)率等，3個重復(fù)，每個重復(fù)30 粒，比較在相同萌發(fā)條件下，不同居群的黑骨藤種子的萌發(fā)差異。

1.3 指標(biāo)測定

吸水率(%)[16]=(種子吸水t時間后的重量/種子未吸水前的重量)×100%;

染色率(%)=(被染種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%；

發(fā)芽勢(%)=(發(fā)芽高峰期發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%；

萌發(fā)率(%)=(試驗結(jié)束后萌發(fā)種子的總粒數(shù)/供試種子總數(shù))×100%；

發(fā)芽指數(shù)[17-18]=∑(Gt/Dt),Gt為在第t天發(fā)芽的種子數(shù)，Dt為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)；

萌發(fā)時滯[19]：從萌發(fā)試驗開始到第1粒種子開始萌發(fā)所需要的天數(shù)；

萌發(fā)歷期[20]：從萌發(fā)試驗開始到結(jié)束萌發(fā)需要的天數(shù)(結(jié)束萌發(fā)即以萌發(fā)數(shù)不再增加的第1天為計)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用 Microsoft Excel 軟件進行統(tǒng)計，用SPSS 23.0 軟件進行單因素方差分析，比較不同處理之間的差異性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同居群黑骨藤種子形態(tài)觀察

成熟度判斷，成熟的黑骨藤種子外觀飽滿且有光澤，未成熟的種子干癟，易斷。通過水試，成熟的種子沉于水下，未成熟的種子則是浮于水面。以手掐試，成熟的種子手掐不折，未成熟的種子則輕掐即斷。

黑骨藤果實為蓇葖果雙生。種子呈不規(guī)則紡錘形，由種皮和胚組成，屬雙子葉無胚乳種子；種皮堅硬，表面無毛，粗糙不光滑，具光澤；頂端具白色絹質(zhì)種毛，顏色多數(shù)呈褐色或棕色；具不規(guī)則的突起，溝壑明顯，且大多為3～4條，頂端狹尖；子葉和胚根白色，子葉2片，對稱。不同居群黑骨藤種子僅顏色和大小有差別，外觀形態(tài)變異穩(wěn)定。詳見圖1。

注：A為黑骨藤果實(蓇葖雙懸果)；B為黑骨藤種子(a為種子，b為種毛)；C為開陽縣；D為惠水縣；E為務(wù)川縣；F為貴中醫(yī)資源圃；G為黔陶鄉(xiāng)；H為納雍縣；I為烏當(dāng)區(qū)；J為六枝特區(qū)；K為西秀區(qū)。圖1 黑骨藤種子形態(tài)Fig.1 Seeds morphology of P. forrestii

由表2可看出，不同居群的黑骨藤種子的長徑和寬徑均有極顯著差異，種子長徑均值為12.241 2 mm，變化范圍在10.89～13.60 mm之間，組間差異極顯著；種子寬徑均值為2.213 6 mm，變化范圍在1.98～2.44 mm之間，組間差異極顯著。種子長徑表現(xiàn)為：H 1>H 5>H 3>H 6>H 7>H 8>H 2>H 4>H 9；種子寬徑表現(xiàn)為：H 3>H 9>H 2=H 5>H 4>H 8>H 6=H 7>H 1。

表2 不同居群黑骨藤種子大小測定結(jié)果Table 2 Test results for P. forrest from different populations

H 1的黑骨藤種子最長，平均值在13 mm以上，其種子長徑除與H 5種子的無顯著差異外，與其余7個居群的長徑差異均達極顯著性。H 3的種子整體外觀相對較大，而H 5的次之。

2.2 不同居群黑骨藤種子特性測定結(jié)果

由表3可知，吸水率在70%以上的有H 4、H 5、H 7 和H 9共4個居群；吸水率在60%～70%之間的有H 1、H 6和H 8共3個居群，吸水率在50%～60%之間的有H 2和H 3兩個居群，組間差異顯著。不同居群吸水率依次為：H 5>H 4>H 7>H 9>H 8>H 1>H 6>H 2>H 3。由此可知，生長環(huán)境的不同，種子的吸水能力也有所差異。

表3 不同居群黑骨藤種子百粒重、吸水率、染色率測定結(jié)果Table 3 Test results for 100-grain weight,water absorption rate and dyeing rate of P. forrestii from different populations

