不同激素對(duì)山韭種子萌發(fā)特性的影響

李韋瑤， 肖匯川， 張碧瑩， 李 杰， 蘇瀅淼， 崔國(guó)文， 秦立剛

(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 黑龍江 哈爾濱 150030；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院， 黑龍江 哈爾濱 150030)

山韭(AlliumsenescensL.)為百合科(Liliaceae)蔥屬(AlliumL.)多年生草本植物，別稱山蔥、巖蔥、忙給日[1-2]，主要分布于海拔2 030 m以下的草原、草甸或山坡上,在我國(guó)東北、華北、內(nèi)蒙古、甘肅、新疆均有分布，中亞、西伯利亞、俄羅斯及蒙古等地也較為常見[3-4]。山韭的經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，具有食用、藥用、飼用和觀賞等價(jià)值[5]。山韭嫩葉可作蔬菜食用[6]，在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期和結(jié)實(shí)期，花莖、嫩葉和花均可食用，同時(shí)具有飼用價(jià)值、藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值。各生育期山韭均含有較高的蛋白質(zhì)，是肥育家畜的優(yōu)等牧草，各種家畜均喜食；葉子曬制后可用于冬春季節(jié)補(bǔ)喂羔羊和弱畜。山韭全草可入藥，味咸、性平，具有健脾開胃、益腎補(bǔ)虛的功效，主治脾胃氣虛、飲食減少、腎虛不固、小便頻數(shù)等癥狀[7]。山韭花序半球形，花淡紅色或紫紅色，有很高的觀賞價(jià)值[8-9]。

外源激素法是揭示種子休眠和萌發(fā)的激素調(diào)控機(jī)理的重要研究方法，已被廣泛應(yīng)用于種子萌發(fā)特性研究，使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑浸種可以打破種子休眠，破壞妨礙種子萌發(fā)的活性物質(zhì)，從而促進(jìn)種子胚的發(fā)育和種子發(fā)芽[10]。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑作為重要的內(nèi)源激素，在植物的生長(zhǎng)中發(fā)揮著重要作用。在已發(fā)現(xiàn)的多種外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑中，其不同濃度施用在不同部位作用不同[11,12]。萘乙酸(Naphthalene acetic acid,NAA)可以促進(jìn)細(xì)胞分裂和組織分化，誘導(dǎo)形成不定根。也能影響細(xì)胞分裂、細(xì)胞伸長(zhǎng)和分化，促進(jìn)種子發(fā)芽和不定根、側(cè)芽的形成[13]。使用適量的乙烯利(Ethrel,ETH)能活化細(xì)胞的某種酶，促使細(xì)胞分裂，使種子萌發(fā)，過量的ETH則會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)[14]。崔雪艷，李永軍[15]研究表明，適宜濃度的ETH浸種可以顯著提高花生種子的萌發(fā)。袁芳等[16]研究指出，一定濃度的IAA浸種對(duì)喜馬拉雅紫茉莉種子的萌發(fā)有促進(jìn)作用。蘭琳英等[17]研究發(fā)現(xiàn)，NAA和IAA浸種對(duì)海州常山種子萌發(fā)均有促進(jìn)作用。鑒于此，為尋求可提高山韭種子發(fā)芽的外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其適宜浸種濃度，研究了IAA、NAA和ETH等3種外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)山韭種子萌發(fā)的影響，以期為山韭種子萌發(fā)機(jī)理研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試種子由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)草學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。試驗(yàn)所用NAA、IAA購于博奧拓達(dá)公司，ETH為阿拉丁公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)設(shè)置6個(gè)不同濃度的NAA、IAA和ETH處理(見表1)。挑選大小均一且飽滿的山韭種子，經(jīng)0.5%次氯酸鈉溶液滅菌后，用無菌水反復(fù)沖洗5遍，再置于不同處理溶液中浸泡24 h，取出后再用蒸餾水清洗數(shù)次，用濾紙吸干種子表面水分。放入墊有2層濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)發(fā)芽，培養(yǎng)箱光周期為光照12 h/黑暗12 h，溫度為25 ℃。每處理100粒種子，重復(fù)3次。

表1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的處理濃度Table 1 Treatments for concentrations of plant growth regulators

1.3 測(cè)定方法

1.3.1萌發(fā)指標(biāo)

