阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒性質(zhì)影響

謝灝婷， 張 霞， 丁玉琴， 劉妮娜， 張智忠， 夏 旭

(中南林業(yè)科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院1，長(zhǎng)沙 410000) (懷化市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所2，懷化 418000)

蝦青素(Astaxanthin，ASX)，是一種天然的抗氧化物質(zhì)[1]，其抗氧化活性是葉黃素的10倍，維生素E的100倍[2]。蝦青素還具有抗炎性[3，4]、抗病能力和調(diào)控免疫相關(guān)基因表達(dá)[5]等生理活性。但由于蝦青素水溶性差、不穩(wěn)定且易氧化分解，生物利用率低而限制了其應(yīng)用。通過(guò)構(gòu)建納米顆粒[6]、乳液[7]、脂質(zhì)體及微膠囊[8]等遞送體系荷載蝦青素是提高蝦青素的溶解性和穩(wěn)定性的有效途徑。

薏米含有約14.6%的蛋白質(zhì)，其中醇溶蛋白約占薏米總蛋白質(zhì)量的44.7%[9]。目前對(duì)薏米蛋白的研究主要集中在提取方法和分離蛋白的功能特性等[10，11]，對(duì)薏米蛋白尤其是薏米醇溶蛋白的應(yīng)用研究還較少。薏米醇溶蛋白具有許多與玉米醇溶蛋白相似的理化性質(zhì)，如消化性和水溶性差等。玉米醇溶蛋白[12]、小麥醇溶蛋白[13]、高粱醇溶蛋白等均可以通過(guò)反溶劑沉淀法制備納米顆粒來(lái)作為疏水性活性物質(zhì)的載體，因此，推測(cè)薏米醇溶蛋白可能也是一種潛在的疏水性活性物質(zhì)輸送載體。前期研究采用反溶劑法制備了荷載蝦青素的醇溶蛋白納米顆粒，但發(fā)現(xiàn)其在pH 6.0～7.0時(shí)易聚集并產(chǎn)生沉淀，穩(wěn)定性較差。

阿拉伯膠是一種天然陰離子多糖，且具有良好的兩親性，被用于改善蛋白基納米顆粒的穩(wěn)定性[14]。因此，本研究采用靜電沉積法將阿拉伯膠吸附到薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒上，制備薏米醇溶蛋白-蝦青素-阿拉伯膠納米顆粒，并進(jìn)一步研究阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒穩(wěn)定性和抗氧化性的影響，為蝦青素納米輸送體系的開(kāi)發(fā)和薏米醇溶蛋白的高值化利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

薏仁米(貴州)；阿拉伯膠、正己烷、氫氧化鈉、氯化鈉、丙酮、無(wú)水乙醇、ABTS、DPPH，均為分析純；蝦青素(純度>90%)；Viscozyme L酶。

R-5410高速離心機(jī)，RV10 digital旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，UV-2100紫外分光光度計(jì)，ZetasizerNano ZS納米粒度儀，Lab-1A-50E冷凍干燥機(jī)，D8 advance X射線衍射分析儀，F(xiàn)EI Tecnai G2掃描電鏡。

1.2 方法

1.2.1 醇溶蛋白的提取

薏米醇溶蛋白的提取參考Liu等[15]的方法，并稍作修改。新鮮薏米磨粉過(guò)80目篩，采用正己烷脫脂，得到脫脂薏米粉。將脫脂薏米粉加入超純水(pH 4.6，料液比為1∶10)中，按3.02 FBG/g的加酶量加入Viscozyme L酶，然后在44 ℃下酶解2.8 h后，8 000 r/min離心15 min取沉淀。按1∶12的比例往沉淀中加入體積分?jǐn)?shù)75%的乙醇，55 ℃下水浴攪拌2 h，10 000 r/min離心15 min取上清液。按1∶1的比例往上清液中加入超純水，并調(diào)pH至6.2，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%NaCl，靜置12 h，5 000 r/min離心15 min，取沉淀，透析袋透析24 h，透析結(jié)束后水洗3次至pH呈中性。冷凍干燥得到薏米醇溶蛋白粉末。由凱氏定氮法測(cè)得薏米醇溶蛋白中蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為89%。

