中小規(guī)模豬場(chǎng)免疫程序制定探討

楊紅梅 劉根新 達(dá)奎 賈萬(wàn)臣 張璽 郭志明 孫月華

摘? 要：通過(guò)調(diào)查分析甘肅省河西地區(qū)中小規(guī)模豬場(chǎng)的免疫接種程序和常發(fā)傳染病，筆者所在項(xiàng)目組制定了合理的免疫程序，并進(jìn)行了抗體檢測(cè)。選擇3家中小規(guī)模豬場(chǎng)中處于不同生長(zhǎng)階段的豬各60頭，按所制定的免疫程序接種疫苗，1個(gè)月后采集血樣并分離血清，監(jiān)測(cè)豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的病毒抗體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)豬瘟病毒、豬口蹄疫病毒、豬偽狂犬病病毒gB基因缺失株的抗體合格率超過(guò)95%，豬偽狂犬病病毒gE基因缺失株抗體為0.00，豬繁殖與呼吸綜合征的病毒抗體水平較低，但符合國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明該免疫程序能幫助中小規(guī)模豬場(chǎng)有效地預(yù)防上述4種疾病。

關(guān)鍵詞：豬瘟;豬口蹄疫;免疫接種程序;抗體監(jiān)測(cè)

基金項(xiàng)目：武威市2020年度第二批市列科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：WW2002015）

作者簡(jiǎn)介：楊紅梅（1975— ），女，副教授，從事畜牧獸醫(yī)教學(xué)和研究工作;E-mail：291919391@qq.com

隨著我國(guó)規(guī)?；?、集約化養(yǎng)豬的快速發(fā)展，豬群中常見傳染病的種類和發(fā)病量不斷增加，尤其是豬繁殖與呼吸障礙綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）、豬圓環(huán)病毒病、非洲豬瘟等免疫抑制性傳染病，已經(jīng)嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，降低了豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。因此，規(guī)?；i場(chǎng)要有效預(yù)防傳染病的發(fā)生，提高生產(chǎn)效益，制定合理的免疫程序，進(jìn)行預(yù)防性免疫接種勢(shì)在必行。

筆者通過(guò)調(diào)查分析甘肅省河西地區(qū)中小規(guī)模豬場(chǎng)免疫接種的程序和常發(fā)傳染病，探討并制定了適用于中小規(guī)模豬場(chǎng)的免疫程序，并進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果完善免疫程序，使其更加合理，從而防制和減少中小規(guī)模豬場(chǎng)傳染病的發(fā)生，提高經(jīng)濟(jì)效益?，F(xiàn)將本次為河西地區(qū)中小規(guī)模豬場(chǎng)量身定制免疫接種程序的過(guò)程及結(jié)果匯報(bào)如下，以供養(yǎng)豬生產(chǎn)者在控制豬場(chǎng)常規(guī)傳染病的過(guò)程中借鑒，從而最大限度地控制發(fā)病率和死亡率，提高生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。

1? 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 疫苗

豬瘟（classical swine fever，CSF）細(xì)胞苗來(lái)自廣東永順生物制藥有限公司，豬乙型腦炎疫苗、豬細(xì)小病毒病疫苗由中農(nóng)威特生物科技有限公司提供，豬口蹄疫（foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD）多價(jià)苗由內(nèi)蒙古金宇生物科技有限公司生產(chǎn)，豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗、豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）弱毒苗、PED滅活苗、大腸桿菌三價(jià)滅活苗、豬偽狂犬?。╬orcine pseudorabies，PR）基因缺失株疫苗均購(gòu)自武漢科前生物股份有限公司，PRRS弱毒疫苗、支原體滅活疫苗從碩騰生物制藥有限公司采購(gòu)。

1.1.2 檢測(cè)試劑盒

CSF病毒酶標(biāo)抗體檢測(cè)試劑盒、PR病毒gB酶標(biāo)抗體檢測(cè)試劑盒、PR病毒gE酶標(biāo)抗體檢測(cè)試劑盒、PRRS病毒酶標(biāo)抗體檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自上海博研生物科技有限公司;豬FMD病毒O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.1.3 試驗(yàn)豬場(chǎng)和試驗(yàn)豬

選擇3家有一定代表性的中小規(guī)模豬場(chǎng)，隨后從這些豬場(chǎng)中各選擇60頭處于不同生長(zhǎng)階段的豬，按所制定的免疫程序接種疫苗，1個(gè)月后（仔豬二免）采集血樣，分離血清后備用。

1.2 調(diào)查與分析

通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)訪談和問卷調(diào)査，抽樣調(diào)查了甘肅省河西地區(qū)具有代表性的中小規(guī)模豬場(chǎng)的免疫程序和常發(fā)病，并統(tǒng)計(jì)分析了調(diào)查資料。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，河西地區(qū)85%的中小規(guī)模豬場(chǎng)有較合理的免疫程序，主要接種的疫苗為CSF疫苗、豬FMD疫苗、PR疫苗、PED疫苗、豬傳染性胃腸炎（transmissible gastroenteritis，TGE）疫苗、仔豬黃白痢疫苗等;常發(fā)傳染病主要是豬喘氣病、豬鏈球菌病、PED、仔豬黃白痢、豬細(xì)小病毒病等，受威脅的傳染病主要是PRRS、非洲豬瘟（African swine fever，ASF）、豬嗜血桿菌病等。

