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    全鏈路高效美白組合物的功效評(píng)價(jià)

    2022-07-07 05:14:02趙冰怡楊洪芹王曉芝張玉銀唐嘉雯李雪竹
    中國(guó)洗滌用品工業(yè) 2022年6期
    關(guān)鍵詞:膚色黑色素美白

    趙冰怡 楊洪芹 王曉芝 張玉銀 叢 琳 唐嘉雯 李雪竹

    1.上海新高姿化妝品有限公司,廣東廣州,510000;

    2.廣州澳希亞實(shí)業(yè)有限公司,廣東廣州,510000

    美白化妝品的配方設(shè)計(jì)核心關(guān)鍵點(diǎn)是美白的作用和效果,這就需要考慮配方使用的原料種類(lèi)及配比問(wèn)題。美白化妝品經(jīng)過(guò)多年的研究發(fā)展,從最初的簡(jiǎn)單物理遮蓋增白到單一的美白活性物成分美白,再到多靶點(diǎn)多路徑的協(xié)同作用,每一階段的發(fā)展都是技術(shù)革新。隨著國(guó)家法規(guī)部門(mén)對(duì)美白祛斑類(lèi)特殊用途化妝品的監(jiān)管力度不斷加強(qiáng)[1],以及消費(fèi)者對(duì)自然美、營(yíng)養(yǎng)肌和健康白的崇尚,使用不同美白機(jī)制的成分協(xié)同作用,探索和開(kāi)發(fā)新型美白化妝品,實(shí)現(xiàn)化妝品全鏈路的美白功效,是美白產(chǎn)品的主流趨勢(shì)。

    1 黑色素的生成及代謝

    人體皮膚的顏色主要取決于皮膚中黑色素的含量和分布狀態(tài)。黑色素可分為堿性難溶的真黑色素和堿性易溶的褐黑色素,真黑色素是皮膚顯黑的主要原因。黑色素細(xì)胞可同時(shí)生成真黑色素和褐黑色素,但一個(gè)黑色素單元僅存在一個(gè)合成路徑。黑色素形成的生物學(xué)過(guò)程十分復(fù)雜,在黑色素細(xì)胞的黑素小體內(nèi)完成,見(jiàn)圖1[2]。當(dāng)肌膚受到紫外線(xiàn)輻射時(shí),激發(fā)表皮中的角質(zhì)細(xì)胞釋放炎癥因子IL-1α等,同時(shí)產(chǎn)生大量的活性氧(ROS)導(dǎo)致DNA損傷[3],激活靜止?fàn)顟B(tài)的黑色素細(xì)胞,促使黑色素細(xì)胞增殖,并以酪氨酸為底物經(jīng)過(guò)一系列酶促反應(yīng)生成黑色素。黑色素生成以后先后經(jīng)黑色素細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移和黑色素細(xì)胞與角質(zhì)細(xì)胞間的轉(zhuǎn)移,逐步遷移至皮膚表面,再由自身新陳代謝脫落,見(jiàn)圖2。此外,炎癥路徑形成的前列腺素、血栓素和白三烯等炎癥介質(zhì)通過(guò)刺激黑素細(xì)胞和一些免疫細(xì)胞的活性,導(dǎo)致黑素持續(xù)合成增加,轉(zhuǎn)移至鄰近的角質(zhì)細(xì)胞,血管擴(kuò)張,肌膚泛紅變黑,進(jìn)一步導(dǎo)致表皮色素沉著。圖1為圖2中黑色素細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的一系列酶促反應(yīng)的詳細(xì)展示。通過(guò)抑制圖1中關(guān)鍵路徑的酶活性,或是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),或者促進(jìn)褐黑色素的生成,或減緩?fù)饨绲难装Y損傷刺激都可以減少黑色素的合成。

    圖1 真黑色素和褐黑色素的合成路徑[1]

    圖2 皮膚變黑的過(guò)程

    2 美白機(jī)制及全鏈路美白組合物

    皮膚美白的作用機(jī)制主要是圍繞黑色素的產(chǎn)生、轉(zhuǎn)移及代謝進(jìn)行的。美白活性組合物通過(guò)抑制黑色素生成及轉(zhuǎn)移、促進(jìn)黑色素代謝剝脫和調(diào)控生成黑色素關(guān)鍵路徑過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)達(dá)到美白效果[4-5]。

