• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    F3代香蘇雜交豬DKK1基因多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)性

    2022-07-14 09:47:05許家利許厚強(qiáng)阮涌趙佳福倪萌萌孫金魁石鵬飛
    關(guān)鍵詞:生長性狀關(guān)聯(lián)性

    許家利 許厚強(qiáng) 阮涌 趙佳福 倪萌萌 孫金魁 石鵬飛

    摘要:【目的】篩選出F3代香蘇雜交豬Dickkopf-1基因(DKKI)的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNPs),并分析基因多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)性,為培育香蘇雜交豬新品系提供參考依據(jù),同時(shí)為深入研究DKK1基因生物學(xué)功能打下基礎(chǔ)。【方法】通過DNA混池測序的方法對164頭F3代香蘇雜交豬群體DKK1基因進(jìn)行SNPs鑒定,采用Excel 2017計(jì)算不同基因型的基因頻率、基因型頻率、遺傳純合度(Ho)、期望雜合度(He)、有效等位基因數(shù)(Ne)及多態(tài)信息含量(PIC),以卡方(c2)檢驗(yàn)分析基因型是否處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài),并在此基礎(chǔ)上分析F3代香蘇雜交豬SNPs位點(diǎn)與生長性狀的關(guān)聯(lián)性。【結(jié)果】在F3代香蘇雜交豬DKK1基因的Exon-3,4區(qū)域發(fā)現(xiàn)6個(gè)SNPs位點(diǎn),分別是A2010T、G2012C、C2014T、A2040C、C2042A和G2044C。6個(gè)SNPs位點(diǎn)的Ho均高于He,其中,A2010T、G2012C、A2040C、C2042A和G2044C等5個(gè)SNPs位點(diǎn)的PIC處于中度多態(tài)水平,C2014T位點(diǎn)的PIC則處于低度多態(tài)水平。c2檢驗(yàn)結(jié)果表明,僅C2042A位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg極度不平衡狀態(tài)(P<0.01),其他5個(gè)SNPs位點(diǎn)(A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C)均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明,F(xiàn)3代香蘇雜交豬DKK1基因A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C位點(diǎn)的不同基因型在體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍方面表現(xiàn)出差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)。【結(jié)論】F3代香蘇雜交豬DKK1基因A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C位點(diǎn)不同基因型與體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍呈顯著或極顯著相關(guān),可作為培育新品系的主效候選基因或與主基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。

    關(guān)鍵詞: 香蘇雜交豬;DKK1基因;單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNPs);生長性狀;關(guān)聯(lián)性

    中圖分類號: S828.89? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:2095-1191(2022)04-0969-08

    Correlation analysis of DKK1 gene polymorphism and

    growth traits of F3 generation Xiangsu hybrid pigs

    XU Jia-li, XU Hou-qiang*, RUAN Yong, ZHAO Jia-fu, NI Meng-meng,

    SUN Jin-kui, SHI Peng-fei

    (College of Zoology,Guizhou University/Key Laboratory of Animal Genetics, Breeding and Reproduction in the Plateau Mountainous Region, Ministry of Education/Guizhou Key Laboratory of Animal Genetics,

    Breeding and Reproduction, Guiyang, Guizhou? 550025, China)

    Abstract:【Objective】Single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the Dickkopf-1 (DKKI) gene of the F3 generation Xiangsu hybrid pigs were screened out, and the correlation between the gene polymorphism and growth traits was analyzed, in order to cultivate a new line of Xiangsu hybrid pigs, so as to lay a foundation for in-depth study on the biological function of DKK1 gene. 【Method】SNPs of DKK1 gene in 164 F3 generation Xiangsu hybrid pig populations were identified by DNA mixed pool sequencing. Gene frequency, genotype frequency, genetic homozygosity (Ho), expected heterozygosity (He), effective allele number (Ne) and polymorphic information content (PIC) of different genotypes were calculated by Excel 2017. Chi square (c2) test was used to analyze whether the genotypes were in Hardy-Weinberg equili-brium, then the association between SNPs and growth traits in F3 Xiangsu hybrid pigs was analyzed based on it. 【Result】Six SNPs were found in Exon-3,4 region of DKK1 gene of F3 Xiangsu hybrid pigs, which were A2010T, G2012C, C2014T, A2040C, C2042A and G2044C respectively. Ho of the six SNPs was higher than that of He. The PIC of the five SNPs, A2010T, G2012C, A2040C,C2042A and G2044C was at the moderate polymorphism level, while the pic of C2014T was at the low polymorphism level. c2 test results showed that only C2042A locus was in Hardy-Weinberg extreme disequilibrium state (P<0.01), and the other five SNPs loci (A2010T, G2012C, C2014T, A2040C and G2044C) were in Hardy-Weinberg equilibrium state (P>0.05). The results of association analysis showed that different genotypes of DKK1 gene A2010T, G2012C, C2014T, A2040C and G2044C in F3 generation Xiangsu hybrid pigs showed significant differences in body height, chest circumference, tube circumference, chest depth or leg and hip circumference (P<0.05) or extremely significant (P<0.01). 【Conclusion】Different genotypes at A2010T, G2012C, C2014T, A2040C and G2044C of DKK1 gene in F3 Xiangsu hybrid pigs are significantly or extremely significantly correlated with body height, chest circumference, tube circumference, chest depth orleg and hip circumference, which can be used as the main candidate gene or molecular markers closely linked with the main genes for breeding new lines.

    Key words: Xiangsu hybrid pig; DKK1 gene; single nucleotide polymorphisms(SNPs) ;growth traits; correlation

    Foundation items: Guizhou Science and Technology Plan Project [QKHFQ〔2018〕4007(002)]; Guizhou Agricultural Major Industrial Scientific Research Tackling Project (QJH-KY〔2019〕011)