由表4可知，黑骨藤種子百粒重均值為1.791 0 g，變化范圍為1.625 9～2.016 2 g，各居群的組間差異均達顯著水平。H 1的種子百粒重最高(2.016 2 g)，說明H 1的黑骨藤種子飽滿度最好，且除與H 6的百粒重差異不顯著外，與其他7個居群間的百粒重均具極顯著差異。不同居群黑骨藤種子百粒重依次為：H 1>H 6>H 3>H 9>H 5>H 2>H 8>H 7>H 4。

表4 黑骨藤種子百粒重、吸水率及種子活力描述統(tǒng)計分析結(jié)果Table 4 Analysis results with descriptive stastics of 100-grain weight,water absorption rate and seed vigor of P. forrestii seeds

2.3 不同染色條件對黑骨藤種子染色的影響

2.3.1不同TTC染色濃度對黑骨藤種子染色的影響

由圖2 A可知，在不同濃度TTC溶液處理下，隨著濃度的升高，黑骨藤種子的染色率呈先升后降的趨勢。TTC濃度達到1.0%時，染色率最高(95.56%)，與0.7% TTC濃度無顯著差異，與2.0% TTC濃度差異極顯著外，與0.2%、0.3%、0.5%、1.5%均具有顯著差異。故而選擇1.0%TTC濃度進行后期的黑骨藤種子染色實驗。

2.3.2不同染色時間對黑骨藤種子染色的影響

由圖2 B可知，在不同染色時間處理下，隨著染色時間的增加，黑骨藤種子的染色率呈先升后降的趨勢。在染色時間為8 h時，染色率達最高(98.89%)，隨著染色時間增加，染色率反而降低。經(jīng)SPSS 23.0軟件進行兩兩比較，除與染色4 h差異不顯著外，與染色1 h、2 h、12 h、16 h的差異均達極顯著。故而選擇8 h作為黑骨藤種子的最佳染色時間，繼續(xù)后續(xù)的種子染色實驗。

2.3.3不同染色溫度對黑骨藤種子染色的影響

由圖2 C可知，在不同染色溫度處理下，隨著染色溫度的升高，黑骨藤種子的染色率呈先升后降的趨勢。在25 ℃時，染色率達最高(95.56%)，之后，隨著溫度的升高，染色率逐漸降低，與20 ℃差異不顯著外，與30 ℃、35 ℃均達顯著差異，而與40 ℃、50 ℃具有極顯著差異。故而選擇25 ℃作為最佳的種子染色溫度，進行后續(xù)的染色實驗。

圖2 不同染色條件處理下染色率變化Fig.2 The dyeing rate changes under different dyeing conditions

2.4 不同居群黑骨藤種子的染色率差異

由表3可知，染色率在90%以上的居群有8個，其中H 5、H 6、H 9等3個居群的黑骨藤種子活力高達100.00%，染色率低于90%的居群僅有H 8。H 8的種子活力最低，與H 2差異顯著，與H 1、H 3、H 5、H 9等6個居群均具有極顯著差異。不同居群的黑骨藤種子的染色率之間雖存在一定的差異性，但都具有較高的活力，均達85%以上。

不同居群的黑骨藤種子均具有活力，且活力值都較高。除用染色法進行檢測外，還結(jié)合萌發(fā)實驗對不同居群的黑骨藤種子進行種子活力檢測，比較其萌發(fā)差異。

2.5 不同居群黑骨藤種子萌發(fā)特性的差異

2.5.1不同居群黑骨藤種子發(fā)芽勢的差異

不同居群黑骨藤種子在萌發(fā)過程中存在一定差異，H 7在第1天就開始萌發(fā)，H 6第4天開始萌發(fā)，H 2、H 4、H 5、H 8、H 9均在第5天開始萌發(fā)，H 1、H 3在第6天開始萌發(fā)。

由表5可知，發(fā)芽勢在80%以上的居群僅有H 3，與H 7不具顯著差異外；與H 1、H 4、H 5、H 7等4個居群之間差異極顯著；與H 2、H 4之間的發(fā)芽勢差異顯著。發(fā)芽勢在70%～80%之間的居群有H 2、H 6、H 8和H 9，4個居群與各居群間的組間差異極顯著；發(fā)芽勢在60%～70%之間的居群僅有H 1，與H 3、H 6、H 8、H 9四個居群之間的發(fā)芽勢均具有極顯著性差異；與H 2、H 4具有顯著性差異。發(fā)芽勢在60%以下的居群有H 4、H 5和H 7。發(fā)芽勢表現(xiàn)為H 3>H 9>H 6>H 8>H 2>H 1>H 7>H 5>H 4。