1.3 中小規(guī)模豬場(chǎng)免疫程序的制定

根據(jù)對(duì)河西地區(qū)具有代表性的中小規(guī)模豬場(chǎng)目前采用的免疫程序、常發(fā)傳染病和受威脅傳染病的調(diào)查結(jié)果，與項(xiàng)目合作單位共同探討并制定了免疫程序，詳見表1。

所有后備豬群接種疫苗后需抽樣監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)合格后才能配種。

1.4 血清收集與抗體監(jiān)測(cè)

1.4.1 待檢血清

按以上免疫程序?qū)λx擇3家豬場(chǎng)的各 60頭豬接種疫苗，接種1個(gè)月后（仔豬二免）對(duì)各家豬場(chǎng)按種公豬10份、母豬20份、仔豬15份和育肥豬15份的數(shù)量采集血樣，合計(jì)180份血樣，血樣經(jīng)自然析出或離心分離后收集血清，于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 抗體監(jiān)測(cè)和結(jié)果判斷

所有抗體監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果判定均按照ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作進(jìn)行。

3家豬場(chǎng)5種抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果見表2;不同生長(zhǎng)階段豬的5種抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果見表3。

2? 結(jié)果與分析

按制定的免疫程序?qū)?家豬場(chǎng)各60頭處于不同生長(zhǎng)階段的豬接種疫苗后，經(jīng)抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，免疫豬的CSF、FMD、PR-gB的抗體合格率超過(guò)95%，PR-gE抗體均為0.00%，PRRS的抗體水平較低，但符合國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明所制定的免疫程序能對(duì)豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征產(chǎn)生良好的免疫效果。盡管如此，也應(yīng)注意是否存在豬瘟、豬偽狂犬病等疫病的野毒株感染情況，這需要結(jié)合病原學(xué)檢測(cè)及臨床癥狀進(jìn)行綜合評(píng)估，并根據(jù)評(píng)估結(jié)果采取相應(yīng)措施。

根據(jù)對(duì)處于不同生長(zhǎng)階段的豬體內(nèi)抗體的監(jiān)測(cè)可發(fā)現(xiàn)，種公豬、母豬、仔豬和育肥豬按所制定的免疫程序接種疫苗后，公豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽(yáng)性率達(dá)100%;母豬的豬瘟、口蹄疫、豬偽狂犬病（PR-gB）的抗體陽(yáng)性率達(dá)96%以上，豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽(yáng)性率達(dá)91.67%;仔豬和育肥豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽(yáng)性率略低于種公豬和母豬的，但均符合要求。

在預(yù)防豬繁殖與呼吸障礙綜合征上，我國(guó)以前常采取強(qiáng)制免疫的措施，但大部分豬場(chǎng)存在隱性帶毒情況，不接種疫苗也能保持疫情平穩(wěn)，但一旦接種反而會(huì)促使發(fā)病。2017年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部取消PRRS強(qiáng)制免疫，部分豬場(chǎng)停止免疫接種，導(dǎo)致部分豬場(chǎng)的PRRS病毒抗體水平不高。建議先進(jìn)行抗原檢測(cè)，后確定免疫程序，開展抗體監(jiān)測(cè)，完善免疫程序。

3? 討論

本試驗(yàn)按表1中免疫程序進(jìn)行免疫，一個(gè)月后監(jiān)測(cè)抗體，免疫豬的CSF、FMD、PR-gB的抗體合格率超過(guò)95%，PR-gE抗體均為0，PRRS的抗體陽(yáng)性率約90%。陳南穎等對(duì)部分規(guī)?；i場(chǎng)主要疫病抗體與監(jiān)測(cè)分析中部分規(guī)模化豬場(chǎng)抽樣進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，CSF抗體陽(yáng)性率最高為97.78%，F(xiàn)MD抗體陽(yáng)性率最高為97.78%、PR-gB抗體陽(yáng)性率最高為100%、PR-gE抗體陽(yáng)性率最高為0、PRRS抗體陽(yáng)性率最高為97.78%。李偉等豬O型和A型口蹄疫二價(jià)合成肽疫苗免疫抗體的檢測(cè)評(píng)估研究表明，首免后30 d，豬O型及A型口蹄疫抗體合格率分別為100%、95%，二免后15 d、45 d抗體合格率均可達(dá)到100%，二免后90 d、120 d抗體臺(tái)格率仍在95%以上。姚敬明等豬偽狂犬病基因缺失株疫苗免疫試驗(yàn)證明，種豬免疫抗體合格率達(dá)100%，仔豬49日齡前抗體合格率達(dá)100%， 75日齡后抗體逐漸降低。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《2013年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》和《2021年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》分別要求高致病性豬繁殖與呼吸障礙綜合征、豬瘟免疫抗體合格率應(yīng)常年保持在70%以上，口蹄疫免疫抗體合格率應(yīng)常年保持在70%以上，綜上所述本文中的免疫程序?qū)χ行∫?guī)模養(yǎng)豬有一定的指導(dǎo)意義。

