普洱大葉茶中對(duì)褪黑素受體具有激動(dòng)作用的活性化合物

王 豪，王 委，劉艷芳，郭志謀，王超然*

1泰州新藥創(chuàng)制服務(wù)中心，泰州 225300；2中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所，大連 116023

抑郁癥、焦慮癥和睡眠障礙為常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，現(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為其發(fā)病與褪黑素(melatonin，MT)和5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)的含量降低及受體功能下降有關(guān)[1-3]。因而，這些神經(jīng)遞質(zhì)的受體模型常被應(yīng)用于抗精神疾病藥物的研發(fā)，其中，MT1受體激動(dòng)劑circadin、ramelteon、agomelatine等已在臨床上用于抑郁癥等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療[1,3]。

茶葉由山茶科山茶屬(Camellia)植物的幼嫩葉或芽加工而成，藥食同源，使用歷史悠久。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明茶葉具有興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)、利尿、抗氧化、抗病毒、降血壓等諸多藥理活性[4-6]，茶多酚類化合物一般被認(rèn)為是茶葉活性的物質(zhì)基礎(chǔ)[6-8]，然而，茶葉抗精神疾病活性的物質(zhì)基礎(chǔ)并不十分明確，茶葉對(duì)褪黑素受體功能的影響也鮮有報(bào)道。

為了進(jìn)一步闡明茶葉抗精神疾病活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究在前期發(fā)現(xiàn)普洱大葉茶(Camelliasinensis)新鮮葉片提取物的乙酸乙酯部分對(duì)褪黑素受體具有明顯激動(dòng)作用的基礎(chǔ)上，基于褪黑素受體激動(dòng)活性測(cè)試模型，在活性跟蹤指導(dǎo)下，綜合運(yùn)用硅膠柱層析和高效液相色譜等分離技術(shù)，對(duì)上述茶葉活性部位進(jìn)行跟蹤分離，并在HEK293細(xì)胞模型上通過(guò)鈣流檢測(cè)法測(cè)試分離化合物對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)作用，以期為茶葉的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用和新的抗精神疾病藥物的研發(fā)提供更多理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

SGW?X-4B熔點(diǎn)測(cè)定儀(上海精密儀器科技有限公司)；1290-6530 LC-QTOF液質(zhì)聯(lián)用儀(Agilent公司，美國(guó))；Nicolet iS5紅外光譜儀(ThermoFisher公司，美國(guó))；Avance III-600超導(dǎo)核磁共振儀(Bruker公司，德國(guó))；NewstyleTM制備/半制備高效液相色譜儀(漢邦科技有限公司)；柱層析用硅膠及GF254薄層層析板(青島海洋化工廠)；顯色劑為10%的硫酸乙醇溶液；FlexStation 3臺(tái)式多功能酶標(biāo)儀(Molecular Devices，美國(guó))；分析純級(jí)陽(yáng)性對(duì)照藥褪黑素(CAS：73-31-4，上海晶純生化科技股份有限公司)；實(shí)驗(yàn)中所用其它試劑均為分析純(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

1.2 材料

實(shí)驗(yàn)用新鮮樣品5 kg采自云南省普洱市，由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)李家美研究員鑒定為普洱大葉茶Camelliasinensis，標(biāo)本(20190509)存放于江蘇省手性醫(yī)藥化學(xué)品生物制造重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.3 提取與分離