1.2.2 醇溶蛋白-蝦青素-阿拉伯膠納米顆粒的制備

參考Dai等[16]的方法并稍作修改，0.3 g薏米醇溶蛋白溶于10 mL 體積分?jǐn)?shù)75%乙醇，50 ℃下600 r/min磁力攪拌2 h使醇溶蛋白完全分散。配制0.15 mg/L的蝦青素-丙酮溶液，然后將蝦青素溶液與薏米醇溶蛋白溶液等體積混合均勻后，在600r/min下緩慢滴入5倍體積的去離子水(pH 3.5)中，攪拌均勻后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，然后離心(3 000 g，15 min)除去不溶性物質(zhì)，得到薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒(C-ASX-NP)。取不同量阿拉伯膠使其與醇溶蛋白比例(AG∶C)分別為2∶1、1.5∶1、1∶1、1∶2、1∶3，溶于2 mL的超純水中，以600 r/min磁力攪拌30 min使其完全溶解，再用1 mol/L HCl將阿拉伯膠溶液pH調(diào)至3.5。將薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒溶液加至不同濃度阿拉伯膠溶液中，得到薏米醇溶蛋白-蝦青素-阿拉伯膠納米顆粒溶液(C-ASX-AG-NP)。

1.2.3 薏米醇溶蛋白-蝦青素-阿拉伯膠復(fù)合納米顆粒的包埋率與荷載率

參考Jiang等[17]的方法并稍加修改，將制備好的C-ASX-AG-NP-20 ℃冷凍24 h，冷凍干燥機(jī)干燥48 h得到C-ASX-AG-NP凍干粉末。稱(chēng)取5 mg C-ASX-AG-NP凍干粉末至離心管中，加入5 mL無(wú)水乙醇，旋渦振蕩器振蕩30 s，加入5 mL正己烷，旋渦振蕩器振蕩1 min，振蕩結(jié)束后加入5 mL水，繼續(xù)振蕩1 min，振蕩結(jié)束后放入恒溫振蕩水浴鍋振蕩30 min以充分提取顆粒內(nèi)的蝦青素，振蕩結(jié)束后800 g離心5 min，取上清液在472 nm處測(cè)定其吸光度A472 nm。用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算蝦青素質(zhì)量，用公式確定荷載率和包埋率：

式中：A472 nm為上層溶液的吸光度；V為加入乙醇的體積/mL；P為蝦青素的分子量，597 g/mol；ε蝦青素的摩爾吸收系數(shù) ，125 100 L/(mol·cm)。

1.2.4 納米顆粒的粒徑與ζ-電位的測(cè)定

參考Donsì等[18]的方法，采用納米粒度儀測(cè)定的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP溶液中顆粒的粒徑和zeta電位，同時(shí)測(cè)定了納米顆粒溶液的分散系數(shù)(PDI)。

1.2.5 納米顆粒的穩(wěn)定性研究

1.2.5.1 pH穩(wěn)定性

將制備好的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP溶液pH分別調(diào)至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0，測(cè)量粒徑及電位。

1.2.5.2 鹽離子穩(wěn)定性

將新鮮制備的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP溶液與不同濃度的NaCl溶液等體積混合，使納米顆粒與NaCl混合溶液的濃度分別為0、25、50、75、100、150 mmoL/L并測(cè)量粒徑。

1.2.5.3 儲(chǔ)藏穩(wěn)定性

將新鮮制備的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP溶液分別放置于4 ℃和25 ℃環(huán)境下避光保存，分別在0、5、10、15 d時(shí)測(cè)量其粒徑電位和蝦青素保留率。蝦青素保留率的測(cè)定按照方法1.2.3并稍作修改。取1 mL納米顆粒溶液置于離心管中，加入5 mL無(wú)水乙醇，旋渦振蕩器振蕩30 s，混合均勻后加入5 mL正己烷，旋渦振蕩器振蕩1 min，結(jié)束后加入4 mL水，繼續(xù)振蕩1 min，結(jié)束后放入恒溫振蕩水浴鍋振蕩30 min以充分萃取顆粒內(nèi)的蝦青素，振蕩結(jié)束后800 g離心5 min，取上清液在472 nm處測(cè)定其吸光度A472 nm。蝦青素保留率計(jì)算公式為：