每隔24 h觀察并記錄發(fā)芽種子數(shù)，以幼芽達(dá)到種子長(zhǎng)度一半、根長(zhǎng)與種子等長(zhǎng)作為發(fā)芽指標(biāo)。種子萌發(fā)試驗(yàn)持續(xù)15 d，在第7天統(tǒng)計(jì)山韭種子的發(fā)芽勢(shì)，在第15天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)和苗干重，并計(jì)算活力指數(shù)。

發(fā)芽勢(shì)(%)=(7 d內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%；

發(fā)芽率(%)=(15 d內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%；

發(fā)芽指數(shù)(GI)=∑(Gt/Dt)；

活力指數(shù)=GI×S；

式中，Dt表示t日的發(fā)芽數(shù)，Gt表示相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)，S為發(fā)芽結(jié)束時(shí)單株芽的平均干質(zhì)量。

1.3.2根、芽長(zhǎng)度及干重

15 d發(fā)芽結(jié)束后，將幼苗用蒸餾水沖洗干凈，用濾紙吸干表面水分。每處理隨機(jī)取10株測(cè)量株高、根長(zhǎng)和干重。

1.3.3生理指標(biāo)的測(cè)定

分別取IAA、ETH和NAA處理后發(fā)芽表現(xiàn)最好的山韭幼苗葉片，進(jìn)行生理指標(biāo)測(cè)定。生理指標(biāo)包括：可溶性蛋白、可溶性糖、淀粉酶、脂肪酶和中性蛋白酶，均采用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定。IAA、脫落酸(Abscisic Acid,ABA)、赤霉素(Gibberellins,GA3)和ETH的測(cè)定采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司試劑盒進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及圖表制作采用Microsoft Office Excel2010軟件，采用IBM SPSS Statistics 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行顯著性方差分析并進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)(Duncan)，主成分分析及相關(guān)性分析采用Origin 2021軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 IAA、ETH和NAA處理對(duì)山韭種子發(fā)芽的影響

由表2可知，與ck相比，IAA處理顯著提高了山韭種子的發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)，當(dāng)IAA濃度為100 mg/L時(shí)，活力指數(shù)達(dá)到最大值(1 199.92)；當(dāng)IAA濃度增加到250 mg/L時(shí)山韭種子的發(fā)芽指數(shù)達(dá)到最大值(29.85)。100～250 mg/L的IAA處理顯著提高了山韭種子的發(fā)芽勢(shì)，在IAA濃度為200 mg/L時(shí)，發(fā)芽勢(shì)達(dá)到最大值(26.67%)；但當(dāng)IAA濃度增加到300 mg/L時(shí)，山韭種子的發(fā)芽勢(shì)降低，為6.00%。IAA處理下的發(fā)芽率雖沒有顯著變化，但與ck相比，也稍有提升，在IAA濃度達(dá)到100 mg/L時(shí)發(fā)芽率達(dá)到最高值(83.33%)。

表2 IAA處理對(duì)山韭種子發(fā)芽的影響Table 2 Effects of IAA treatments on seed germination of Allium senescens L.

由表3可知，與ck相比，ETH處理顯著提高了山韭種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)。50、75 mg/L的ETH處理顯著提高了山韭種子的發(fā)芽率。ETH處理下，山韭種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)均呈先升后降的趨勢(shì)。當(dāng)ETH濃度增加到50 mg/L時(shí)，發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率均達(dá)到最大值，分別為68.00%和84.00%，而當(dāng)ETH濃度增加到75 mg/L時(shí)，發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)也均達(dá)到最高值，分別為54.39、2 574.27。但在25 mg/L和100～125 mg/L ETH的處理下，山韭種子的發(fā)芽率則顯著低于ck。說明只有適宜濃度的ETH才有助于促進(jìn)山韭種子的萌發(fā)。

表3 ETH處理對(duì)山韭種子發(fā)芽的影響Table 3 Effects of ETH treatments on seed germination of Allium senescens L.