    美白劑種類(lèi)較多,實(shí)驗(yàn)擬從清除氧自由基、緩解炎癥因子釋放、抑制絡(luò)氨酸酶活性、抑制黑色素生成、抑制黑色素的轉(zhuǎn)移、降低色素沉積程度、加速皮膚代謝更新等方面考慮美白組合物功效成分,具體見(jiàn)表1。

    表1 全鏈路美白組合物

    3 實(shí)驗(yàn)材料及方法

    3.1 儀器及原料

    紫外日光模擬儀(601-300,美國(guó)Solar Light,EWISH-YQSB-144):各項(xiàng)性能指標(biāo)符合測(cè)定規(guī)范要求;皮膚色度儀(CM26D,日本KONICA MINOLTA,EWISH-YQSB-143):測(cè)量皮膚L*a*b*顏色空間數(shù)據(jù)來(lái)表征人體皮膚顏色參數(shù)個(gè)體類(lèi)型角(individual type angle,ITA°);皮膚黑素檢測(cè)儀(Mexameter MX 18,德國(guó)Courage&Khazaka,EWISH-YQSB-137):測(cè)量皮膚的黑素指數(shù)(melanin index,MI)。

    煙酰胺,購(gòu)于帝斯曼營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品有限公司;凝血酸,購(gòu)于湖南衡眾藥業(yè)有限公司。Alwhite Complex,INCI名稱(chēng)為:丁二醇、水、熊果苷、檸檬酸、亞硫酸鈉、水解歐洲李(Prunus domestica)、乙酰酪氨酸、草莓虎耳草(Saxifraga sarmentosa)提取物、牡丹(Paeonia suffruticosa)根提取物、氨基丙醇抗壞血酸磷酸酯、黃芩(Scutellaria baicalensis)根提取物、谷胱甘肽;MandarinClear,INCI名稱(chēng)為:丁二醇、水、柑橘(Citrus reticulata)果皮提取物;Dragon Fruit Liquid B,INCI名稱(chēng)為:丁二醇、水、量天尺(Hylocereus undatus)果提取物;均購(gòu)于ICHIMARU PHARCOS CO.,LTD;熊果苷,購(gòu)于現(xiàn)代百朗德生物科技(江蘇)有限公司;羥乙基哌嗪乙烷磺酸,購(gòu)于聚和國(guó)際股份有限公司。其余均為常規(guī)試劑和配方原料。

    3.2 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品

    全鏈路美白霜的配方見(jiàn)表2,配置方法按照常規(guī)膏霜制備即可。本配方的涉及的全鏈路的美白機(jī)制如下:①以牡丹根提取物、黃岑根提取物抑制過(guò)度日曬皮膚釋放的炎癥因子,草莓虎耳草提取物可以修護(hù)已被損傷的DNA,同時(shí)輔以氨基丙醇抗壞血酸磷酸酯等物質(zhì)的抗氧化功效,可以最大限度地對(duì)黑色素細(xì)胞的激活,對(duì)黑色素的生成從防御啟動(dòng)因子上加以限制。②黃岑根提取物、凝血酸、熊果苷等可抑制黑色素小體內(nèi)酪氨酸酶的活性,抑制以酪氨酸為底物合成黑色素的酶促反應(yīng)發(fā)生;乙酰酪氨酸是一種黑色素形成拮抗劑,它以酪氨酸的類(lèi)似物形式與酪氨酸競(jìng)爭(zhēng)酪氨酸酶,即以競(jìng)爭(zhēng)性抑制的酶促反應(yīng)路徑生成未知的黃色物質(zhì)取代黑色素的合成;一個(gè)黑色素小體內(nèi)只存在一種黑色素合成的路徑,谷胱甘肽可促進(jìn)以不顯黑的褐黑色素路徑生成,代替真黑色素合成,使皮膚不顯黑。對(duì)黑色素從表達(dá)合生上加以抑制或轉(zhuǎn)化,是最有效的抑制方法。③煙酰胺具有抑制黑色素從黑色素細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)至角質(zhì)層細(xì)胞的能力;量天尺果提取物可抑制搬運(yùn)黑色素的驅(qū)動(dòng)蛋白活力,降低黑色素向角質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)效率;水解歐洲李抑制角質(zhì)細(xì)胞吞并黑色素。對(duì)黑色素從三種轉(zhuǎn)運(yùn)、傳遞路徑上進(jìn)行抑制和阻礙。④柑橘果皮提取物、羥乙基哌嗪乙烷磺酸等促進(jìn)角質(zhì)細(xì)胞更新脫落,提升角質(zhì)層細(xì)胞活力,提高功效成分吸收能力,有利于沉積在肌膚表層的黑色素剝脫和代謝。

