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    黑翅土白蟻工蟻和兵蟻轉(zhuǎn)錄組測(cè)序比較及表達(dá)分析

    2022-07-19 09:33:04黃雙
    天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年6期
    關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)錄組工蟻比較分析

    黃雙

    摘? ? 要:基于Illumina高通量測(cè)序RNA-seq技術(shù)對(duì)黑翅土白蟻Odontotermes formosanus (Shiraki,1909)的工蟻和兵蟻進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析,了解不同品級(jí)的轉(zhuǎn)錄組特征,豐富白蟻轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)信息,為探明黑翅土白蟻品級(jí)分化的分子機(jī)制打下基礎(chǔ)。經(jīng)過(guò)測(cè)序獲得質(zhì)量值高于20的堿基比例(Q20)均不低于98%的數(shù)據(jù),所有reads組裝成65 604個(gè)Unigenes,平均長(zhǎng)度337.78 bp;將所得序列注釋到NR、NT、KOG、GO和KEGG等數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),所得Unigenes均被注釋。兵蟻與工蟻差異基因的上調(diào)基因有與能量代謝及蛋白質(zhì)翻譯有關(guān),下調(diào)相關(guān)基因有與能量運(yùn)輸相關(guān),差異基因豐富,有助于黑翅土白蟻品級(jí)分化相關(guān)基因挖掘。本研究擴(kuò)充了黑翅土白蟻的基因資源,為科學(xué)研究白蟻種群的基因構(gòu)造、遺傳社會(huì)性、獲取有效分子標(biāo)記、綜合防控等提供珍貴的生物資源。

    關(guān)鍵詞:黑翅土白蟻;轉(zhuǎn)錄組;工蟻;兵蟻;比較分析

    中圖分類(lèi)號(hào):Q963? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? ? ? ? ? DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2022.06.001

    Comparative Transcriptome Sequencing and Expression Analysis of Worker and Soldier Termites of Odontotermes Formosanus

    HUANG Shuang

    (Key Laboratory of Southwest China Wildlife Resources Conservation ( Ministry of Education) ,China West Normal University, Nanchong , Sichuan 637002, China)

    Abstract: Based on Illumina high-throughput sequencing RNA-seq technology, the transcriptome of worker and soldier termites of Odontotermes formosanus (Shiraki, 1909) was sequenced to understand the transcriptome characteristics of different grades, to enrich the information of termite transcriptome data, and to lay the foundation for exploring the molecular mechanism of grade differentiation in the black-winged soil termite. After sequenced, we obtained data that the proportion of bases with quality values higher than 20 (Q20) was not less than 98%, and all reads were assembled into 65 604 Unigenes with an average length of 337.78 bp. The obtained sequences were annotated to NR, NT, KOG, GO and KEGG databases for comparison, and all Unigenes were annotated. The up-regulated genes were related to energy metabolism and protein translation, and the down-regulated genes were related to energy transport, which were rich in differential genes and could help to further develop their work to find their class differentiation-related genes. The study expands the genetic resources of black-winged soil termites and provides valuable biological resources for scientific research on the genetic structure of termite populations, genetic sociality, acquisition of effective molecular markers, and integrated prevention and control.

    Key words: Odontotermes formosanus (Shiraki, 1909); transcriptome; worker ants; solider ants; comparative analysis