1.2.6 納米顆粒的結(jié)構(gòu)表征

1.2.6.1 X-射線衍射分析

用Cu靶和40 kV的電壓，以2°/min的掃描速度掃描記錄納米顆粒凍干粉末的5°～45°的XRD圖譜。

1.2.6.2 透射電鏡

新鮮制備的納米顆粒分散液用 pH 4的超純水稀釋 10倍，均勻混合后分別取一滴C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP分散液滴在銅網(wǎng)上，在空氣中自然干燥后進(jìn)行拍攝。

1.2.7 抗氧化能力測(cè)定

1.2.7.1 ABTS+·清除能力測(cè)定

參考Meng等[19]的方法，將7.4 mmol/L的ABTS與2.6 mmol/L的過(guò)硫酸鉀等體積混合，混合均勻后室溫下避光靜置16 h，使用前用10 mmol/L的磷酸鹽緩沖液稀釋約50倍，在734 nm處測(cè)量其吸光度，其為(0.7±0.02)。將16 μL分別稀釋至5、10、15、20 μg/mL的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP分散液加入至4 mL ABTS溶液中，使樣品的最終質(zhì)量濃度達(dá)到0.5～1.0 μg/mL，充分混合后靜置7 min，在734 nm處讀取其吸光度，記為As，以10 mmol/L的PBS做空白，記為Ac，計(jì)算公式為：

1.2.7.2 DPPH·清除能力測(cè)定

參考Meng等[19]的方法并稍作修改，具體方法為：將2 mL新鮮制備的0.1 mmol/L的DPPH乙醇溶液加入2 mL同濃度的蝦青素丙酮溶液、荷載蝦青素的薏米醇溶蛋白納米顆粒、荷載蝦青素的阿拉伯膠-薏米醇溶蛋白納米顆粒中，蝦青素質(zhì)量濃度分別為20、15、10、5 μg/mL，避光反應(yīng)30 min后在518 nm處測(cè)定其吸光值，記為A1，將2 mL無(wú)水乙醇代替DPPH乙醇溶液進(jìn)行相同處理，記為A2，將2 mL無(wú)水乙醇加入2 mL DPPH乙醇溶液進(jìn)行相同處理，其吸光度記為A0，樣品的DPPH自由基清除率公式為：

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。以Excel 2017進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析整理，以SPSS 22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和Duncan檢驗(yàn)，P<0.05表示差異顯著，用Origin 2017作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒的粒徑、PDI和ζ-電位的影響

不同醇溶蛋白與阿拉伯膠比例制備的薏米醇溶蛋白-蝦青素-阿拉伯膠納米顆粒(C-ASX-AG-NP)平均粒徑、PDI及ζ-電位如圖1所示。薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒(C-ASX-NP)的平均粒徑為120.9 nm，制備出了比小麥醇溶蛋白-阿拉伯膠-白藜蘆醇納米顆粒更小粒徑的納米顆粒[14]。C-ASX-AG-NP的平均粒徑隨著薏米醇溶蛋白與阿拉伯膠的比例(C∶AG)的減小而呈先減小再增大的趨勢(shì)。當(dāng)C∶AG為2∶1時(shí)，C-ASX-AG-NP平均粒徑最小，但高于C-ASX-NP的。C-ASX-NP的ζ-電位為39 mV，而阿拉伯膠在此pH下帶負(fù)電荷，阿拉伯膠可以通過(guò)靜電相互作用吸附在C-ASX-NP表面，形成蛋白質(zhì)-多糖的核-殼結(jié)構(gòu)[12，20]，導(dǎo)致納米顆粒的平均粒徑顯著增大，顆粒表面凈電荷由正電荷轉(zhuǎn)變?yōu)樨?fù)電荷。這和阿拉伯膠對(duì)麥醇溶蛋白蛋白納米顆粒的影響一致[14]。當(dāng)C∶AG為1∶1時(shí)，PDI達(dá)到最小值，此時(shí)顆粒大小最為均勻。C-ASX-NP當(dāng)C∶AG為3∶1～1∶1.5時(shí)，C-ASX-AG-NP的ζ-電位無(wú)顯著性差異(P>0.05)。當(dāng)C∶AG增加到1∶2時(shí)，C-ASX-AG-NP的ζ-電位為-17.6 mV，此時(shí)顆粒的所帶凈電荷最少。

