鐵嶺地區(qū)牛肉源大腸埃希菌耐藥性調查研究

安妮

大腸埃希菌（E.coli）俗稱大腸桿菌，是人和動物腸道內(nèi)的正常菌群成員之一，常隨糞便排出，故被用作水、食品和飼料等衛(wèi)生檢測的指標。少數(shù)具有致病性，可以引起畜禽特別是幼畜禽的大腸桿菌病。本研究擬對鐵嶺地區(qū)牛肉源大腸埃希菌的藥物敏感性進行檢測，為指導臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)，以減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

1.1 試驗材料

菌株：從鐵嶺地區(qū)8家市場采集的牛肉樣品中分離得到20株大腸埃希菌。

藥物：氨芐西林、頭孢唑啉、頭孢噻肟、美羅培南、慶大霉素、阿米卡星、鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸、環(huán)丙沙星、黏菌素、磷霉素、復方新諾明。

1.2 試驗方法

采用瓊脂稀釋法，對20株大腸埃希菌進行耐藥性檢測。

菌液制備：將已純化并鑒定的20株大腸埃希菌在瓊脂平板上劃線培養(yǎng)后，挑取單個菌落接種于2毫升MH肉湯管中，37℃恒溫振蕩培養(yǎng)4～8小時，用MH肉湯稀釋菌液，至含菌量約為1×106 CFU/毫升，備用。

抗菌藥的稀釋：把抗菌藥物原液按試管二倍稀釋法在試管中稀釋到需要的各個梯度，吸入2毫升藥液放進做好標記的平皿中。

藥物瓊脂平板的制備：用25毫升滅菌移液管吸取18毫升，冷卻至50～60℃MH瓊脂，加入已有2毫升抗菌藥物的平皿中，混勻。同時每種藥物設有兩個空白瓊脂平板。在超凈工作臺中風干冷卻后，立即使用。

細菌接種：按照藥物濃度從低到高的順序，將菌液接種到瓊脂平板表面。將接種好菌液的瓊脂平板放置在超凈臺內(nèi)，直到接種的菌液被瓊脂完全吸干。然后將平板放入培養(yǎng)箱，37℃恒溫培養(yǎng)18～24小時。

1.3 結果判定

當接種前后兩塊空白的MH平板上的所有接種點的菌生長良好，而無接種細菌的平皿均無菌落生長時，試驗組完全不見細菌生長的最低藥物濃度為該藥物對細菌的最小抑菌濃度（MIC）。以 MIC值規(guī)定的敏感、耐藥折點值范圍判斷結果。受試藥物的敏感折點值判斷標準見表1。

試驗中20株大腸埃希菌對氨芐西林和復方新諾明的耐藥率高于65%，對四環(huán)素的耐藥率在45%，對其他12種藥物的耐藥率均低于30%（表2）。

試驗結果表明，多數(shù)常用藥物在雞肉源大腸埃希菌中的耐藥率較低，但仍有少數(shù)藥物的耐藥率較高。為了達到最佳的治療效果，需要正確合理地使用抗生素，在藥敏試驗的基礎上有針對性地選擇用藥，加強對細菌耐藥性的監(jiān)測以及對臨床用藥的指導和監(jiān)管，避免耐藥菌向人類的傳播。