2.5.2不同居群黑骨藤種子萌發(fā)率的差異

由表5可知，萌發(fā)率在90%以上(不含90%)的居群有H 3、H 6、H 8和H 9，組間差異極顯著；萌發(fā)率在80%～90%之間的居群有H 1、H 2、H 4、H 5，組間差異顯著。萌發(fā)率在80%以下的居群僅有H 7。不同居群萌發(fā)率表現(xiàn)為：H 9>H 3>H 6>H 8>H 2>H 1、H 4>H 5>H 7。除H 5外，H 7與其他居群萌發(fā)率差異均達顯著水平。

2.5.3不同居群黑骨藤種子發(fā)霉率的差異

由表5可知，H 1的黑骨藤種子發(fā)霉率最高(5.56%)，其次是H 7(4.44%)、H 6(2.22%)，而H 2、H 3、H 4、H 5、H 8和H 9等6個居群的黑骨藤種子發(fā)霉率均為0，不同居群間的發(fā)霉率也存在一定差異。

2.5.4不同居群黑骨藤種子發(fā)芽指數(shù)的差異

由表5可知，發(fā)芽指數(shù)在22以上的居群有H 3、H 9；發(fā)芽指數(shù)在20～22之間的居群有H 6、H 8；發(fā)芽指數(shù)在18～20之間的居群有H 1、H 2、H 7；發(fā)芽指數(shù)在16～18之間的居群有H 4、H 5，各居群間的組間差異顯著。發(fā)芽指數(shù)表現(xiàn)為：H 9>H 3>H 6>H 8>H 2>H 7>H 1>H 4>H 5。

2.5.5不同居群黑骨藤種子萌發(fā)時滯和萌發(fā)歷期的差異

由表5可知，H 7的萌發(fā)時滯最短(3.67 d)，而H 1和H 5的最長(6.33 d)；H 6的萌發(fā)歷期最短(13.67 d)，而H 2、H 7萌發(fā)歷期最長(14.67 d)。

表5 不同居群黑骨藤種子萌發(fā)特性的差異Table 5 Seed germination characteristics of P. forrestii among different populations

不同居群黑骨藤種子在萌發(fā)過程中，萌發(fā)時滯和萌發(fā)歷期有差異，H 7第1天便開始萌發(fā)，H 6第4天萌發(fā)，而H 2、H 4、H 5、H 8、H 9均在第5天萌發(fā)，H 1與H 3第6天開始萌發(fā)，萌發(fā)最晚。但不同居群均在第14、15天萌發(fā)數(shù)不再增加，萌發(fā)結(jié)束。

2.6 不同居群黑骨藤種子萌發(fā)特性相關(guān)性分析

由表6可知，種子長徑與寬徑呈顯著負(fù)相關(guān)，與萌發(fā)時滯呈顯著正相關(guān)；寬徑與吸水率呈顯著負(fù)相關(guān)，與發(fā)霉率呈顯著負(fù)相關(guān)。

表6 不同居群黑骨藤種子特性相關(guān)性分析Table 6 Seed characteristics correlation analysis of P. forrestii among different populations

百粒重與種子活力呈顯著正相關(guān)，與發(fā)芽勢也呈顯著正相關(guān)，與發(fā)霉率呈顯著正相關(guān)，與吸水率、海拔和萌發(fā)歷期之間呈負(fù)相關(guān)，與種子活力、萌發(fā)率、發(fā)芽指數(shù)、萌發(fā)時滯呈正相關(guān)，但關(guān)系均不顯著。

吸水率與萌發(fā)率呈顯著負(fù)相關(guān)，與發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)均呈極顯著負(fù)相關(guān)，而與種子活力、海拔、發(fā)霉率之間呈正相關(guān)，與萌發(fā)時滯、萌發(fā)歷期之間呈負(fù)相關(guān)，且關(guān)系均不顯著。

發(fā)芽勢與萌發(fā)率、發(fā)芽指數(shù)之間均呈極顯著正相關(guān)；萌發(fā)率與發(fā)芽指數(shù)呈極顯著正相關(guān)，與萌發(fā)時滯呈顯著正相關(guān)，與發(fā)霉率呈顯著負(fù)相關(guān)。