2.2 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒的包埋率和荷載量的影響

C∶AG對(duì)蝦青素包埋率和荷載率的影響如表1所示。在未加入阿拉伯膠時(shí)C-ASX-NP的包埋率和荷載量分別為49.18%和2.45 mg/g，隨著C∶AG的增大，荷載率顯著增大，包埋率則先增大后減小。綜合圖1和表1，發(fā)現(xiàn)當(dāng)C∶AG為1∶1時(shí)有較高的包埋率且顆粒粒徑較小(163.43 nm)，具有較小的分散系數(shù)(0.123)，因此選擇其進(jìn)行后續(xù)的研究。

表1 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒荷載率包埋率的影響

2.3 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒穩(wěn)定性的影響

2.3.1 pH穩(wěn)定性

C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP在不同pH環(huán)境中的穩(wěn)定性如圖2所示。C-ASX-NP在pH 2.0～5.0時(shí)，其平均粒徑?jīng)]有顯著性變化，具有良好的穩(wěn)定性。而在pH 6.0和pH 7.0時(shí)C-ASX-NP的ζ-電位分別為-2.6 mV和-7.0 mV，此時(shí)平均粒徑增大至4 000 nm以上。這可能是由于表面所帶凈電荷減少，分子間的靜電斥力減少引起的。pH 5.0和pH 6.0時(shí)，C-ASX-NP的ζ-電位分別為33.2 mV和-2.62 mV，在pH5.8附近達(dá)到了等電點(diǎn)。C-ASX-AG-NP在pH 2.0時(shí)會(huì)產(chǎn)生沉淀，所帶凈電荷少，這可能是由于pH接近阿拉伯膠的等電點(diǎn)(pK-2.2)[21]，產(chǎn)生了靜電屏蔽，導(dǎo)致納米顆粒聚集[22]。C-ASX-AG-NP在pH 3.0～6.0時(shí)，其平均粒徑無(wú)顯著變化，但其ζ-電位增加。當(dāng)pH增加至 7.0時(shí)粒徑升高至949.9 nm，低于相同pH下的C-ASX-NP的平均粒徑。由此可知，阿拉伯膠可以增強(qiáng)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒在pH 6.0～7.0時(shí)的穩(wěn)定性。

2.3.2 鹽離子穩(wěn)定性

阿拉伯膠對(duì)C-ASX-NP鹽離子穩(wěn)定性的影響如圖3所示。C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP的平均粒徑隨著氯化鈉濃度的增加而增加。C-ASX-NP在未加入氯化鈉時(shí)粒徑僅為121.73 nm，當(dāng)氯化鈉濃度增大至25 mmoL/L時(shí)，納米顆粒的粒徑達(dá)到5 362.33 nm，C-ASX-NP發(fā)生了聚集，并出現(xiàn)明顯沉淀。當(dāng)氯化鈉濃度為12.5～37.5 mmoL/L時(shí)，C-ASX-AG-NP平均粒徑增加，但增加幅度明顯小于C-ASX-NP，說(shuō)明阿拉伯膠可以在一定程度上增強(qiáng)薏米醇溶蛋白的蝦青素納米顆粒的鹽離子耐受性。當(dāng)氯化鈉濃度達(dá)到50 mmoL/L時(shí)，C-ASX-AG-NP粒徑達(dá)到3 305.33 nm，并出現(xiàn)明顯的沉淀，膠體顆粒出現(xiàn)失穩(wěn)現(xiàn)象。這些可以歸因于鹽對(duì)納米粒子之間靜電相互作用的影響[23]。2種納米顆粒所帶凈電荷隨著NaCl的增加而減小，這是由于離子結(jié)合和靜電屏蔽的作用。因此，在高濃度鹽的存在下，納米顆粒的凈電荷減少，導(dǎo)致它們之間的靜電斥力降低，從而促進(jìn)了它們的聚集[24]。