由表4可以看出，與ck相比，NAA處理顯著降低了山韭種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)，且在NAA濃度800 mg/L時(shí)降到最低值,分別為0、7.66和80.88。發(fā)芽率在200 mg/L NAA處理下有所升高，為75.33%，但不顯著，與ck相比僅提高了2.00%。100 mg/L NAA處理下山韭種子發(fā)芽勢(shì)降為0，當(dāng)NAA濃度增加到200 mg/L，發(fā)芽指數(shù)達(dá)到最大值，為13.89，仍比ck低3.72。當(dāng)NAA濃度為800 mg/L時(shí)，活力指數(shù)降到最低值(80.88)，與ck相比，降低了515.86。說明NAA處理對(duì)山韭種子的萌發(fā)有抑制作用。

表4 NAA處理對(duì)山韭種子發(fā)芽的影響Table 4 Effects of NAA treatments on seed germination of Allium senescens L.

2.2 IAA、ETH和NAA處理對(duì)山韭幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響

由圖1可見，與ck相比，IAA處理顯著增高山韭幼苗的芽根長(zhǎng)和芽根重。由圖1 A可知，山韭幼苗的芽長(zhǎng)和根長(zhǎng)均在IAA濃度為100 mg/L時(shí)達(dá)到最高，分別為43.00 mm和22.00 mm。但當(dāng)IAA濃度超過100 mg/L后，山韭幼苗的芽長(zhǎng)和根長(zhǎng)則呈下降趨勢(shì)，250 mg/L時(shí)，芽長(zhǎng)最低，為31.67 mm；根長(zhǎng)則在IAA濃度300 mg/L時(shí)最低，為3.33 mm，且顯著低于ck。IAA處理下山韭幼苗的芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)則呈上升趨勢(shì)，且當(dāng)IAA濃度為300 mg/L時(shí)顯著高于ck，為13.02。由圖1 B可知，山韭幼苗的芽重、根重均在IAA濃度200 mg/L時(shí)達(dá)到最大值，分別為0.021 0 g和0.006 0 g。山韭幼苗的芽重在IAA濃度為250 mg/L時(shí)達(dá)到最低，為0.011 4 g；根重則在IAA濃度為300 mg/L時(shí)達(dá)到最低(0.000 5 g)，且顯著低于ck。IAA處理下，山韭幼苗芽重/根重則總體呈上升趨勢(shì)，當(dāng)IAA濃度為300 mg/L時(shí)顯著高于ck，為32.75。

注：同一指標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)。下同。圖1 IAA處理對(duì)山韭幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響Fig.1 Effects of IAA treatments on morphological of Allium senescens L. seedlings

由圖2可見，與ck相比，低濃度的ETH處理下山韭幼苗的芽根長(zhǎng)和芽根重顯著提高。由圖2 A可知，山韭幼苗的芽長(zhǎng)在ETH濃度為100 mg/L時(shí)達(dá)到最高，為51.00 mm。但當(dāng)ETH濃度為125 mg/L時(shí)，芽長(zhǎng)則降到最低，為33.67 mm。山韭幼苗根長(zhǎng)則在ETH濃度增加到75 mg/L時(shí)達(dá)到最高，為31.33 mm。山韭幼苗的芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)則在ETH處理下呈先下降后上升的趨勢(shì)，當(dāng)ETH濃度增加到125 mg/L時(shí)顯著高于ck，為8.77。由圖2 B可知，山韭幼苗的芽重和根重均呈先上升后下降的趨勢(shì)，ETH濃度為100 mg/L時(shí)，山韭幼苗芽重達(dá)到最大值，為0.017 5 g。山韭幼苗的根重則在ETH濃度為75 mg/L時(shí)達(dá)到最高，為0.004 6 g；125 mg/L時(shí)最低，為0.000 7 g。在ETH處理下的山韭幼苗芽重/根重則總體呈上升趨勢(shì)，當(dāng)IAA濃度為125 mg/L時(shí)顯著高于ck，為16.94。

圖2 ETH處理對(duì)山韭幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響Fig.2 Effects of ETH treatments on morphological of Allium senescens L. seedlings