3 結(jié)論與討論

3.1 不同居群黑骨藤種子形態(tài)特征

黑骨藤種子頂端具白色絹毛，種皮堅硬，表面粗糙具光澤，有深淺不同的溝壑。種子呈不規(guī)則紡錘形，具3～4條明顯溝壑。種子的長寬略有差異，其中H 3的種子整體最大，其次是H 5，種子最小的是H 4。

種子質(zhì)量是藥材產(chǎn)量和品質(zhì)的重要前提和基礎(chǔ)，而種子大小、百粒重、萌發(fā)率等是檢測種子質(zhì)量的重要指標(biāo)[19]。種子大小對種子的萌發(fā)、傳播及幼苗成長等均有一定影響。一方面，種子大小是植物生活史的重要特征之一，既受遺傳控制，也受環(huán)境影響。如隨著生境破碎化的加劇，伊犁郁金香的種子體積變小，質(zhì)量變輕[21]。而另一方面，種子大小對幼苗的存活和生存競爭力也有影響。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，大種子在逆境條件下通過產(chǎn)生較大的幼苗來提高其競爭能力，而小種子形成的幼苗較小，死亡率高[22]，但是較小的種子在逃避動物采食等方面具有優(yōu)勢[23]。百粒重是影響種子萌發(fā)率的一個重要因素，百粒重越重，說明種子越飽滿，也說明種子具有活力，具有萌發(fā)潛力。不同居群的種子由于生長環(huán)境的不同，其百粒重存在一定差異性。本研究中，種子大小與百粒重關(guān)系不顯著，H 1的黑骨藤種子雖不是最大，但其百粒重最高，為(2.016 2±0.013 2)g，說明H 1的種子較飽滿。本研究中不同居群的黑骨藤種子間百粒重存在一定的差異性，同時，百粒重與海拔高度呈不顯著負(fù)相關(guān)，造成差異的原因可能跟所生長地理環(huán)境或遺傳變異有關(guān)，具體差異機制還需進一步驗證。

3.2 不同居群黑骨藤種子吸水率特性

種子萌發(fā)是植物生長的開端，種子吸水又是種子萌發(fā)的重要條件之一。種子萌發(fā)吸水是一個動態(tài)的過程，是種子由休眠狀態(tài)到生活狀態(tài)的轉(zhuǎn)變過程[20]。種子萌發(fā)需要吸收一定的水分，測定吸水率可檢測種子吸水是否受種皮的阻礙影響，吸水障礙會對種子的萌發(fā)產(chǎn)生一定的影響。在外界條件滿足生長需求時，種子能否達到其吸水飽和點對其萌發(fā)至關(guān)重要，這對幼苗的成功定植和環(huán)境適應(yīng)具有重要的生態(tài)學(xué)意義[24]。黑骨藤種子種皮雖堅硬，但對種子吸水的阻礙不大，其種子在0～6 h吸水量大而迅速，此過程主要是靠吸脹作用完成，而后吸水量較慢，趨于平緩，吸水達到飽和后，吸水量不再變化。不同居群的黑骨藤種子在吸水飽和后，H 5的黑骨藤種子吸水率最高，為(83.646 4±1.786 4)%，而H 3的吸水率最低，為(56.615 4±0.616 0)%。不同居群黑骨藤種子的吸水率與種子形態(tài)沒有明顯的規(guī)律性，造成不同居群吸水率差異的原因可能與種子的生長環(huán)境差異有關(guān)，具體原因還需進一步驗證。

3.3 黑骨藤種子活力測定

活力測定是檢測種子質(zhì)量最直接，也是最快捷的方式。TTC法檢測種子生活力是一種能快速判斷種子萌發(fā)潛力和質(zhì)量的有效方法[25]，目前，已廣泛應(yīng)用于許多藥用植物的活力檢測中，但不同植物采用的TTC條件會有所不同。本研究采用該法測定黑骨藤種子活力，首先對TTC濃度、染色時間和染色溫度進行了單因素考察，建立了黑骨藤種子活力測定最佳的染色條件，即染色濃度1.0%、染色溫度25 ℃、染色時間8 h，然后以此條件對不同居群的黑骨藤種子進行活力測定，結(jié)果表明，不同居群的種子活力無明顯差異，種子均具較高活力。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，百粒重與種子活力呈顯著正相關(guān)。