    黑翅土白蟻Odontotermes formosanus(Shiraki,1909)為白蟻科(Termitidae)大白蟻亞科(Macroter-mitinae)土白蟻屬(Odontotermes),屬土棲性白蟻,主要分布在我國(guó)北緯35°以南的地區(qū),分布范圍廣,食性雜,主要以樹(shù)根、皮層、幼苗、幼樹(shù)、莊稼秸桿、甘蔗、竹根、草根、水稻等為取食對(duì)象,也能取食牛糞[1-2]。黑翅土白蟻品級(jí)包括蟻王與蟻后、有翅成蟲(chóng)、兵蟻、工蟻4個(gè)品級(jí)[3],各品級(jí)白蟻具有不同的行為模式和社會(huì)分工,其中蟻后與有翅成蟲(chóng)為繁殖蟻,而工蟻與兵蟻為不育蟻,其形態(tài)結(jié)構(gòu)及社會(huì)職能為不同屬性[4]。根據(jù)巢體大小其卵分化為不同品級(jí),其分化時(shí)間及齡期會(huì)不同。黑翅土白蟻工蟻數(shù)量全巢最多,可達(dá)到200萬(wàn)個(gè),從卵孵化到工蟻需要17 d;兵蟻數(shù)量次之,兵蟻有雌雄之分,但無(wú)交配生殖能力,從卵孵化到兵蟻分化大約需要24 d[5]。工蟻社會(huì)屬性為作工,主要有筑巢、供食、修路、照顧幼蟻、覓食等;兵蟻社會(huì)屬性為保衛(wèi)巢穴,用發(fā)達(dá)的上顎和能分泌毒液的額腺作為防御武器[6]。卵發(fā)育為工蟻或兵蟻受環(huán)境影響,且在最后1個(gè)齡期前其品級(jí)完成轉(zhuǎn)化,通過(guò)工蟻與兵蟻的高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序比較分析,可為影響分化品級(jí)基因發(fā)生的分子機(jī)制提供研究信息[7]。本研究采用Illumina Hiseq 2000高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)黑翅土白蟻工蟻與兵蟻進(jìn)行測(cè)序及生物信息學(xué)分析,建立轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù),分析兵蟻和工蟻表達(dá)差異顯著的基因,為其分化品級(jí)相關(guān)分子機(jī)制的研究提供依據(jù)[8]。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    2020年6月在四川南充西山進(jìn)行了黑翅土白蟻樣品的采集,采集后立刻將其保存在RNA保存液中。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 總RNA提取 選取樣品中的兵蟻20頭和工蟻30頭,分別取下頭部,成功地從工蟻和兵蟻頭部提取總RNA。

    1.2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序 通過(guò)Illumina Hiseq 2000平臺(tái)測(cè)序,構(gòu)建cDNA文庫(kù),在無(wú)參考基因組的條件下,通過(guò)樣本間比較對(duì)差異基因進(jìn)行分析。其中,對(duì)照組為工蟻,處理組為兵蟻。測(cè)序由上海生工生物有限公司完成。

    1.2.3 數(shù)據(jù)處理 在Hiseq平臺(tái)上經(jīng)CASAVA堿基識(shí)別 (Base Calling) 分析轉(zhuǎn)化得到原始測(cè)序序列(Sequenced Reads),黑翅土白蟻的兵蟻和工蟻的轉(zhuǎn)錄組原始數(shù)據(jù)通過(guò)FastQC進(jìn)行原始數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估,使用Trimmomatic[9]進(jìn)行質(zhì)量剪切,得到clean 數(shù)據(jù)。再使用Trinity軟件[10]組裝成轉(zhuǎn)錄本,得到轉(zhuǎn)錄組拼接序列(Transcript)和冗余后的拼接轉(zhuǎn)錄本序列(Unigene)。使用Salmon[11]計(jì)算基因的表達(dá)量,Unigene表達(dá)量的計(jì)算使用TPM(Transcripts Per Million)。計(jì)算方式為:

    TPMi=××106

    Xi=total exon fragment/reads Li=

    1.2.4 Unigene的注釋、功能分類(lèi)和生物學(xué)通路分析 通過(guò)BLAST[12]將拼接后的Unigene序列與CDD、KOG、NR、NT、PFAM、Swissprot、TrEMBL等多個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),摘取重要數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)信息得到其重要功能注釋信息。比對(duì)到NCBI非冗余核酸數(shù)據(jù)庫(kù)(NCBI non-redundant protein sequences,NR)中,分析物種相似性。根據(jù)轉(zhuǎn)錄本與Swissprot、TrEMBL的注釋結(jié)果得到基因功能分類(lèi)數(shù)據(jù)庫(kù)(Gene Ontology,GO)功能注釋信息,從宏觀上認(rèn)識(shí)黑翅土白蟻的工蟻及兵蟻的基因和基因產(chǎn)物的屬性。對(duì)Unigene進(jìn)行真核蛋白質(zhì)直系同源數(shù)據(jù)庫(kù)(Clusters of orthologous

    groups for eukaryotic complete genomes,KOG)比對(duì),對(duì)其可能的功能分類(lèi)統(tǒng)計(jì)[13]。利用KAAS得到轉(zhuǎn)錄本基因組百科全書(shū)代謝通路庫(kù)(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)注釋信息,了解其代謝途徑、生物學(xué)功能以及基因間的相互作用等[14]。

    1.2.5 工蟻和兵蟻差異基因表達(dá)數(shù)據(jù)分析處理? 利用聚類(lèi)分析軟件對(duì)表達(dá)模式相似的不同基因進(jìn)行聚類(lèi),并用數(shù)據(jù)分析比較基因差異。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 工蟻和兵蟻RNA-seq轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)拼接及注釋結(jié)果

    2.1.1 工蟻和兵蟻RNA-seq轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)拼接結(jié)果 黑翅土白蟻兵蟻共獲得24 138 602條原始序列,Q20含量98.93%,GC含量62.28%。工蟻共獲得39 376 474條原始序列,Q20含量98.97% ,GC含量57.40%,具體見(jiàn)表1。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果較好,能夠滿足后續(xù)數(shù)據(jù)分析。

    將轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行de novo拼接,這些干凈讀數(shù)組裝成 99 639 條Transctipt,這些轉(zhuǎn)錄本最后被組裝成 65 604條Unigenes。對(duì)已組裝的轉(zhuǎn)錄本和Unigenes進(jìn)行了長(zhǎng)度分布統(tǒng)計(jì),具體見(jiàn)表2。

    2.1.2 工蟻和兵蟻Unigene序列的比對(duì)及NR注釋? 用NCBI Blast+將工蟻和兵蟻所有Unigenes序列比對(duì)到PFAM、Swissprot、TrEMBL、CDD、KOG、NR、NT7個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù),其注釋基因分別有8 738,18 326,

    23 458,13 235,11 562,23 646,13 256條。NR數(shù)據(jù)庫(kù)可查閱同源序列的功能信息及與相似物種的近似值,注釋匹配較高的相似物種分別為內(nèi)華達(dá)州濕木白蟻(Zootermopsis nevadensis)、小鼠(Mus muscuius)、家白蟻(Coptotermes formosanus),分別有8 549,