    表2 全鏈路美白霜配方

    綜上,配方采用全鏈路高效美白組合物構(gòu)建了一款美白霜,美白機(jī)制涉及黑色素合成的啟動(dòng)、表達(dá)、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝等各個(gè)階段。

    陰性對(duì)照:黑化區(qū)空白對(duì)照。

    陽(yáng)性對(duì)照:7%抗壞血酸(維生素C)制品,按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(201版)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局2021年第17號(hào)通告附錄Ⅰ配方制備。

    3.3 穩(wěn)定性測(cè)試方法

    制得樣品在45 ℃、5 ℃、-15 ℃、冷熱循環(huán)條件下連續(xù)存放3個(gè)月觀(guān)察樣品是否有變色或其他異?,F(xiàn)象;在自然光照射條件下連續(xù)放置3個(gè)月,觀(guān)察樣品是否有變色或其他異?,F(xiàn)象。

    3.4 美白祛斑功效測(cè)試實(shí)驗(yàn)方法

    采用紫外線(xiàn)誘導(dǎo)人體皮膚黑化模型祛斑美白功效測(cè)試法,簡(jiǎn)述如下。

    3.4.1 受試對(duì)象

    完成測(cè)試有效受試者共12人,其中男性4人,女性8人,年齡21~60歲,平均年齡39.83±12.35歲,符合受試者志愿入選和排除標(biāo)準(zhǔn)。

    3.4.2 紫外線(xiàn)黑化模型建立

    首先測(cè)試入組的合格受試者受試部位(背部)的最小紅斑量(minimal erythema dose,MED),然后在受試部位選定3個(gè)面積在9 cm2的試驗(yàn)區(qū),分別為試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)、陰性對(duì)照區(qū)和陽(yáng)性對(duì)照區(qū),每個(gè)試驗(yàn)區(qū)之間的間隔1.0 cm,并在每個(gè)試驗(yàn)區(qū)內(nèi)選定面積不小于0.5 cm2的黑化測(cè)試區(qū),用紫外線(xiàn)日光模擬儀按0.75倍MED劑量每天照射1次,連續(xù)照射4天。

    3.4.3 膚色評(píng)測(cè)

    照射結(jié)束后第5天,對(duì)各黑化測(cè)試區(qū)進(jìn)行產(chǎn)品使用前的膚色視覺(jué)評(píng)估、皮膚色度儀和皮膚黑素檢測(cè)儀的測(cè)試。以皮膚色度儀測(cè)試的L*a*b*顏色空間數(shù)值計(jì)算ITA°值,計(jì)算公式如下:

    在涂抹試驗(yàn)物后每隔1周對(duì)各黑化測(cè)試區(qū)皮膚顏色進(jìn)行視覺(jué)評(píng)估和儀器檢測(cè),并記錄。

    3.4.4 試驗(yàn)物涂抹

    根據(jù)隨機(jī)表在試驗(yàn)區(qū)按照(2.00±0.05)mg/cm2的用量涂抹試驗(yàn)物(陰性對(duì)照區(qū)不涂抹任何產(chǎn)品)。產(chǎn)品使用頻率為每天2次,連續(xù)涂抹試驗(yàn)物4周。

    3.4.5 美白功效評(píng)判依據(jù)

    陽(yáng)性對(duì)照使用前后與陰性對(duì)照相比顯著改善皮膚黑化(P<0.05),則證明試驗(yàn)有效,否則試驗(yàn)失?。唤?jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,涂抹試驗(yàn)產(chǎn)品前后任一時(shí)間點(diǎn)膚色視覺(jué)評(píng)分差值或ITA°或MI差值與陰性空白對(duì)照相比有顯著改善時(shí)(P<0.05),且經(jīng)回歸分析整體判斷試驗(yàn)產(chǎn)品與陰性空白對(duì)照相比皮膚黑化顯著改善時(shí)。