新鮮普洱大葉茶葉片先用50%乙醇回流提取2次后再用熱水回流提取1次，每次4 h，總提取液濃縮后用乙酸乙酯萃取，得到茶葉乙酸乙酯部分浸膏和水部分浸膏。

對(duì)MT1和MT2受體均具有激動(dòng)作用的茶葉乙酸乙酯部分浸膏(80 g)經(jīng)硅膠柱層析分離，經(jīng)氯仿-甲醇-水梯度洗脫(100∶0∶0、90∶10∶1、80∶20∶2、70∶30∶3、0∶100∶0)粗分得到組分Fr.1～Fr.5，活性組分Fr.3(20 g)經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶甲醇=90∶10)分離得到亞組份Fr.3-1～Fr.3-6，活性亞組分Fr.3-1(0.45 g)再經(jīng)半制備液相色譜(RP C-18，甲醇∶水=10∶90→100∶0)分離得到Fr.3-1-1～Fr.3-1-4，F(xiàn)r.3-1-1再經(jīng)反復(fù)純化得到化合物7(150 mg)，F(xiàn)r.3-1-3(60 mg)經(jīng)凝膠柱層析(LH-20，氯仿∶甲醇=50∶50)純化得化合物8(14 mg)；活性亞組分Fr.3-4(4.6 g)經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶乙酸乙酯=70∶30)洗脫得到4個(gè)次組分Fr.3-4-1～Fr.3-4-4，F(xiàn)r.3-4-1(450 mg)經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶丙酮=15∶85)分離得到Fr.3-4-1-1～Fr.3-4-1-3，F(xiàn)r.3-4-1-1和Fr.3-4-1-2再分別經(jīng)凝膠柱層析純化得化合物4(15 mg)和化合物9(6 mg)，F(xiàn)r.3-4-2(1.7 g)經(jīng)半制備液相色譜(MCI，CHP20P，甲醇∶水=10∶90→100∶0)洗脫得Fr.3-4-2-1～Fr.3-4-2-5，F(xiàn)r.3-4-2-3(0.95 g)再經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶乙酸乙酯=80∶20)劃分為Fr.3-4-2-3-1～Fr.3-4-2-3-3，F(xiàn)r.3-4-2-3-2(0.7 g)再經(jīng)硅膠柱層析純化得化合物3(520 mg)；活性組分Fr.3-5(9.3 g)經(jīng)半制備液相色譜(MCI，CHP20P，甲醇∶水=10∶90→100∶0)洗脫得Fr.3-5-1～Fr.3-5-6，F(xiàn)r.3-5-1(1.2 g)經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶甲醇=90∶10)洗脫得到Fr.3-5-1-1和Fr.3-5-1-2，F(xiàn)r.3-5-1-1(0.5 g)先后經(jīng)半制備液相色譜(RP C-18，甲醇∶水=40∶60)和凝膠柱層析(氯仿∶甲醇=50∶50)純化，得化合物6(280 mg)，F(xiàn)r.3-5-1-2(0.4 g)先后經(jīng)硅膠柱層析(氯仿∶乙酸乙酯=40∶60)、半制備液相色譜(RP C-18，甲醇∶水=40∶60)和凝膠柱層析(氯仿∶甲醇=50∶50)純化，得化合物5(50 mg)。

活性組分Fr.4(29 g)經(jīng)硅膠柱層析(氯仿-甲醇-水(90∶10∶1、80∶20∶2))洗脫得到Fr.4-1～Fr.4-7，F(xiàn)r.4-5(1.2 g)經(jīng)半制備液相色譜(MCI，CHP20P，甲醇∶水=10∶90→100∶0)洗脫得到Fr.4-5-1～Fr.4-5-5，其中，活性次組分Fr.4-5-3(0.4 g)再經(jīng)半制備液相色譜(RP C-18，甲醇∶水=15∶85→75∶25)分離得到Fr.4-5-3-1～Fr.4-5-3-6，F(xiàn)r.4-5-3-1(0.12 g)再反復(fù)經(jīng)硅膠柱層析和凝膠柱層析純化，得化合物1(12 mg)；Fr.4-5-3-2(0.20 g)經(jīng)凝膠柱層析純化得到化合物2(13 mg)。

1.4 對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)活性測(cè)試

被測(cè)樣品對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)作用在HEK293細(xì)胞模型上通過(guò)鈣流檢測(cè)法測(cè)試[6,9]。取培養(yǎng)在添加10%胎牛血清的杜氏改良培養(yǎng)基中的穩(wěn)轉(zhuǎn)HEK293細(xì)胞，接種于Matrigel?Matrix 預(yù)先包被的96孔黑色板(細(xì)胞密度為4 × 104/孔)，在含5% CO2的溫箱中培養(yǎng)24 h后，用HDB免洗Fluo-8鈣試劑盒在37 ℃下黑暗中染色1 h，然后分別用被測(cè)樣品和陽(yáng)性藥物處理，室溫下用Flex-Station 3臺(tái)式多模式微孔板閱讀器讀取吸收值。以褪黑素作為陽(yáng)性對(duì)照，將陽(yáng)性對(duì)照的激動(dòng)率設(shè)定為100%，供試樣品對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)率以陽(yáng)性對(duì)照的百分比計(jì)算[6]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z331.117 3[M+H]+(calcd for C18H19O6，331.117 6)；(-)HR-ESI-MS：m/z329.098 7[M-H]-(calcd for C18H17O6，329.099 0)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：7.01(1H，s，H-6′)，6.56(1H，s，H-3′)，5.95(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.93(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，4.43(1H，d，J=9.2 Hz，H-2)，3.83(1H，ddd，J=10.6，9.2，6.0 Hz，H-3)，2.94(1H，dd，J=15.3，6.0 Hz，H-4a)，2.43(1H，dd，J=15.3，10.6 Hz，H-4b)，1.52(3H，s，H-8′)，1.47(3H，s，H-9′)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：74.5(d，C-2)，68.0(d，C-3)，28.0(t，C-4)，157.8(s，C-5)，96.6(d，C-6)，156.9(s，C-7)，95.9(d，C-8)，157.9(s，C-9)，101.3(s，C-10)，125.4(s，C-1′)，135.4(s，C-2′)，112.8(d，C-3′)，145.1(s，C-4′)，146.1(s，C-5′)，112.7(d，C-6′)，76.9(s，C-7′)，32.1(q，C-8′)，28.5(q，C-9′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致，故被鑒定為(+)-7′,7′-dimethyl-5-hydroxy-2R,3S-trans-pubeschin。