2.3.3 儲(chǔ)藏穩(wěn)定性

將制備的C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP顆粒分別置于25 ℃和4 ℃條件下儲(chǔ)藏，其粒徑和ζ-電位的變化如圖4所示。C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP初始平均粒徑分別為113.73、144.83 nm，在25 ℃條件下儲(chǔ)藏，C-ASX-NP儲(chǔ)藏至5 d時(shí)粒徑減小至106.13 nm，儲(chǔ)藏至10 d時(shí)出現(xiàn)沉淀并散發(fā)出臭雞蛋氣味，此時(shí)C-ASX-NP已變質(zhì)，并且此時(shí)ζ-電位接近0。隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的增加，C-ASX-AG-NP平均粒徑增大，儲(chǔ)藏至15 d時(shí)粒徑增大至281.97 nm，但此時(shí)仍未出現(xiàn)沉淀及變質(zhì)。在4 ℃條件下儲(chǔ)藏時(shí)，C-ASX-NP的平均粒徑隨著時(shí)間的增加而減小，而ζ-電位在0～10 d時(shí)無(wú)明顯變化，儲(chǔ)藏至15 d時(shí)ζ-電位下降。C-ASX-AG-NP平均粒徑隨著時(shí)間的增加而增大，儲(chǔ)藏到15 d時(shí)，C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP平均粒徑分別為107.23 nm和156.2 nm，C-ASX-AG-NP隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的增加所帶負(fù)電荷逐漸減少，這可能是由于少量阿拉伯膠從納米顆粒上脫落導(dǎo)致的。

C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP蝦青素保留率隨儲(chǔ)藏時(shí)間的變化如圖5所示。由于相同條件下的游離蝦青素在30 min內(nèi)蝦青素保留率降至8.3%。25 ℃下儲(chǔ)藏5～10 d時(shí)，C-ASX-AG-NP的蝦青素保留率高于C-ASX-NP，說(shuō)明阿拉伯膠的加入能夠減緩蝦青素的降解。當(dāng)儲(chǔ)藏至15 d時(shí)，C-ASX-NP已經(jīng)完全沉淀，此時(shí)數(shù)據(jù)不做參考。在4 ℃儲(chǔ)藏時(shí)，2種納米顆粒的蝦青素保留率均高于25 ℃儲(chǔ)藏，說(shuō)明低溫能夠緩解蝦青素的降解。

圖5 薏米醇溶蛋白-蝦青素阿拉伯膠復(fù)合納米顆粒在不同溫度下儲(chǔ)藏時(shí)蝦青素的保留率

2.4 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒結(jié)構(gòu)的影響

2.4.1 X衍射圖譜分析

如圖6所示，薏米醇溶蛋白分別在9.5°和19.6°有寬衍射峰，這和麥醇溶蛋白[14]一樣呈現(xiàn)出2個(gè)峰。阿拉伯膠在19.5°處有存在1個(gè)寬衍射峰，說(shuō)明薏米醇溶蛋白與阿拉伯膠是具有無(wú)定形結(jié)構(gòu)特征的非晶體。蝦青素有多個(gè)尖銳的衍射峰，這是因?yàn)槲r青素的晶化程度高，而被包埋的蝦青素顆粒均未出現(xiàn)尖銳的衍射峰，說(shuō)明蝦青素以無(wú)定形態(tài)被成功包埋在納米顆粒中，在其他的類(lèi)胡蘿卜素中也有出現(xiàn)類(lèi)似現(xiàn)象，如葉黃素在納米體系中封裝后由于納米顆粒限制了葉黃素的結(jié)晶變成了非晶體[25]。加入阿拉伯膠的納米顆粒的峰值強(qiáng)度低于未加入阿拉伯膠的納米顆粒的峰值強(qiáng)度，這說(shuō)明薏米醇溶蛋白與阿拉伯膠之間存在非共價(jià)相互作用。

圖6 X射線衍射圖譜

2.4.2 透射電鏡

C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP的透射電鏡如圖7所示。荷載蝦青素的薏米醇溶蛋白納米顆粒為表面光滑的球體，粒徑在100～150 nm之間，并且在加入阿拉伯膠后的納米顆粒粒徑增加，這與粒徑測(cè)定結(jié)果一致。