    0 引言

    【研究意義】從江香豬是我國西南地區(qū)特有的地方豬品種,具有肉質(zhì)醇香、耐粗飼等特點(diǎn)(許厚強(qiáng),2019;張福平等,2021),但存在生長緩慢及瘦肉率低等劣勢。本課題組前期利用蘇太豬父本與從江香豬母本雜交獲得F1代群體(倪萌萌等,2018a;阮涌等,2018a,2018b,2019a),F(xiàn)1代母本與從江香豬父本雜交獲得F2代群體(倪萌萌等,2018b;阮涌等,2019b),再利用F2代母本與從江香豬父本培育出F3代。與從江香豬相比,香蘇雜交豬具有生長速度快,且能基本保持從江香豬原有肉質(zhì)風(fēng)味的優(yōu)勢。因此,亟待分析基因多態(tài)性與F3代香蘇雜交豬生長性狀的關(guān)聯(lián)性,為后期培育香蘇雜交豬新品系提供科學(xué)依據(jù)?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】Dickkopf(DKK)家族屬于分泌型蛋白家族,在脊椎動(dòng)物中主要包含4個(gè)成員,即DKK1、DKK2、DKK3和DKK4。DKKI是Dickkopf蛋白家族的重要成員之一,是一種外泌型糖蛋白,可作為抑制劑參與Wnt信號調(diào)控(蔡恬恬,2008),由Glinka等(1998)首次在非洲爪蟾胚胎細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)。Yaccoby等(2007)研究表明,抗DKK1抗體可增加成骨細(xì)胞數(shù)量、降低破骨細(xì)胞數(shù)量,進(jìn)而促進(jìn)骨質(zhì)形成;高建斌等(2013)在研究秦川牛生長相關(guān)多態(tài)性位點(diǎn)時(shí)發(fā)現(xiàn),DKK1基因的G523A、A999G、A1169G、C1858T和A2355G位點(diǎn)與體斜長、體高、腰高、尻長、坐骨端寬、背膘厚、眼肌面積及肌間脂肪含量差異顯著相關(guān);郭琳等(2017)在麥洼牦牛、類烏齊牦牛、申扎牦牛、帕里牦牛和斯布牦牛的生長相關(guān)多態(tài)性位點(diǎn)研究中發(fā)現(xiàn),DKK1基因存在2個(gè)突變位點(diǎn)(g.983A→G和g.1075C→G),其中,g.983A→G位點(diǎn)與體高、體斜長、胸圍和體質(zhì)量存在顯著相關(guān)性,而g.1075C→G位點(diǎn)與生長性狀不相關(guān);封竣淇(2018)研究表明,黔北麻羊DKK1基因的7個(gè)突變位點(diǎn)(C454T、A1911G、T1828C、T2056C、T2066C、G2068A和T2239C)與體重、體高、體斜長、胸深、胸圍及管圍等生長性狀均顯著相關(guān);陸娜(2019)通過分析DKK1基因多態(tài)性與羊毛彎曲性狀的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)DKK1基因通過負(fù)調(diào)控IGFBP5基因而在羊毛彎曲形成中起調(diào)控作用;雷蕾(2019)基于2b-RAD技術(shù)對天祝白牦牛毛長性狀的全基因組進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常天祝白耗牛皮膚組織中DKK1基因的表達(dá)量高于長毛型個(gè)體,DKK1基因表達(dá)量低,其毛囊生長期延長且退行期推遲,進(jìn)而產(chǎn)生天祝白耗牛長毛型個(gè)體;田志鵬等(2019)通過研究小鼠胚胎發(fā)育過程中Brachyury蛋白對Wnt信號通路的作用機(jī)理,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Brachyury、Axin2、Dkk1及Wnt3a蛋白在突變胚胎和野生胚胎中的表達(dá)存在顯著差異;張夢瑤等(2018)研究表明,以構(gòu)建的敖漢細(xì)毛羊DKK1基因重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染成纖維細(xì)胞,轉(zhuǎn)染的成纖維細(xì)胞生長良好,且DKK1基因的表達(dá)量極顯著高于未轉(zhuǎn)染組;Lu等(2020)研究證實(shí),膽汁酸可誘導(dǎo)胃上皮細(xì)胞中腸道標(biāo)志物的表達(dá),而DKK1基因因膽汁酸的刺激呈下調(diào)表達(dá);Wang等(2020)研究發(fā)現(xiàn),HOXA10通過調(diào)節(jié)β-catenin定位和DKK1基因表達(dá)而抑制牙周韌帶干細(xì)胞的成骨分化; He等(2021)研究發(fā)現(xiàn),DEC1是在骨發(fā)育和維持中具有廣泛活性譜的正調(diào)節(jié)劑,需通過增強(qiáng)DKK1活性和減弱PI3KCA/Akt/GSK3β信號傳導(dǎo)而發(fā)揮作用?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】至今,有關(guān)DKK1基因在蟾蜍、小鼠、牛、羊及人類上的研究較多,但鮮見DKK1基因與豬生長性狀關(guān)聯(lián)性的研究報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】以F3代香蘇雜交豬為研究對象,通過DNA混池測序的方法對DKK1基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNPs)進(jìn)行鑒定,并與生長性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,以期為培育香蘇雜交豬新品系提供參考依據(jù),同時(shí)為深入研究DKK1基因生物學(xué)功能打下基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1. 1 試驗(yàn)材料

    選取同一飼養(yǎng)環(huán)境下的164頭F3代香蘇雜交豬,測量記錄其生長性狀(體重、體直長、體高、胸圍、腹圍、管圍、胸深、胸寬和腿臀圍),并通過耳緣靜脈或前腔靜脈采集5 mL血液,放入EDTA抗凝管。試驗(yàn)豬由貴州大學(xué)香豬育種場提供,喂養(yǎng)飼料購自貴陽臺農(nóng)種養(yǎng)殖有限公司。DNA提取試劑盒購自上海西寶生物科技有限公司;2×Taq PCR StarMix購自上海詡圣生物科技有限公司;DL2000 DNA Marker購自北京擎科生物技術(shù)有限公司;超微量分光光度計(jì)(型號Thermo Mano Drop 2000)和高速冷凍離心機(jī)(型號RC-6 Plus)購自Thermo公司;梯度PCR儀(型號9902)購自ABI公司;凝膠成像系統(tǒng)(型號Universal Hood II)購自Bio-Rad公司。

    1. 2 引物設(shè)計(jì)與合成

    根據(jù)NCBI已公布的豬DKK1基因(NC-010456.5)外顯子區(qū)域,采用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增引物(表1),并委托北京擎科生物技術(shù)有限公司合成。

    1. 3 DNA提取及檢測

    采用Blood DNA Mini Kit試劑盒提取F3代香蘇雜交豬血液DNA,通過超微量分光光度計(jì)檢測DNA的濃度和純度,并以1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1. 4 PCR擴(kuò)增及測序