本試驗(yàn)按表1中免疫程序進(jìn)行免疫，一個(gè)月后監(jiān)測(cè)抗體，公豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽(yáng)性率達(dá)100%;母豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬?。≒R-gB）的抗體陽(yáng)性率達(dá)97%以上，豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽(yáng)性率達(dá)91.67%;仔豬和育肥豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征4種疾病的抗體陽(yáng)性率略低于種公豬和母豬。覃軍等規(guī)?；i場(chǎng)主要疫病抗體監(jiān)測(cè)與免疫效果分析研究表明，哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的豬瘟抗體100%合格，哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的豬口蹄疫血清抗體83.8%合格。賀俊暢等在規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟免疫程序制定探索中研究結(jié)果表明，母豬首免后4周監(jiān)測(cè)抗體合格率達(dá)93%。本試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)中的基本相符，個(gè)別結(jié)果抗體陽(yáng)性率偏高，與免疫后采樣時(shí)間有一定的關(guān)系，綜上所述說(shuō)明本文中免疫程序較合理。

新生仔豬在接種疫苗時(shí)，要考慮是否受母源抗體的干擾。如果母豬在配種前和妊娠階段接種了疫苗，且母豬相應(yīng)疫苗的抗體水平較高，所產(chǎn)仔豬通過(guò)吃初乳可獲得相應(yīng)的抗體，不宜過(guò)早接種相應(yīng)的疫苗。張一鳴的豬瘟苗免疫效果試驗(yàn)研究表明豬瘟STK細(xì)胞苗、ST細(xì)胞苗、豬瘟脾淋組織苗在仔豬二免后25 d（90日齡）進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，抗體合格率達(dá)100%，賀俊暢等在規(guī)模化豬場(chǎng)豬瘟免疫程序制定探索中仔豬首免受母源抗體干擾研究結(jié)果表明，仔豬在25日齡首免，65日齡二免具有指導(dǎo)意義，本文表1中仔豬接種的豬瘟細(xì)胞苗免疫程序基本與其研究相符，并且二免一個(gè)月后測(cè)抗體，仔豬豬瘟抗體合格率在96.67%，進(jìn)一步證明對(duì)中小規(guī)模養(yǎng)豬有一定的指導(dǎo)意義。

在制定免疫程序和實(shí)施免疫接種過(guò)程中，除把好疫苗質(zhì)量關(guān)外，還需考慮不同種類的疫苗之間的協(xié)同作用、拮抗作用等。許建康的生豬同時(shí)注射豬瘟、口蹄疫二種疫苗試驗(yàn)免疫效果分析結(jié)果表明分點(diǎn)同時(shí)注射豬瘟活疫苗和豬O型口蹄疫滅活疫苗，28 d后采血測(cè)抗體，豬瘟抗體陽(yáng)性率86.5%，豬口蹄疫抗體陽(yáng)性率87%，邵國(guó)青曾指出，同時(shí)注射豬瘟、豬口蹄疫二種疫苗，能夠增強(qiáng)二種疫苗的免疫效果，存在協(xié)同作用。本文借鑒參考文獻(xiàn)中研究結(jié)果，免疫程序制定過(guò)程中育肥豬150日齡接種豬瘟細(xì)胞苗和豬口蹄疫多價(jià)苗，頸部左右兩側(cè)分別進(jìn)行肌內(nèi)注射，育肥豬140日齡接種乙腦疫苗和豬細(xì)小病毒病疫苗，頸部左右兩側(cè)分別進(jìn)行肌內(nèi)注射。免疫接種后臨床上未見不良反應(yīng)和這兩種疾病的發(fā)生，還需進(jìn)一步抗體監(jiān)測(cè)以完善免疫程序。

4? 結(jié)論

通過(guò)對(duì)河西地區(qū)中小規(guī)模豬場(chǎng)免疫接種情況、當(dāng)?shù)爻０l(fā)傳染性豬病進(jìn)行的調(diào)查、統(tǒng)計(jì)和分析，本試驗(yàn)重新制定了免疫接種程序，并在3家有代表性的規(guī)?；i場(chǎng)不同生長(zhǎng)階段的豬上應(yīng)用，通過(guò)血清抗體水平分析，證明該程序能有效預(yù)防豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病和豬繁殖與呼吸障礙綜合征。由于受疫情、經(jīng)濟(jì)、地域等條件的限制，免疫程序中其他疫苗免疫后血清中抗體未測(cè)定，有待進(jìn)一步研究和探討。中小規(guī)模豬場(chǎng)制定科學(xué)的免疫程序需要綜合考慮豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理水平、生物安全、豬群的健康狀況、藥物使用情況等諸多因素，豬場(chǎng)的免疫程序并不是一成不變的，還要根據(jù)當(dāng)?shù)刎i傳染病的流行情況、豬群常發(fā)傳染性疾病的狀況以及抗原和抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行及時(shí)的調(diào)整，并進(jìn)行不斷的探討和完善，才能真正做到提高中小規(guī)模豬場(chǎng)生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。