化合物2白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z347.111 3[M+H]+(calcd for C18H19O7，347.112 5)；(-)HR-ESI-MS：m/z345.097 1[M-H]﹣(calcd for C18H17O7，345.098 0)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.39(1H，s，H-6′)，5.91(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，5.76(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，4.39(1H，s，H-2)，4.24(1H，d，J=5.0 Hz，H-3)，2.86(1H，dd，J=17.4，5.0 Hz，H-4a)，2.74(1H，d，J=17.4 Hz，H-4b)，1.62(3H，s，H-8′)，1.60(3H，s，H-9′)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：72.6(d，C-2)，64.6(d，C-3)，26.5(t，C-4)，157.5(s，C-5)，96.2(d，C-6)，156.6(s，C-7)，95.7(d，C-8)，157.8(s，C-9)，99.8(s，C-10)，124.8(s，C-1′)，122.2(s，C-2′)，143.7(s，C-3′)，135.1(s，C-4′)，145.3(s，C-5′)，109.4(d，C-6′)，75.5(s，C-7′)，28.6(q，C-8′)，24.5(q，C-9′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道一致，因而被鑒定為plumbocatechin A。

化合物3白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z291.086 6[M+H]+(calcd for C15H15O6，291.086 3)；(-)HR-ESI-MS：m/z289.068 1[M-H]﹣(calcd for C15H13O6，289.065 9)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.83(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.75(1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，6.71(1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6′)，5.92(1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，5.85(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，4.56(1H，d，J=7.5 Hz，H-2)，3.97(1H，ddd，J=8.2，7.5，5.6 Hz，H-3)，2.84(1H，dd，J=16.4，5.6 Hz，H-4a)，2.50(1H，dd，J=16.4，8.2 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：82.8(d，C-2)，68.8(d，C-3)，28.5(t，C-4)，157.6(s，C-5)，96.3(d，C-6)，156.9(s，C-7)，95.5(d，C-8)，157.8(s，C-9)，100.8(s，C-10)，132.2(s，C-1′)，115.2(d，C-2′)，146.2(s，C-3′)，146.2(s，C-4′)，116.1(d，C-5′)，120.0(d，C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道一致，故被鑒定為(-)-兒茶素。

化合物4白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z443.097 0[M+H]+(calcd for C22H19O10，443.097 3)；(-)HR-ESI-MS：m/z441.078 9[M-H]﹣(calcd for C22H17O10，441.082 7)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.96(2H，s，H-2′，H-6′)，6.83(1H，s，H-5′)，6.72(2H，s，H-3″，H-7″)，5.96(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，5.94(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，5.37(1H，ddd，J=6.1，5.9，5.1 Hz，H-3)，5.06(1H，d，J=5.9 Hz，H-2)，2.81(1H，dd，J=16.5，5.1 Hz，H-4a)，2.71(1H，dd，J=16.5，6.1 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：71.1(d，C-2)，79.3(d，C-3)，24.3(t，C-4)，157.5(s，C-5)，96.4(d，C-6)，156.4(s，C-7)，95.6(d，C-8)，158.0(s，C-9)，99.6(s，C-10)，131.4(s，C-1′)，114.4(d，C-2′)，146.2(s，C-3′)，146.2(s，C-4′)，116.2(d，C-5′)，119.2(d，C-6′)，167.6(s，C-1″)，121.3(s，C-2″)，110.1(d，C-3″，C-7″)，146.3(s，C-4″，C-6″)，139.8(s，C-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道一致，因而被鑒定為兒茶素-3-氧-沒(méi)食子酸酯。