    2 477,789條相似序列。

    2.1.3 工蟻和兵蟻Unigene的GO注釋及其分類(lèi)? 根據(jù)NR數(shù)據(jù)庫(kù)注釋所得,對(duì)21 285條Unigenes(占總Unigenes的32.44%)進(jìn)行了GO功能注釋?zhuān)沧⑨?06 751個(gè)GO功能,可了解其基因功能分布特征。在GO注釋中有3大類(lèi)別,分別是生物過(guò)程、細(xì)胞組分和分子功能。如圖1所示,生物過(guò)程共注釋了92 356個(gè)基因,數(shù)量最多,占總注釋的44.67%,其包含的26個(gè)功能亞類(lèi)中,以細(xì)胞進(jìn)程(Cellular Processes)和代謝過(guò)程(Metabolism)、生物調(diào)節(jié)(biological regulation)占主導(dǎo)地位,分別占該類(lèi)型15.95%,12.76%,8.87%,以生物相(biological phase)最低,僅占生物過(guò)程全部的0.000 3%。其次是細(xì)胞組分,共注釋了82 799個(gè)基因,占40.04%,其包含的22個(gè)功能亞類(lèi)中,細(xì)胞(cell)、細(xì)胞組分(cell part)、細(xì)胞器(organelle)占主導(dǎo)地位,分別占該類(lèi)別的18.88%,18.81%,13.97%,而以其他細(xì)胞器(other organism)和其他細(xì)胞器組成(other organism part)較低,均占該類(lèi)別的0.02%。分子功能最少,共31 596個(gè)基因被注釋?zhuān)?5.28%,其包含的21個(gè)功能亞類(lèi)中,以結(jié)合(binding)、催化活性(catalytic activity)居多,分別占該類(lèi)型的42.41%,32.18%,而以形態(tài)發(fā)生素活性(morphogen activity)、化學(xué)排斥物活性(chemorepellent activity)、營(yíng)養(yǎng)庫(kù)活性(nutrient reservoir activity)、金屬伴侶蛋白活性(metallochaperone activity)較低,分別占該類(lèi)別的0.001%,0.019%,0.022%,0.025%。這些結(jié)果顯示了黑翅土白蟻頭部基因表達(dá)情況,以生物活性及代謝調(diào)節(jié)相關(guān)的基因量較多,表明黑翅土白蟻代謝能力較強(qiáng)。

    2.1.4 黑翅土白蟻轉(zhuǎn)錄組Unigenes的KOG注釋及其分類(lèi) 在KOG注釋成功的基因有11 562條Unigenes,占總Unigene的17.62%。按其數(shù)據(jù)庫(kù)功能分類(lèi)為25個(gè)。其比對(duì)結(jié)果如圖2所示,信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制(Signal transduction mechanisms)最多,占12.8%,其次是翻譯后修飾、蛋白質(zhì)折疊和分子伴侶(Posttranslational modification,protein turnover,chaper-

    ones,11.85%),一般功能基因(General function prediction only,9.89%),翻譯、核糖體結(jié)構(gòu)與生物起源(Transiation,ribosomal structure and biogenesis,7.95%);而防御機(jī)制(Defense machanisms, 0.72%)、核結(jié)構(gòu)(Nuclear structure,0.36%)和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性(Cell motility,0.10%)是最小的類(lèi)群。結(jié)果表明,黑翅土白蟻在信號(hào)傳遞和轉(zhuǎn)錄、翻譯等基因表達(dá)豐度高。

    2.1.5 工蟻和兵蟻差異表達(dá)基因Unigene的KEGG代謝通路分析 根據(jù)KO與Pathway的關(guān)聯(lián)性對(duì)KEGG代謝通路進(jìn)行分析。結(jié)果如圖3所示,共有9 539 Unigenes獲得注釋?zhuān)?4.54%),共獲得6 657個(gè)KEGG功能注釋。黑翅土白蟻Unigenes參與或涉及的代謝通路可歸為5個(gè)類(lèi)別,即環(huán)境信息處理(Environmental Information Processing)、代謝(Metabolism)、細(xì)胞過(guò)程(Cellular Processes)、生物系統(tǒng)(Organismal Systems)、遺傳信息處理(Genetic Information Processing),共有33個(gè)亞類(lèi)293個(gè)信號(hào)通路(Pathway)。大多數(shù)Unigenes都被注釋到了代謝、有機(jī)系統(tǒng)。參與代謝的共有2 271條Unigenes,主要集中在參與糖代謝過(guò)程(Carbohydrate metabolism)的Unigenes數(shù)量為419條,比例為18.45%;其次參與能量代謝過(guò)程(Energy metabolism)的為328條(14.44%);參與全局整體映射(Overview)和氨基酸代謝(Amino acid metabolism)的Unigenes分別有301條(13.25%)和279條(12.29%)。參與生物系統(tǒng)的共有1 415條Unigenes,主要集中在內(nèi)分泌系統(tǒng)(Endocrine system,21.98%)和免疫系統(tǒng)(Immune system,18.80%)。參與細(xì)胞過(guò)程的共有 895條Unigenes,主要集中在運(yùn)輸與代謝(Transport and catabolism,38.77%)和細(xì)胞群落(Cellular community,28.38%)。環(huán)境信息處理涉及912條Unigenes,包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(Signal transduction,79.50%),信號(hào)分子和交互作用(Signaling molecules and interaction,13.38%),膜轉(zhuǎn)運(yùn)(Membrane transport,7.13%)?;蛐畔⑻幚砩婕? 164條Unigenes,主要涉及翻譯(Translation,46.48%),折疊、分類(lèi)和降解(Folding sorting and degradation,31.27%)。