3.4 不同居群黑骨藤種子萌發(fā)特性

除測定種子活力外，還可通過種子萌發(fā)來判斷種子萌發(fā)潛力和種子質(zhì)量，只是此過程相對于活力測定歷時較長，往往需要幾天，甚至幾個月。本研究黑骨藤種子萌發(fā)的結(jié)果與活力測定結(jié)果一致，通過萌發(fā)結(jié)果可知，不同居群的黑骨藤種子均具有萌發(fā)活力，但不同居群間的萌發(fā)率存在顯著差異，以H 7居群的萌發(fā)率最低(76.67%)，H 9的最高(98.89%)，這兩居群間的萌發(fā)率差異最大，其余各居群間均有一定程度的差異性。造成種子萌發(fā)率差異的原因很多，生長的地理環(huán)境、海拔高度、土壤、光照、溫度、濕度(水分)、遮陰程度等，甚至是伴生植物也會對其造成一定的影響。此外，種子百粒重和種子大小也是影響種子萌發(fā)率的重要因素。由實驗結(jié)果可知，種子百粒重與種子活力、發(fā)芽勢、萌發(fā)率均呈正相關(guān)，即百粒重越大，種子活力越高，發(fā)芽勢和萌發(fā)率也就越高；種子活力與發(fā)芽勢、萌發(fā)率呈負(fù)相關(guān)，種子活力高，發(fā)芽勢和萌發(fā)率不一定高，這也與實驗結(jié)果一致，H 7活力高達98%，但種子萌發(fā)率最低(76.67%)，且發(fā)芽勢也不高(55.56%)。本研究中，黑骨藤種子的吸水率與萌發(fā)率具顯著負(fù)相關(guān)。石福高、王渭玲[26]對桔梗種子的吸水特性及萌發(fā)條件的研究結(jié)果表明，適量的水分供應(yīng)是種子萌發(fā)的必要條件，但水分供應(yīng)過多，會造成桔梗種子發(fā)霉，從而降低種子的萌發(fā)率。本研究結(jié)果與之一致，黑骨藤種子吸水率與發(fā)霉率呈正相關(guān)，表明水分?jǐn)z入過多會造成種子霉變；而黑骨藤種子發(fā)霉率與萌發(fā)率呈顯著負(fù)相關(guān)，表明吸水率通過影響種子的霉變，進而影響黑骨藤種子的萌發(fā)率。研究表明，發(fā)芽勢的高低，可以衡量種子萌發(fā)率的高低[27-30]。本研究結(jié)果表明，黑骨藤種子的發(fā)芽勢與萌發(fā)率呈極顯著正相關(guān)，所以在判斷種子的萌發(fā)潛力時，發(fā)芽勢也可作為衡量的指標(biāo)之一。本研究結(jié)果表明，黑骨藤種子發(fā)芽指數(shù)與萌發(fā)率極顯著正相關(guān)，這與朱瑩等[31]的研究結(jié)果一致，H 9發(fā)芽指數(shù)最高(22.36)，其萌發(fā)率最高(98.89%)。

4 總結(jié)與展望

在自然狀態(tài)下萌發(fā)的種子，除受溫度、光照、水分等的影響，還受土壤鹽分、埋藏深度、土壤微生物等環(huán)境因子的影響[32]。黑骨藤為多年生木質(zhì)藤本植物，攀附生長在灌木及小喬木上，其在不同生態(tài)環(huán)境中均有分布。研究表明，不同居群的黑骨藤種子在種子特性及萌發(fā)特性方面均存在一定程度上的差異，其原因可能與種子自身條件、生長環(huán)境(海拔、經(jīng)緯度、土壤、濕度、伴生植物等)、氣候條件(陽光、溫度、光照、降水量等)有關(guān)，綜合各項指標(biāo)分析，黔產(chǎn)黑骨藤以務(wù)川縣(H 3)和西秀區(qū)(H 9)兩個居群的黑骨藤種子萌發(fā)潛力大、且萌發(fā)率高，可作為育苗優(yōu)質(zhì)的種源。但關(guān)于土壤因子、氣候因子等對不同居群黑骨藤種子的影響本研究未涉及，也是今后研究的方向。以期為篩選黑骨藤優(yōu)質(zhì)種源及種子育苗的相關(guān)研究提供理論和技術(shù)參考。