化合物5白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z459.075 6[M+H]+(calcd for C22H19O11，459.072 2)；(-)HR-ESI-MS：m/z457.041 6[M-H]﹣(calcd for C22H17O11，457.041 2)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.97(2H，s，H-3″，H-7″)，6.40(2H，s，H-2′，H-6′)，5.95(2H，s，H-6，H-8)，5.37(1H，ddd，J=5.3，5.1，4.7 Hz，H-3)，5.05(1H，d，J=5.1 Hz，H-2)，2.76(1H，dd，J=16.3，4.7 Hz，H-4a)，2.71(1H，dd，J=16.3，5.3 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：71.0(d，C-2)，79.1(d，C-3)，23.7(t，C-4)，157.6(s，C-5)，96.3(d，C-6)，156.3(s，C-7)，95.5(d，C-8)，158.1(s，C-9)，99.5(s，C-10)，130.9(s，C-1′)，106.2(d，C-2′，C-6′)，146.9(s，C-3′，C-5′)，133.9(s，C-4′)，167.7(s，C-1″)，121.4(s，C-2″)，110.3(d，C-3″，C-7″)，146.3(s，C-4″，C-6″)，139.8(s，C-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道一致，故被鑒定為沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯。

化合物6白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z481.054 6[M+Na]+(calcd for C22H18O11Na，481.054 1)；(-)HR-ESI-MS：m/z457.039 9[M-H]﹣(calcd for C22H17O11，457.041 2)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.94(2H，s，H-3″，H-7″)，6.49(2H，s，H-2′，H-6′)，5.95(2H，s，H-6，H-8)，5.52(1H，brs，H-3)，4.96(1H，s，H-2)，2.97(1H，dd，J=17.3，4.5 Hz，H-4a)，2.83(1H，dd，J=17.3，1.9 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：69.9(d，C-2)，78.6(d，C-3)，26.8(t，C-4)，157.8(s，C-5)，96.5(d，C-6)，157.2(s，C-7)，95.8(d，C-8)，157.8(s，C-9)，99.4(s，C-10)，130.8(s，C-1′)，106.8(d，C-2′，C-6′)，146.7(s，C-3′，C-5′)，133.8(s，C-4′)，167.6(s，C-1″)，121.5(s，C-2″)，110.2(d，C-3″，C-7″)，146.3(s，C-4″，C-6″)，139.8(s，C-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致，因而被鑒定為表沒(méi)食子酸兒茶素沒(méi)食子酸酯。

化合物7白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z291.083 8[M+H]+(calcd for C15H15O6，291.086 3)；(-)HR-ESI-MS：m/z289.066 0[M-H]﹣(calcd for C15H13O6，289.065 9)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.97(1H，d，J=1.7 Hz，H-2′)，6.79(1H，dd，J=8.2，1.7 Hz，H-6′)，6.75(1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，5.93(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，5.91(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，4.80(1H，s，H-2)，4.16(1H，s，H-3)，2.85(1H，dd，J=16.7，4.6 Hz，H-4a)，2.73(1H，dd，J=16.7，2.8 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：79.8(d，C-2)，67.5(d，C-3)，29.2(t，C-4)，157.6(s，C-5)，96.4(d，C-6)，157.4(s，C-7)，95.9(d，C-8)，158.0(s，C-9)，100.1(s，C-10)，132.3(s，C-1′)，115.3(d，C-2′)，145.7(s，C-3′)，145.9(s，C-4′)，115.9(d，C-5′)，119.4(d，C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道一致，故被鑒定為(-)-表兒茶素。

化合物8乳白色粉末，(+)HR-ESI-MS：m/z307.079 1[M+H]+(calcd for C15H15O7，307.081 2)；(-)HR-ESI-MS：m/z305.059 8[M-H]﹣(calcd for C15H13O7，305.060 8)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.39(2H，d，J=1.8 Hz，H-2′，H-6′)，5.91(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，5.85(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，4.51(1H，d，J=7.2 Hz，H-2)，3.95(1H，ddd，J=7.8，7.2，5.3 Hz，H-3)，2.80(1H，dd，J=16.2，5.3 Hz，H-4a)，2.49(1H，dd，J=16.2，7.8 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：82.9(d，C-2)，68.8(d，C-3)，28.1(t，C-4)，157.6(s，C-5)，96.2(d，C-6)，156.9(s，C-7)，95.5(d，C-8)，157.9(s，C-9)，100.7(s，C-10)，131.6(s，C-1′)，107.2(d，C-2′，6′)，146.9(s，C-3′，5′)，134.0(s，C-4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道一致，因而被鑒定為沒(méi)食子酸兒茶素。