    2.2 工蟻和兵蟻差異基因表達(dá)的分析

    2.2.1 工蟻和兵蟻差異基因Unigenes的GO富集分析 所有Unigenes比對(duì)到數(shù)據(jù)庫(kù)中所有差異基因數(shù)為53 092個(gè),其中工蟻和兵蟻差異表達(dá)基因GO生物過(guò)程比對(duì)基因數(shù)為16 957個(gè),如圖4所示,最顯著富集基因數(shù)為3 472個(gè),主要用于發(fā)育過(guò)程(developmental process)、多細(xì)胞生物過(guò)程(multicellular organismal process)、生物調(diào)節(jié)(biological regulation)、生物過(guò)程調(diào)節(jié)(regulation of biological process)、行為(behavior)、信號(hào)(signaling)等;細(xì)胞組成中比對(duì)基因數(shù)有3 908個(gè),其中最顯著富集基因數(shù)為3 908個(gè),主要用于膜部分(membrane part)、突觸(synapse)、突觸部分(synapse part);分子功能比對(duì)基因數(shù)為18 062個(gè),其中最顯著富集基因數(shù)為3 810個(gè),主要功能是結(jié)構(gòu)分子活性(structural molecule activity)、受體活性(receptor activity)、運(yùn)輸活性(transporter activity)等。

    2.2.2 工蟻和兵蟻差異基因Unigenes的KEGG富集分析 KEGG通路中所有基因數(shù)3 591個(gè),其中差異表達(dá)基因數(shù)890個(gè),差異表達(dá)基因顯著富集通路20個(gè)(表3),其中5個(gè)是與營(yíng)養(yǎng)因子合成及代謝相關(guān)的通路,5個(gè)是與蛋白質(zhì)、激素合成相關(guān)的通路,3個(gè)是與免疫應(yīng)答相關(guān)的通路,7個(gè)是與信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)通路。

    2.2.3 工蟻和兵蟻差異基因表達(dá)的分析 在兵蟻和工蟻的處理組中,有20 486個(gè)差異基因,篩選出10 503個(gè)具有顯著表達(dá)差異基因,其中上調(diào)基因有5 099個(gè),下調(diào)基因有5 404個(gè)(圖5)。具有功能注釋的上調(diào)基因有2 291個(gè),具有功能注釋的下調(diào)基因有4 063個(gè)。工蟻和兵蟻一共有27 167個(gè)相同的差異表達(dá)基因,12 279條有功能注釋。工蟻有19 889個(gè)特有差異基因,7 969條有功能注釋;兵蟻有17 868個(gè)特有差異基因,9 670條有功能注釋。

    2.2.4 工蟻和兵蟻相比差異幅度最大且前18位的基因 與兵蟻頭部基因表達(dá)相比,工蟻頭部中上調(diào)或下調(diào)幅度前18位基因見(jiàn)表4。統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著性檢驗(yàn)指標(biāo)P<0.01;q為校正后的P值,q<0.01。從表4可以看出,兵蟻上調(diào)幅度最大前7位基因中有主要功能為碳水化合物運(yùn)輸和代謝及翻譯、核糖體結(jié)構(gòu)和生物生成,其余功能未知;在工蟻中下調(diào)幅度最大的前11位基因主要功能為能量運(yùn)輸相關(guān),其余功能未知。