    PCR反應(yīng)體系30.0 μL:2×Taq PCR StarMix 15.0 μL,上、下游引物各1.0 μL,DNA模板1.5 μL,ddH2O 11.5 μL。擴(kuò)增程序:94 ℃預(yù)變性2 min;94 ℃ 30 s,61 ℃ 30 s,72 ℃ 1 min,進(jìn)行35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸7 min,4 ℃保存。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物以1.0%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測。同時(shí)對提取的血液DNA混池(1.0 μL)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物委托北京擎科生物技術(shù)有限公司完成測序,測序結(jié)果使用DNAStar進(jìn)行序列對比,篩選出SNPs位點(diǎn)。

    1. 5 數(shù)據(jù)處理

    利用SPSS 25.0中的單因素分析(ANOVA)對不同基因型的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,分析不同基因型與生長性狀的關(guān)聯(lián)性;并以LSD對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。采用Excel 2017計(jì)算不同基因型的基因頻率、基因型頻率、遺傳純合度(Ho)、期望雜合度(He)、有效等位基因數(shù)(Ne)及多態(tài)信息含量(PIC),以卡方(c2)檢驗(yàn)分析基因型是否處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(周春寶等,2021)。

    2 結(jié)果與分析

    2. 1 PCR擴(kuò)增結(jié)果

    利用表1中的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.0%瓊脂糖凝膠電泳40 min,在凝膠成像系統(tǒng)檢測目的基因片段,結(jié)果(圖1)顯示DKK1基因Exon-1,2和Exon-3,4的PCR擴(kuò)增電泳圖譜與預(yù)期的基因片段長度接近,且條帶清晰單一。

    2. 2 測序分析結(jié)果

    使用DNAStar對測序結(jié)果進(jìn)行序列比對分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在DKK1基因的Exon-3,4區(qū)域存在6個(gè)SNPs位點(diǎn),分別是A2010T、G2012C、C2014T、A2040C、C2042A和G2044C(圖2)。

    2. 3 F3代香蘇雜交豬DKK1基因SNPs位點(diǎn)遺傳學(xué)分析結(jié)果

    由表2可知,F(xiàn)3代香蘇雜交豬DKK1基因6個(gè)SNPs位點(diǎn)的Ho均高于He,其中,A2010T、G2012C、A2040C、C2042A和G2044C等5個(gè)SNPs位點(diǎn)的PIC處于中度多態(tài)水平,C2014T位點(diǎn)的PIC則處于低度多態(tài)水平。A2010T位點(diǎn)以AA型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中A>T;G2012C位點(diǎn)以GG型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中G>C;C2014T位點(diǎn)以CC型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中C>T;A2040C位點(diǎn)以AC型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中A>C;C2042A位點(diǎn)以CC型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中C>A;G2044C位點(diǎn)以GG型為優(yōu)勢基因型,等位基因頻率中G>C。c2檢驗(yàn)結(jié)果表明,僅C2042A位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg極度不平衡狀態(tài)(P<0.01),其他5個(gè)SNPs位點(diǎn)(A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C)均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。

    2. 4 F3代香蘇雜交豬DKK1基因SNPs位點(diǎn)基因型與生長性狀的關(guān)聯(lián)性

    運(yùn)用SPSS 25.0對F3代香蘇雜交豬DKK1基因SNPs位點(diǎn)不同基因型與其生長性狀(體重、體直長、體高、胸圍、腹圍、管圍、胸深、胸寬和腿臀圍)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析,結(jié)果(表3)表明,A2010T位點(diǎn)不同基因型群體在體高和胸深方面存在差異極顯著(P<0.01,下同),在胸圍和管圍方面存在差異顯著(P<0.05,下同);G2012C位點(diǎn)不同基因型群體在體高和胸深方面存在差異極顯著;C2014T位點(diǎn)不同基因型群體在體高方面存在差異顯著;A2040C位點(diǎn)不同基因型群體在體高方面存在差異極顯著,在胸深和腿臀圍方面存在差異顯著;G2044C位點(diǎn)不同基因型群體在體高方面存在差異極顯著,在胸圍和腿臀圍方面存在差異顯著??梢姡現(xiàn)3代香蘇雜交豬DKK1基因A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C位點(diǎn)的不同基因型在體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍方面表現(xiàn)出差異顯著或極顯著。

    3 討論

    DKK1基因最早是在誘導(dǎo)非洲蟾蜍頭部發(fā)育和脊索前板形成的研究中發(fā)現(xiàn)(Glinka et al.,1998),目前已在蟾蜍、小鼠、牛、羊等脊椎動(dòng)物及人類中得到廣泛研究,且普遍認(rèn)為DKK1基因能調(diào)控骨骼形成,尤其與肢體骨骼發(fā)育和脂肪分化密切相關(guān)(高建斌等,2013;封竣淇等,2018)。Hashimoto等(2000)在斑馬魚胚胎發(fā)育早期的研究中發(fā)現(xiàn),DKK1基因的表達(dá)量會影響骨發(fā)育,高表達(dá)量可造成斑馬魚軀干縮短和頭部擴(kuò)張,低表達(dá)量則導(dǎo)致斑馬魚小頭胚胎形成。Hall等(2005)研究表明,在成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)移早期,DKK1基因在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào),抑制Wnt信號通路,表現(xiàn)為促進(jìn)骨溶解;但在成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)移后期,前列腺癌細(xì)胞中的DKK1基因表達(dá)下降并發(fā)生關(guān)閉,間接抑制骨溶解過程。Wang等(2007)研究認(rèn)為,DKKI基因的反義寡核普酸可增加成骨細(xì)胞數(shù)量,降低RANKL基因表達(dá),減少破骨細(xì)胞的發(fā)生,增強(qiáng)去卵巢大鼠股骨的骨礦含量和骨密度。Piters等(2010)針對男青年DKKI基因突變的研究表明,DKK1基因突變對人類骸部差異影響顯著,但對于骨密度和骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物的影響不顯著??梢?,DKK1基因在調(diào)控骨骼、肌肉生長等生理過程中發(fā)揮重要作用,是重要的生長相關(guān)候選基因,但其與豬生長相關(guān)的研究鮮見報(bào)道。

    本研究采用PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測序法,在F3代香蘇雜交豬DKK1基因上共發(fā)現(xiàn)6個(gè)SNPs位點(diǎn),其中,A2010T、G2012C、A2040C、C2042A和G2044C等5個(gè)SNPs位點(diǎn)的PIC處于中度多態(tài)水平, C2014T位點(diǎn)的PIC為低度多態(tài)水平,具有進(jìn)一步的選擇提升空間。c2檢驗(yàn)結(jié)果表明,C2042A位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg極度不平衡狀態(tài),可能是在自然或人工選育過程中被逐漸淘汰;而A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C等位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài),說明這5個(gè)SNPs位點(diǎn)在自然選擇和人工選育等外界因素作用下仍處于動(dòng)態(tài)平衡,對今后育種工作有一定的參考價(jià)值。