    3.5 消費(fèi)者感官評(píng)價(jià)問(wèn)卷調(diào)查

    3.5.1 調(diào)查對(duì)象

    志愿者人數(shù)34人,男性0人,女性34人;最小年齡27歲,最大年齡50歲;平均年齡38.80±6.81歲。

    3.5.2 調(diào)研方法

    研究者按照隨機(jī)派發(fā)產(chǎn)品,詳細(xì)告知受試者使用方法和注意事項(xiàng),受試者在研究者的指導(dǎo)下使用產(chǎn)品。使用2周、4周、8周后分別進(jìn)行回訪(fǎng)問(wèn)卷調(diào)查。受試者根據(jù)使用測(cè)試產(chǎn)品使用后的主觀(guān)感受對(duì)測(cè)試產(chǎn)品進(jìn)行評(píng)價(jià)。

    4 結(jié)果與分析

    4.1 穩(wěn)定性測(cè)試

    樣品在45 ℃、5 ℃、-15 ℃、冷熱循環(huán)條件下連續(xù)放置3個(gè)月均未出現(xiàn)分層、析出現(xiàn)象,在自然光照條件下連續(xù)放置3個(gè)月,有輕微的淡黃色,說(shuō)明樣品的穩(wěn)定性良好。

    4.2 美白功效測(cè)試實(shí)驗(yàn)

    由專(zhuān)業(yè)的皮膚科醫(yī)生對(duì)使用前后皮膚膚色等級(jí)進(jìn)行評(píng)分,評(píng)分差值結(jié)果見(jiàn)表3,膚色等級(jí)評(píng)分回歸系數(shù)結(jié)果見(jiàn)表4。陰性對(duì)照與試驗(yàn)產(chǎn)品對(duì)比以便說(shuō)明確實(shí)是由變量因素引起的,而不是由于皮膚自身的代謝更新;陽(yáng)性對(duì)照使用前后與陰性對(duì)照相比顯著改善皮膚黑化(P<0.05),證明試驗(yàn)有效。3周結(jié)束后試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域和陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域分別出現(xiàn)顯著性差異,4周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),陰性對(duì)照區(qū)的膚色差值為-1,陽(yáng)性對(duì)照區(qū)的膚色差值為-2且有顯著性差異,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)的膚色對(duì)照為-1.5且有顯著性差異,說(shuō)明試驗(yàn)產(chǎn)品可以改變膚色。

    表3 產(chǎn)品使用前后各測(cè)試區(qū)視覺(jué)膚色等級(jí)評(píng)分差值結(jié)果(中位數(shù))

    表4 視覺(jué)膚色等級(jí)評(píng)分回歸系數(shù)(斜率k值)結(jié)果

    利用皮膚色度儀收集皮膚圖像,通過(guò)圖像分析軟件分析皮膚顏色,包括L*值、b*值和ITA°值。皮膚L*值越大,表示皮膚亮度越好;皮膚b*值越小,表示皮膚泛黃程度越低;皮膚ITA°值越高,表示皮膚白皙度越高,皮膚越白。產(chǎn)品使用前后皮膚ITA°差值結(jié)果見(jiàn)表5,皮膚ITA°值回歸系數(shù)見(jiàn)表6。4周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),陰性對(duì)照區(qū)域皮膚ITA°差值為4.61±4.58,陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域皮膚ITA°差值為7.61±3.14,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚ITA°差值為7.39±3.08,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域與陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域差值接近,說(shuō)明試驗(yàn)產(chǎn)品可以提高皮膚白皙度,使皮膚變白。

    表5 產(chǎn)品使用前后皮膚ITA°差值結(jié)果(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

    表6 皮膚ITA°值回歸系數(shù)(斜率k值)結(jié)果

    皮膚黑素檢測(cè)儀基于光譜吸收的原理,通過(guò)測(cè)量特定波長(zhǎng)的光照在皮膚上后的反射量來(lái)確定皮膚中的黑色素含量,因此MI數(shù)值越小,表明黑色素含量越低。產(chǎn)品使用前后皮膚MI差值見(jiàn)表7,皮膚MI值回歸系數(shù)見(jiàn)表8。3周結(jié)束時(shí)陰性對(duì)照區(qū)域和陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域分別出現(xiàn)顯著性差異;4周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),陰性對(duì)照區(qū)域皮膚MI差值為-25.11±23.54,陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域皮膚MI差值為-54.03±24.19,且有顯著性差異,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚M I 差值為-45.69±20.70,且有顯著性差異,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚黑色素含量顯著降低,說(shuō)明試驗(yàn)產(chǎn)品可以降低皮膚中黑色素的含量,從而美白肌膚。

    表7 產(chǎn)品使用前后皮膚MI差值(均值±標(biāo)準(zhǔn)差)