    3 結(jié)論與討論

    本研究中,采用Illumina hisiqTM高通量測(cè)序?qū)诔嵬涟紫伒谋伜凸は伒霓D(zhuǎn)錄組差異進(jìn)行了分析,獲得黑翅土白蟻轉(zhuǎn)錄組信息。測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn),共獲得0.58 Gb的clean reads,每個(gè)樣品的Q20含量均在98%以上,說(shuō)明測(cè)序質(zhì)量較好。經(jīng)過(guò)組裝拼接構(gòu)建Unigenes數(shù)據(jù)庫(kù),共獲得65 604個(gè)Unigenes,平均長(zhǎng)度為337.78 bp,N50為319 bp,N90為216 bp,且多數(shù)Unigenes能比對(duì)到親緣關(guān)系較近的物種,說(shuō)明其測(cè)序組裝質(zhì)量較好。采用生物信息學(xué)分析方法,對(duì)黑翅土白蟻兵蟻及工蟻轉(zhuǎn)錄組的序列進(jìn)行功能注釋及其功能分類(lèi)。通過(guò)NR數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),有23 646條序列比對(duì)上,占總Unigene的36.04%。在KOG分類(lèi)中,共得到11 562個(gè)功能注釋?zhuān)婕?5個(gè)KOG類(lèi)別,其中信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制比例最大(1 632個(gè),12.80%),其次是翻譯后修飾、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換、分子伴侶(1 511個(gè),11.85%),防御機(jī)制比例較?。?2個(gè),0.72%),最小是核結(jié)構(gòu)(46個(gè),0.36%),這些基因反映了兵蟻與工蟻在一定時(shí)期的表達(dá)情況。在NR數(shù)據(jù)庫(kù)中發(fā)現(xiàn)剩余的未被注釋的基因在無(wú)參考基因組的條件下,可能是黑翅土白蟻?zhàn)陨硖赜械幕?,或是含有蛋白質(zhì)編碼未翻譯或非保守的一段區(qū)域[15]。

    在GO分類(lèi)中,獲得206 751個(gè)功能性注釋?zhuān)忌镞^(guò)程注釋總數(shù)的44.67%,其次是細(xì)胞成分(40.04%)和分子功能(15.28%)。在KEGG分類(lèi)中,有3 591條Unigenes具有具體的定義,共獲得6 657個(gè)KEGG功能注釋?zhuān)?大分支中,基因主要參與信號(hào)傳導(dǎo)、翻譯、糖代謝、折疊排序和降解。對(duì)黑翅土白蟻兵蟻及工蟻差異表達(dá)基因進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞胚胎發(fā)育、生物調(diào)節(jié)、膜部分、突觸等基因表達(dá)均存在差異。黑翅土白蟻中兵蟻及工蟻的差異基因表達(dá)分析結(jié)果可根據(jù)qPCR試驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步分析。兵蟻失去自身取食能力,需由工蟻將食物吞入自身體內(nèi)然后將已經(jīng)消化或半消化的營(yíng)養(yǎng)從口吐出或腸管下側(cè)排出予以喂飼才能存活。因此,轉(zhuǎn)錄組分析可進(jìn)一步探索和發(fā)現(xiàn)纖維素利用、消化酶的調(diào)控基因[16]。