    高建斌等(2013)在秦川牛生長相關(guān)多態(tài)性位點(diǎn)的研究中發(fā)現(xiàn),DKK1基因的G523A、A999G、A1169G、C1858T和A2355G位點(diǎn)與體斜長、體高、腰高、尻長、坐骨端寬、背膘厚、眼肌面積及肌間脂肪含量差異顯著相關(guān)。郭琳等(2017)在麥洼牦牛、類烏齊牦牛、申扎牦牛、帕里牦牛和斯布牦牛生長相關(guān)多態(tài)性位點(diǎn)的研究中發(fā)現(xiàn)DKK1基因存在2個(gè)突變位點(diǎn)(g.983A→G和g.1075C→G),其中g(shù).983A→G位點(diǎn)與體高、體斜長、胸圍和體質(zhì)量呈顯著相關(guān)。封竣淇(2018)在黔北麻羊生長相關(guān)多態(tài)性位點(diǎn)的研究中發(fā)現(xiàn),DKK1基因存在7個(gè)SNPs位點(diǎn)(C454T、A1911G、T1828C、T2056C、T2066C、G2068A和T2239C)與體重、體高、體斜長、胸深、胸圍及管圍等具有顯著相關(guān)性。本研究結(jié)果表明,在F3代香蘇雜交豬群體中,DKK1基因的A2510T、G2512C、G2513C、C2514T、A2540C和G2544C位點(diǎn)與體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍等生長性狀具有不同程度的正相關(guān)??梢?,DKK1基因在不同物種中的多態(tài)性差異明顯,但也說明其多態(tài)性與生長性狀具有顯著關(guān)聯(lián)。此外,曹貴玲等(2010)通過分析山羊DKKl基因多態(tài)性與產(chǎn)絨量的關(guān)聯(lián)性,發(fā)現(xiàn)啟動(dòng)子區(qū)存在2個(gè)鄰近多態(tài)位點(diǎn),以A為優(yōu)勢等位基因,且對產(chǎn)絨量和單位體表面積產(chǎn)絨量有利。Liu等(2011)對DKK1基因與豬胴體性狀的相關(guān)分析結(jié)果表明,豬DKK1基因第2內(nèi)含子存在1757G→A,并證實(shí)AG基因型與豬胴體性狀的眼肌面積顯著相關(guān)。欒新(2012)研究表明,兔DKK1基因的2個(gè)突變基因型(AA和BB)與其皮張面積、毛長、毛密度、光澤度和平整度的關(guān)聯(lián)性均不顯著。本研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)3代香蘇雜交豬DKK1基因有6個(gè)SNPs位點(diǎn),其中5個(gè)SNPs位點(diǎn)(A2010T、G2512C、C2514T、A2540C和G2544C)的不同基因型在體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍方面表現(xiàn)出差異顯著或極顯著,但關(guān)于F3代香蘇雜交豬DKK1基因與屠宰性能是否也存在高度相關(guān)性尚有待進(jìn)一步探究。

    4 結(jié)論

    F3代香蘇雜交豬DKK1基因A2010T、G2012C、C2014T、A2040C和G2044C位點(diǎn)不同基因型與體高、胸圍、管圍、胸深和腿臀圍呈顯著或極顯著相關(guān),可作為培育新品系的主效候選基因或與主基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。

    參考文獻(xiàn):

    蔡恬恬. 2008. Dkk1抑制經(jīng)典Wnt信號通路的分子機(jī)制的研究[D]. 北京:清華大學(xué). [Cai T T. 2008. Study of the molecular mechanism of Dkk1-mediated inhibition of canonical Wnt pathway[D]. Beijing:Tsinghua University.]

    曹貴玲,張渝潔,李標(biāo),唐培榮,姜運(yùn)良. 2010. 山羊Dkk1基因的結(jié)構(gòu)、啟動(dòng)子區(qū)的多態(tài)性及其與生產(chǎn)性狀的關(guān)聯(lián)分析[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),41(11):1394-1400. [Cao G L,Zhang Y J,Li B,Tang P R,Jiang Y L. 2010. Genomic structure,polymorphism in promoter region and their associations with production traits of Dkkl gene in goats[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,41(11):1394-1400.]

    封竣淇,羅衛(wèi)星,張依裕,蔡惠芬,羅錚,徐偉,翁吉梅,陳說. 2018. 黔北麻羊DKK1基因CDS區(qū)及部分內(nèi)含子的多態(tài)性與生物信息學(xué)分析[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),31(1):211-216. [Feng J Q,Luo W X,Zhang Y Y,Cai H F,Luo Z,Xu W,Weng J M,Chen Y. 2018. Polymorphism and bioinformatic analysis of CDS region and part introns of Qianbei Ma goat DKK1 gene[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences,31(1):211-216.] doi:10.16213/ j.cnki.scjas.2018.1.036.

    封竣淇. 2018. DKK1、DKK2基因多態(tài)性及甲基化對黔北麻羊生長性狀的遺傳效應(yīng)分析[D]. 貴陽:貴州大學(xué). [Feng J Q. 2018. Analysis of genetic effects of DKK1 gene and DKK2 gene polymorphisms and methylation on growth traits of Qianbei brown goat[D]. Guiyang:Guizhou University.]

    高建斌,昝林森,楊寧,李耀坤,皇甫一凡,郝瑞杰,馬向輝,付常振,姜碧杰,成功. 2013. 秦川牛DKK1基因SNPs檢測及其與體尺、肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),44(3):376-386. [Gao J B,Zan L S,Yang N,Li Y K,Huangfu Y F,Hao R J,Ma X H,F(xiàn)u C Z,Jiang B J,Cheng G. 2013. Polymorphisms of DKK1 gene and its association with body measurement and meat quality traits in Qinchuan cattle[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,44(3):376-386.]

    郭琳,柴志欣,鐘金城,陳智華. 2017. 牦牛DKK1基因多態(tài)性及其與生長性狀的相關(guān)性[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),26(7):975-982. [Guo L,Chai Z X,Zhong J C,Chen Z H. 2017. Association of single nucleotide polymorphism of DKK1 gene with growth traits in yak[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,26(7):975-982.] doi:10.7606/j.issn.1004-1389.2017.07.003.

