fFN、NF-κB、HMGB1聯(lián)合預(yù)測早產(chǎn)價值及與神經(jīng)發(fā)育關(guān)系探究

牟瑩瑩 侯玉嬌 王 偉

山東省濰坊市婦幼保健院(261011)

早產(chǎn)是致圍產(chǎn)兒死亡首要原因之一[1]。目前臨床主要根據(jù)孕28～36+6周孕婦是否出現(xiàn)宮縮、陰道出血或有血性分泌物等典型癥狀判斷早產(chǎn)，缺乏超早期預(yù)警機(jī)制，多數(shù)孕婦保胎失敗[2]。臨床普遍認(rèn)為促炎、免疫調(diào)控過程參與早產(chǎn)發(fā)生發(fā)展[3-4]。胎兒纖維連接蛋白(fFN)是絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞生成的糖蛋白，分娩前胎盤或羊膜炎性或機(jī)械性損傷可致fFN外泄。有研究提出，fFN陽性利于評價早產(chǎn)風(fēng)險[5]。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是高度保守核蛋白，外周血水平升高多與神經(jīng)發(fā)育異常有關(guān)，但近年深入研究顯示，HMGB1還具有促炎作用，可能介導(dǎo)早產(chǎn)中炎性反應(yīng)過程[6]。核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)具有炎癥及免疫調(diào)節(jié)多重作用[7]。本研究聯(lián)合檢測fFN及血清NF-κB、HMGB1水平，分析其預(yù)測早產(chǎn)價值及與新生兒神經(jīng)發(fā)育的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

回顧性收集2019年1月-2020年4月本院收治的有早產(chǎn)危險因素孕婦195例臨床資料，根據(jù)妊娠結(jié)局分為早產(chǎn)組和足月分娩組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確有早產(chǎn)史、妊娠間隔≤18個月或≥5年、孕期高強(qiáng)度勞動或營養(yǎng)不良等早產(chǎn)危險因素；②24 h內(nèi)無同房史、無陰道檢查史；③單胎妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴慢性腎炎、病毒性肝炎；②存在前置胎盤、心臟病、妊娠期高血壓疾病；③合并陰道炎。本研究經(jīng)倫理委員會審批，孕婦均簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

①fFN：常規(guī)處理消毒后，無菌拭子置陰道后穹窿處采集分泌物標(biāo)本，以全自動生化分析儀(北京普朗新技術(shù)有限公司)檢測fFN，fFN<50 ng/ml為陰性，否則為陽性。②血清NF-κB、HMGB1：取孕婦晨空腹靜脈血、新生兒頭皮靜脈血，離心取上清，以珠海麗珠生物科技有限公司酶聯(lián)免疫試劑盒檢測NF-κB、HMGB1水平。

1.3 評估標(biāo)準(zhǔn)

采用新生兒行為神經(jīng)測定(NBNA)評估新生兒神經(jīng)發(fā)育，包含對光習(xí)慣、聲音、擁抱、吮吸、意識、肌張力等反應(yīng)，評分范圍0～40，≤35分為神經(jīng)發(fā)育不良，>35分為神經(jīng)發(fā)育良好。

1.4 觀察指標(biāo)

比較兩組出現(xiàn)先兆早產(chǎn)癥狀3 d內(nèi)、7 d內(nèi)、14 d內(nèi)fFN、血清NF-κB、HMGB1水平。先兆早產(chǎn)判斷：妊娠28～<37周，出現(xiàn)不規(guī)律宮縮，且伴腹痛、陰道流血等癥狀。分析fFN、血清NF-κB、HMGB1預(yù)測早產(chǎn)價值。比較早產(chǎn)組新生兒神經(jīng)發(fā)育良好及不良血清NF-κB、HMGB1水平。分析新生兒神經(jīng)發(fā)育與NF-κB、HMGB1水平相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組一般情況比較

早產(chǎn)組51例，足月分娩組144例。兩組年齡、體質(zhì)指數(shù)、保胎孕周、流產(chǎn)史、孕史、保胎時間等比較無差異(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般情況比較

一般資料 早產(chǎn)組(n=51)足月分娩組(n=144)t/χ2P體質(zhì)指數(shù)(kg/m2,x±s)21.0±0.921.2±0.91.2450.215保胎孕周(x±s)31.5±1.331.5±1.40.0890.929流產(chǎn)(次,x±s)1.0±0.31.0±0.31.0140.312保胎時間(d,x±s)5.0±0.75.1±0.61.5700.118