    通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)有65 604條Unigenes具有注釋信息,占總Unigenes的100%。其中,GO分析得到69個(gè)功能分類(lèi),以生物學(xué)過(guò)程、細(xì)胞組分占大多數(shù),各分亞類(lèi)中以細(xì)胞組分、細(xì)胞、細(xì)胞進(jìn)程等類(lèi)別的基因含量豐富,表明黑翅土白蟻具有很強(qiáng)的細(xì)胞活性機(jī)制;KOG分析可分為25個(gè)不同功能分類(lèi),以信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制和轉(zhuǎn)錄功能、一般功能基因的較多;KEGG的293個(gè)代謝通路,以代謝、有機(jī)系統(tǒng)較為豐富。兵蟻與工蟻差異基因的上調(diào)基因有與能量代謝及蛋白質(zhì)翻譯有關(guān),下調(diào)相關(guān)基因有與能量運(yùn)輸相關(guān),差異基因豐富,有助于黑翅土白蟻品級(jí)分化相關(guān)基因發(fā)掘。黑翅土白蟻基因豐富,分析其基因分布特征,確定基因代謝通路的分布,為黑翅土白蟻基因提供了轉(zhuǎn)錄組水平上的支持,也為后續(xù)黑翅土白蟻基因構(gòu)造,遺傳社會(huì)性,獲取有效分子標(biāo)記,綜合防控等提供珍貴的生物資源。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 黃復(fù)生, 朱世模, 平正明, 等. 中國(guó)動(dòng)物志 昆蟲(chóng)綱 第十七卷 等翅目[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2000.

    [2] 蔡邦華, 陳寧生. 中國(guó)白蟻分類(lèi)和區(qū)系問(wèn)題[J]. 昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 1964, 13(1): 25-37.

    [3] 徐志德, 李德運(yùn), 周貴清, 等. 黑翅土白蟻的生物學(xué)特性及綜合防治技術(shù)[J]. 昆蟲(chóng)知識(shí), 2007, 44(5): 763-769.

    [4] 陳艷. 黑翅土白蟻巢群間競(jìng)爭(zhēng)和種間競(jìng)爭(zhēng)的研究[D]. 武漢: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2007.

    [5] 黃求應(yīng). 黑翅土白蟻覓食行為學(xué)基礎(chǔ)及誘殺系統(tǒng)的研究[D]. 武漢: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2006.

    [6] PRESTWICH G D. Chemical systematics of termite exocrine secretions[J]. Annual Review of Ecology and Systematics, 1983, 14(1): 287-311.

    [7] MIURA T, KAMIKOUCHI A, SAWATA M, et al. Soldier caste-specific gene expression in the mandibular glands of Hodotermopsis japonica (Isoptera: Termopsidae)[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1999, 96(24): 13874-13879.

    [8] LEONARDO F C, DA CUNHA A F, DA SILVA M J, et al. Analysis of the workers head transcriptome of the Asian subterranean termite, Coptotermes gestroi[J]. Bulletin of Entomological Research, 2011, 101(4): 383-391.

    [9] BOLGER A M, LOHSE M, USADEL B. Trimmomatic: a flexible trimmer for Illumina sequence data[J]. Bioinformatics, 2014, 30(15): 2114-2120.

    [10] HAAS B J, PAPANICOLAOU A, YASSOUR M, et al. De novo transcript sequence reconstruction from RNA-seq using the Trinity platform for reference generation and analysis[J]. Nature Protocols, 2013, 8(8): 1494-1512.

    [11] PATRO R, DUGGAL G, LOVE M I, et al. Salmon provides fast and bias-aware quantification of transcript expression[J]. Nature Methods, 2017, 14(4): 417-419.

    [12] ALTSCHUL S F, MADDEN T L, SCH?FFER AA, et al. Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs[J]. Nucleic Acids Research, 1997, 25(17): 3389-3402.

    [13] TATUSOV R L, GALPERIN M Y, NATALE D A, et al. The COG database: a tool for genome-scale analysis of protein functions and evolution[J]. Nucleic Acids Research, 2000, 28(1): 33-36.

    [14] KANEHISA M, GOTO S. KEGG: kyoto encyclopedia of genes and genomes[J]. Nucleic Acids Research, 2000, 28(1): 27-30.

    [15] HOWARD R, HAVERTY M I. Seasonal variation in caste proportions of field colonies of Reticulitermes flavipes (Kollar)[J]. Environmental Entomology, 1981, 10(4): 546-549.

    [16] MCMAHAN E A. Studies of termite wood-feeding preferences[J]. Proceedings, Hawaiian Entomological Society, 1966, 19(2): 239-250.

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