由圖3可見，與ck相比，NAA處理下的山韭芽根長(zhǎng)與芽根重總體均呈下降趨勢(shì)。由圖3 A可知，隨著NAA濃度的增加，山韭幼苗芽長(zhǎng)和根長(zhǎng)均顯著下降。山韭幼苗芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)則呈先升后降的趨勢(shì)，在NAA濃度為200 mg/L時(shí)，芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)達(dá)到最大值(15.38)，且顯著高于ck。由圖3 B可知，隨著NAA濃度增加，山韭幼苗的根重呈下降趨勢(shì)，而芽重僅在NAA濃度為50 mg/L時(shí)稍有上升，之后隨NAA濃度的增加顯著下降。山韭幼苗芽重/根重隨NAA濃度的增加呈先升后降的趨勢(shì)，當(dāng)NAA濃度為200 mg/L時(shí)達(dá)到最高(23.47)，且顯著高于ck。

圖3 NAA處理對(duì)山韭幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響Fig.3 Effects of NAA treatments on morphological of Allium senescens L. seedlings

2.3 IAA、ETH和NAA處理對(duì)山韭幼苗生理指標(biāo)的影響

由圖4可見，與ck相比，100 mg/L IAA、50 mg/L ETH和200 mg/L NAA處理下的山韭幼苗可溶性蛋白和可溶性糖含量顯著增加，其中50 mg/L ETH處理下的可溶性蛋白含量(27.24 mg/g)顯著高于其他兩種激素；200 mg/L NAA處理下可溶性糖含量最高，為25.00 mg/g。山韭幼苗在100 mg/L IAA、50 mg/L ETH和200 mg/L NAA處理下，其α-淀粉酶、β-淀粉酶、(α+β)淀粉酶均無顯著變化，但稍有上升。100 mg/L IAA、50 mg/L ETH和200 mg/L NAA處理下山韭幼苗脂肪酶和中性蛋白酶活性也有顯著提高，50 mg/L ETH處理下脂肪酶含量顯著高于其他處理，為42.73 μmol/(min·g)；100 mg/L IAA處理下的山韭幼苗中中性蛋白酶活性最高，為12 566.68 μmol/(min·g)。3種處理下的山韭幼苗ABA激素含量并無顯著變化，但與ck相比有所下降。而3種處理下的內(nèi)源IAA含量與ck相比則顯著下降，其中50 mg/L ETH處理下的內(nèi)源IAA含量下降最為顯著，為142.82 μg/L。與ck相比，50 mg/L ETH處理下的山韭幼苗內(nèi)源ETH含量顯著上升，且高于其他處理，為5 161.96 μg/L。山韭幼苗內(nèi)源GA3含量在3種激素處理下則無顯著變化。

圖4 IAA、ETH和NAA處理對(duì)山韭幼苗生理指標(biāo)的影響 Fig.4 Effects of IAA, ETH and NAA treatments on physiological indicators of Allium senescens L.

2.4 IAA、ETH和NAA處理下山韭種子萌發(fā)各指標(biāo)的綜合分析

由圖5 A可見，山韭種子各處理下的指標(biāo)主要分布在1、2、4象限，即在100 mg/L IAA、50 mg/L ETH和200 mg/L NAA處理之間。芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)和芽重/根重二者之間近乎重合，說明它們之間有很強(qiáng)的相關(guān)關(guān)系。在100 mg/L IAA和50 mg/L ETH之間，可溶性蛋白、α-淀粉酶和脂肪酶之間距離較近，說明它們之間相關(guān)性較強(qiáng)；GA3與發(fā)芽率距離很遠(yuǎn)，說明二者之間有極強(qiáng)的相關(guān)性；發(fā)芽勢(shì)、活力指數(shù)、發(fā)芽指數(shù)之間距離也很近，說明它們之間存在極強(qiáng)的相關(guān)關(guān)系，這些指標(biāo)均與100 mg/L IAA和50 mg/L ETH存在較強(qiáng)相關(guān)關(guān)系。(α+β)淀粉酶和根重之間距離較近，二者之間也有很強(qiáng)相關(guān)性。由圖5 B可見，發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、芽根長(zhǎng)、芽根重之間均存在極強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系；而芽重/根重和芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)則與它們之間存在很強(qiáng)的負(fù)相關(guān)關(guān)系。同時(shí)，發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)與可溶性蛋白之間也存在較強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系?？扇苄蕴桥c芽根長(zhǎng)、芽根重之間又有較強(qiáng)的負(fù)相關(guān)關(guān)系，但與芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)和芽重/根重則呈正相關(guān)。α-淀粉酶與發(fā)芽勢(shì)和可溶性蛋白呈正相關(guān)，(α+β)淀粉酶與β-淀粉酶正相關(guān)。脂肪酶與可溶性蛋白和α-淀粉酶相關(guān)。蛋白酶與(α+β)淀粉酶與β-淀粉酶之間負(fù)相關(guān)。ABA與發(fā)芽率、α-淀粉酶和蛋白酶存在負(fù)相關(guān)關(guān)系。IAA與發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、芽長(zhǎng)β-淀粉酶和(α+β)淀粉酶存在很強(qiáng)的負(fù)相關(guān)性。ETH與發(fā)芽勢(shì)發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、可溶性蛋白、(α+β)淀粉酶和脂肪酶存在極強(qiáng)的正相關(guān)性。GA3與發(fā)芽率發(fā)芽勢(shì)發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、可溶性蛋白、脂肪酶和ETH存在顯著正相關(guān)關(guān)系。ETH和GA3與IAA顯著負(fù)相關(guān)性。