    雷蕾. 2019. 基于2b-RAD技術(shù)對天祝白牦牛毛長性狀的全基因組關(guān)聯(lián)分析[D]. 蘭州:西北民族大學(xué). [Lei L. 2019. Genome-wide association study of hair length trait in Tianzhu white yak (Bos grunniens) based on 2b-RAD[D]. Lanzhou:Northwest Minzu University.] doi:10.27408/d.cnki.gxmzc.2019.000291.

    陸娜. 2019. DKK1與羊毛彎曲性狀的相關(guān)性分析[D]. 太原:山西農(nóng)業(yè)大學(xué). [Lu N. 2019. Correlation analysis between DKK1 and wool bending character[D]. Taiyuan:Shanxi Agricultural University.] doi:10.27285/d.cnki.gsxnu.2019. 000575.

    欒新. 2012. 兔MC4R和DKK1基因的多態(tài)性及其與經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)系研究[D]. 泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué). [Luan X. 2012. The association of polymorphism of MC4R and DKK1 gene with economic traits in rabbits[D]. Tai?an:Shandong Agricultural University.] doi:10.7666/d.y2117009.

    倪萌萌,謝玲玲,阮涌,蔡剛志,張林華,許厚強(qiáng). 2018a. 從江香豬與蘇太豬不同組合雜交性能比較研究[J]. 畜牧與獸醫(yī),50(10):12-16. [Ni M M,Xie L L,Ruan Y,Cai G Z,Zhang L H,Xu H Q. 2018a. Comparative study of the crossing performance of different combinations of Cong-jiang Xiang pigs and Sutai pigs[J]. Animal Husbandry & Veterinary Medicine,50(10):12-16.]

    倪萌萌,謝玲玲,阮涌,趙佳福,段志強(qiáng),陳祥,許厚強(qiáng). 2018b. 從江香豬、蘇太豬不同雜交組合繁殖性能比較[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),(14):82-83. [Ni M M,Xie L L,Ruan Y,Zhao J F,Duan Z Q,Chen X,Xu H Q. 2018b. Comparison of reproductive performance of different cross combinations of Congjiang Xiang pig and Sutai pig[J]. Heilong-jiang Animal Science and Veterinary Medicine,(14):82-83.] doi:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.12.0096.

    阮涌,嵇辛勤,茍維勝,盧賢君,段志強(qiáng),趙佳福,倪萌萌. 2019a. 蘇×香F1代JHDM1A基因多態(tài)性與生長性能相關(guān)性分析[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),38(4):1540-1544. [Ruan Y,Ji X Q,Gou W S,Lu X J,Duan Z Q,Zhao J F,Ni M M. 2019a. Correlation analysis of polymorphisms and growth traits of JHDM1A gene in F1 pig of Su×Xiang pig hybrid[J]. Genomics and Applied Biology,38(4):1540-1544.] doi:10.13417/j.gab.038.001540.

    阮涌,嵇辛勤,茍維勝,盧賢君,趙佳福,段志強(qiáng),倪萌萌. 2018a. F1代蘇香雜交豬GAS7、JHDM1A基因組織表達(dá)水平研究[J]. 生物技術(shù),28(2):196-199. [Ruan Y,Ji X Q,Gou W S,Lu X J,Zhao J F,Duan Z Q,Ni M M. 2018a. Study the expression level of GAS7 and JHDMIA gene in different tissues in Suxiang hybrid F1 pig[J]. Biotechnology,28(2):196-199.] doi:10.16519/j.cnki.1004-311x. 2018.02.0034.

    阮涌,嵇辛勤,盧賢君,趙佳福,段志強(qiáng),倪萌萌. 2018b. F1代蘇香雜交豬GAS7基因多態(tài)性與生長性狀關(guān)聯(lián)性分析[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),(5):115-117. [Ruan Y,Ji X Q,Lu X J,Zhao J F,Duan Z Q,Ni M M. 2018b. Association analysis of GAS7 gene polymorphism and growth traits of F1 generation Suxiang hybrid pigs[J]. Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine,(5):115-117.] doi:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.08.0010.

    阮涌,廖政,倪萌萌,趙佳福,段志強(qiáng),嵇辛勤. 2019b. 香×蘇F2代雜交豬屠宰性狀、肉質(zhì)性狀及臟器系數(shù)的測定[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),(12):52-54. [Ruan Y,Liao Z,Ni M M,Zhao J F,Duan Z Q,Ji X Q. 2019b. Determination of slaughter traits,meat quality traits and organ coefficients of Xiang×Su F2 hybrid pigs[J]. Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine,(12):52- 54.] doi:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.08.0360.

    田志鵬,智達(dá)夫,龍鑫,曹貴方. 2019. 小鼠胚胎發(fā)育過程中Brachyury對Wnt信號通路的作用研究[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),38(6):2509-2515. [Tian Z P,Zhi D F,Long X,Cao G F. 2019. Effect of Brachyury on Wnt signaling pathway during embryonic development in mice[J] Genomics and Applied Biology,38(6):2509-2515.] doi:10.13417/j.gab.038.002509.

    許厚強(qiáng). 2019. 貴州地方畜禽遺傳資源志[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社. [Xu H Q. 2019. Animal genetic resources in Guizhou[M]. Beijing:China Agriculture Press.]

    張福平,唐靚婷,王嘉福,冉雪琴,李升,黃世會. 2021. 基于轉(zhuǎn)錄組測序篩選影響從江香豬產(chǎn)仔數(shù)的候選基因[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),52(4):847-856. [Zhang F P,Tang L T,Wang J F,Ran X Q,Li S,Huang S H. 2021. Selection of candidate genes affecting litter size of Congjiang Xiang pig by transcriptome sequencing[J]. Journal of Southern Agriculture,52(4):847-856.] doi:10.3969/j.issn.2095-1191.2021.04.001.

    張夢瑤,楊峰,劉開東,程明,王國義,劉積鳳,柳楠,賀建寧. 2018. 敖漢細(xì)毛羊DKK1基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在成纖維細(xì)胞中表達(dá)量的研究[J]. 中國畜牧獸醫(yī),45(1):131-139. [Zhang M Y,Yang F,Liu K D,Cheng M,Wang G Y,Liu J F,Liu N,He J N. 2018. Study on construction of DKK1 gene recombinant plasmid in Aohan fine wool sheep and its expression in fibroblasts[J] China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,45(1):131-139.] doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2018.01.017.