圖7 透射電鏡圖

2.5 抗氧化能力

2.5.1 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒ABTS+·清除能力的影響

如圖8所示，在相同的蝦青素濃度下， C-ASX-AG-NP的ABTS+·清除率高于C-ASX-NP，這可能是因?yàn)榧尤肓税⒗z后可以增強(qiáng)納米顆粒的復(fù)溶性[14]。蝦青素的抗氧化能力雖然極強(qiáng)，但它作為親脂化合物，如果將其置于水環(huán)境中，其抗氧化活性會(huì)大大降低，在食品系統(tǒng)中，蝦青素與自由基的接觸多少是限制其生物活性的主要因素[26]。游離的蝦青素在水相中分散性較差，與ABTS+·接觸有限，所以ABTS+·清除率較低。在相同濃度下，游離的蝦青素(ASX)的ABTS+·清除率低于C-ASX-AG-NP和C-ASX-NP，因此采用薏米醇溶蛋白和阿拉伯膠荷載蝦青素可以顯著提高其抗氧化性。

圖8 不同蝦青素濃度的ABTS+·清除能力

2.5.2 阿拉伯膠對(duì)薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒DPPH·清除能力

C-ASX-NP、C-ASX-AG-NP及游離蝦青素對(duì)DPPH·清除能力如圖9所示。當(dāng)蝦青素質(zhì)量濃度為20 μg /mL時(shí)，C-ASX-NP、C-ASX-AG-NP、游離蝦青素的DPPH·清除率分別為73.55%、81.53%、11.08%。加入了阿拉伯膠的C-ASX-AG-NP自由基清除率大于未加入阿拉伯膠的C-ASX-NP的自由基清除率，未加入阿拉伯膠的C-ASX-NP的自由基清除率大于游離蝦青素的自由基清除率，這與ABTS+·清除能力實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果一致。所不同的是，游離的蝦青素對(duì)DPPH·清除率遠(yuǎn)低于C-ASX-NP和C-ASX-AG-NP，這是因?yàn)榘窀纳屏宋r青素的分散性，DPPH試劑容易滲透到顆粒的核心，增加了自由基接觸的表面積，從而促進(jìn)了DPPH·清除率的提高[27,28]。

圖9 不同蝦青素濃度的DPPH·清除率

3 討論

結(jié)合顆粒大小、電位、XRD、SEM形貌等性質(zhì)，發(fā)現(xiàn)阿拉伯膠是以非共價(jià)結(jié)合的方式和薏米醇溶蛋白-蝦青素納米顆粒結(jié)合。吳煒豪[14]研究指出，阿拉伯膠通過(guò)改變納米顆粒的結(jié)構(gòu)增強(qiáng)了其制備的麥醇溶蛋白納米顆粒的pH穩(wěn)定性及其對(duì)于白藜蘆醇的保留率穩(wěn)定性，然而本研究發(fā)現(xiàn)阿拉伯膠雖能顯著增加納米顆粒的鹽離子穩(wěn)定性和儲(chǔ)藏穩(wěn)定性，但在不同的pH環(huán)境下，其僅能增強(qiáng)在等電點(diǎn)附近的pH穩(wěn)定性，而在較低pH時(shí)不穩(wěn)定，還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

當(dāng)薏米醇溶蛋白與阿拉伯膠比例為1∶1時(shí)納米顆粒有較高的包埋率和較小的粒徑。阿拉伯膠的加入使C-ASX-AG-NP在pH3.0～6.0的環(huán)境中均能穩(wěn)定存在，并且能夠提高納米顆粒的鹽離子耐受性。C-ASX-AG-NP在室溫中的穩(wěn)定性要高于C-ASX-NP，并且對(duì)于蝦青素的保留率略高于C-ASX-NP。蝦青素以無(wú)定形態(tài)被包埋在薏米醇溶蛋白納米顆粒的內(nèi)核中，而阿拉伯膠通過(guò)非共價(jià)結(jié)合的方式復(fù)合在納米顆粒表面。在抗氧化能力實(shí)驗(yàn)中，受蝦青素溶解度的影響，2種納米顆粒的自由基清除率均遠(yuǎn)大于游離的蝦青素。因此本研究制備的C-ASX-AG-NP具有較好的穩(wěn)定性，并且相較于未包埋的蝦青素具有較高的抗氧化活性。