    表8 皮膚MI值回歸系數(shù)(斜率k值)結(jié)果

    綜上,根據(jù)化妝品祛斑美白功效測(cè)試結(jié)果說(shuō)明試驗(yàn)產(chǎn)品全鏈路美白霜具有祛斑美白功效。

    4.3 消費(fèi)者感官評(píng)價(jià)問(wèn)卷調(diào)查

    依照評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),34名志愿者在使用測(cè)試產(chǎn)品2周、4周、8周后,對(duì)測(cè)試產(chǎn)品的使用感受和功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。

    志愿者使用試驗(yàn)產(chǎn)品2周后在效果上認(rèn)可度比較好,見(jiàn)圖3。100%的受試者認(rèn)為皮膚變水潤(rùn)、柔軟;超過(guò)90%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后氣色看上去變好了;超過(guò)80%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后皮膚看上去有光澤、不那么暗黃、膚色更均勻;超過(guò)70%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后肌膚看上去有提亮、皮膚煥亮光彩;超過(guò)60%的受試者認(rèn)為色斑/痘印被明顯淡化、皮膚更干凈、色斑/瑕疵的數(shù)量減少。

    圖3 志愿者使用2周后自評(píng)感受

    志愿者在使用試驗(yàn)產(chǎn)品4周后在效果上認(rèn)可度較高,見(jiàn)圖4。100%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后皮膚變水潤(rùn)、柔軟;超過(guò)80%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后皮膚看上去有光澤、有提亮、不那么暗黃了、皮膚煥亮光彩;超過(guò)70%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后色斑/痘印被明顯淡化了、皮膚更干凈、色斑/瑕疵的數(shù)量減少;91.18%的受試者對(duì)“膚色看上去更均勻了”感到滿(mǎn)意;97.06%的受試者對(duì)“整體面部氣色看上去變好了”感到滿(mǎn)意。

    圖4 志愿者使用4周后自評(píng)感受

    志愿者使用試驗(yàn)產(chǎn)品8周后在效果上整體認(rèn)可度進(jìn)一步提升,見(jiàn)圖5。仍有約100%受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后皮膚變水潤(rùn)或柔軟;超過(guò)90%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后膚色更均勻、面部氣色變好;超過(guò)85%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后皮膚有光澤、有提亮、看上去不那么暗黃、更煥亮光彩;超過(guò)70%的受試者認(rèn)為使用產(chǎn)品后色斑/痘印被明顯淡化、皮膚看上去更干凈、色斑/瑕疵的數(shù)量減少。

    圖5 志愿者使用8周后自評(píng)感受

    從8周消費(fèi)者試用感官評(píng)價(jià)調(diào)研數(shù)據(jù)來(lái)看,34名受試者的皮膚有變得水潤(rùn)柔軟、有光澤、更加明亮勻凈、痘印變淡的整體趨勢(shì)。其中2名受試者使用產(chǎn)品后面部有較為明顯的變白,見(jiàn)圖6。表明設(shè)計(jì)的這款全鏈路美白組合物,通過(guò)層層黑色素阻擊,減少了黑色的分泌和沉淀,促進(jìn)肌膚新陳代謝,具有明顯改善膚色、美白肌膚的作用。

    圖6 2名受試者使用產(chǎn)品后的面部變化

    5 結(jié)論

    全鏈路的美白組合物,通過(guò)抗氧化、緩解炎癥因子釋放、抑制絡(luò)氨酸酶活性、減少黑色素生成、抑制黑色素的轉(zhuǎn)移、降低色素沉積程度、加速皮膚新陳代謝等路徑,實(shí)現(xiàn)黑色素層層阻擊。臨床測(cè)試結(jié)果表明:使用含該美白組合物的膏霜4周后可明顯改善膚色;試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚ITA°差值為7.39±3.08,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域與陽(yáng)性對(duì)照區(qū)域差值接近,皮膚白皙度提升;試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚MI差值為-45.69±20.70且有顯著性差異,試驗(yàn)產(chǎn)品區(qū)域皮膚黑色素含量降低。消費(fèi)者感官評(píng)價(jià)問(wèn)卷調(diào)查顯示34名志愿者的皮膚有水潤(rùn)柔軟、光澤煥亮、白皙?jiǎng)騼?、痘印變淡的變化趨?shì)。組合物具有明顯的美白效果,顯效周期為4周。

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