    周春寶,劉林雨,胡廷延,倪黎綱,徐盼. 2021. 蘇姜豬MC4R基因多態(tài)性及其與生產(chǎn)性狀的關(guān)聯(lián)分析[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),37(4):929-935. [Zhou C B,Liu L Y,Hu T Y,Ni L G,Xu P. 2021. Analysis on MC4R gene polymorphism and its association with production traits in Sujiang pigs[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,37(4):929-935.] doi:10.3969/j.issn.1000-4440.2021.04.015.

    Glinka A,Wu W,Delius H,Monaghan A P,Blumenstock C,Niehrs C. 1998. Dickkopf-1 is a member of a new family of secreted proteins and functions in head induction[J]. Nature,391(6665):357-62. doi:10.1038/34848.

    Hall C L,Bafico A,Dai J L,Aaronson S A,Keller E T. 2005. Prostate cancer cells promote osteoblastic bone metastases through Wnts[J]. Cancer Research,65(17):7554-7560. doi:10.1158/0008-5472.

    Hashimoto H,Itoh M,Yamanaka Y,Yamashita S,Shimizu T,Solnica-Krezel L,Hibi M,Hirano T. 2000. Zebrafish Dkk1 functions in forebrain specification and axial mesendoderm formation[J]. Developmental Biology,217(1):138-152. doi:10.1006/dbio.1999.9537.

    He S C,Guan Y,Wu Y C,Zhu L,Yan B F,Honda H,Yang J,Liu W. 2021. DEC1 deficiency results in accelerated osteopenia through enhanced DKK1 activity and attenuated PI3KCA/Akt/GSK3 beta signaling[J]. Metabolism:Clinical and Experimental,118:154730. doi:10.1016/j.meta-bol.2021.154730.

    Liu C X,Gao H,Zhai S L,Liu B. 2011. Molecular characte-rization,chromosomal localization,expression profile and association analysis with carcass traits of the porcinedickkopf homolog1gene[J]. Molecular Biology Reports,38(3):1929-1934. doi:10.1007/s11033-010-0313-x.

    Lu W Q,Ni Z,Tong M F,Jiang S Q,Zhang J,F(xiàn)eng C C,Han C,Yuan T,Wang N,Zhao J,Sun N N,Liu C F,Jia Q Y,Wu Q,Ning H B,Shi Y Q. 2020. DKK1 is epigenetically downregulated by promoter methylation and inhibits bile acid-induced gastric intestinal metaplasia[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications,523(3):780-786. doi:10.1016/j.bbrc.2019.12.109.

    Piters E,Balemans W,Nielsen T L,Andersen M,Boudin E,Brixen K,van Hul W. 2010. Common genetic variation in the DKK1 gene is associated with hip axis length but not with bone mineral density and bone turnover markers in young adult men:Results from the Odense Androgen Study[J]. Calcified Tissue International,86(4):271-281. doi:10.1007/s00223-010-9334-7.

    Wang C Z,Li Y Z,Yu K,Jiang Z W,Wang Y,Yang G L. 2020. HOXA10 inhibit the osteogenic differentiation of periodontal ligament stem cells by regulating β-catenin localization and DKK1 expression[J]. Connective Tissue Research,62(4):393-401. doi:10.1080/03008207.2020.17 56271.

    Wang F S,Ko J Y,Lin C L,Wu H L,Ke H J,Tai P J. 2007. Knocking down diekkopf-1 alleviates esogen deficiency induction of bone loss. A histomorphological study in ovariectomized rats[J]. Bone,40(2):485-492. doi:10.1016/ j.bone.2006.09.004.

    Yaccoby S,Ling W,Zhan F h,Walker R,Barlogie B,Shaughnessy Jr J D. 2007. Antibody-based inhibition of DKK1 suppresses tumor-induced bone resorption and multiple myeloma growth in vivo[J]. Blood,109(5):2106-2111. doi:10.1182/blood-2006-09-047712.

    收稿日期:2021-05-06

    基金項(xiàng)目:貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目[黔科合服企〔2018〕4007(002)號];貴州省農(nóng)業(yè)重大產(chǎn)業(yè)科學(xué)研究攻關(guān)項(xiàng)目(黔教合KY字〔2019〕011號)

    通訊作者:許厚強(qiáng)(1957-),https://orcid.org/0000-0002-4696-5671,博士,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事細(xì)胞分子生物學(xué)及動(dòng)物遺傳育種研究工作,E-mail:gzdxxhq@163.com

    第一作者:許家利(1996-),https://orcid.org/0000-0002-5393-0506,研究方向?yàn)閯?dòng)物遺傳育種與種質(zhì)創(chuàng)新,E-mail:1484209550 @qq.com