2.2 兩組各檢測指標(biāo)比較

出現(xiàn)先兆早產(chǎn)癥狀3 d內(nèi)、7 d內(nèi)、14 d內(nèi)，早產(chǎn)組fFN及血清NF-κB、HMGB1水平均高于足月分娩組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組出現(xiàn)先兆早產(chǎn)不同時間內(nèi)各檢測指標(biāo)比較

2.3 ROC分析預(yù)測價值

ROC顯示，預(yù)測在出現(xiàn)先兆早產(chǎn)癥狀14 d內(nèi)早產(chǎn)價值的AUC fFN>NF-κB>HMGB1，7 d內(nèi)NF-κB>HMGB1>fFN，3 d內(nèi)fFN>NF-κB>HMGB1。14 d內(nèi)fFN聯(lián)合血清NF-κB、HMGB1水平預(yù)測價值最高。見表3。

表3 ROC分析出現(xiàn)先兆流產(chǎn)癥狀不同時間各指標(biāo)預(yù)測價值

2.4 早產(chǎn)組新生兒神經(jīng)發(fā)育與NF-κB、HMGB1水平

娩出后、生后第3 d、第7 d早產(chǎn)組神經(jīng)發(fā)育不良新生兒血清NF-κB、HMGB1水平高于神經(jīng)發(fā)育良好新生兒(P<0.05)。見表4。

表4 早產(chǎn)組新生兒神經(jīng)發(fā)育與出生后不同時期NF-κB、HMGB1水平比較

2.5 新生兒神經(jīng)發(fā)育與NF-κB、HMGB1水平相關(guān)性

新生兒神經(jīng)發(fā)育與血清NF-κB、HMGB1水平均呈正相關(guān)(r=0.634、0.651，均P<0.001)。

3 討論

早產(chǎn)是妊娠常見并發(fā)癥，是導(dǎo)致新生兒死亡及神經(jīng)發(fā)育異常等近遠(yuǎn)期并發(fā)癥高發(fā)的主要原因[8]。目前早產(chǎn)具體發(fā)病機(jī)制尚未明確，但臨床普遍認(rèn)為炎癥及免疫調(diào)控是早產(chǎn)發(fā)生的主要病理生理基礎(chǔ)[9]。因此，從炎癥及免疫調(diào)控分子層面探討早產(chǎn)病理性改變對早期防治具有重要意義。

fFN是一種可連接并黏附絨毛、蛻膜的糖蛋白，有研究顯示，早產(chǎn)孕婦機(jī)體中絨毛膜、蛻膜蛋白水解酶活性較正常孕婦略高，孕婦fFN外溢造成宮頸、黏液內(nèi)fFN水平升高[10]。本研究結(jié)果顯示，出現(xiàn)先兆流產(chǎn)癥狀3 d內(nèi)、7 d內(nèi)、14 d內(nèi)早產(chǎn)組fFN水平高于足月分娩組。fFN作為細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白，主要分布在蛻膜、胎盤胎膜組織、羊水內(nèi)，可確保子宮蛻膜、胎盤間互相黏附而起到對應(yīng)保護(hù)效果。正常情況臨產(chǎn)前，絨毛膜自子宮蛻膜上剝離，fFN漏入宮頸，宮頸陰道分泌物內(nèi)fFN水平可反映宮頸成熟度[11]。但早產(chǎn)孕婦受機(jī)體異常炎性反應(yīng)或機(jī)械性損害等作用，絨毛膜、蛻膜、胎盤胎膜異常水解可大量釋放fFN進(jìn)入陰道分泌物[12]。因此，陰道分泌物fFN可反映早產(chǎn)孕婦胎盤組織受炎性損害程度。另外，有研究顯示，與Bishop評分對比，fFN>50 ng/ml時預(yù)測分娩啟動的靈敏度較高，且更具客觀性[13]。本研究ROC曲線分析顯示，出現(xiàn)先兆早產(chǎn)癥狀14 d內(nèi)fFN預(yù)測早產(chǎn)的AUC值為0.819，可為臨床提供預(yù)測信息。但fFN檢測結(jié)果易受宮頸陰道炎等影響，造成假陽性率偏高，取材時應(yīng)注意。