圖5 IAA、ETH和NAA處理下山韭各指標(biāo)主成分分析和相關(guān)性分析Fig.5 Principal component analysis and correlation analysis of all indices of Allium senescens L. under IAA, ETH and NAA treatments

3 討 論

3.1 植物激素處理對(duì)種子活力的影響

外源激素不僅對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育具有調(diào)控作用[18-20]，還對(duì)植物種子萌發(fā)起到促進(jìn)或抑制的作用[21]。張薇等[22]研究表明，低濃度外源激素溶液浸種促進(jìn)種子發(fā)芽，高濃度外源激素溶液浸種則產(chǎn)生抑制作用；閆艷華等[23]研究了外源激素處理對(duì)曼陀羅(Daturastramonium)種子萌發(fā)的影響，結(jié)果表明，隨IAA浸種濃度升高，種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)逐漸提高，且幼苗芽根的長(zhǎng)勢(shì)也最好。本研究中，山韭種子在100～250 mg/L的IAA處理下，發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)等指標(biāo)與ck相比均有顯著增高，但當(dāng)IAA濃度增加到300 mg/L時(shí)，山韭種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率則有所下降。

ETH是外源植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有打破種子休眠、調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)抗逆性和提高果實(shí)品質(zhì)等作用[24-26]。研究表明，ETH能夠增加甘蔗的出苗率、幼苗莖干重和根干重[27]。適量的ETH能活化細(xì)胞的某種酶，促使細(xì)胞分裂，使種子萌發(fā)，過量的ETH則會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。本研究表明，25～125 mg/L ETH處理對(duì)山韭種子的萌發(fā)均有促進(jìn)作用，但125 mg/L ETH處理對(duì)山韭幼苗的根長(zhǎng)和根重會(huì)產(chǎn)生抑制作用，其中50 mg/L ETH處理對(duì)山韭種子的萌發(fā)促進(jìn)最為顯著。

NAA可促進(jìn)植物根系生長(zhǎng)，具有促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大，誘導(dǎo)形成不定根的作用[28]。袁芳等[29]研究發(fā)現(xiàn)，NAA處理不利于喜馬拉雅紫茉莉種子的萌發(fā)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，50～800 mg/L NAA處理對(duì)山韭種子的萌發(fā)有抑制作用，且隨NAA濃度的增加，山韭種子的發(fā)芽和形態(tài)指標(biāo)均呈下降趨勢(shì)；這與靳祖石等[30]的研究結(jié)論有所不同，推測(cè)是因?yàn)椴煌参锓N子對(duì)不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的敏感程度不同。