    猜你喜歡
    生長性狀關(guān)聯(lián)性
    四物湯有效成分的關(guān)聯(lián)性分析
    中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:05
    斑點(diǎn)叉尾MSTN基因4個(gè)SNP位點(diǎn)及其與生長性狀的相關(guān)性
    如何準(zhǔn)確認(rèn)定排污行為和環(huán)境損害之間的關(guān)聯(lián)性
    CRP檢測與新生兒感染的關(guān)聯(lián)性
    不同年齡關(guān)嶺黃牛生長性狀及肌肉氨基酸組成分析
    翠京元微生物肥對晚稻生長性狀及產(chǎn)量的影響研究
    木荷種源和家系試驗(yàn)林早期生長性狀分析
    杉木速生優(yōu)良無性系選擇研究
    設(shè)計(jì)鮮為人知的一面:匠藝的關(guān)聯(lián)性
    不同播期、密度對遼西地區(qū)玉米生長性狀及產(chǎn)量的影響
    大香蕉97超碰在线| 搡老妇女老女人老熟妇| 特级一级黄色大片| 能在线免费观看的黄片| 99九九线精品视频在线观看视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产精品久久久久久久电影| 可以在线观看毛片的网站| 99热精品在线国产| 插逼视频在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 插逼视频在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 禁无遮挡网站| 一本一本综合久久| 丝袜喷水一区| 免费看美女性在线毛片视频| 久久久亚洲精品成人影院| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产亚洲精品av在线| 国产 一区 欧美 日韩| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 成人毛片a级毛片在线播放| 免费电影在线观看免费观看| 69人妻影院| 最近手机中文字幕大全| 午夜老司机福利剧场| 色综合站精品国产| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 九草在线视频观看| 黄色日韩在线| 免费观看a级毛片全部| 我要看日韩黄色一级片| 少妇熟女欧美另类| 久久精品国产亚洲av天美| 老女人水多毛片| 久热久热在线精品观看| 热99re8久久精品国产| 亚洲av免费高清在线观看| 两个人视频免费观看高清| 一级二级三级毛片免费看| 国产成人aa在线观看| 国产探花在线观看一区二区| 久久鲁丝午夜福利片| 久久精品91蜜桃| 亚洲在线观看片| 欧美成人午夜免费资源| 日本黄色片子视频| 国产淫片久久久久久久久| 热99re8久久精品国产| 午夜视频国产福利| 国产精品福利在线免费观看| 成人午夜高清在线视频| 如何舔出高潮| 亚洲人成网站在线观看播放| 免费看光身美女| 国产精品人妻久久久久久| 国产探花在线观看一区二区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | av又黄又爽大尺度在线免费看 | 久久亚洲国产成人精品v| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 在线播放国产精品三级| 2021少妇久久久久久久久久久| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲最大成人中文| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久久久久久国产电影| 欧美成人午夜免费资源| 欧美另类亚洲清纯唯美| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲最大成人中文| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产免费又黄又爽又色| 十八禁国产超污无遮挡网站| 成年av动漫网址| 高清在线视频一区二区三区 | 色尼玛亚洲综合影院| 免费一级毛片在线播放高清视频| www.av在线官网国产| 国产午夜精品论理片| 赤兔流量卡办理| 国产成人精品一,二区| 国产乱人偷精品视频| 久久久久久久国产电影| 直男gayav资源| 亚洲不卡免费看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 综合色丁香网| 精品久久久久久久久av| 高清日韩中文字幕在线| 九色成人免费人妻av| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲欧洲日产国产| 免费观看的影片在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| av天堂中文字幕网| 美女大奶头视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 精品一区二区三区人妻视频| 永久免费av网站大全| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲精品色激情综合| 久久综合国产亚洲精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲三级黄色毛片| 欧美人与善性xxx| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲经典国产精华液单| 岛国毛片在线播放| av免费观看日本| 久99久视频精品免费| 免费观看的影片在线观看| 免费在线观看成人毛片| 禁无遮挡网站| 91久久精品国产一区二区成人| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲欧美日韩卡通动漫| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲欧美清纯卡通| 国产免费又黄又爽又色| 在线a可以看的网站| 村上凉子中文字幕在线| www日本黄色视频网| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| .国产精品久久| 国产午夜福利久久久久久| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日韩av不卡免费在线播放| 99热网站在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美变态另类bdsm刘玥| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲国产精品合色在线| 99久久九九国产精品国产免费| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 97热精品久久久久久| 中文字幕制服av| 看片在线看免费视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久久久久九九精品二区国产| 九九在线视频观看精品| 国产成人精品久久久久久| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜日本视频在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲av福利一区| 男女国产视频网站| 一级毛片电影观看 | 丰满乱子伦码专区| av在线播放精品| 久久草成人影院| 色5月婷婷丁香| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 在线观看一区二区三区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩精品有码人妻一区| 最近最新中文字幕免费大全7| 麻豆国产97在线/欧美| 在现免费观看毛片| 国产探花极品一区二区| 亚洲av成人av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产男人的电影天堂91| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久亚洲精品不卡| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 国产精品一区二区三区四区免费观看| 人体艺术视频欧美日本| 日本wwww免费看| or卡值多少钱| 少妇的逼好多水| 我要搜黄色片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 最近的中文字幕免费完整| 精品人妻一区二区三区麻豆| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 天天一区二区日本电影三级| 国产在线一区二区三区精 | 国产成人a区在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 高清午夜精品一区二区三区| 精品一区二区免费观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 性色avwww在线观看| 嫩草影院入口| 超碰av人人做人人爽久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产成年人精品一区二区| 亚洲国产欧美在线一区| 插阴视频在线观看视频| 国产精品伦人一区二区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成人一区二区视频在线观看| 国产亚洲精品av在线| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产伦精品一区二区三区四那| 高清在线视频一区二区三区 | 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产成人freesex在线| 国产精品综合久久久久久久免费| av播播在线观看一区| 免费看美女性在线毛片视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 免费观看性生交大片5| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲国产精品成人综合色| 日日干狠狠操夜夜爽| 两个人视频免费观看高清| 国产真实乱freesex| 99久久人妻综合| 男女那种视频在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 国产精品野战在线观看| 岛国毛片在线播放| 国产真实伦视频高清在线观看| 亚洲最大成人av| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲在线自拍视频| 老女人水多毛片| 天堂网av新在线| 国产探花极品一区二区| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲av免费在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 99久国产av精品| 午夜视频国产福利| 亚洲最大成人中文| 国产毛片a区久久久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品福利在线免费观看| 内射极品少妇av片p| 久久热精品热| 99在线人妻在线中文字幕| 高清日韩中文字幕在线| 欧美精品国产亚洲| 久久久久九九精品影院| 国产视频内射| 联通29元200g的流量卡| 内射极品少妇av片p| 哪个播放器可以免费观看大片| 一级毛片我不卡| 精品国内亚洲2022精品成人| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲欧洲国产日韩| 色综合站精品国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 一区二区三区免费毛片| 极品教师在线视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 91在线精品国自产拍蜜月| 午夜福利成人在线免费观看| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩欧美 国产精品| 欧美精品国产亚洲| 国产精品蜜桃在线观看| 全区人妻精品视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲av福利一区| 免费大片18禁| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 好男人在线观看高清免费视频| 中文字幕制服av| 伦精品一区二区三区| 日日啪夜夜撸| 亚洲国产精品成人久久小说| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产乱人视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 级片在线观看| 99久久精品一区二区三区| 黄色日韩在线| 日本色播在线视频| 大香蕉97超碰在线| 