NF-κB是近年新發(fā)現(xiàn)的核轉(zhuǎn)入因子，參與啟動并調(diào)節(jié)人體炎癥及免疫反應(yīng)、細(xì)胞增殖分化及凋亡等相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄過程[14]。研究顯示，宮內(nèi)感染可通過激活NF-κB相關(guān)通路介導(dǎo)促炎-抗炎系統(tǒng)紊亂而誘發(fā)早產(chǎn)，NF-κB阻滯劑可應(yīng)用于早產(chǎn)預(yù)防[15]。HMGB1是新發(fā)現(xiàn)與炎癥反應(yīng)相關(guān)的核蛋白，與C反應(yīng)蛋白、白介素-6等早期炎性因子對比持續(xù)存在時間更久，可能在炎癥反應(yīng)發(fā)生、維持過程中發(fā)揮更重要作用[16]。據(jù)報道HMGB1與Toll樣受體-2、4、9或晚期糖基化終產(chǎn)物受體結(jié)合可經(jīng)NF-κB所介導(dǎo)信號通路激活機(jī)體炎癥反應(yīng)[17]。本研究，出現(xiàn)先兆流產(chǎn)癥狀3 d內(nèi)、7 d內(nèi)、14 d內(nèi)早產(chǎn)組血清NF-κB、HMGB1水平均高于足月分娩組，說明在發(fā)生早產(chǎn)孕婦中存在血清NF-κB、HMGB1異常表達(dá)情況，此表達(dá)特征與上述研究病理生理過程相符。ROC曲線分析顯示，出現(xiàn)先兆早產(chǎn)癥狀14 d內(nèi) fFN聯(lián)合血清NF-κB、HMGB1預(yù)測早產(chǎn)的AUC值最高?；谏鲜鲅芯勘狙芯康贸鲆韵陆Y(jié)論：NF-κB、HMGB1可能在早產(chǎn)發(fā)生中發(fā)揮重要作用，機(jī)體異常表達(dá)HMGB1并經(jīng)NF-κB過程激活下游炎癥反應(yīng)；胎盤組織受炎性影響，組織細(xì)胞損害、凋亡釋放fFN進(jìn)入宮頸分泌物。因此，NF-κB、HMGB1聯(lián)合檢測更能全面反映早產(chǎn)早期病理生理變化，為臨床早期干預(yù)提供參考。

此外，早產(chǎn)易造成新生兒神經(jīng)發(fā)育異常[18]。本研究發(fā)現(xiàn)，早產(chǎn)神經(jīng)發(fā)育不良新生兒血清NF-κB、HMGB1水平高于神經(jīng)發(fā)育良好早產(chǎn)新生兒。HMGB1主要在腦內(nèi)表達(dá)，當(dāng)缺氧缺血引起腦神經(jīng)損害后，受損星型膠質(zhì)細(xì)胞或神經(jīng)元可被動釋放HMGB1入血，啟動并維持炎癥瀑式反應(yīng)，放大缺血再灌注神經(jīng)炎性反應(yīng)，延長炎性病理過程，加重神經(jīng)損害。而有研究已表明HMGB1主要通過NF-κB所介導(dǎo)信號通路發(fā)揮炎性作用，故二者水平越高提示腦神經(jīng)發(fā)育不良越嚴(yán)重[19-20]。另外，臨床研究已證實(shí)，早產(chǎn)兒各項(xiàng)生理發(fā)育均未完善，其中以肺功能缺陷最為顯著，因此，早產(chǎn)兒難以為機(jī)體組織正常代謝供給血氧，而腦神經(jīng)組織作為高代謝器官易受缺氧影響，是炎性反應(yīng)的最早啟動者[21-22]。上述研究結(jié)果說明，NF-κB、HMGB1表達(dá)異?？赡軈⑴c了早產(chǎn)新生兒神經(jīng)發(fā)育發(fā)展的病理過程。相關(guān)分析顯示，新生兒神經(jīng)發(fā)育與血清NF-κB、HMGB1水平呈正相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)NF-κB、HMGB1水平與神經(jīng)發(fā)育關(guān)系密切，提示早產(chǎn)兒出生后需及時檢測上述因子水平以指導(dǎo)臨床治療。但腦神經(jīng)發(fā)育受多種病理生理過程調(diào)節(jié)，如NF-κB、HMGB1所介導(dǎo)炎癥損害過程是否與其受體活性有關(guān)，仍需進(jìn)一步探究。

綜上所述，fFN聯(lián)合NF-κB、HMGB1檢測對早產(chǎn)有較高預(yù)測價值，且血清NF-κB、HMGB1水平與新生兒神經(jīng)發(fā)育關(guān)系密切。臨床可針對早產(chǎn)兒聯(lián)合檢測上述血清因子以評價神經(jīng)發(fā)育情況，進(jìn)行早期干預(yù)治療。