3.2 植物激素處理對(duì)山韭種子貯藏物質(zhì)和酶活性的影響

種子成熟的過程中會(huì)積累大量的可溶性糖、可溶性蛋白等貯藏物質(zhì)，當(dāng)種子打破休眠進(jìn)入萌動(dòng)狀態(tài)時(shí)，首先動(dòng)用胚部或胚中軸的可溶性糖及貯藏蛋白[31]。而貯存物質(zhì)分解需要酶的參與，因此，與貯存物質(zhì)分解有關(guān)的酶活性升高是促進(jìn)種子萌發(fā)的重要原因，蛋白酶活力提高,導(dǎo)致蛋白質(zhì)的水解速度加快，增加了種子萌發(fā)所需的物質(zhì)和能量供應(yīng)[32]。閆曉娜等[33]研究發(fā)現(xiàn)，IAA處理顯著提升偃松種子的可溶性蛋白。可溶性蛋白質(zhì)是主要的氮源，在萌發(fā)時(shí)被動(dòng)員。本實(shí)驗(yàn)中，激素處理的山韭種子在萌發(fā)過程中蛋白質(zhì)含量顯著增加，表明種子萌發(fā)和形態(tài)建成需要蛋白質(zhì)提供能量和物質(zhì)[34]?？扇苄蕴鞘欠N子萌發(fā)的呼吸底物，作為能量來源被逐漸分解[35]。激素處理下，山韭的可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量較其他處理高，說明激素處理對(duì)種子萌發(fā)的生化指標(biāo)有一定影響。而3種激素處理下的山韭α-淀粉酶、β-淀粉酶、(α+β)淀粉酶活性則無明顯變化；但脂肪酶活性則均有明顯提升。與ck相比，蛋白酶在100 mg/L IAA和200 mg/L NAA處理下也有顯著增加。

3.3 植物激素處理對(duì)山韭種子內(nèi)源激素影響

種子發(fā)芽與其內(nèi)源激素的含量變化密切相關(guān)[36]，本研究顯示，與ck相比，100 mg/L IAA、50 mg/L ETH和200 mg/L NAA處理均顯著增加了山韭IAA含量；50 mg/L ETH處理顯著提升山韭的內(nèi)源ETH含量，ETH主要是通過增強(qiáng)種子的呼吸作用影響種子的萌發(fā)，同時(shí)促進(jìn)胚根細(xì)胞的擴(kuò)大和胚軸的伸長(zhǎng)與根毛分化，外源ETH可以促進(jìn)多種休眠或非休眠植物種子的萌發(fā)。在種子休眠與萌發(fā)的過程中，ABA和GA3作為兩種最為重要的植物激素，相互拮抗[37]，3種激素處理下的山韭內(nèi)源ABA和GA3含量無明顯變化，可能是處理期間山韭種子中ABA和GA3拮抗作用不明顯。

3.4 植物激素處理下山韭各萌發(fā)指標(biāo)的綜合分析

由主成分分析可知，在100 mg/L IAA和50 mg/L ETH處理下，山韭的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)距離很近，說明ETH處理對(duì)山韭種子的萌發(fā)影響較大；發(fā)芽率與GA3和ETH之間距離較近，說明GA3和ETH是影響山韭發(fā)芽率的主要因素。在200 mg/L NAA處理下，芽重/根重和芽長(zhǎng)/根長(zhǎng)之間距離很近，說明NAA對(duì)山韭芽根長(zhǎng)、芽根重比值影響很大。通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，可溶性蛋白、ETH和GA3含量之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系，說明山韭種子萌發(fā)期間，可溶性蛋白會(huì)大量積累來提供能量，同時(shí)ETH和GA3含量也很大程度影響山韭種子的發(fā)芽。IAA含量與ETH和GA3含量之間則存在顯著負(fù)相關(guān)性，說明IAA與二者可能存在拮抗作用。α-淀粉酶也與發(fā)芽率存在極顯著正相關(guān)關(guān)系，說明山韭種子的發(fā)芽率受α-淀粉酶的控制。

4 結(jié) 論

與ck相比，100 mg/L IAA和50 mg/L ETH對(duì)山韭種子的萌發(fā)和形態(tài)有顯著促進(jìn)作用，NAA處理則對(duì)山韭種子萌發(fā)和生長(zhǎng)有抑制作用。100 mg/L IAA處理顯著提高山韭種子可溶性蛋白含量和蛋白酶活性。50 mg/L ETH處理顯著增加了山韭可溶性蛋白、可溶性糖含量、脂肪酶活性、內(nèi)源IAA和ETH含量，但卻顯著降低了蛋白酶活性。200 mg/L NAA處理也顯著提升了山韭的可溶性蛋白、可溶性糖含量、蛋白酶活性和內(nèi)源ETH含量。綜合種子發(fā)芽情況及形態(tài)指標(biāo)得出，100 mg/L IAA和50 mg/L ETH是促進(jìn)山韭萌發(fā)的最佳濃度。