化合物9淡黃色粉末，(+)HR-ESI-MSm/z307.079 1[M+H]+(calcd for C15H15O7，307.081 2)；(-)HR-ESI-MSm/z305.059 8[M-H]﹣(calcd for C15H13O7，305.060 8)；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ：6.51(2H，d，J=1.8 Hz，H-2′，H-6′)，5.93(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，5.90(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，4.74(1H，s，H-2)，4.12(1H，s，H-3)，2.84(1H，dd，J=16.6，4.6 Hz，H-4a)，2.72(1H，dd，J=16.6，2.9 Hz，H-4b)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：79.9(d，C-2)，67.5(d，C-3)，29.2(t，C-4)，157.7(s，C-5)，96.3(d，C-6)，157.3(s，C-7)，95.9(d，C-8)，158.0(s，C-9)，100.1(s，C-10)，131.5(s，C-1′)，107.0(d，C-2′，6′)，146.7(s，C-3′，5′)，133.6(s，C-4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道一致，故被鑒定為表沒(méi)食子酸兒茶素。

化合物1～9結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

圖1 化合物1～9的化學(xué)結(jié)構(gòu)

2.2 對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)作用

活性跟蹤指導(dǎo)下得到的化合物對(duì)褪黑素受體的激動(dòng)作用在HEK293細(xì)胞模型上通過(guò)鈣流檢測(cè)法進(jìn)行測(cè)試[1,9]，測(cè)試結(jié)果如表1所示，上述9個(gè)化合物對(duì)褪黑素MT1受體均具有激動(dòng)作用，同時(shí)，化合物1、3、5、7和8對(duì)褪黑素MT2受體也具有一定的激動(dòng)作用。其中，化合物3在0.96 mmol/L濃度時(shí)對(duì)MT1受體的激動(dòng)率為362.93%(EC50為46.29 μmol/L)，對(duì)MT2受體的激動(dòng)率為136.13%(EC50為102.41 μmol/L)；化合物1在0.98 mmol/L濃度時(shí)對(duì)MT1和MT2受體的激動(dòng)率分別為301.51%和79.37%；化合物4在0.98 mmol/L濃度時(shí)對(duì)MT1受體的激動(dòng)率為174.26%，對(duì)MT2受體沒(méi)有明顯激動(dòng)作用。

表1 茶葉活性組分及化合物1～9對(duì)褪黑素受體MT1和 MT2的激動(dòng)作用

3 討論與結(jié)論

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，褪黑素的受體功能和抑郁癥、焦慮癥等精神疾病的發(fā)病與治療密切相關(guān)[1-3]；茶葉具有興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理活性[4-6]，但其活性物質(zhì)基礎(chǔ)并不十分明確。因而，為進(jìn)一步闡明茶葉抗精神疾病活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究采用褪黑素受體MTT法測(cè)試模型，在活性跟蹤指導(dǎo)下，從普洱大葉茶的活性部位分離得到9個(gè)多酚類化合物，通過(guò)HR-ESI-MS及NMR分析并與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比對(duì)，鑒定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)?；衔?和2為首次從山茶屬中發(fā)現(xiàn)的黃烷醇類吡喃衍生物，豐富了茶葉的化學(xué)信息。

活性測(cè)試結(jié)果表明，本研究得到的9個(gè)化合物對(duì)褪黑素MT1受體均具有一定的激動(dòng)作用，并且對(duì)褪黑素MT1受體的激動(dòng)作用普遍高于相應(yīng)的對(duì)褪黑素MT2受體的激動(dòng)作用。尤為值得注意的是，化合物(-)-兒茶素(3)含量較高，作為茶葉的大量成分之一，對(duì)褪黑素MT1和MT2受體同時(shí)具有較高的激動(dòng)活性，很有可能是茶葉調(diào)節(jié)MT受體而發(fā)揮抗精神疾病活性的主要活性物質(zhì)，其作用機(jī)制值得進(jìn)一步研究。