午夜视频国产福利| 国产精品一区二区性色av| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲综合色惰| av在线天堂中文字幕| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品一二三区在线看| 国产成人一区二区在线| 国产精品久久久久久精品电影| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲精品色激情综合| 亚洲av成人av| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲av二区三区四区| 97超视频在线观看视频| 熟女人妻精品中文字幕| 成年av动漫网址| 欧美变态另类bdsm刘玥| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产极品精品免费视频能看的| 免费看a级黄色片| 国产精品女同一区二区软件| 高清在线视频一区二区三区 | 婷婷色麻豆天堂久久 | 国产精品嫩草影院av在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲不卡免费看| 搞女人的毛片| 欧美又色又爽又黄视频| 听说在线观看完整版免费高清| 国产69精品久久久久777片| 在线观看66精品国产| 久久99热这里只有精品18| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久久精品94久久精品| 成人午夜高清在线视频| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品一区二区三区四区免费观看| av免费在线看不卡| 人妻系列 视频| 欧美人与善性xxx| 午夜日本视频在线| 久久这里只有精品中国| 一级毛片电影观看 | 午夜精品在线福利| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲色图av天堂| 色吧在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 中文欧美无线码| a级毛色黄片| 婷婷色麻豆天堂久久 | 亚洲经典国产精华液单| 黑人高潮一二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲成人久久爱视频| 欧美高清性xxxxhd video| 国产成人freesex在线| 久久国产乱子免费精品| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日韩一区二区三区影片| www.av在线官网国产| 舔av片在线| 久久久a久久爽久久v久久| 国产三级中文精品| 青青草视频在线视频观看| 能在线免费观看的黄片| 在线播放国产精品三级| 国产精品国产高清国产av| 免费观看在线日韩| 亚州av有码| 欧美xxxx性猛交bbbb| 麻豆成人午夜福利视频| 极品教师在线视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 啦啦啦啦在线视频资源| 高清午夜精品一区二区三区| 国产成人精品婷婷| a级毛色黄片| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 欧美bdsm另类| 99在线视频只有这里精品首页| 国产免费又黄又爽又色| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | videossex国产| 成年av动漫网址| 国产爱豆传媒在线观看| 国产视频首页在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 国产爱豆传媒在线观看| 秋霞在线观看毛片| 午夜日本视频在线| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲在线观看片| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 日本免费在线观看一区| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲性久久影院| 久久99热这里只有精品18| 熟女人妻精品中文字幕| 九九在线视频观看精品| 综合色av麻豆| 极品教师在线视频| 国产黄片美女视频| 午夜福利在线在线| 男女边吃奶边做爰视频| 成年免费大片在线观看| 三级经典国产精品| 免费电影在线观看免费观看| 成人性生交大片免费视频hd| 精品一区二区三区人妻视频| 午夜激情福利司机影院| 亚洲成色77777| 变态另类丝袜制服| 热99re8久久精品国产| 欧美变态另类bdsm刘玥| 夫妻性生交免费视频一级片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 九草在线视频观看| АⅤ资源中文在线天堂| 精品人妻熟女av久视频| 国产黄片美女视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 老女人水多毛片| 欧美日韩在线观看h| 亚洲五月天丁香| 99久久人妻综合| 免费av不卡在线播放| 精品久久久久久久久av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 成人毛片60女人毛片免费| 久久久久久大精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 午夜福利网站1000一区二区三区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 日韩欧美三级三区| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 91久久精品电影网| 天美传媒精品一区二区| 男女那种视频在线观看| 久久精品人妻少妇| 99热这里只有是精品在线观看| 国产av码专区亚洲av| 我要看日韩黄色一级片| 丝袜喷水一区| 2022亚洲国产成人精品| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲不卡免费看| 国产爱豆传媒在线观看| 久久精品久久精品一区二区三区| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久午夜福利片| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品av视频在线免费观看| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 永久网站在线| 欧美日韩精品成人综合77777| 简卡轻食公司| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲av中文av极速乱| 麻豆国产97在线/欧美| 真实男女啪啪啪动态图| 久久99热这里只有精品18| 国产视频内射| 日本免费在线观看一区| 毛片女人毛片| 成人毛片60女人毛片免费| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美最新免费一区二区三区| 精品久久久久久久末码| 国产精品1区2区在线观看.| 青青草视频在线视频观看| 国产免费又黄又爽又色| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲精品,欧美精品| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 网址你懂的国产日韩在线| 成年女人永久免费观看视频| 成年av动漫网址| 国产真实伦视频高清在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 欧美人与善性xxx| 中国国产av一级| 国产午夜精品一二区理论片| 精品久久久久久久久av| 国产精品电影一区二区三区| av免费观看日本| 美女高潮的动态| 又粗又爽又猛毛片免费看| 2021少妇久久久久久久久久久| 搞女人的毛片| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产乱人偷精品视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 美女cb高潮喷水在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 免费搜索国产男女视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 精品久久久久久电影网 | 看十八女毛片水多多多| 日本av手机在线免费观看| 国产亚洲精品av在线| 久久久久久久午夜电影| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲国产精品专区欧美| 九九爱精品视频在线观看| 精品一区二区免费观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 免费观看a级毛片全部| 一级av片app| www日本黄色视频网| 韩国高清视频一区二区三区| 村上凉子中文字幕在线| 少妇熟女欧美另类| 日韩欧美 国产精品| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲欧美日韩东京热| 一个人免费在线观看电影| 中文资源天堂在线| 国产成人福利小说| 联通29元200g的流量卡| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 丝袜喷水一区| 日日撸夜夜添| 日韩欧美国产在线观看| 在线观看一区二区三区| 日本黄色片子视频| 黄片无遮挡物在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| av国产免费在线观看| 高清毛片免费看| 美女国产视频在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成年女人看的毛片在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 三级国产精品欧美在线观看| 大香蕉97超碰在线| 全区人妻精品视频| 日韩亚洲欧美综合| 午夜福利在线在线| 欧美3d第一页| 亚洲欧美精品专区久久| 麻豆av噜噜一区二区三区| 日韩欧美精品v在线| 中文字幕亚洲精品专区| av国产免费在线观看| 亚洲不卡免费看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 91狼人影院| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 看黄色毛片网站| 男女边吃奶边做爰视频| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产日韩欧美在线精品| 黄片wwwwww| 亚洲国产精品国产精品| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产三级在线视频| 欧美丝袜亚洲另类| 九九在线视频观看精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产色婷婷99| 床上黄色一级片| 成人午夜精彩视频在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 久久久久久久久中文| 亚洲国产欧美人成| kizo精华| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲av不卡在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产中年淑女户外野战色| 小说图片视频综合网站| 日韩av在线大香蕉| 欧美激情久久久久久爽电影| 嫩草影院精品99| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 成人特级av手机在线观看| 国产亚洲精品av在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产亚洲精品av在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久欧美国产精品| 国产精品女同一区二区软件| 国产探花极品一区二区| 99久久无色码亚洲精品果冻| 99久久九九国产精品国产免费| 岛国在线免费视频观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 一二三四中文在线观看免费高清| 欧美激情国产日韩精品一区| av卡一久久| 三级国产精品欧美在线观看| 一级黄片播放器| 日本午夜av视频| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲精品国产成人久久av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 日韩高清综合在线| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 熟女人妻精品中文字幕| 国产 一区精品| 国产又黄又爽又无遮挡在线|